Eliminación de anilina 4-cloroanilina y 2-clorofenol utilizando una peroxidasa aniónica de chayote. Ana Rosa Pérez Diaz1, Julieta Pérez Curiel1, Elizabeth Estrada Jonson 1, M.L. Osnelda Villegas Rosas 2 y Alejandro I.A. Alonso Calderón 1,2. (1) Universidad Politécnica de Puebla, Desviación a 6.5 Km de Cholula sobre Blvd. Huejotzingo (222) 7746668 y 69. (2) Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, Instituto de Ciencias, Posgrado en Ciencias Ambientales, Ciudad Universitaria, [email protected] [email protected] Modalidad: Cartel Área: Tecnología y Biotecnología Ambiental. Palabras clave: aniónico, contaminante, peroxidasa Introducción: Los avances alcanzados en el campo de la biotecnología, y más específicamente la biocatálisis, han permitido generar procesos catalíticos basados en enzimas (1). Las peroxidasas son enzimas que catalizan la oxidación de dos moléculas de sustrato utilizando una molécula de peróxido como aceptor de electrones (2). Estas enzimas tienen un gran potencial de aplicación en diversos campos como en la eliminación de contaminantes aromáticos debido a su alto poder oxidante. El objetivo de este trabajo es el de la eliminación de contaminantes aromáticos en aguas artificialmente contaminadas utilizando una peroxidasa aniónica de chayote. Metodología. Se partieron de 1.2 Kg. de fruto de chayote en su variedad no espinosa. Se obtuvo el zumo y posteriormente éste fue centrifugado a 7,000 rpm. El sobrenadante fue sometido a un proceso de diálisis durante 15 h en amortiguador acetato de sodio-ácido acético 10 mM a un pH de 4.5 y a una temperatura de 4 ºC. Se obtuvo un concentrado de proteínas de chayote y para ello se realizó una cromatografía de intercambio catiónico con el intercambiador carboximetilcelulosa (CM-52) previamente equilibrado a un pH de 4.5. El eluido no retenido en la cromatografía de intercambio catiónico fue sometido a una cromatografía de intercambio aniónico (DE-53) previamente equilibrado con buffer de fosfatos pH: 8, el concentrado de peroxidasas anionicas se obtuvo mediante un régimen isocrático de concentración. A continuación se prepararon aguas artificialmente contaminadas con anilina, 4-cloroanilina y 2-clorofenol a 100 ppm, y se realizo la remoción del contaminante utilizando peroxidasa de chayote aniónica y peroxido de hidrógeno 12.3 mM, el monitoreo de los experimentos fue seguido mediante espectroscopia UV-Vis en el rango de 350 a 700 nm, utilizando un espectrofotometro Agilent 8453 UV-visible. Resultados y discusión. Nuestro grupo de investigación ha purificado peroxidasas catiónicas con muy buenos resultados en la remoción de diversos contaminantes (3), la innovación en este trabajo de investigación es de que se ha utilizado íntegramente al zumo de chayote pudiendo purificar también peroxidasas aniónicas capaces de transformar a los contaminantes anilina, 4-cloroanilina y 2 clorofenol por arriba del 95%, en sus respectivos polímeros, los cuales son insolubles en agua y esto habré la perspectiva de que estos sean removidos fácilmente mediante métodos de separación mecánicos como la filtración y la centrifugación. Conclusiones. 1.- Se logró purificar con éxito peroxidasas aniónicas de chayote. 2.- Mediante esta peroxidasa fue posible transformar a estos contaminantes en un 95%. Por lo anterior se abre la posibilidad de utilizar peroxidasas aniónicas en la eliminación de contaminantes aromáticos. Citas Bibliograficas 1. Schoemaker HE, Wubbolts MG. (2003). Dispelling the myths-biocaralysis in industrial sybthesis. Science 299:1694-1697. 2. Welinder KG. (1992) Superfamily of plant, fungal and bacterial peroxidases. Current Opinion in Structural Biology 2: 388-393. 3. Villegas-Rosas María Lioba Osnelda., Gunther Geissler., Anabella Handall-Silva y Enrique González-Vergara. (2003). Inmovilización de una peroxidasa de chayote (Sechium edule (Jacq) Sw.) y su potencial aplicación en la remoción de sustancias fenólicas en aguas contaminadas. REVista INTernacional de Contaminación AMBIENTal. No. 19 (2). 73-81.