CRONOGRAMA TTPP QBIIA 2016 DIA 1 (Ma 3 MAYO) -Cultivo Celular. Solamente se discutirá el manejo de células que se realizará en el día -Teórica: Clase de Bioseguridad y cultivo de células (*) -Tripsinización, conteo y pasaje de células DÍA 2 (Jue 5 MAYO) -Viabilidad celular I. Incubación de U2OS con H20 desionizada como agente estresor - Fijación, incubación con Cristal Violeta y lavados. -Teórica: Introducción global al TP (*) DÍA 3 (Ma 10 MAYO) -Viabilidad celular II. Lectura de Absorbancia de las células teñidas con Cristal Violeta - Teórica: Viabilidad celular, problemas: cultivo celular (*) Día 4 (Ju 12 MAYO) - Preparación de células para FISH I: fijación, lavado y congelado - Formación de gránulos de estrés en respuesta a arsenito - Efecto de agentes farmacológicos DÍA 5 (Ma 17 MAYO) - FISH II: bloqueo y agregado de sonda - Teórica: Técnica de FISH, inmunofluorescencia y microscopía de fluorescencia (*) DÍA 6 (Ju 19 MAYO) - FISH III: lavados, tinción con DAPI y montaje DÍA 7 (Ma 24 MAYO) - Microscopía de epifluorescencia I. Medio Turno - Resolución de problemas DÍA 8 (Ju 26 MAYO) - Microscopía de epifluorescencia II. Medio turno - Resolución de problemas DÍA 9 (Ma 31 MAYO) - Microscopía confocal. - Teórica: Introducción de ácidos nucleicos exógenos en células (Transfección, transducción)(*) - Teórica: microscopía (*) DÍA 10 (Ju 2 JUNIO) (aula de computadoras) - Discusión de criterios para cuantificar la respuesta. - Conteo de células positivas, análisis de imágenes y construcción de gráficos - Análisis del efecto de cicloheximida y puromicina Día 11 (Ma 7 JUNIO) - Discusión exhaustiva de los resultados del TP. -Teórica: Fraccionamiento subcelular. Centrifugación en gradientes (*) Día 12 (Ju 9 JUNIO) - Problemas de Gradientes - Instrucciones para la confección del informe con formato de artículo científico (*) DÍA 13 (Ma 14 JUNIO) - Presentación oral del esquema del paper-informe por los grupos (*) DÍA 14 (Ju 16 JUNIO) LIBRE MARTES 21 JUNIO- Parcial de laboratorio. (Enfocado en los aspectos prácticos y teóricos de las técnicas empleadas y en la resolución de problemas). - Fiestita!!! VIERNES 24 JUNIO- SEGUNDO PARCIAL TEORICO DÍA 15 (Mi 29 JUNIO ) Fecha límite de entrega del informe escrito, que deberán enviar hasta las 24hs. DÍA 16 (Ju 30 JUNIO) RECUPERATORIO PARCIAL DE LABORATORIO (*) Se necesita computadora y cañón