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EFECTO DEL BENZOATO DE ESTRADIOL EN LA PRESENTACIÓN DEL PICO
PREOVULATORIO DE LH, MOMENTO DE OVULACIÓN Y FERTILIDAD EN
CABRAS SINCRONIZADAS CON ACETATO DE MELENGESTROL
THE EFFECT OF ESTRADIOL BENZOATE ON THE TIME TO THE LH PEAK, OVULATION
TIME AND FERTILITY IN MELENGESTROL ACETATE SYNCHRONIZED GOATS
Nicolás Valenzuela-Jiménez, Joel Hernández-Cerón, Clara Murcia-Mejía,
Rodolfo Rodríguez-Maltos y Carlos G. Gutiérrez
Departamento de Reproducción. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional
Autónoma de México. Ciudad Universitaria, 04510, Coyoacán. D. F. ([email protected])
RESUMEN
ABSTRACT
Se realizaron dos experimentos para evaluar el efecto del benzoato
de estradiol (BE) en la presentación del pico de LH, el momento
de ovulación y la fertilidad en cabras sincronizadas con acetato de
melengestrol (MGA). Experimento 1, con cuatro tratamientos:
M-1 (n=7), 0.5 mg animal−1 d−1 MGA en el alimento durante 10 d;
The effect of estradiol benzoate (EB) on the time to the LH peak,
ovulation and fertility in goats synchronized with MGA was
evaluated in two experiments. Experiment 1, with four
treatments: M-1 (n=7) 0.5 mg MGA animal−1 d−1 mixed in the
feed for 10 d; M+EB-1 (n=7) as group M-1 and injected
intramuscularly (im) with 0.25 mg EB, 6 h after the start of estrus;
M+GnRH-1 (n=8) as group M-1, but received an im injection of
100 µ g GnRH, 6 h after the start of estrus; FGA-1 (n=6) was
treated with an intravaginal sponge with FGA (fluor gestone
acetate) for 10 d. Goats in the four groups received 12.5 mg PGF2α
M+BE-1 (n=7), igual al grupo M-1 más 0.25 mg BE intramuscular
(im), 6 h después del inicio del estro; M+GnRH-1 (n=8), igual al
grupo M-1 más 100 µg GnRH im, 6 h después del inicio del estro;
FGA-1 (n=6), se insertó una esponja intravaginal con acetato de
fluorogestona (FGA) durante 10 d. Todas las cabras recibieron
12.5 mg PGF2α al retirar el progestágeno. Se detectaron estros
cada 4 h con un macho con mandil y, a partir del inicio del estro,
se tomaron muestras sanguíneas cada 2 h durante 24 h, para medir LH. Se determinó el momento de la ovulación mediante
ultrasonografía cada 4 h. El intervalo del retiro del progestágeno
al inicio del estro fue mayor (p≤0.01) en los grupos tratados con
MGA (M-1, M+BE-1 y M+GnRH-1; 71.1±2.0 h) vs FGA-1 (33.7±2.9
h). Los intervalos del estro al pico de LH y estro a la ovulación no
fueron diferentes entre grupos (p>0.05). Sin embargo, en los grupos M+BE-1 y M+GnRH-1, todas las cabras presentaron el pico
de LH en las primeras 12 h después del inicio del estro y ovularon
en las 32 h siguientes al inicio del mismo, vs 42% del grupo M-1
(p≤0.05). Experimento 2 tuvo tres tratamientos: M-2 (n=50) 0.5
mg animal−1 d−1 MGA en el alimento por 10 d; M+BE-2 (n=49)
igual al grupo M-2 más 0.25 mg BE im, 6 h después del inicio del
estro; FGA-2 (n=49), se insertó una esponja intravaginal con FGA,
durante 10 d. Todas las cabras recibieron 12.5 mg PGF2α al retirar el progestágeno. Se detectaron estros cada 4 h con un macho
con mandil y las cabras en estro recibieron dos montas con 12 h de
diferencia. El porcentaje de estros no fue diferente (p>0.05) entre
los grupos con MGA (M-2 y M+BE-2; 73.5%) y FGA-2 (80.3%).
La concepción fue menor en el grupo M+BE-2 (55.1%) vs M-2
(74%) y FGA-2 (83.6%) (p≤0.05). Se concluye que la administración de BE al inicio del estro en cabras tratadas con MGA induce
el pico de LH y la ovulación; sin embargo, tiene un efecto negativo
sobre la fertilidad.
at the end of the progestin treatment. Estrus was detected every
4 h by a male goat fitted with an apron. LH plasma concentrations
were determined from samples collected every 2 h, starting at
the time of estrus and for 24 h. The time of ovulation was detected
by ultrasound examination every 4 h. The interval from the end
of progestin treatment to estrus was greater (p≤0.01) in groups
synchronized with MGA (M-1, M+BE-1 M+GnRH-1; 71.1±2.0
h) vs FGA-1 (33.7±2.9 h). The intervals from estrus onset to the
LH peak and ovulation were not different among groups (p>0.05).
However, in the M+EB-1 and M+GnRH-1 groups, the LH peak
occurred within 12 h of the start of estrus and ovulation within
32 h for all goats, compared to only 42% in the M-1 group
(p≤0.05). Experiment 2 had three treatments: M-2 (n=50) 0.5
mg MGA animal−1 d−1 mixed in feed for 10 d; M+EB-2 (n=49) as
group M-2 and injected with 0.25 mg EB, 6 h after the start of
estrus; FGA-2 (n=49), an intravaginal sponge with FGA for 10 d.
All goats received 12.5 mg PGF2α at the end of the progestin
treatment. Estrus was detected every 4 h using a male goat fitted
with an apron and goats in estrus were mated twice with an
interval of 12 h. There were no differences (p>0.05) in the
proportion of goats showing estrus after treatment with MGA
(M-2 and M-EB+2; 73.5%) and FGA-2 (80.3%). Conception rate
was lower in the M+BE-2 (55.1%) group when compared to M-2
(74%) and FGA-2 (83.6%) (p≤0.05). It is concluded that EB
administration at the start of estrus advanced the LH peak and
ovulation in MGA synchronized goats; however, it had a negative
effect on fertility.
Recibido: Abril, 2004. Aprobado: Octubre, 2004.
Publicado como ARTÍCULO en Agrociencia 38: 603-611. 2004.
Key words: Estrus, fertility, LH, MGA, ovulation.
603
604
AGROCIENCIA VOLUMEN 38, NÚMERO 6, NOVIEMBRE-DICIEMBRE 2004
INTRODUCTION
Palabras clave: Estro, fertilidad, LH, MGA, ovulación.
INTRODUCCIÓN
P
ara la sincronización de estros es deseable que las
hembras presenten la ovulación en forma
sincronizada, lo que facilita implementar técnicas
como la inseminación a tiempo fijo o la recolección y
transferencia de embriones. El acetato de melengestrol
(MGA) es un progestágeno oral, de bajo costo, y eficaz
para sincronizar los estros en vacas, ovejas y cabras
(Zimbelman y Smith, 1966; Sanwal et al., 1983; Chávez
et al., 1990; Quispe et al., 1994). En hembras
sincronizadas con MGA, el intervalo del retiro del tratamiento a la presentación del estro y la ovulación es
mayor, si se compara con hembras sincronizadas con
dispositivos vaginales liberadores de progesterona
(CIDR) o las esponjas vaginales impregnadas con
acetato de fluorogestona (FGA) (Quispe et al., 1994;
Freitas et al., 1997; Oliveira et al., 2001; Daniel et al.,
2001; Martínez et al., 2002). Lo anterior ocurre porque la fuente del fármaco no desaparece al dejar de
administrarlo en el alimento, sino que continúa
absorbiéndose durante su tránsito por el tubo digestivo
(Daniel et al., 2001). El tiempo de eliminación del MGA
suministrado por vía oral contrasta con otros métodos
de administración del progestágeno (esponjas, implantes y dispositivos vaginales), en los cuales el retiro del
tratamiento resulta en la desaparición inmediata de la
fuente del fármaco.
En cabras sincronizadas con MGA se ha observado
mayor variabilidad del intervalo del estro al pico
preovulatorio de LH y, en consecuencia, del estro a la
ovulación, en comparación con cabras sincronizadas con
esponjas de FGA (Álvarez et al., 2001). En bovinos y
caprinos se ha utilizado la inyección de la hormona
liberadora de gonadotropinas (GnRH) después de retirar el progestágeno, con el fin de sincronizar el pico
preovulatorio de LH y la ovulación (Martínez et al., 2002;
Pierson et al., 2003; Kaim et al., 2003). Otra opción es
la administración de estradiol, el cual también desencadena la liberación de LH y la ovulación (Clarke, 1988;
Meikle et al., 2001). Este método se utiliza con buenos
resultados en bovinos (Hanlon et al., 1996; Lane et al.,
2001; Evans et al., 2003); sin embargo, no se ha probado en cabras. El primer objetivo de este estudio fue evaluar el efecto del benzoato de estradiol (BE) y GnRH en
la sincronización del pico preovulatorio de LH y de la
ovulación en cabras tratadas con MGA. Pero debido a
que los niveles séricos de estradiol pueden persistir varios días después de su administración (Larson y
Kiracofe, 1995), es posible que tengan un efecto en la
fertilidad. Concentraciones séricas elevadas de estradiol
durante los primeros días después de la inseminación,
F
or the synchronization of estrus, it is desirable for
the females to present ovulation in a synchronized
form, which facilitates the implementation of
techniques such as fixed time insemination or the
collection and transfer of embryos. Melengestrol acetate
(MGA) is a low cost oral progestin treatment, and is
effective in the synchronization of estrus in cows, ewes
and goats (Zimbelman and Smith, 1966; Sanwal et al.,
1983; Chávez et al., 1990; Quispe et al., 1994). In females
synchronized with MGA, the interval of the end of the
treatment to the presentation of estrus and ovulation is
greater, if compared with females synchronized with
intravaginal progesterone-releasing devices (CIDR), or
vaginal sponges impregnated with fluorogestone acetate
(FGA) (Quispe et al., 1994; Freitas et al., 1997; Oliveira
et al., 2001; Daniel et al., 2001; Martínez et al., 2002).
The above occurs due to the fact that the source of the
drug does not disappear when it is no longer administered
in the feed, rather it continues to be absorbed during its
passage through the digestive tract (Daniel et al., 2001).
The time of elimination of the orally administered MGA
contrasts with that of other methods of administration of
the progestin treatment (sponges, implants and
intravaginal devices), in which the withdrawal of the
treatment results in the immediate disappearance of the
drug source.
In goats synchronized with MGA, a greater variability
has been observed in the interval of estrus to the
preovulatory LH peak, and consequently, of estrus to
ovulation, compared to goats synchronized with sponges
with FGA (Álvarez et al., 2001). In cows and goats, the
injection of the gonadatropine releasing hormone (GnRH)
has been used following the progestin withdrawal to
synchronize the preovulatory LH peak and ovulation
(Martínez et al., 2002; Pierson et al., 2003; Kaim et al.,
2003). Another option is the administration of estradiol,
which also induces the release of LH and ovulation
(Clarke, 1988; Meikle et al., 2001). This method is used
with good results in bovines (Hanlon et al., 1996; Lane
et al., 2001; Evans et al., 2003); however, it has not been
tested in goats. The first objective of this study was to
evaluate the effect of estradiol benzoate (EB) and GnRH
on the synchronization of the preovulatory LH peak and
ovulation in goats treated with MGA. However, because
estradiol serum concentration remain high several days
after its administration (Larson and Kiracofe, 1995), it is
possible that they have an effect on fertility. High seric
concentrations of estradiol during the first days following
insemination, affect embryo development (Dieleman et
al., 1989). However, in bovines, the administration of EB
or estriadol cypionate (ECP) for the synchronization of
ovulation, does not have a negative effect on fertility
VALENZUELA-JIMÉNEZ et al.: BENZOATO DE ESTRADIOL, PICO PREOVULATIORIO Y FERTILIDAD EN CABRAS
afectan el desarrollo embrionario (Dieleman et al., 1989).
Sin embargo, en bovinos, la administración de BE o
cipionato de estradiol (ECP) para sincronizar la ovulación no tiene efecto negativo en la fertilidad (Hanlon et
al., 1996; Lammoglia et al., 1998). En cabras hay poca
información a este respecto; por tanto, en la segunda parte
de este trabajo se evaluó el efecto de la inyección de
0.25 mg de BE 6 h después de iniciado el estro, en la
concepción en cabras sincronizadas con MGA.
MATERIALES Y MÉTODOS
El estudio se realizó en una estación experimental de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional
Autónoma de México, localizada en la meseta central de México, a
1880 m, con clima semiseco templado. Se usaron cabras de raza
cruzada (Boer y Alpina), ciclando, y con una condición corporal entre
2.5 y 3, de acuerdo con una escala de 0 a 5 (Delavaud et al., 2000).
Las cabras permanecieron estabuladas y recibieron una dieta equivalente a 4% de su peso vivo en materia seca, consistente en 30%
heno de alfalfa, 50% paja de avena y 20% concentrado comercial
(16% PC).
Experimento 1
Se utilizaron cuatro tratamientos distribuidos aleatoriamente en
28 cabras: M-1 (n=7) 0.5 mg MGA1 por cabra al día, mezclado con
200 g de alimento durante 10 d; M+BE-1 (n=7), igual al M-1, más
una inyección intramuscular (im) de 0.25 mg BE, 6 h después del
inicio del estro; M+GnRH-1 (n=8), igual al grupo M-1, más una im
de 100 µg GnRH 2, 6 h después del inicio del estro; FGA-1 (n=6),
en las cabras se insertó una esponja intravaginal con 45 mg FGA3,
la cual permaneció in situ 10 d. Todas las cabras recibieron una
dosis luteolítica de PGF2α4 al retirar el progestágeno. Después de
retirar el tratamiento las cabras fueron observadas para detectar signos de estro, utilizando un macho con mandil. El momento del retiro del MGA se consideró 24 h después de la última vez que las
cabras consumieron el alimento preparado con esta hormona. Una
vez detectadas las cabras en estro, se tomaron muestras sanguíneas
cada 2 h durante 24 h. Las muestras se recolectaron de la vena yugular utilizando tubos vacutainer con gel activador de la coagulación y se centrifugaron 15 min para separar el suero, el cual se congeló hasta su análisis. Se determinaron las concentraciones de LH
mediante un radioinmunoanálisis heterólogo en fase líquida. El tiempo de incubación total fue 120 h a 4 oC. Se utilizó un segundo anticuerpo (IgG) de origen equino más suero normal de conejo, y como
primer anticuerpo se utilizó anti-LH ovina (NIDDK-oLH-26) (Ramos et al., 1995). La sensibilidad del ensayo fue 0.06 ng mL−1, con
un coeficiente de variación intraensayo de 8.72% e interensayo de
13.05%.
1
MGA-100. Pfizer, México S. A. de C. V.
Fertagyl. Intervet. México, S. A. de C. V.
3
Chronogest. Intervet. México, S. A. de C. V.
4
Lutalyse. Pfizer, México S. A. de C. V.
2
605
(Hanlon et al., 1996; Lammoglia et al., 1998). In goats,
there is little information to this respect; therefore, in the
second part of this study, an evaluation was made of the
effect of the injection of 0.25 mg of EB 6 h after the
onset of estrus, on conception in goats synchronized with
MGA.
MATERIALS AND METHODS
The study was carried out at an experimental station of the
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia of the Universidad
Nacional Autónoma de México, located in the central highland of
México, at 1880 m, with a semi-dry temperate climate, with cyclic
cross breed goats (Boer and Alpina), with a body condition score
from 2.5 to 3, according to a scale from 0 to 5 (Delavaud et al.,
2000). The goats remained enclosed and received a diet equivalent
to 4% of their live weight in dry matter, consisting of 30% alfalfa
hay, 50% oat straw and 20% of a commercial concentrate (16%
PC).
Experiment 1
In this experiment, four treatments were randomly distributed
into 28 goats: M-1 (n=7), 0.5 mg MGA1 per goat each day, mixed
with 200 g of feed during 10 d; M+EB-1 (n=7), as for M-1, plus an
intramuscular injection (im) for 0.25 mg EB, 6 h after the onset of
estrus; M+GnRH-1 (n=8), as for group M-1, plus an im of 100 µg
GnRH2, 6 h after the onset of estrus; FGA-1 (n=6), an intravaginal
sponge with 45 mg FGA3 was inserted in the goats, which remained
in situ for 10 d. All of the goats received a luteolithic dose of PGF2α4
at the end of the progestin treatment. After the treatment, the goats
were observed to detect signs of estrus, using a male goat fitted
with an apron. MGA withdrawal was considered to be 24 h after the
last MGA administration. Once the goats in estrus were detected,
blood samples were taken every 2 h over 24 h. The samples were
collected from the jugular vein using vacutainer tubes with
coagulation activating gel, and were centrifuged for 15 minutes to
separate the serum, which was then frozen until it was to be analyzed.
The LH concentrations were determined by a heterologous liquid
phase RIA. The total incubation time was 120 h at 4 oC. A second
antibody (IgG) of equine origin was used along with normal rabbit
serum, and as the first antibody, ovine anti-LH (NIDDK-oLH-26)
(Ramos et al., 1995). The sensitivity of the assay was 0.06ng mL−1,
with an intrassay variation coefficient of 8.72% and an interassay
variation of 13.05%.
The time of ovulation was determined by transrectal ultrasound
examination every 4 h from the onset of estrus. The ovulation was
determined by the disappearance of the dominant follicle or follicles
observed in the previous examination (Lassala et al., 2004).
606
AGROCIENCIA VOLUMEN 38, NÚMERO 6, NOVIEMBRE-DICIEMBRE 2004
El momento de ovulación se determinó mediante ultrasonografía
transrectal cada 4 h a partir del inicio del estro. La ovulación se determinó por la desaparición de el o los folículos dominantes observados
en el examen previo (Lassala et al., 2004).
Experimento 2
Se utilizaron tres tratamientos distribuidos aleatoriamente en 148
cabras: M-2 (n=50) 0.5 mg MGA por cabra al día, mezclado en 200 g
de alimento durante 10 d; M+BE-2 (n=49), igual al anterior más 0.25
mg BE im, 6 h después del inicio del estro; FGA-2 (n=49), en las
cabras se insertó una esponja intravaginal con 45 mg de FGA, la cual
permaneció in situ durante 10 d. Todas las cabras recibieron, el último
día, una dosis luteolítica de PGF2α. Después del retiro del tratamiento
las cabras fueron observadas para detectar signos de estro utilizando
un macho con mandil. Las cabras en estro recibieron montas, a las 12
y 24 h post-estro, con machos de fertilidad probada. El diagnóstico de
gestación se realizó mediante ultrasonografía transrectal 45 d después
del servicio.
Análisis estadístico
Los efectos del tratamiento se evaluaron por ANDEVA, utilizando como variables los intervalos del retiro del progestágeno al inicio
del estro, del retiro del progestágeno al pico de LH, del inicio del estro
al pico de LH, inicio del estro a la ovulación, tratamiento al pico de
LH y pico de LH a la ovulación. La distribución de los picos de LH en
las primeras 12 h inmediatas al inicio del estro se analizó con una
prueba exacta de Fisher. Los porcentajes de cabras en estro y concepción se compararon entre grupos a través de una prueba de Ji-cuadrada. El porcentaje de concepción se calculó como la proporción de
cabras positivas al diagnóstico de gestación entre el total de cabras
servidas. En todos los análisis se utilizó SAS (SAS, 1988).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Experimento 1
La administración de BE o GnRH, 6 h después del
inicio del estro, adelantó la presentación del pico
preovulatorio de LH y la ovulación (Cuadro 1). En los
tratamientos M+BE-1 y M+GnRH-1, 100 % de las cabras presentaron el pico preovulatorio de LH en las primeras 12 h siguientes al inicio del estro y ovularon antes
de 32 h después del inicio del mismo, mientras que sólo
42% (p≤0.05) de las cabras M-1 (testigo) lo hicieron (Figura 1). Estos resultados muestran que, en la cabra, el
BE tiene la misma eficacia que el GnRH para inducir el
pico preovulatorio de LH y la ovulación. El efecto del
GnRH en la inducción del pico de LH y la ovulación ha
sido demostrado en vacas (Kaim et al., 2003) y en cabras
(Pierson et al., 2003), pero no se había considerado la
evaluación del efecto del BE en estos procesos dentro del
protocolo de sincronización de estros en caprinos.
Experiment 2
For the second experiment, three treatments were randomly
distributed into 148 goats: M-2 (n=50) 0.5 mg MGA per animal each
day, mixed in 200 g of feed during 10 d; M+EB-2 (n=49), same as the
above plus 0.25 mg EB im, 6 h after the onset of estrus; FGA-2 (n=49),
an intravaginal sponge was inserted in the goats with 45 mg FGA,
which remained in situ during 10 d. The last day, all of the goats
received a luteolithic dose of PGF2α. After the withdrawal of the
treatment, the goats were observed to detect signs of estrus, by means
of a male goat fitted with an apron. The goats in estrus were mated, 12
and 24 h post-estrus, with males of demonstrated fertility. The gestation
diagnosis was carried out by means of transrectal ultrasound
examination 45 d after mating.
Statistical analysis
The effects of the treatment were evaluated by means of ANDEVA,
using as variables the intervals of the end of the progestin treatment to
the onset of estrus, the end of the progestin treatment to the LH peak,
the onset of estrus to the LH peak, the onset of estrus to ovulation,
treatment to the LH peak and LH peak to ovulation. The distribution
of the LH peaks in the first 12 h to the onset of estrus was analyzed
with an exact Fisher test. The percentages of goats in estrus and
conception were compared among groups by means of a chi-square
test. The percentage of conception was calculated as the proportion of
goats that tested positive to the gestation diagnosis divided by the total
of mated goats. SAS (SAS, 1988) was used in all of the analysis.
RESULTS AND DISCUSSION
Experiment 1
The administration of EB or GnRH, 6 h after the onset
of estrus, hastened the presentation of the preovulatory
LH peak and ovulation (Table 1). In the treatments
M+EB-1 and M+GnRH-1, 100% of the goats presented
the preovulatory LH peak in the first 12 h after the onset
of estrus and ovulated prior to 32 h after the onset of
estrus, whereas this occurred in only 42% (p≤0.05) of
the goats M-1 (control) (Figure 1). These results show
that, in goats, EB has the same effectiveness as Gn RH
in inducing the preovulatory LH peak and ovulation. The
effect of GnRH in the induction of the LH peak and
ovulation has been demonstrated in cows (Kaim et al.,
2003) and in goats (Pierson et al., 2003), but the
evaluation of the effect of the EB had not been considered
in these processes within the protocol of estrus
synchronization in goats.
In studies with bovines (Kojima et al., 1995; Lemaster
et al., 1999), a wide interval has been found between the
removal of the MGA and the presentation of the LH peak,
which coincides with what was observed in the present
study. Furthermore, the goats of the group M-1 presented
VALENZUELA-JIMÉNEZ et al.: BENZOATO DE ESTRADIOL, PICO PREOVULATIORIO Y FERTILIDAD EN CABRAS
607
Cuadro 1. Relaciones entre el estro, el pico de LH y la ovulación de cabras sincronizadas con MGA (M-1), MGA más una inyección 6 h
después del estro de GnRH (M+GnRH-1) o benzoato de estradiol (M+BE-1), y esponjas intravaginales con FGA (FGA-1).
Table 1. Relationships between estrus, LH peak and ovulation of goats synchronized with MGA (M-1), MGA plus an injection 6 h postestrus of GnRH (M+GnRH-1) or estradiol benzoate (M+EB-1), or intravaginal sponges with FGA(FGA-1).
Intervalos (h)
Tratamientos
n
M-1
M+GnRH-1
M+BE-1
FGA-1
7
8
7
6
Retiro del progestágeno
a pico de LH
Estro a
pico de LH
87.6± 4.3a
76 ± 4a
78 ± 1.8 a
41.8± 4 b
12 ±
7.5 ±
8.2 ±
7.6 ±
Estro a
ovulación
2.2a
1.3b
0.8 ab
0.7 ab
32.5 ±
30.5 ±
29.1 ±
29.8 ±
2.1a
1.6a
1.1a
2.5a
LH a
ovulación
Tratamiento
a pico de LH†
20.5 ± 0.5a
23 ± 0.8a
20.8 ± 0.7a
20.83± 0.5a
8.8 ± 1.8a
3.3 ± 0.6b
3 ± 0.4b
4 ± 0ab
Diferente literal en una columna indica diferencia estadística (p≤0.05).
†
En este análisis se eliminaron aquellas cabras que al momento del tratamiento con GnRH, BE o con el placebo, ya habían presentado el pico de
LH, quedando los grupos de la siguiente forma: M-1 n=5; M+GnRH-1 n=6; M+BE-1 n=6; FGA-1 n=3.
En estudios con bovinos (Kojima et al., 1995;
Lemaster et al., 1999) se ha encontrado un amplio intervalo entre el retiro del MGA y la presentación del pico de
LH, lo que coincide con lo observado en este trabajo.
Además, las cabras del grupo M-1 mostraron mayor dispersión en el intervalo del inicio del estro al pico de LH,
27
24
24
21
21
18
15
12
15
12
9
6
6
3
3
0
0
30
FGA-1
27
24
24
21
21
LH (ng mL −1)
27
18
15
12
15
12
9
6
6
3
3
0
0
4
8
12
16
Horas después del estro
20
24
M+GnRH-1
18
9
0
M+BE-1
18
9
30
LH (ng mL −1)
30
M-1
27
LH (ng mL −1)
LH (ng mL −1)
30
greater dispersion in the interval of the onset of estrus to
the LH peak, compared with the goats synchronized with
FGA. Thus, all of the synchronized goats of the FGA-1
group presented the LH peak before 12 h after estrus,
versus 42% of the goats of group MGA-1. These results
confirm the observations of Álvarez et al. (2001), who
0
4
8
12
16
Horas después del estro
20
24
Figura 1. Pico preovulatorio de LH en cabras sincronizadas con MGA (M-1), MGA más una inyección de GnRH (M+GnRH-1) o benzoato
de estradiol (M+BE-1), 6 h después del inicio del estro y esponjas intravaginales con FGA (FGA-1).
Figure 1. Preovulatory LH peak in goats synchronized with MGA (M-1), MGA plus an injection of GnRH (M+EB-1), 6 h after the start of
estrus or intravaginal sponges with FGA (FGA-1).
608
AGROCIENCIA VOLUMEN 38, NÚMERO 6, NOVIEMBRE-DICIEMBRE 2004
en comparación con las cabras sincronizadas con FGA.
Así, todas las cabras sincronizadas del grupo FGA-1 mostraron el pico de LH antes de 12 h después del estro, versus 42% de las cabras del grupo MGA-1. Estos resultados confirman las observaciones de Álvarez et al. (2001),
quienes encontraron que las cabras tratadas con MGA
mostraron un intervalo promedio del inicio del estro al
pico de LH, similar a las sincronizadas con FGA; sin embargo, al comparar la dispersión en la presentación del
pico de LH, las cabras tratadas con MGA mostraron una
variación significativamente mayor que las de FGA. La
causa de este fenómeno se desconoce y pudiera estar relacionada con la naturaleza farmacológica de este
progestágeno.
El tiempo promedio de presentación del estro, después de retirar el progestágeno, fue mayor (p≤0.01) en
las cabras tratadas con MGA (71.1±2.0 h) que en las
del tratamiento FGA (33.7±2.9 h). Este resultado es similar a lo encontrado en cabras utilizando MGA vs FGA,
(Álvarez et al., 2001); en ovejas tratadas con MGA versus CIDR (Daniel et al., 2001), y en vacas sincronizadas
con MGA comparado con vacas tratadas con implantes
de norgestomet o CIDR-B (Odde, 1990). Esta diferencia se debe al retiro rápido de la fuente del fármaco cuando es administrado en esponjas intravaginales o en dispositivos intravaginales de liberación, en comparación
con la vía oral. El MGA se mezcló con un concentrado
comercial; por lo que la eliminación del MGA de la circulación sanguínea puede estar determinada, en parte,
por el tiempo de vaciado del tubo digestivo y también
puede estar afectada por factores individuales como la
cantidad consumida de MGA y la condición corporal
(Kojima et al., 1995). Además, el tejido adiposo puede
retener hasta 86 % de MGA en forma activa (Krzeminski
et al., 1981). El metabolismo del progestágeno que contiene el CIDR (progesterona) o en la esponja (FGA),
puede ser más rápido que el del MGA (Daniel et al.,
2001).
Experimento 2
La administración del BE, 6 h después del inicio del
estro, redujo el porcentaje de concepción, el cual fue menor (p≤0.05) en el grupo M+BE-2 (55.1%) vs M-2 (74%)
y FGA-2 (83%) (Cuadro 2). Estos resultados contrastan
con los obtenidos en vacas que reciben una inyección de
BE o cipionato de estradiol para sincronizar la ovulación,
sin afectar el porcentaje de concepción (Hanlon et al.,
1996; Lammoglia et al., 1998). En el presente estudio se
muestra un efecto negativo del estradiol en la fertilidad
cuando se administra dentro de un tratamiento de
sincronización de estros en cabras.
El efecto del estradiol en la fertilidad, en este estudio,
es interesante porque no ocurre en las vacas que reciben
found that goats treated with MGA showed an average
interval from the onset of estrus to the LH peak, similar
to that of the goats synchronized with FGA; however, on
comparing the dispersion in the presentation of the LH
peak, the goats treated with MGA presented a variation
which was significantly greater than those of FGA. The
cause of this phenomenon is unknown, and could be
related to the pharmacological nature of this progestin.
The average time for the presentation of estrus, after
removal of the progestin treatment, was greater (p≤0.01)
in the goats treated with MGA (71.1±2.0 h) than in those
of the FGA treatment (33.7±2.9 h). This result is similar
to that found in goats using MGA vs FGA (Álvarez et al.,
2001); in ewes treated with MGA versus CIDR (Daniel
et al., 2001), and in cows synchronized with MGA
compared with cows treated with implants of norgestomet
or CIDR-B (Odde, 1990). This difference is due to the
rapid fall in progestin after removal of the source of the
drug when it is administered in intravaginal sponges or
in intravaginal release devices, compared to oral
administration. The MGA was mixed with a commercial
concentrate; thus, the elimination of the MGA from the
bloodstream could be determined, in part, by the time of
evacuation of the digestive tract, and also could be affected
by individual factors such as the amount of MGA
consumed and the body condition (Kojima et al., 1995).
Furthermore, the adipose tissue can retain up to 86% of
MGA in active form (Krzeminski et al., 1981). The
metabolism of the progestin treatment contained in the
CIDR (progesterone) or in the sponge (FGA), could be
faster than that of the MGA (Daniel et al., 2001).
Experiment 2
The administration of EB, 6 h after the onset of estrus,
reduced the percentage of conception, which was lower
(p≤0.05) in M+EB-2 (55.1%) vs M-2 (74%) and FGA-2
(83%) (Table 2). These results contrast with those obtained
in cows which receive an injection of EB or estradiol
cypionate to synchronize ovulation, without affecting the
percentage of conception (Hanlon et al., 1996; Lammoglia
et al., 1998). The present study shows a negative effect
of estradiol on fertility when administered within a
treatment of estrus synchronization in goats.
The effect of estradiol on fertility in this study is
interesting, because it does not occur in the cows which
receive estradiol to induce ovulation (Lammoglia et al.,
1998; Lane et al., 2001). The cause of the low fertility is
unknown, but it may be related to the effect of residual
concentrations of estradiol on early embryonic
development. Thus, the high concentrations of estradiol
in the days following mating may delay the development
of the embryo (Dieleman et al., 1989). In cows
superovulated with eCG, the presence of follicles which
VALENZUELA-JIMÉNEZ et al.: BENZOATO DE ESTRADIOL, PICO PREOVULATIORIO Y FERTILIDAD EN CABRAS
estradiol para inducir la ovulación (Lammoglia et al.,
1998; Lane et al., 2001). La causa de la baja fertilidad se
desconoce, pero puede estar relacionada con el efecto de
concentraciones residuales de estradiol en el desarrollo
embrionario temprano. Así, las concentraciones elevadas
de estradiol en los días siguientes al servicio pueden retrasar el desarrollo embrionario (Dieleman et al., 1989).
En vacas superovuladas con eCG, la presencia de folículos
que no ovularon o en crecimiento durante el metaestro
aumenta en la proporción de embriones degenerados, lo
cual se asocia con concentraciones elevadas de estradiol
durante ese periodo (Bevers et al., 1993). Los niveles altos de estradiol en los días siguientes a la ovulación pudieron provocar regresión prematura del cuerpo lúteo.
Cabras superovuladas con eCG presentan niveles altos
de estradiol después del estro, provocado por la presencia de folículos ováricos anovulatorios, lo cual se asocia
con la luteólisis prematura (Saharrea et al., 1998;
Riesenberg et al., 2001). Smith y Zimbelman (1968) observaron que al administrar cipionato de estradiol en el
último día del tratamiento con MGA, la fertilidad disminuía y se incrementaba el número de cuerpos lúteos de
vida media corta, en vacas.
Otro factor que pudo haber influido en la fertilidad es
la dosis de BE empleada. En una vaca de 500 kg, la dosis
utilizada es aproximadamente 1 µg por kg de peso vivo y
4.7 µg kg de peso metabólico (0.5 mg dosis total) (Hanlon
et al., 1996; Evans et al., 2003), mientras que en una cabra de 50 kg es alrededor de 5 µg y 13 µg por kg de peso
vivo y metabólico (0.25 mg dosis total). Así, la dosis utilizada en este experimento fue tres a cuatro veces más
alta que la usada en vacas, lo cual pudo afectar el porcentaje de concepción. La dosis utilizada en este experimento fue seleccionada en un estudio preliminar porque induce el pico de LH. Es necesario evaluar si dosis menores pueden provocar el pico de LH y la ovulación, sin un
efecto desfavorable en la fertilidad.
El porcentaje de concepción entre las cabras M-2
(74%) y FGA-2 (83.6%) no fue diferente (p>0.05), lo
que indica que, si bien existe mayor variación en el intervalo entre el inicio del estro y el pico preovulatorio de
LH en las cabras tratadas con MGA, la fertilidad no cambió (Cuadro 2).
El porcentaje de presentación de estros no fue diferente entre cabras tratadas con MGA (M-2 y M+BE-2) y
FGA (73.5% y 80.3%); sin embargo, la dispersión de los
mismos fue mayor en las cabras tratadas con MGA que
en las sincronizadas con FGA (Figura 2). El tiempo de
presentación del estro puede estar afectado por el tiempo
de eliminación del progestágeno. Dado que la proporción de cabras en estro y la fertilidad fueron similares
entre los grupos tratados con MGA y FGA, el uso de
MGA en las sincronización de estros en la cabra es una
alternativa eficaz y más económica.
609
have not ovulated or which are in the process of growth
during metaestrus increases in the proportion of
degenerated embryos, which is associated with high
concentrations of estradiol during this period (Bevers et
al., 1993). The high levels of estradiol in the days
following ovulation could induce premature regression
of the corpus luteum. Goats superovulated with eCG
present high levels of estradiol after estrus, provoked by
the presence of anovulatory ovarian follicles, which is
associated with premature luteolysis (Saharrea et al.,
1998; Riesenberg et al., 2001). Smith and Zimbelman
(1968) observed that when estradiol cypionate was
administered on the last day of the treatment with MGA,
fertility was reduced and the number of corpus luteum of
a short half life increased in cows.
Another factor which could have had an influence
on fertility is the dose of EB employed. In a cow of 500
kg, the dose used is approximately 1 µg per kg live
weight and 4.7 µg kg metabolic weight (0.5 mg total
dose) (Hanlon et al., 1996; Evans et al., 2003), whereas
in a goat of 50 kg, the dose is approximately 5 µg and
13 µg per kg live and metabolic weight (0.25 mg total
dose). Thus, the dose used in this experiment was three
to four times higher than that used in cows, which could
affect the conception rate. The dose used in this
experiment was chosen in a preliminary study for
inducing the LH peak. It is necessary to evaluate whether
smaller doses can induce the LH peak and ovulation,
without having a unfavorable effect on fertility.
The percentage of conception among the goats M-2
(74%) and FGA-2 (83.6%) was not different (p>0.05),
which indicates that, although there is a greater variation
in the interval between the start of estrus and the
preovulatory LH peak in the goats treated with MGA,
the fertility did not change (Table 2).
The percentage of presentation of estrus was not
different among goats treated with MGA (M-2 and
M+EB-2) and FGA (73.5% and 80.3%); however, the
dispersion was greater in goats treated with MGA than
in those synchronized with FGA (Figure 2). The time
of the onset of estrus could be affected by the time of
elimination of the progestin. Given that the proportion
of goats in estrus and the fertility were similar among
the treatments with MGA and FGA, the use of MGA in
the estrus synchronization of goats is an effective and
more economical alternative.
CONCLUSIONS
The administration of estradiol benzoate at the onset
of estrus in goats treated with MGA, induces the LH peak
and ovulation; however, it has a negative effect on fertility.
The proportion of goats in estrus and the fertility of the
goats treated with MGA orally is similar to that obtained
AGROCIENCIA VOLUMEN 38, NÚMERO 6, NOVIEMBRE-DICIEMBRE 2004
Cuadro 2. Presentación de estros, fertilidad y prolificidad de cabras tratadas por vía oral con MGA (M-2), MGA más
benzoato de estradiol (M+BE-2) y esponjas
intravaginales con FGA (FGA-2).
Table 2. Presentation of estrus, fertility and prolificacy of goats
treated orally with MGA (M-2), MGA plus estradiol
benzoate (M+EB-2) or intravaginal sponges with FGA
(FGA-2).
Tratamientos
n
Cabras en estro
(%)
Concepción
(%)
Prolificidad
M-2
M+BE-2
FGA-2
50
49
49
73.5a
74.2a
80.3a
74a
55.1b
83.6a
1.60 ± 0.08a
1.39 ± 0.10a
1.32 ± 0.08a
Diferente literal en una columna indica diferencia estadística (p≤0.05).
CONCLUSIONES
La administración de benzoato de estradiol al inicio
del estro, en cabras tratadas con MGA, induce el pico de
LH y la ovulación; sin embargo, tiene un efecto negativo
en la fertilidad. La proporción de cabras en estro y la
fertilidad de cabras tratadas con MGA por vía oral es
similar a la obtenida con el uso de esponjas intravaginales
impregnadas con FGA.
LITERATURA CITADA
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60
FGA
MGA
50
Cabras en estro (%)
610
40
30
20
10
0
1
2
3
4
5
Días después del retiro
6
7
Figura 2. Distribución de la presentación del estro después del
retiro del progestágeno (día 0) en cabras sincronizadas
con MGA (tratamientos M-2 y M+BE-2) por vía oral y
esponjas intravaginales impregnadas con FGA
(tratamiento FGA-2).
Figure 2. Distribution of the presentation of estrus after the end
of progestin treatment (day 0) in goats synchronized with
MGA (treatment M-2 and M+EB-2) administered orally
or intravaginal sponges impregnated with FGA
(treatment FGA-2).
with the use of intravaginal sponges impregnated with
FGA.
—End of the English version—
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