II CURSO DE TÉCNICAS HISTOLÓGICAS Instituto de Investigaciones Biotecnológicas

II CURSO DE TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
24 al 28 de Febrero de 2014
Instituto de Investigaciones Biotecnológicas
Instituto Tecnológico de Chascomús
Universidad Nacional de San Martín
CONICET.
Responsables:
-Dr. Gustavo M. Somoza (IIB-INTECH, CONICET-UNSAM)
-Lic. Tomás Chalde (IIB-INTECH, CONICET-UNSAM)
-Téc. Gabriela C. López (IIB-INTECH, CONICET-UNSAM)
Disertantes Invitados:
-Dra. Claudia Delgiorgio (División Patología Forense-Superintendencia de Policía Científica)
-Dr. Juan Ignacio Fernandino (IIB-INTECH CONICET-UNSAM)
-Téc. Javier Herdman (IIB-INTECH, CONICET-UNSAM)
-Lic. Vanina Tartalini (Instituto de Física Rosario-CONICET)
-Lic. María Rita Perez (IIB-INTECH, CONICET-UNSAM)
-Téc. Gabriela E. Zarlavsky (Fac. de Agronomía. UBA)
Lugar:
Instituto Tecnológico de Chascomús. Avenida Intendente Marino Km 8.2. Chascomús, Buenos
Aires, Argentina.
Objetivo:
Acercar a los participantes al conocimiento de las técnicas histológicas. Se brindarán conceptos
teóricos básicos y consejos prácticos sobre las mismas y algunas de sus posibles aplicaciones.
Duración: 40 hs de clase (teóricas y prácticas), con evaluación final.
Cupo: 10 (diez) personas.
Destinatarios: estudiantes de posgrado en Ciencias Biológicas, Biología Molecular y Biotecnología
y afines.
PROGRAMA
Teórico
1. Conceptos básicos sobre histología animal y vegetal.
2. Introducción a la microscopia: Microscopio óptico y electrónico de transmisión y de barrido.
Diferencias y semejanzas, correcto uso y aplicaciones. Partes mecánicas y ópticas del microscopio
compuesto. Función de cada parte. Empleo de lupa en histología.
3. Técnicas histológicas I: Toma de muestra (conceptos de autólisis, necrosis y apoptosis). Proceso
de fijación y fijadores. Decalcificación y tipos de decalcificadores. Deshidratación/diafanización.
Inclusión: métodos (procesadores automáticos, microondas, etc), tipos y diferentes medios
(parafina, gelatina, celoidina, resinas, etc). Armado del taco: orientación de muestra y tallado.
4. Técnicas Histológicas II: Corte con micrótomos: modelos (de deslizamiento y de congelación, de
rotación, vibrátomo, ultramicrótomo y crióstato) y utilidades. Tipos de navajas. Preparación de
portaobjetos: limpieza, adhesivos. Montado de cortes, free-floating. Preparación de muestras y
portaobjetos. Conservación de cortes.
5. Técnicas Histológicas III: Coloraciones: fundamentos, clasificación y tipos de colorantes.
Tinciones anilínicas (ej: Hematoxilina-Eosina). Tricrómicos (Ej: Tricrómico de Masson/Mallory).
Metacromasia (ej: Azul de Toluidina). Técnicas especiales (ej: Impregnación Argéntica). Técnicas
histoquímicas (ej: Alcian Blue, PAS, etc). Técnicas enzimohistoquímicas (ej: estearasas) Técnicas
inmunohistoquímicas: fundamentos, sistemas de revelado, recuperación antigénica. Técnicas de
Hibridación in situ: Introducción, fundamento y aplicaciones.
6. Anatomía patológica y medicina forense: Definición de patología forense. Incumbencia del
técnico en histología en el laboratorio de patología forense. Diferencias y similitudes con la técnica
histológica en clínica médica. Recepción y preparación de muestra. Técnicas especiales.
7. Técnicas histológicas aplicadas en Microscopia Electrónica de Transmisión y de Barrido.
Aspectos básicos en el tratamiento y procesamiento de muestras.
8. Captura de imágenes con Image Pro plus y NIS. Aumentos y escalas. Análisis y edición de
Imágenes. Obtención de datos cualitativos y cuantitativos. Formatos de archivos para publicaciones.
Práctico
1. Procesamiento de muestras: Deshidratación, inclusión en parafina, armado del taco, corte (con
micrótomos de deslizamiento y de rotación). Preparación de muestras para realizar cortes con
crióstato. Montado en portaobjetos con y sin adhesivos. En tejidos vegetales: Corte a mano alzada,
coloración simple y montaje con gelatina-glicerina.
2. Técnicas: Hematoxilina & Eosina, Alcian Blue-PAS e inmunohistoquímica en las preparaciones
realizadas a partir muestras incluidas en parafina. En las realizadas con crióstato y micrótomo de
congelación realizarán Sudán IV y Azul de Toluidina respectivamente.
3. Observación al microscopio óptico. Captura de imágenes y discusión de resultados.
4. Discusión de bibliografía otorgada y de trabajos de divulgación.