LABICO – Laboratorio Biológico Córdoba [email protected] | www.labico.com.ar www.labico.com.ar - © Copyright 2005 - Todos los derechos reservados Paraná 670 - Planta Baja - CP X5000ARZ - Nueva Córdoba - Córdoba - Te.: (0351) 469 1565 BIOLOGÍA MOLECULAR Normas Toma de Muestra Instrucciones para la toma y preparación de las muestras: Consideraciones generales: Tener presente que va a tomar una muestra para una determinación mucho más susceptible de contaminarse que un hemocultivo; por lo tanto además de todas las precauciones que ud. ya conoce, podemos recalcar las siguientes: 1. 2. 3. 4. - Lavado de manos con desinfectante o mejor use guantes. - No permita la existencia de corrientes de aire. - Cuide la esterilidad y la cadena de frío de la muestra durante todo el proceso. - La heparina interfiere con la PCR por lo que en pacientes en tratamiento o en diálisis, tome la muestra antes de la próxima toma o diálisis. 5. - Adjunte datos clínicos. 6. - Usar guantes sin talco. El talco (almidón) pueden interferir con la reacción. Existen en el comercio guantes sin talco o bien usar una manopla de plástico sobre los guantes comunes. 7. - No usar hisopos ni espátulas de madera para la toma de muestra. Sangre con EDTA: (SE) Se refiere a que se necesita sangre entera para el análisis, el componente a analizar está en células. El material de preferencia son tubos al vacío con EDTA (existen varias marcas, entre las que podemos citar, a modo de ejemplo, Vacutainer, Venojet, etc). Remitir 2 tubos con 3 ml cada uno por cada paciente. Procedimiento optativo: sacar en jeringa descartable, previamente cargada con una gota de una solución saturada de EDTA. Inmediatamente luego de la extracción, descartar la aguja y tapar la jeringa por ejemplo, con el capuchón de la aguja cortado a la mitad si eso la tapa correctamente u otra tapa que tape bien. NOTA: Las jeringas que vengan con aguja serán descartadas ni bien ingresen al laboratorio. Se descartará la jeringa con aguja y la muestra, por lo tanto rogamos ser muy cuidadoso en este detalle de bioseguridad. Refrigerar a 2-8 grados inmediatamente después de la extracción y mantener así hasta su envío. No es necesario centrifugar. Plasma con EDTA: (PE) Se refiere a que la muestra necesaria es plasma de sangre anticoagulada con EDTA. El material de preferencia son tubos al vacío con EDTA (existen varias marcas, entre las que podemos citar a modo de ejemplo Vacutainer, Venojet, etc.). Sacar un tubo de 10 ml o 2 de 5 ml por cada paciente. Inmediatamente luego de la extracción y siempre a temperatura ambiente, centrifugar el material durante 15 minutos a 1500 g. Luego mediante el uso de gotero de plástico estéril y cuidando las normas de asepsia, separar el plasma colocándolo en tubo descartable y tapar (todo nuevo, preferentemente estéril). Congelar a –20 C y remitir a esa temperatura. Frascos ámbar. Chlamydia en secreción ocular: BM - 1 LABICO – Laboratorio Biológico Córdoba [email protected] | www.labico.com.ar www.labico.com.ar - © Copyright 2005 - Todos los derechos reservados Paraná 670 - Planta Baja - CP X5000ARZ - Nueva Córdoba - Córdoba - Te.: (0351) 469 1565 Por medio de una pipeta o gotero dejar caer 2 a 3 gotas de solución fisiológica (todo estéril) en el interior del ojo. Bajar el párpado inferior y tomar material del saco lagrimal, por medio de una pipeta Pasteur de plástico estéril. Colocar el líquido aspirado en un tubo estéril con tapa a rosca. Conservar y remitir refrigerado. Chlamydia en exudado uretral o vaginal: Mujer: Se debe disponer de dos hisopos plástico - rayón. Con el primero, limpiar la zona a tomar la muestra. Con el segundo, frotar intensamente en el lugar a estudiar, se debe levantar células. Colocarlo en el medio de transporte. Refrigerar a +2 a +8 C. Remitir debidamente identificado. Según las características anatómicas del lugar a tomar la muestra se puede usar un hisopo de aluminio – rayón que tiene un diámetro inferior al de plástico – rayón. Hombre: Se usa un hisopo de aluminio - rayón. Se introduce 1 a 2 centímetros y se rota con el fin de arrastrar células. Colocarlo en el medio de transporte. Refrigerar a +2 a +8 C. Remitir debidamente identificado. Hisopados para Herpes I - II o HPV: Se cepilla la zona afectada con hisopo de plástico - rayón. Frotar fuertemente una o dos veces y colocarlo en el tubo estéril. Es importante realizar la extracción con el menor lapso posible de tiempo, antes de enviarla. Si se dispone de biopsia, enviarla en iguales condiciones. Biopsias: Colocar la pieza en solución fisiológica estéril. Mantenerla refrigerada a +2 a +8 C, remitir para su análisis a la brevedad. No usar formol ni alcoholes. Si bien las muestras incluidas en parafina podrían usarse, no son las mas adecuadas dado que la recuperación de ADN puede no ser óptima o demorar el trabajo. BM - 2