DESAFÍOS EN REPRODUCCIÓN : Semen Sexado Dr. Sergio Kmaid Antes de largar… EVALUACIÓN SEMEN HOLANDO CONVENCIONAL 2010- 2013 (Valores Promedio ± DS, DILAVE, Depto. Reproducción) % Origen (N) VIVOS Hora 0 VIGOR Hora 0 % VIVOS Hora 2 VIGOR Hora 2 106 por DOSIS 106 Anomalías C. VIABLES Totales (%) IMP (339) 61.1 ± 6.7 3.9 ± 0.3 48.2 ± 8.8 3.3 ± 0.6 17.0 ± 6.6 10.2 ± 3.8 11 ± 4.3 A NAC (153) 53.7 ± 7.5 3.9 ± 2.9 42.5 ± 23.8 3.2 ± 0.3 31.7 ± 8.1 16.1 ± 4.4 14.9 ± 5.4 A IMP (32) 40.3 ± 23 3.0 ± 1.5 31.5 ± 18.1 2.6 ± 1.3 13.9 ± 6.4 5.4 ± 3.4 19.2 ± 17.1 C/N NAC (25) 29.8 ± 14.9 3.2 ± 0.7 18.9 ± 8.5 2.8 ± 0.3 33.6 ± 11.5 10.9 ± 4.1 28.2 ± 10.8 C/N 10.4% de los toros analizados No Aptos o Cuestionables. 30% Motilidad progresiva al descongelado, Concentración mínima 6 x 106 viables/dosis, <30% Anomalías, máx. 15% A. mayores Fuente: DILAVE, Dr. Pedro Bañales comunicación personal EVALUACIÓN SEMEN JERSEY CONVENCIONAL 2010- 2013 (Valores Promedio ± DS, DILAVE, Depto. Reproducción) Origen (N) % VIVOS Hora 0 VIGOR Hora 0 % VIVOS Hora 2 VIGOR Hora 2 106 por DOSIS 106 VIABLES Anomalías Totales (%) C. IMP(39) 61.4 ± 6.6 3.9 ± 0.3 49.6 ± 6.8 3.3 ± 0.3 19.0 ± 3.8 11.6 ± 2.6 13.8 ± 4.3 A IMP(6) 21.0 ± 16.7 2.6 ± 1.7 18.0 ± 16 1.9 ± 1.4 14.4 ± 4.4 4.5 ±2 27.7 ± 27.1* C NAC(1) 60.0 3.5 50.0 3.0 31.2 18.7 15.2 A NAC(1) 60.0 3.5 40.0 3.0 23.1 13.8 32.0 C 14.9% de los toros analizados No Aptos o Cuestionables. Un toro importado sin espermas viables 30% Motilidad progresiva al descongelado, Concentración mínima 6 x 106 viables/dosis, <30% Anomalías, máx. 15% A. mayores Fuente: DILAVE, Dr. Pedro Bañales comunicación personal Y el semen Sexado? Los espermas son inyectados en el citómetro de flujo en una fila única, 60 mph, 40 psi. Esta corriente es convertida en gotas individuales por cristales que vibran. Se colorean con Hoechst 33342. Los espermas pasan por un rayo laser y el ADN coloreado emite fluorescencia. La fluorescencia es medida y es aplicada una carga eléctrica +ve o –ve a cada gota. Pasan por entre medio de placas deflectoras cargadas y se separan en direcciones diferentes +ve o –ve. Las gotas sin carga se descartan. Cromosoma X Cromosoma Y Aproximadamente 300 dosis pueden ser producidas por hora. 2.100.000 Espermatozoides totales/Dosis 0.25 ml Bajo condiciones de manejo adecuado, apropiada manipulación del semen, etc. la mayoría de los toros en los experimentos desarrollados tienen una tasa de preñez que varía entre un 70 y un 90% de la del semen convencional no sexado con ≥10,000,000 espermatozoides/dosis. George Seidel, Universidad de ColoradoJ. Anim. Sci. Vol. 88, J. Dairy Sci. Vol. 93, 2010. EVALUACIÓN SEMEN SEXADO 2010- 2013 (Valores Promedio ± DS, DILAVE, Depto. Reproducción) N 247 % VIVOS HORA 0 VIGOR % VIVOS VIGOR HORA 0 HORA 2 HORA 2 58.5 ± 6.5 3.6 ± 0.3 45 ± 8.5 3 ± 0.3 30% Motilidad progresiva al descongelado, Concentración mínima 6 x 106 viables/dosis, <30% Anomalías, máx. 15% A. mayores 106 SPZ DOSIS 106 VIABLES Anomalías Totales 2.1 ± 0.3 1.2 ± 0.2 5.8 ± 2.9 Fuente: DILAVE, Dr. Pedro Bañales comunicación personal Te parece que funcione? % CONCEPCIÓN TAMBO % CONCEPCIÓN SEXADO CONVENCIONAL A 47 (276/585) 56 (330/585) B 51 (541/1070) 60 (696/1152) C 46 (1182/2580) 48 (212/444) D 49 (439/902) 63 (693/1108) E 42 (450/1070) 49 (377/765) F 43 (506/1175) 54 (154/286) G 41 (415/1006) 45 (379/834) H 42 (471/1126) 48 (535/1148) I 40 (612/1527) 54 (787/1448) Fuente: Servicio Técnico CRI, USA. Tambos comerciales que utilizan semen GenChoice® Vaquillonas Vacas SC SS % SC SS % Año 2006 39.7684 1,4 2510911 0,1 Año 2007 395.932 9,5 4112363 0,2 Año 2008 377.572 17,8 4161519 0,4 NORMAN ET AL. Journal of Dairy Science Vol. 93 No. 8, 2010 Tasa de concepción promedio en vaquillonas 2006 – 2008 USA Tipo Semen Servicio N° Convencional Sexado 1 59 41 2 54 34 3 49 31 4 45 28 ≥5 37 22 Promedio 56 32 NORMAN ET AL. Journal of Dairy Science Vol. 93 No. 8, 2010 Tasa de concepción (%) Efecto del toro y la concentración espermática sobre la tasa de concepción en vaquillonas holando 6,268 IA en 45 rodeos, 298 ± 4.2 IA para cada toro TORO J. M. DeJarnette y col, JDS 2010 9,172 servicios (Prom. 287 ± 3.5 IA/tipo semen y toro). 1º Servicio, vaquillonas 14 meses. Celo visto, IA 8-12 horas. J. M. DeJarnette y col. J. Dairy Sci. 94 :3477–3483, 2011 Performance reproductiva de vaquillonas holando inseminadas con semen sexado o convencional RODEO A Número Edad al 1º Servicio, meses (±SEM) Preñadas a la 1ª AI (% ) Pérdidas de preñez después de 1º AI (% ) Intervalo entre 1ª y 2ª IA, días (±SEM) RODEO B Sexado C Sexado C 123 104 220 924 13.1 ± 0.1a 13.8 ± 0.1b 12.8 ± 0.1a 13.0 ± 0.1a 38.2a 51.9b 41.4a 51.7b 10.6 7.4 0 1.9 27.7 ± 2.7 33.1 ± 3.3 29.4 ± 2.0 31.0 ± 1.1 Vaquillonas que comenzaron su primer lactancia (%) Chebel y col. Journal of Dairy Science Vol. 93 No. 6, 2010 83.7 81.7 63.6 68.6 360 kg. 0.6Kg/día ganancia. Detección de celo AM por pintura, IA en el momento Comparación entre semen sexado dosis baja y alta separación vs semen sexado alta dosis y baja separación en vacas y vaquillonas jersey Dosis Baja, 90%* Categoría Lugar Preñadas Inseminadas Vaquillonas Vacas Dosis Alta, 75%** % Preñadas Inseminadas % 1 111 261 42.5 122 255 48 2 49 148 33.1 54 130 42 3 31 99 31.3 22 74 30 Total 191 508 37.6 198 459 43 1 110 233 47.2 128 262 49 2 53 124 42.7 64 132 49 3 18 63 28.6 23 65 35 Total 181 420 43.1 215 459 47 * 2.1 × 106 esp./dosis, 90% pureza crom. X; ** 10 × 106 esp/dosis, 75% pureza crom. X Lucena y col. Davis California. Journal of Dairy Science Vol. 97 No. 3, 2014 Terneras nacidas en vacas y vaquillonas Jersey inseminadas con SS dosis baja y alta separación vs semen sexado alta dosis y baja separación Semen 90 Semen 75 Terneras nacidas (%) Terneras nacidas (%) Vaquillonas 160/185 (86.5) 142/186 (76.3) Vacas 148/164 (90.2) 147/187 (78.64) Lucena y col. Davis California. Journal of Dairy Science Vol. 97 No. 3, 2014 Comparación de la Tasa de preñez por IATF en vaquillonas holando con semen convencional o sexado (GenChoice 90®) , de acuerdo con la presencia o ausencia de celo Mallory y col. Univ. Columbia. Journal of Dairy Science Vol. 96 No. 2, 2013 Convencional Celo Proporción Sexado % Proporción Combinado % Proporción % Localización 1 SI 28/43 65 22/41 54a 50/84 60 NO 18/27 67c 8/29 28b,d 26/56 46 TOTAL 46/70 66c 30/70 43d 76/140 54 Localización 2 SI 16/20 80c 10/29 34d 26/49 53 NO 20/30 67c 5/21 24d 25/51 49 TOTAL 36/50 72c 15/50 30d 51/100 51 Combinado SI 44/63 70c 32/70 46a,d 76/133 57x NO 38/57 67c 13/50 26b,d 51/107 48y Localizaciones 1+2 82/120 68c 45/120 38d 127/240 53 Mallory y col. Univ. Columbia. Journal of Dairy Science Vol. 96 No. 2, 2013 PODEMOS HACER ALGO PARA MEJORAR? Adición de GnRH al inicio del celo (Heatwatch®) Inseminadas Preñadas % Sin GnRH 251 122 48.6% Con GnRH 258 137 53.1% Efecto del Nº de inseminaciones y dosis Inseminadas Preñadas % 1 IA (1 dosis) 193 87 45.08% 1 IA (2 dosis) 193 85 44.04% 2 IA (12 y 24 h) 190 94 49.47% M.F. Sá Filho et al. / Theriogenology 74 (2010) 1636–1642 Texas, 14 Toros, Vaquillonas Jersey 11-16 meses, dieta completa encerradas Porcentaje de preñez en vaquillonas Jersey según el intervalo entre inicio del celo (HeatWath®) e IA Intervalo entre el inicio del celo e IA Inseminadas Preñadas % 12-16 horas 106 40 37.7a 16.1 -20 horas 164 85 51.8b 20.1-24 horas 234 130 55.6b >24 horas 134 61 45.5a,b TOTAL 638 316 49.5 M.F. Sá Filho et al. / Theriogenology 74 (2010) 1636–1642 Texas, 14 Toros, Vaquillonas Jersey 11-16 meses, dieta completa encerradas INSEMINACIÓN A TIEMPO FIJO: 54 o 60 h de retiro del dispositivo Intravaginal. Semen sexado o convencional. 420 Vaquillonas Jersey, 3 Toros diferentes J.N.S. Sales et al. / Theriogenology 76 (2011) 427–435 Efecto del intervalo entre IA y ovulación en la preñez de vacas Nelore inseminadas con semen sexado a tiempo fijo K. Alessandri. Tesis Final USP 2010 HAGAMOS! Ubicación Cantidad de animales Peso Fecha Alimentación Condición Corporal (1-5) Sincronización de celo Detección de celo Inseminación Semen Diagnóstico de gestación Young 244 – 14/15 meses edad 368 ± 35 kg. Ganancia diaria promedio 0.94 ± 0.18 Kg. 27 de mayo al 1º de junio de 2012 Mixer Dieta completa, encerradas 3.6 ± 0.35 Doble inyección PG (Cloprostenol 2 ml, separadas 11 días) Visual, 3 veces al día (Mañana, mediodía y tarde) + Parches/Pintura 3 veces por día, 2 intervalos 12 y 18 horas 3 Toros diferentes, GenChoice 90® CRI Ecografía a partir de los 35 días 60 Distribución del celo (Horas post PG) 50 40 30 20 10 0 36 Animales en celo 2 48 44 54 53 60 29 72 32 78 15 84 3 96 102 108 120 126 132 144 150 156 6 5 0 1 2 0 2 1 0 Vaquillonas sincronizadas 244 100% Vaquillonas Inseminadas 194 79.5% % Concepción 107 55.2% % Preñez general 107 43.8% 12 Horas celo - IA Toro 18 Horas celo -IA Servicios Gestación Servicios Gestación B 29 41.4 35 57.1 I 28 42.9 37 59.5 D 28 64.3 37 62.1 Promedio 85 49.53 109 59.57 Número Porcentaje de Concepción Servicios sin camisa 106 58.50% Servicios con camisa 88 51.10% Ubicación Cantidad de animales Fecha Alimentación Condición Corporal (1-5) Sincronización de celo Detección de celo Inseminación Semen Diagnóstico de gestación Florida 69 – 14/15 meses edad 26 al 29 de diciembre de 2012 Pastoreo sobre sorgo forrajero 2.71 ± 0.2 Doble inyección PG (Delprostenate Glandinex 1 ml, separadas 11 días) Visual, 3 veces al día (mañana, mediodía y tarde) 3 veces por día, 2 intervalos 12 y 18 horas 1 Toro GenChoice90 ® CRI Ecografía a partir de los 35 días Vaquillonas en celo 25 20 15 10 5 0 48 h 54 h 60 h 66 h 72 h 78 h 84 h 90 h 96 h 102 h Inseminadas Preñadas % 12 Horas 33 21 0,64 18 Horas 25 18 0,72 Total 58 39 0,67 Departamento Cantidad de animales Fecha Alimentación Condición Corporal (1-5) Sincronización de celo Detección de celo Inseminación Semen Diagnóstico de gestación Rocha 102 – 18 meses edad 24 al 27 de setiembre de 2012 Campo mejorado, sorgo planta entera concentrado 3.36 ± 0.44 Doble inyección PG (Cloprostenol 2 ml, separadas 11 días) Visual, 3 veces al día (Mañana, mediodía y tarde) 3 veces por día, 2 intervalos 12 y 18 horas 1 Toro Genchoice90 ® CRI Ecografía a partir de los 35 días Distribución del celo (horas post PG) 30 25 20 15 10 5 0 Animales en celo 48 h 22 54 h 16 60 h 27 72 h 14 78 h 8 84 h 7 96 h 3 102 h 2 114 h 3 Inseminadas Preñadas % 12 Horas 34 21 0.62 18 Horas 48 29 0.60 Total 82 50 0.61 INSEMINACIÓN CON SEMEN SEXADO: Intervalo celo - Inseminación 12 Horas 18 Horas Toro IA P % Gest. IA P % Gest. B 91 33 0.36 165 83 0.50 118 50 0.42 C A 19 7 0.37 D 828 401 0.48 278 166 0.60 E 21 8 0.38 218 106 0.49 Total 959 449 0.47 779 405 0.52 S. Kmaid, S. Secco. CRI datos no publicados 2012-2013 Establecimiento 1 Toro A Nº IA 19 Preñadas 7 % 0.37 1 B1 71 42 0.59 2 2 1 2 3 1 2 2 3 4 5 6 5 1 2 3 3 7 8 1 3 5 1 1 3 9 1 B2 B2 B2 C C D D D D D D D D D E E E E E F G G I I K M T 12 183 64 65 81 57 199 119 226 299 82 58 95 65 54 7 39 19 18 77 40 80 38 65 35 113 118 6 80 32 30 41 30 89 48 101 174 50 39 36 41 22 4 14 11 9 51 30 36 21 34 16 67 69 0.50 0.44 0.50 0.46 0.51 0.53 0.45 0.40 0.45 0.58 0.61 0.67 0.38 0.63 0.41 0.57 0.36 0.58 0.50 0.66 0.75 0.45 0.55 0.52 0.46 0.59 0.58 2,398 1,230 0.51 Resultados 2012- 2014 TOTAL Porcentaje de gestación según Tambo y toro (2012 – 2014) TOTAL 2,398 1,230 0.51 0,80 0,70 0,60 0,50 0,40 0,30 0,20 0,10 0,00 A B1 B2 D D F I I T B2 B2 C D D E C D E E G K D D D G D E E M 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 4 5 5 5 6 7 8 9 % 0,3 0,5 0,5 0,5 0,6 0,6 0,5 0,5 0,5 0,5 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 0,5 0,4 0,5 0,3 0,7 0,4 0,5 0,6 0,3 0,4 0,6 0,5 0,5 0,5 S. Kmaid y S. Secco. CRI Uruguay Datos no publicados Porcentajes de gestación 2012- 2014 según Toro y establecimiento 0,80 0,70 0,60 0,50 0,40 0,30 0,20 0,10 0,00 A B1 B2 D D F A B1 B2 D D F I I I T B2 B2 C D D E C D E E G K D D D G D E E M I T B2 B2 C D D E C D E E G K D D D G D E E S. Kmaid y S.Secco. CRI Uruguay Datos no publicados M Haciendo las cuentas… SIMULACIÓN ECONÓMICA SEMEN SEXADO VS SEMEN CONVENCIONAL 100 Vaquillonas /3 servicios Concepción SS 45% Concepción SC 70% Gestaciones Dosis Dosis/preñez SS 83 SC 97 185.25 139 2.2 1.4 SIMULACIÓN ECONÓMICA SEMEN SEXADO VS SEMEN CONVENCIONAL Coeficiente SS Coeficiente SC Terneras 0.93 77.5 0.50 48.7 Terneros 0.07 5.8 0.50 48.7 Mortandad Perinatal 10% Guachera 5% Perinatal 10% Guachera 5% Hembras muertas 7.8 3.5 4.9 2.2 Machos muertos 0.6 0.3 4.9 2.2 Sexado Convencional 66.3 41.6 5.0 41.6 Hembras Viables Machos Viables Fuente: Ing. Gabriel Giudice comunicación personal Costos de crianza hasta 250 Kg (U$D) Guachera hasta 80 kilos 200 200 Recría costo/kilo 1.8 306 Total de costo 506 Costo total (semen, inseminador, costo crianza, terneras/os nacidos) U$D/Dosis 35 25 20 Semen Sexado U$D 43,549 41,697 40,770 U$D/Dosis 12 9 5 Semen Convencional U$D 44,930 44,513 43,957 *Inseminador: U$D 12/Preñez Valor bruto de producción de los dos sistemas (U$D) Valor kilo de ternera Valor kilo de ternero Total U$D/kilo Sexado Convencional 4.00 66,286 41,596 1.30 1,622 13,519 67,907 55,114 Fuente: Ing. Gabriel Giudice comunicación personal Margen según el uso del tipo de semen cada 100 vaquillonas inseminadas U$D Dosis 35 25 20 Margen Sexado (U$D) 24,358 26,210 27,137 U$D Dosis 12 9 5 Margen Convencional (U$D) 10,184 10,601 11,157 Fuente: Ing. Gabriel Giudice comunicación personal Registros desde 1995 a 1999 de 2.38 millones de lactancias de 1.49 millones de vacas holando en USA ha mostrado que el sexo fetal influencia la capacidad de la glándula mamaria para sintetizar leche Las vacas producen más leche si paren hembras que si paren machos, al excluir las vacas tratadas con bST (113.750) o con partos distócicos encontraron que el sexo de feto influencia la producción de leche en la 1a y 2a lactancia. Vacas que paren hembras en su primer y Segundo parto producen 445kg más de leche (305 d) que vacas que paren machos. HIPOTESIS: LA PRODUCCION DE LECHE ESTÁ INFLUENCIADA POR EL SEXO DEL FETO ENTRE LACTANCIAS. Hinde K, Carpenter AJ, Clay JS, Bradford BJ (2014) Holsteins Favor Heifers, Not Bulls: Biased Milk Production Programmed during Pregnancy as a Function of Fetal Sex. PLoS ONE 9(2): e86169. doi:10.1371/journal.pone.0086169 http://127.0.0.1:8081/plosone/article?id=info:doi/10.1371/journal.pone.0086169 Influencia del sexo del feto en presencia o ausencia de Somatotrofina Bovina (bST) sobre la productivad de la lactancia. Hinde K, Carpenter AJ, Clay JS, Bradford BJ (2014) Holsteins Favor Heifers, Not Bulls: Biased Milk Production Programmed during Pregnancy as a Function of Fetal Sex. PLoS ONE 9(2): e86169. doi:10.1371/journal.pone.0086169 http://127.0.0.1:8081/plosone/article?id=info:doi/10.1371/journal.pone.0086169 Las terneras producen ventajas en la production lechera luego del parto, durante la gestación y en las lactancias subsiguientes. 113.750 vacas sin bST y sin distocias. S = Ternero, D = Ternera. Las medias con diferentes letras difieren (p 0,001) El parto de hembras resulta en mayor productividad por lactancia, y su efecto es afectado por la administración de Somatotrofina bovina (bST) Hinde K, Carpenter AJ, Clay JS, Bradford BJ (2014) Holsteins Favor Heifers, Not Bulls: Biased Milk Production Programmed during Pregnancy as a Function of Fetal Sex. PLoS ONE 9(2): e86169. doi:10.1371/journal.pone.0086169 http://127.0.0.1:8081/plosone/article?id=info:doi/10.1371/journal.pone.0086169 Influencia del sexo del ternero en la producción lechera (Datos de Canadá, 2001 – 2013, 5.4 millones de lactancias y 2,5 millones de vacas) Lynsay Beavers and Brian Van Doormaal March 2014 MUCHAS GRACIAS ! AGRADECIMIENTOS y DISCULPAS POR LOS QUE ME OLVIDO: Sebastián Secco Santiago Rodríguez Carlos Sencion Joaquín Slavica Carlos Delgado Andres Karlen Gustavo Benedetto Jorge Slavica Jaime Cibils Gabriel Giudice Pedro Bañales Personal de todos los establecimientos.