Finocchiaro-ITG 2012.pdf

Vacunas antitumorales
Unidad de Transferencia Genética
Instituto de Oncología “Ángel H. Roffo”
Universidad de Buenos Aires
Enfoque Reduccionista
Visión Holística
Vacunas Antitumorales
Más de 100 en desarrollo.
10 aprobadas:
2 profilá
profilácticas:
cticas: aprobadas por FDA (USA):
previenen infecciones virales asociadas a cáncer:
ncer:
- Hepatitis B: cáncer de hígado.
gado.
- Gardasil:
Gardasil: HPV 16 and 18: 70 % ca cervical.
Vacunas Antitumorales Terapéuticas
Aprobadas: 8
Vacuna
Melacina
Gendicine™
Gendicine™ (Shenzhen SiBiono
Genetechnologies)
Genetechnologies)
Oncorine™
Oncorine™ (H101; Shanghai
Sunway Biotech)
DCVaxDCVax-Brain Vac.
Vac. (Swiss
Institute of Public Health)
Health)
Oncophage®
Oncophage® (vitespen)
vitespen)
CimaVax EGF
Oncept(TM) (Merial,
Merial, AMC,
NYC,USA)
NYC,USA)
Provenge™
Provenge™ (NCI, Dendrion,
Dendrion,
USA)
Paí
País
Modalidad
Canadá
Canadá
(2000)
China
(2003)
China
(2006)
Suiza
(2007)
Rusia
(2008)
Cuba
(2008)
Lisado de 2 lílíneas de
melanoma humano
Adenovirus p53 +
radioterapia
USA
(2008)
USA
(2010)
Adenovirus oncolí
oncolítico
DC marcadores
tumorales autó
autólogos.
gp96: HSP/pé
HSP/péptidos
autó
autólogos
Proteí
Proteína fusió
fusión: EGFEGF-p64
Indicació
Indicación
Melanoma
CCE de cabeza y
cuello
Ca cabeza y
cuello.
Ca cerebro.
Ca renal.
Ca pulmó
pulmón de
cels.
cels. no pequeñ
pequeñas
pDNA:
pDNA: Tirosinasa humana
Melanoma canino
xenogé
xenogénica
APC pulsadas fosfatasa
ácida prostá
prostática
Ca pró
próstata
metastá
metastásico
Vacunas Antitumorales Terapéuticas
Aprobadas: 8 / genéticas: 3
Mecanismos tumorales de evasión a la respuesta inmune
Inhibe actividad NK
Induce tolerancia
Ipilimumab/Tremelimumab
B7
B7
CTLA4
CD28
(-)
IL2
X
Mecanismos tumorales de evasión a la respuesta inmune
Inhibe actividad NK
Induce tolerancia
Mecanismos tumorales de evasión a la respuesta inmune
Inhibe actividad NK
Induce tolerancia
Inestabilidad genética
Mecanismos tumorales de evasión a la respuesta inmune
Inhibe actividad NK
Induce tolerancia
Inestabilidad genética
Inmunosupresión
CCL21
Linfocitos regulatorios
Gen Suicida
Terapia
combinada:
cirugía,
genes suicidas
control de la
enfermedad local
y
vacunas
control de la
enfermedad
sistémica.
Cancer Gene Ther.
Ther. (2008) 15: 165165-172.
172.
Suicide gene and cytokines combined nonviral gene therapy
for spontaneous canine melanoma
LME Finocchiaro, GL Fiszman, AL Karara and GC Glikin
Gene Ther.
Ther. (2008) 15: 267267-276.
276.
5
Cytokine-enhanced vaccine and suicide gene therapy as
surgery adjuvant treatments for spontaneous canine melanoma
LME Finocchiaro and GC Glikin
Primeros protocolos de terapia génica veterinaria de America latina
con tecnologí
tecnología 100% argentina.
argentina.
bench ( )
rug
MELANOMA CANINO MUCOSO ORAL / DIGITAL
Altamente maligno, metastásico y letal.
De rápido crecimiento, invasión local y
metástasis temprana
Resistente a las terapias convencionales.
Células
Xenogénicas
Cirugí
Cirugía
Total
Gen suicida
Fragmentos formolizados
hIL-2
hGM-CSF
Cirugí
Cirugía
Parcial
Controles
Cirugí
Cirugía
Recidiva
PostPost-quirú
quirúrgica
Vacuna
subcutá
subcutánea
Gen Suicida
Semanalmente
emanalmente
por 5 semanas.
semanas.
Luego cada 2, 4,
9, 18 semanas.
semanas.
hIL-2
hGM-CSF
?
Gen Suicida: Timidina Kinasa del Virus Herpes Simplex
CELLCELL-TK
+ ATP
Guanosina
ATP
Ganciclovir
Necrosis inflamatoria
Escasa infiltració
infiltración inmune
Ambiente tumoral inmunosupresor
Infiltració
Infiltración inmune
Inmunoestimulació
Inmunoestimulación del
microambiente tumoral
X
X X
XX
.
Inactivació
Inactivación
Apoptosis
Destrucció
Destrucción del tumor residual
Inmunoestimulació
Inmunoestimulación Afluencia inmune
Fig. 2: Effects of
combined
treatment on antitumor response.
Micrographs (400
X) showing the
cellular
inflammatory intratumor response
before (left column)
and after (right
column) 5 weekly
combined
treatments. Every
row represents a
single patient.
Representative
tumor sections from
5 different patients
obtained by biopsy
were treated for
hematoxylin and
eosin staining as
described in
Materials and
Methods.
CD8
.
.
CD4
.
MØ
Células
Xenogénicas
Cirugí
Cirugía
Total
Gen suicida
Fragmentos formolizados
hIL-2
hGM-CSF
Cirugí
Cirugía
Parcial
Controles
Cirugí
Cirugía
Recidiva
PostPost-quirú
quirúrgica
Vacuna
subcutá
subcutánea
Gen Suicida
Semanalmente
emanalmente
por 5 semanas.
semanas.
Luego cada 2, 4,
9, 18 semanas.
semanas.
Cancer Gene Ther.
Ther. (2008) 15: 165165-172.
172.
Suicide gene and cytokines combined nonviral gene therapy
for spontaneous canine melanoma
LME Finocchiaro, GL Fiszman, AL Karara and GC Glikin
Gen suicida
Gen suicida + vacuna
RC=7%
RC=16%
PT=26%
PT=31%
RP=38%
RP=31%
CR: Rta completa
EE=25%
PR: Rta. parcial
SD: Enf. estable
PD: Enf. progressiva
EE=27%
Gene Ther.
Ther. (2010) 17: 2626-36.
36
Suicide gene therapy on spontaneous canine melanoma:
correlations between in vivo tumors and their derived
multicell spheroids in vitro
Marí
María L. Gil Cardeza,
Cardeza, Marcela S. Villaverde,
Villaverde, Gabriel L. Fiszman,
Fiszman, Natalia A.
Altamirano, Ruth A. Cwirenbaum,
Cwirenbaum, Gerardo C. Glikin and Liliana M. E. Finocchiaro.
Tto Combinado n=284
Gen Suicida
Cx.
Sin recidiva Parcial
post-Cx
30%
(SRPQ)=49%
RPQ=21%
61
172
SRPQ=9%
Cx. Parcial
27%
Recidiva
post-Cx.
(RPQ)=64%
Control Cx.
Cx. n=135
P<0,0001 LogLog-rank test
Aná
Análisis de Kaplan Meier
Control de la enfermedad local
TC
51%
PT=19%
RPQ=21%
EE=29%
RP=32%
SRPQ: 9%
Cx
SRPQ: sin recidiva post-Cx.
RPQ: recidiva post-Cx
CP=27%
% in itia l tu m o r s iz e
CP=30%
SRPQ=49%
.
RC=20%
100
80
60
198
783
0
20
40
20
CP: Cx. Parcial
RC: Rta completa
RP: Rta. parcial
RPQ=64%
EE: Enf. estable
PT: Progresión tumoral
0
days
40
Respuesta local
Respuesta sisté
sistémica
LEL: libre de enf. local.
RC
TC
10%
LEL:59%
LE: libre de enfermedad.
M0-1=9%
RP=16%
M0: libre de metástasis
M1-1=10%
M1-1: Metástasis desde día 0
M1-0=1 %
M0-1: Metástasis durante Tto.
EE=15%
M1-0: desaparición de
metástasis
SRPQ=49%
M0=84%
PT=9%
49%
67
241
SRPQ: 9%
Cx
M0-1=46%
M0=44%
PT=91%
M1-1
10%
p<0,0001 LogLog-rank test
Aná
Análisis de Kaplan Meier
Remisión Completa de metástasis en órganos distantes
1) Cocker macho de 15 añ
años
2) Mestiza hembra de 15 añ
años
Remisión Completa de metástasis en órganos distantes
Pastor Alemá
Alemán hembra de 13 – 15 añ
años
.
14/10/05: Enucleació
Enucleación por melanoma ocular
.
. 5/1/07: 39 dí
dí as: Hí
Hí gado: Sin evidencia
ecográ
ecográfica de metá
metástasis.
. 11/11/06: metá
metástasis hepá
hepáticas mú
múltiples.
Extirpació
Extirpación de un ló
lóbulo hepá
hepático completo . 26/04/08: 524 dí
dí as: Libre de enfermedad.
y parte del 2do, quedando mú
múltiples nó
nódulos
Excelente estado clí
clínico y calidad de vida.
imposibles de resecar.
. 27/04/08: 525 dí
dí as: eutanasia no relacionada.
. 27/11/06: Se derivó
derivó a terapia gé
génica.
Cx
TC
(n=133)
%
51
48
99
(n=133)
%
47
13
60
1
40
ABANDONARON PROTOCOLO
0
26
VIVOS
1
27
CAUSA DE MUERTE
ENFERMEDAD LOCAL (L)
METASTASiS (M)
ENFERMEDAD (L+M)
NO RELACIONADA
Cx vs. TC
(p<)
0.012
2x10-8
Prolongación significativa de la sobrevida libre de enfermedad
Supervivencia (días)
Controles Cirugía
Tratamiento Combinado Cx vs TC p<
Libre de enfermedad (E) 56 (3(3-425) (n=82)
>2855 (37(37-2855) (n=176)
Libre de recidiva (R)
56 (3
(3--425) (n=93)
>2855 (28
(28--2855) (n=192)
Libre de metástasis (M) 99 (11(11-563) (n=122) >2855 (81(81-2855) (n=261)
0.00001
0.000001
0.00001
Prolongación significativa de la supervivencia
Supervivencia (dí
(días)
Controles Cirugí
Cirugía (n=135)
Tratamiento combinado (n=284)
Mediana toda causa
83 (10(10-568)
88 (10(10-568)
509 (17(17-2848)
2848) p<0,00001
>2848 (36(36-2848)
2848) p<0,000004
Mediana melanoma
Mejoró o restauró
la calidad de vida previa a la enfermedad
de todos los pacientes tratados
•
•
•
•
•
apetito
ánimo
movilidad
alerta
interacción social
•
•
•
•
•
fuerza y energía
bienestar general
estado clínico
perfil hematológico
química sanguínea.
• No produjo toxicidad local o sistémica, alergia,
disfunción orgánica.
LME Finocchiaro, MD Riveros and GC Glikin
Cytokine-enhanced vaccine
and suicide gene therapy as
surgery adjuvant treatments of
metastatic melanoma
in a gray stallion
Vet. Rec. 164, 278278-279 (2009).
Padrillo tordillo pura sangre de 13 añ
años
Región perianal y prepucio
Lesiones múltiples pre-quirúrgicas
Resultado post-quirúrgico / GS
A 1528 días
posttratamiento:
excelente
GS
calidad de vida
35 dí
días
y plena
postpost-GS
función
reproductiva.
Metastásis subcutáneas en cuello, lomo, hombros
Finocchiaro LME, Villaverde MS, Gil Cardeza ML, Riveros MD and Glikin GC
Cytokine--enhanced vaccine and interferon
interferon--β plus suicide
Cytokine
gene as combined therapy for spontaneous canine sarcomas
Res Vet Sci. (2011) 91: 230–
230–234.
Finocchiaro LME, Spector A, Rossi UA, Gil-Cardeza ML, Suarez JL, Riveros
MD, Villaverde MS & Glikin GC
The Potential of Suicide plus Immune Gene Therapy for
Treating Osteosarcoma:
the Experience on Canine Veterinary Patients
In Sarcoma: Symptoms, Causes and Treatments. E.J. Butler (Ed.). Nova
Science Publishers, Inc. (New York, U.S.A.), (2012). ISBN: 978-1-62100-362-5.
In press.
Remisión completa de un osteosarcoma en hombro
Dogo de
Burdeos
3 añ
años
Día 0: diagnóstico
d
Gen suicida + IFN
peritumoral
Día 94: Rta.
Rta. Parcial
vac
Lesión proliferativa
en metáfisis de la
cabeza del húmero
Día 835: Libre de enfermedad
Día 325: sin Metá
Metástasis
Día 282: Rta.
Rta.
Completa
Conclusión:
El tratamiento logró:
prevenir o retrasar
la recurrencia y
las metástasis,
prolongar la
supervivencia
mejorar la
calidad de vida.
Conclusión:
Seguridad y Efectividad
validada por:
alto número de
pacientes: 284
>9 años de
seguimiento
un protocolo clínico
veterinario.
ideal
bench (
bed
)
real
Modelos experimentales murinos
x días
x días
x días
x días
Pacientes humanos o caninos
III
IV
II
III
n meses
z meses
y meses
x meses
Modelos experimentales murinos
x días
x días
x días
x días
Pacientes humanos o caninos
III
IV
II
III
n meses
z meses
y meses
x meses
En conclusión…
Presentan respuestas anatómicas y fisiológicas similares
Factibilidad, seguridad,
toxicidad, efectividad,
esquemas de
tratamiento.
Un protocolo clínico para
definir la seguridad y
efectividad de un tratamiento
en:
Pacientes caninos
Pacientes humanos
Requiere entre 1 y 3 años
Requiere entre 5 y 15 años
Acero
Aika
Ajax
Alé
Andy
Angie
Archi
Archi2
Arena
Argos
Arturo
Arturo2
Astrboy
Atila
Atila2
Aura
Axel
Ayelén
Ayén
Aylén
Azul
Babas
Baltazar
Bambi
Bat
Bayffi
Beast
Berni
Betún
Bijou
Bijou2
Black
Blacky
Blaky2
Boby
Bolita
Bonito
Bonzo
Brini
Briggitte
Bronco
Bruno
Brutus
Buda
Bujía
Camila
Candela
Carlota
Carola
Carola2
Caruso
Celeste
Cerovaz
Chapita
Charly
Charly2
Charly3
Chavero
Chess
Chiche
Chicho
Chichón
Chino
Chiqui
Chispitas
Chocolate
Choi
Chuleta
Cimbaro
Clayton
Cocucita
Coffee
Coli
Colita
Cooky
Coty
Cozzi
Creta
Cristobal
Cromo
Cubito
Cuca
Daisy1
Daisy2
Daisy3
Daisy3
Dalma
Daycry
Dayton
Denis
Diana
Dici
Dogui
Dragma
Dulce
Edinga
Enzo
Erica
Facundo
Fashion
Federica
Federico
Felipe
Felipe2
Felipe3
Felipe4
Fili
Fita
Flaca
Flopy
Flopy2
Fly
Foquer
Frida
Fungui
Futler
Galo
Gary
Goico
Greta
Guffy
Hada
Hasha
Heidy
Helix
Homero
Homero2
Homero3
Homero4
Hoock
Hueso
Iaika
Iana
Ika
India
Inti
Iron
Jack
Jackie
Jackie2
John
Juana
Julieta
Junior
Junior2
Kaila
Kevin
King
Kity
Klaine
Klaus
Lady
Lady2
Laica
Larry
Leo
Letango
Liza
Lobo
Lobo2
Lobo3
Lola
Lucy
Luli
Lulu
Luna
Luna2
Luna3
Luna4
Luna5
Lupita
Lupo
Luz
Maggie
Maggie2
Maggie G
Maia
Maldonado
Malena
Malena2
Manchi
Manchita
Manchu
Manucho
Manuela
Mapu
Marcus
María
Matilda
Maverick
Maya
Melba
Melina
Mica
Miguel
Miguelito
Miki
Mili
Mona
Moncho
Mono
Mora
Mora2
Murmullo
Napoleón
Negra
Negro
Negro2
Neo
Neón
Nico
Noel
Odin
Olivia
Olivia2
Ona
Oso
Paco
Pamela
Pancha
Pancho
Pascual
Peky
Peky2
Pelusa
Pepe
Pichin
Pili
Pinky
Pipi
Pompi
Pompi2
Pritt
Pretty
Puchula
Pulga
Pupi
Quimei
Quartz
Rabito
Raiza
Ramona
Reina
Ringo
Rocco
Rocco G
Roky
Roky2
Roque
Rosario
Rosita
Sacco
Sam
Sancho
Sasha
Sasha2
Señor
Shara
Shasha
Sheik
Shira
Silvestre
Sofi
Sol
Tachuel
a
Terry
Tico
Tobías
Toby
Toby3
Toby4
Tomás
Tomy
Tomy2
Tomy3
Trak
Trini
Tronqui
Ushi
Ulises
Vazquez
Valentín
Waki
Wendy
Willy
Willy2
Yagger
Yayo
Yenny
Yeny G
Zoilo
Zoro