desinvest - Policía Nacional

I.- INTRODUCCIÓN
El laboratorio de Criminalística surge en los años ochenta de una necesidad por
Esclarecer los delitos, que en esa naciente sociedad nicaragüense estaban
empezando a tomar auge. Entre las especialidades con que cuenta el laboratorio, y
con
las cuales
presta servicio al poder judicial, se encuentra el laboratorio de
biología que tiene como objeto principal el análisis de los fluidos orgánicos (sangre,
semen, saliva, orina, sudor), así como fibras naturales o sintéticas que son remitidas
de la escena del delito.
Los análisis que se realizan en el laboratorio tienen tres etapas, la primera se
realiza por la presunción de saber si la sustancia es la que se cree investigar, la
segunda etapa se realiza para confirmar que realmente
es la sustancia que se
desea investigar y la tercera etapa, dependiendo del tipo de sustancia se le realizan
los respectivos exámenes.
Si el fluido es sangre se determina primero su presencia, de ser sangre se
prosigue a determinar la especie, de ser sangre humana se identifica el grupo
sanguíneo al que pertenece.
En los análisis que se realizan en el laboratorio de biología, para la determinación de
la especie, esta el método de CHISTOVICH UHLENHUTH, los sueros que se utilizan
se obtienen de la inmunización de conejos con suero de un determinado animal, los
conejos forman anticuerpos precipitantes contra las albúminas de ese determinado
animal, y así se obtienen sueros anti-humanos, anti-bovino, anti-equino etc. Teniendo
un conjunto de sueros precipitantes capaces de reaccionar con la sangre de
diferentes animales se puede probar con este, la sangre desconocida y determinar
su especie.
En los análisis de sangre humana seca, se utilizan los métodos de absorción
elusión y el método de Lattes, mediante las cuales se determinan los anticuerpos
existentes en las manchas utilizando antígenos conocidos.
El método de Lattes determina anticuerpos A y B presentes en las manchas
mediante antígenos conocidos A y B, los anticuerpos presentes reaccionan con sus
correspondientes antígenos lo cual se hace visible por medio de aglutinación.
La presencia de sangre en un hecho delictivo, es generalmente una constante y
muy importante en el proceso de investigación de delitos, las evidencias remitidas al
laboratorio, en las cuales se presume la presencia de sangre, esta no siempre
puede ser de humanos, por tal razón es necesario realizar la reacción de especie o
tener un
Patrón de reacción de la sangre humana con sangre seca animal. En estos casos se
pueden presentar problema en la valoración de los resultados.
Se sabe
la forma como reacciona la sangre humana cuando se utiliza el
método de Lattes, pero con relación a la sangre animal los datos son escasos y
pocos profundizados. Cuando hay presencia de sangre animal o una mezcla de
sangre animal con sangre humana, y no se toma en cuenta esta posibilidad, esto
podría dar como resultado una conclusión pericial incompleta o apresurada, esto
conlleva a recaer en injusticias para las personas imputadas.
Se sabe que las manchas que pertenecen a sangre humana, pueden ser
investigadas meses después de ocurrido el hecho, pero no sabemos en cuanto
tiempo una mancha de sangre animal puede ser viable para su examen o análisis.
Por ser la sangre de tanta importancia en las investigaciones criminalísticas, se
escogió este tema para poder profundizar en los conocimientos sobre la sangre y
tratar de aportar un nuevo conocimiento, estableciendo patrones de comportamiento
de reacción entre la sangre humana y la sangre seca de algunos animales.
II.- OBJETIVOS
Objetivos General
Conocer la reacción de la sangre líquida humana con sangre seca
de
diferentes especies animales, estableciendo patrones que permitan una mejor
calidad en las investigaciones de delitos.
Objetivos Específicos
1.
Describir la reacción de antígenos del sistema ABO, humanos con
anticuerpos en sangre seca de animales, tales como ganado vacuno, equino,
así como de especies caninas y aviar.
2.
Determinar los factores que interfieren en la reacción de antígenos
humanos con anticuerpos de las especies de animales ensayadas.
3.
Establecer un patrón de comportamiento de la reacción de antígenos
humanos con anticuerpos de animales, a través de ensayos repetidos
III.- MARCO TEORICO
Tipificar una mancha de sangre es encontrar su tipo o grupo dentro de la
mayor cantidad posible de sistemas, para ello se utilizan las técnicas inmunológicas y
bioquímicas.
Técnicas bioquímicas: Se basan en la investigación de proteínas polimórficas
e isoenzimas, como por ejemplo, la determinación de la fosfoglucomutasa (PGM) y la
fosfatasa ácida de eritrocitos.
Técnicas inmunológicas: Se aplican especialmente al estudio de los sistemas
ABO, MN y RH.
Estas técnicas de investigación se basan en la existencia sobre la superficie
de
los glóbulos rojos de la sangres de ciertas estructuras químicas llamadas
antígenos, los cuales confieren a la sangre el tipo dentro de cada sistema sanguíneo.
En sangre fresca la presencia o ausencia de un antígeno se determina por la
aglutinación o no de los glóbulos rojos, puestos en contactos con un antisuero
específicos, por ejemplo, antisuero anti-A, antisuero anti-B, antisuero anti-H.
En manchas de sangre seca los glóbulos rojos están generalmente destruidos y
por lo tanto las técnicas de aglutinaciones directas no son aplicables, sin embargos,
los anticuerpo no se desnaturalizan inmediatamente y retiene la capacidad de
combinarse con antígenos específicos, los métodos de detección de estos
anticuerpos se basan en la unión antígeno-anticuerpo, específicos.
Factores tales, como el tiempo transcurrido, la luz del sol directa, temperaturas
extremas y otros factores que pueden afectar a la sangre producen alteraciones que
disminuyen la posibilidad de tipificar la sangre líquida, por lo cual, es conveniente el
examen en sangre seca. (1)
En algunos casos como hallazgos de cadáveres, accidentes de tránsito,
asesinatos, violaciones, abigeatos, etc, en los cuales no se puede obtener sangre
líquida,se levantan las manchas encontradas en la escena del crimen las cuales son
remitidas al laboratorio para su investigación, y el procedimiento que se le dan a las
manchas de aspecto hemáticos son presuntivas para saber si la mancha es o no
sangre. La confirmativa comprueba que estamos en presencia de sangre, luego se
procede a determinar la especie, al determinar que es humana se procede a la
tipificación o grupo sanguíneo a la que pertenece.
1 (Gendarmeria Naciona, Policía de Argentinal)
3.1- Generalidades de la sangre y su importancia en el
Esclarecimiento de delitos:
La
clasificación de la sangre se inició en 1900 cuando Paúl Uhlenhuth
perfeccionó el procedimiento del suero para distinguir la sangre humana de la sangre
animal. Un año después Karl Landsteiner descubrió grupos sanguíneos con base en
la capacidad diferenciadora del suero para conglutinar los glóbulos rojos, aunque no
se trataba de una identificación positiva este análisis servia a menudo para descartar
a los sospechosos que resultaban inocentes.
El grupo sanguíneo o fenotipo es el resultado de la unión de dos genes, uno
de origen materno y otro de origen paterno.
La sangre es un tejido constituido por células, líquido y sustancias, es el
vehículo del oxígeno y de todos los elementos nutritivos necesarios para el trabajo
fisiológico del cuerpo humano.
La sangre arterial es de color rojo claro, la venosa es de color obscuro y son
ligeramente alcalinas. El medio sólido de la sangre está formado por glóbulos rojos
(eritrocitos), glóbulos blancos (leucocitos) y plaquetas (trombocitos).
El transporte del oxígeno se realiza por medio de los glóbulos rojos los cuales
contienen hemoglobina,
la
que al combinarse
con
el oxígeno
forma
la
oxihemoglobina y en esta forma es conducida a través de todo el organismo.
El medio líquido (suero) conduce las sustancias nutritivas a los diferentes
tejidos como son proteínas, lípidos, carbohidratos que son absorbidos a nivel
intestinal. (2)
Teniendo una semblanza sobre la sangre humana, en la investigación
criminalística se debe de tener en cuenta lo siguiente: En la sección de biología
criminalística por medio de la serología se estudian muestra Problemas que
proceden de la escena del delito, de los instrumentos del delito, de la víctima o del
victimario, por otra parte se cuenta con muestras testigos o de comparación se
deciden los resultados en una investigación.
Es muy frecuente que las ropas, objetos e instrumentos asociados al suceso
se contaminen en las maniobras que se realizan para lesionar, consumar muertes
violentas, etc, para ello, el examen de los indicios originados por la sangre pueden
ser útiles para determinar lo siguiente:

Identificar instrumentos en el hecho.

Localizar lugares de hecho, donde se cometieron delitos

Se discriminan sospechosos.
__________________________________________________________________
2 (OPCIP pag 16)
Con la realización de exámenes y análisis biológicos
se puede determinar si la
sangre problema es humana o animal, así mismo, se determinan los grupos
sanguíneos y dependiendo de la época y contaminación se puede determinar su RH.
Los exámenes y análisis de sangre están sujetos a ciertas limitaciones:

No es posible identificar sangre humana como procedente de una persona en
particular, salvo que sea una estructura muy específica.

Con el análisis de sangre no se puede determinar el sexo de una persona ni la
raza a la que pertenece.

No se precisa la época en que se produjo la mancha o huella en cuestión.
3.2.- Concepto Biológico de la Sangre
La sangre del ser humano y de todos los animales vertebrados en general esta
compuesta de plasma que es su parte líquida y de elementos figurados (células) que
integran la parte sólida. Es por tanto, el único tejido líquido del organismo. El plasma
esta compuesto por agua, grasa, hidratos de carbono, albúminas, las células son los
cuerpos rojos (eritrocitos), los cuerpos blancos (leucocitos) y las plaquetas o
trombocitos. Los eritrocitos contienen pigmentos de hemoglobina que dan el color
rojo característicos, puede ser venosa o arterial desempeñando muchas funciones en
el organismo. (3)
3 Folleto de Post-grado en Biología Criminalistica. (2002-2003. Policía Nacional de Nicaragua)
3.3.- Concepto Criminalistico de la sangre
La sangre es un elemento objetivo de un delito realizado indicando algunas
veces el lugar del delito, otras la participación de una u otra persona, la actividad del
delincuente, entre otras.
Es frecuente en la investigación de los delitos de homicidio, violaciones,
accidentes automovilísticos, robos, etc, convirtiéndose después del peritaje en la
posibilidad de prueba, que cada día pueden objetivizar más sobre uno u otro hecho.
3.4.-Grupo Sanguíneo ABO
A principios del siglo XX se llevó a cabo un descubrimiento crucial en medicina
transfucional Karl Landesteiner, demostró que cuando se combinaban dos muestras
de sangre, en algunos casos se mezclaban sin signos apreciables de reacción pero
en otras se producía aglutinación de glóbulos rojos.
Esta aglutinación se atribuyó a la presencia de antígenos en los glóbulos rojos y
anticuerpos en el suero., mas tarde se comprobó que existen dos antígenos
eritrocitarios A y B, y en lo que respecta al grupo ABO, los glóbulos rojos pueden
exhibir, uno de estos antígenos en la superficie, los dos, o ninguno.
Los eritrocitos que poseen antígenos A, corresponden al grupo A, los que
contienen antígeno B, corresponden al grupo B, los que cuentan con los dos
antígenos al grupo AB, y los que no revelan ninguno al grupo O.
En el suero se encuentran dos tipos de anticuerpos anti-A, que reacciona con los
glóbulos rojos del grupo A, y anti-B, que aglutinan los del grupo B. (4)
Los anticuerpos séricos anti-A y anti-B,
eritrocitarios:
-
varían de acuerdo a los antígenos
Si los glóbulos rojos tienen antígenos A (grupo A) el suero tiene
anticuerpos anti-B,
-
Si los glóbulos rojos tienen antígenos B (grupo B) el suero tiene
anticuerpos anti-A
-
Si los glóbulos rojos tienen antígenos A y B (grupo AB), el suero no
tiene anticuerpos anti-A, ni anti-B
-
Si los glóbulos rojos no tiene antígenos A ni B, (O), el suero tiene
anticuerpos anti-A y anti-B.
De ahí su importancia para las transfusiones, solo se pueden efectuar dentro de los
grupos compatibles, o sea a los pacientes A solo A; a los pacientes B solo B; etc. (5)
___________________________________________________________________
4 (Folleto Post-Grado (2002-2003) Sangre y Componentes Seguros)
5 (Reimann. W (1987), Vademécum de Medicina Legal)
3.5.- Composición de la sangre humana
3.5.1.- Sangre total:
Es un complejo constituido por células suspendidas en un líquido amarillento
denominado plasma. Los elementos formes consisten en una mezcla de glóbulos
rojos, glóbulos blancos y plaquetas. El plasma contiene múltiples proteínas,
sustancias químicas factores de coagulación y numerosos compuestos metabólicos.
3.5.2.- Glóbulos Rojos ó Eritrocitos
Tiene aspectos de discos bicóncavos, son muy pequeños tienen un diámetros de
7.2 micrones, tienen un grosor de 2.4 micras en la periferia y 1 micra en su parte
central. Están constituidos en un 71% por lípidos y unos 3% por azúcares, sales y
proteínas enzimáticos conteniendo en su interior 400 millones de moléculas de
hemoglobina.
Existen alrededor de cinco millones de eritrocitos por milímetros cúbicos de
sangre. Se producen en la medula ósea y cuando maduran ingresan al torrente
sanguíneo en el que sobreviven 120 días.
3.5.3.- Hemoglobina:
Es una molécula compleja, grande formada por fracciones que contienen hierro
(Hemo), que se fija a cadenas polipeptidicas. Es un líquido de color rojizo que se
encuentran en los eritrocitos, puede combinarse en forma reversible con el oxígeno y
el dióxido de carbono.
Los niveles de hemoglobinas se expresan en gramos por decilitros de sangre.
En los varones la concentración de hemoglobinas es de 13.5 a 17 gr/d, mientras que
en las mujeres es de 12 a 16 gr/d.
3.5.4.- Glóbulos Blancos ó Leucocitos
Constituyen una familia de células nucleadas integrado por granulocitos,
linfocitos, y basófilos, existen tres tipos de granulocitos que son: neutrófilos,
eocinófilos y basófilos, el número de leucocitos circulante es inferior al de eritrocitos,
en el adulto sano la cifra es de 4000 a 11000 leucocitos por mm ³ de sangre en la
siguiente distribución:
Neutrofilos 1500 a 7500 por mm ³ de sangre, Eusinófilos 0 a 400 por mm ³ de
sangre, Basófilos de 0 a 200 mm ³ de sangre, Monolitos de 0 a 800 mm ³ de sangre.
Linfocitos de 100 a 4500 mm ³ de sangre.
A diferencia de los globulos rojos los leucocitos son celulas nucleadas y su sobrevida
es mucho más breve. Los granulocitos perduran de 3 a 5 días. No se ha definido con
certeza la vida de los linfocitos.
3.5.5.- Plaquetas ó Trombocitos
Son mas pequeñas que los glóbulos rojos y glóbulos blancos, en el adulto normal
varían entre ciento cincuenta mil a quinientos mil por milímetro cúbico de sangre, son
fundamentales en la coagulación.
A nivel de lesiones y heridas liveran una sustancia y se combinan con otros
factores de coaugulación del plasma para producir fibrina. Las fibrinas por su parte
opera como una red que atrapa a los eritrocitos para formar un cuagulo y evitar la
hemorragia adicional. La sobrevida de las plaquetas conservadas de manera
correcta puede llegara a cinco días y de nueve a once días en la circulación. (6)
6 (OP. CIT. Pag 11)
3.6.- Composición de la sangre animal
3.6.1.- Sangre total
El plasma es entre amarillo e incoloro, según la cantidad, la especie del animal
y su dieta. En algunas especies, como gatos, perros, ovejas y cabras, es incoloro o,
ligeramente amarrillo en grandes cantidades. En las vacas y en especial en los
caballos, es generalmente más obscuro. El color resulta principalmente de
concentraciones variables de un pigmento llamado bilirrubina. El suero es similar al
plasma, excepto que el fibrinogeno y otros factores de coagulación estan ausente.
El plasma contiene de 91 a 92 % de agua y de 8 a 9 % de sólidos en el animal
adulto. Más del 7% del plasma consiste de proteínas como: Albúminas, Globulinas y
Fibrinógenos.
3.6.2.- Glóbulos Rojos ó Eritrocitos
Los eritrocitos en la sangre circulante en los mamíferos son células sin núcleo,
no móviles, tienen un diámetro de 7 a 8.4 micras. Se observan generalmente como
discos circulares bicóncavos con una mancha palida central. La biconcavidad
aumenta el area superficial, lo que facilita el intercambio de oxígeno y dióxido de
carbono que transportan los globulos rojos. Para facilitar el transporte de dióxido de
carbono, los eritrocitos contienen la enzima anhidrasa carbonica, la cual cataliza la
reacción reversible de dióxido de carbono a iones bicarbonato, lo cual se elimina
facilmente el dióxido de carbono del organismo por medio de los pulmones.
Los eritrocitos varían en diámetro de acuerdo con la especie y el estado
nutricional del animal, pero son capaces de cambiar de forma al atravezar los lechos
capilares. El eritrocito del perro es marcadamente biconcavo, los eritrocitos del gato y
el caballo son ligeramente bicóncavos.
El período de vida de un eritrocito varia de acuerdo a la especie, los eritrocitos
del perro tienen un promedio de vida de 100-130 días , los caballos de 140-150 días ,
los eritrocitos de los caballos tienen un promedio de vida de 125-150 días y los de
los pollos tienen promedio de vida de 115- 130 días.
3.6.3.- Glóbulos Blancos ó Leucocitos
Leucocitos ó glóbulos blancos son mucho menos numerosos que los
eritrocitos en la sangre circulante. Los eritrocitos realizan sus funciones en el torrente
circulatorio, mientras que los leucocitos realizan las suyas predominantemente en
los tejidos. Hay aproximadamente 1300 eritrocitos por cada leucocito en el torrente
circulatorio de las cabras; 1000 por 1 en los caballos; 800 por 1 en las vacas; 600 por
1 en perros y gatos; 400 por 1 en los cerdos y 100 por 1 en los pollos.
Los leucocitos que se encuentran normalmente en la sangre se clasifican en:
granulocitos y agranulocitos. Los granulocitos se caracterizan por tener granulos
especificos en su citoplasma. Según su reacción a la coloración, son neutrofilos,
eosinofilos o basofilos. Los agranulocitos son los linfocitos y monolitos, La función de
los leucocitos es de proteger a todo el organismo de los microorganismos.(7)
3.6.4.-Plaquetas ó Trombocitos
Plaquetas ó trombocitos, son cuerpos pequeños, incoloros redondos o en
forma de bastón que se encuentran en la circulación sanguínea en los mamíferos,
miden
3um de diámetro. Las plaquetas son extremadamente abundantes en la
circulación sanguínea y su función principal es la coagulación de las heridas.
7 (DukesHung(1999). Fisiología de animales domésticos)
IV.- DEFINICIÒN DE TERMINOS
Albúminas: Grupos de proteínas que tienen azufre, son solubles en agua y en
soluciones salinas, se coagulan por la acción del calor, se encuentran en
el huevo, leche y en el suero sanguíneo.
Antisuero: Contiene anticuerpos contrarios a los antìgenos asociados con la
enfermedad.
Anticuerpo: Molécula de proteína producida en la sangre por los linfocitos, como
respuestas a la presencia de sustancias extrañas.
Antígeno: Sustancia que provoca la producción de anticuerpos por parte del sistema
inmunológico del cuerpo.
Aglutinación: Agrupación de antìgenos, como glóbulos rojos de la sangre o
bacterias, para formar masas visibles de mayor tamaño, bajo la
influencia de los anticuerpos.
Bicóncavo: Que presenta dos caras cóncavas opuestas.
Citoplasmas: Parte fundamental viva de la célula que contiene las vacuolas, el
condrioma y otras inclusiones.
Hemólisis: Destrucción de glóbulos rojos.
Tipificar: Reconocer la sangre en determinado grupo sanguíneo.
Rh: grupo de antìgenos de la superficie de los glóbulos rojos característico del
……sistema de grupos sanguíneos Rhesus. La mayoría de las personas poseen el
……factor Rh, principalmente el Rh positivo, pero aquellas que carecen de este
……factor, Rh negativo producen anticuerpos si entran en contacto con el. El
……nombre procede del Mono Rhesus, animal en el que se descubrió por primera
……vez la existencia de estos factores de la sangre.
V.- PREGUNTAS DIRECTRICES
1- ¿Qué importancia tiene la identificación del tipo de sangre en el
esclarecimiento del delito?
2- ¿Qué diferencia existe entre la sangre humana y la sangre animal desde el
punto de vista químico e histológico?
3- ¿Cómo reacciona la sangre humana con la sangre animal cuando se aplica la
técnica de Lattes?
4- ¿Qué patrón de comportamiento se pueden establecer entre las reacciones de
sangre humana con la sangre de diferentes animales?
VI.- OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES
Variable
Dimensión
IdentificaciónTipo sanguineo
Sangre lìquida
Indicador
Escala
A
B
AB
Aglutina (+)
O
No Aglutina (-)
Animal
Orgànico
mm cùbico /sangre
Inorgànico
Glòbulos rojos
Glòbulos blancosmm cùbico /sangre
Trombocitos
Directo
4+,3+, 2+,1+, Inverso
4+, 3+, 2+, 1+, -
Sangre seca
Lattes
ComposiciónQuímica
Histològicas
Tecnicas
A-E
Aglutina (+)
No Aglutina (-)
4+,3+,2+,1+, -
VII- DISEÑO METODOLOGICO
7.1.- Tipo de estudio
El estudio se realizó en el laboratorio de criminalística, específicamente en el
laboratorio de biología, sobre sangre seca animal y sangre líquida humana. El
estudio es descriptivo de corte transversal y pre-experimental, ya que no hay un
control de la variable independiente, tiene como finalidad conocer el comportamiento
del sistema ABO, en sangre humana en presencia de sangre seca de diferentes
especies de animales, ejecutándose en el mes de marzo del 2003.
7.2.- Población y muestra del estudio
Por la modalidad de nuestro estudio la población es igual a la muestra ya que se
trabajara con 4 tipos de sangre humana y sangre de 4 especie animal, donde se
procedió a experimentar los grupos sanguíneos (ABO) con cada tipo de sangre
animal.
1- Sangre humana (sistema ABO)
Grupo sanguíneo A.
Grupo sanguíneo B.
Grupo sanguíneo AB.
Grupo sanguíneo O.
2- Sangre animal.
Sangre de ganado bovino.
Sangre de ganado equino.
Sangre de perro.
Sangre de aves.
7.3.- Métodos empíricos
7.3.1 Método de Lattes:
Momento 1: Recolección de Sangre
Se recolectaron las muestras de sangre de ganado bovino (vaca), equino
(caballo), así como sangre de las especies caninas(perro), y aviar(pollo), la sangre se
recolectó de forma líquida en cantidades de 10ml por cada animal ensayado, la fecha
de recolección fue el 3/03/03 a las 9:45 de la mañana, la sangre fue recolectada de la
siguiente manera:

Sangre de ganado bovino, recolectada en la finca Veracruz (San Pedro de
Lobago Chontales).

Sangre de ganado equino, recolectada en la finca Veracruz (San Pedro de
Lobago, Chontales).


Sangre de especie canina, recolectada en el Laboratorio de Criminalística
Sangre de ave, recolectada en la granja Avícola Gracias a Dios, Los Brasiles,
Managua
Una vez recolectada la muestra se procedió a secar la sangre en una gasa estéril
a temperatura ambiente, para posteriormente ser utilizada en el montaje del método
de Lattes.
Momento 2: Montaje de la técnica de Lattes
Una vez preparado todos los materiales y equipos necesarios para el análisis se
procedió ha realizar los montajes el día 12/03/03 a las 10.00 a.m, para realizar las
pruebas de los estudios pertinentes.
A) Primera Prueba:
Se prepararon las suspensiones de eritrocitos al 2% de sangre humana (A, B,
AB, O) y se montaron controles de estas suspensiones para verificar su viabilidad.
Se montaron cuatro placas rotuladas con A, B, AB y O y las especies a la que
pertenecen las manchas. Se colocaron las manchas en cada placa y luego se les
agregaron dos gotas de las suspensiones de eritrocitos respectivamente, se pusieron
las placas ( porta objetos) en cámara húmeda ( consisten en poner dentro de un
plato pétri un papel filtro y humedecerlo con soluciones salinas al 0.9% se colocan
dos trozos de hisopos para evitar el contacto de las pacas, con el medio liquido),
luego se dejaron durante 15 minutos a temperatura ambiente, pasado este tiempo se
procedió a observar al microscopio ( con el objetivo 10x) y se registraron los
resultados.
B) Segunda prueba:
En esta segunda prueba del montaje de la técnica, se dejaron las cámaras
húmedas en incubación a ocho grados centígrados por 24 horas, pasado este tiempo
se observó nuevamente en el microscopio y se anotaron los resultados.
Este proceso se realizó durante siete días, preparando las suspensiones de
eritrocitos A, B, AB y O al 2% cada dos días.
7.3.2 Método de Observación:
Permitió verificar de forma directa las reacciones que se dieron entre los
diferentes tipos de sangres liquida humana con sangre seca de las especies
animales, permitiendo establecer parámetros de comportamientos de la sangre de
las especies ensayadas.
7.4- Materiales
Suspensión de sangre humana al 2 %, 10 ml de cada grupo
Sangre de ganado, bovino, equino, así como de especies caninas y aviar, 10 ml
puesto a secar en gasa.
Portaobjetos........................................................ 3′ x 1′
Cubreobjetos.......................................................22 x 22 mm
Pipetas...............................................................50 µl
Lápiz Cristalografos
Platos pétri………………………………………... 90 x 24 mm
Papel filtro..........................................................110mm x 100 de circunferencia
Hisopos……………………………………………. mango de madera doble
Agua destilada
Tubos de ensayo …………………………………12 x 75 mm
Solución salina al 0.9 %
Pinzas de acero inoxidable
Tijeras de acero inoxidable
7.5.-Equipos
Microscopio Leica DMLS, Binocular de 4 objetivos (4x, 10x, 40x y 100x). En nuestro
estudio solo utilizaremos el objetivo 10x.
Centrifuga Clay Adams. De 3500 rpm, tiempo máximo de 5 minutos. Rotor con
capacidad de 12 tubos de ensayos de 12 x 75 mm.
Refrigerador Sanyo. Temperatura de 1 a 5 grados centígrados.
VIII.- ANALISIS DE RESULTADOS
A continuación se presenta el análisis, obtenido al aplicar la técnica de Lattes
en sangre líquida humana con sangre seca de algunas especies animales.
8.1.- REACCION DE SANGRE LIQUIDA HUMANA CON SANGRE
SECA DE VACA.
En relación a la reacción de la suspensión de eritrocitos humanos “A”, con
sangre seca de vaca, se observó que no hubo reacción antígeno-anticuerpo,
obteniendo un cien por ciento de reacciones negativas, tanto en la observación a los
quince minutos como a la realizada a las veinticuatro horas.
En los demás grupos sanguíneos (B, AB y O) se observó aglutinaciones, pero
con diferencias en relación a los 15 minutos y a las 24 horas.
A los 15 minutos el tipo sanguíneo “B”, presento reacción positiva del 28.57 % y
una reacción del 85.7 %, el grupo sanguíneo “AB” presento una reacción positiva de
42.85 % y una reacción negativa de 57.1 %, el grupo sanguíneo “O”, presento una
reacción positiva del 28.57 % y una reacción negativa del 71.4 %.
A las 24 horas el grupo “B y AB”, presentaron reacciones positivas 14.2 % y
reacciones negativas del 85.7 %, el grupo “O”, presento reacciones positivas del
28.57 % y reacciones negativas del 71.4 %.
De forma general existen diferencias de reacciones, a excepción del grupo “A”
que fue estable, por lo que no se puede establecer un patrón de comportamiento
entre las reacciones. (Ver tabla No. 1 y gráfica 1 y 2).
TABLA No. 1
PORCENTAJES DE REACCIONES POSITIVAS Y NEGATIVAS
Especie
Animal
Sangre
Humana
Reacción a los 15 minutos
+
Vaca
A
B
AB
O
Reacción a las 24 hrs
-
+
-
F
%
F
%
F
%
F
%
0
2
3
2
0
28.57
42.85
28.57
7
5
4
5
100
71.4
57.1
71.4
0
1
1
2
0
14.2
14.2
28.57
7
6
6
5
100
85.7
85.7
71.4
F: frecuencia de reacción.
Gráfica No.1 Reacciones (+ y -, en intervalo de 15 minutos) de la sangre líquida
humana con sangre seca de vaca.
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Positivas
Negativas
A
B
AB
O
Gráfica No.2 Reacciones (+ y -, en intervalo de 24 hrs.) de la sangre líquida
humana con sangre seca de vaca.
100
80
60
Positivas
40
Negativas
20
0
A
B
AB
O
8.2.- REACCION DE SANGRE LIQUIDA HUMANA CON SANGRE
SECA DE PERRO.
A los 15 minutos la reacción de la sangre tipo “A” humana con sangre seca de
perro, se observo que una reacción positiva del 71.4 % y una reacción negativa del
28.57 %, el tipo de sangre “B”, presento una reacción positiva del 28.57 %, y una
reacción negativa del 71.4 %, el tipo sangre “AB”, presento una reacción positiva de
42.85 % y un reacción del 57.1 %, el tipo de sangre “O” presento una reacción
positiva de 14.2 % y una reacción negativa de 85.7 % .
A las 24 horas la reacción de la sangre tipo “ A ”, humana con sangre seca de
perro, se observo una reacción positiva del 57.1 % y una reacción negativa del
42.85 %, el tipo de sangre “B”, presento una reacción de 42.85 % y una reacción de
57.1 %, el tipo “AB” , presento una reacción positiva del 57.1 % y una reacción
negativa del 42.85 %, el tipo “O” , presento una reacción positiva de 28.57 %, y una
reacción negativa del 27.1 %.
En este caso las reacciones son completamente diferentes por lo cual no se
puede establecer un patrón de comportamiento. (ver tabla No.2, gráficas 3 y 4)
TABLA No. 2
PORCENTAJES DE REACCIONES POSITIVAS Y NEGATIVAS
Especie
Animal
Sangre
Humana
Reacción a los 15 minutos
+
Perro
A
B
AB
O
Reacción a las 24 hrs
-
+
-
F
%
F
%
F
%
F
%
5
3
3
1
71.4
42.85
42.85
14.2
2
4
4
6
28.57
57.1
57.1
85.7
4
3
4
2
57.1
42.85
57.1
28.57
3
4
3
5
42.85
57.1
42.85
71.4
Gráfica No.3 Reacciones (+ y -, en intervalo de 15 minutos) de la sangre líquida
humana con sangre seca de Perro.
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Positivas
Negativas
A
B
AB
O
Gráfica No.4 Reacciones (+ y -, en intervalo de 24 hrs) de la sangre líquida
humana con sangre seca de Perro.
80
70
60
50
40
Positivas
30
Negativas
20
10
0
A
B
AB
O
8.3.- REACCION DE LA SANGRE LIQUIDA HUMANA CON SANGRE
SECA DE POLLO
La sangre de los tipos “ A, B y O”, reaccionaron de forma similar tanto a los 15
minutos como a las 24 horas, presentando una reacción positiva del 0 %, y una
reacción negativa del 100%, la sangre del tipo “AB”, presento una reacción positiva
de 14.2 % y una reacción negativa de 85.7 % tanto a los 15 minutos como a las 24
horas.
Los valores positivos y negativos de estas reacciones se mantienen constante
tanto a los 15 minutos como a las 24 horas siendo la única especie que puede dar un
patrón de comportamiento.
Se debe de tomar en cuenta que la sangre estudiada pertenece a pollo de engorde, a
los cuales se les administra gran cantidad de antibióticos los cuales disminuyen la
capacidad de los anticuerpos de reconocer sustancias extrañas en este caso los
antìgenos de la sangre humana.
TABLA No. 3
PORCENTAJES DE REACCIONES POSITIVAS Y NEGATIVAS
Especie
Animal
Sangre
Humana
Reacción a los 15 minutos
+
Pollo
A
B
AB
O
Reacción a las 24 hrs
-
F
%
F
0
0
1
0
0
0
14.2
0
7
7
6
7
+
-
%
F
%
F
%
100
100
85.7
100
0
0
1
0
0
0
14.2
0
7
7
6
7
100
100
85.7
100
Gráfica No.5 Reacciones (+ y -, en intervalo de 15 min) de la sangre líquida
humana con sangre seca de Pollo.
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Positivas
Negativas
A
B
AB
O
Gráfica No.6 Reacciones (+ y -, en
intervalo de 24 hrs) de la sangre líquida humana con sangre seca de Pollo.
100
80
60
Positivas
40
Negativas
20
0
A
B
AB
O
8.4.- REACCIÒN DE LA SANGRE LIQUIDA HUMANA CON SANGRE
SECA DE CABALLO.
A los 15 minutos la sangre del tipo “A” humana con la sangre de caballo
presentó una reacción positiva del 42.85 % y una reacción negativa de 51.1 %, la
sangre tipo “B, AB, y O”, presentaron reacciones positivas de 57.1 % y reacciones
negativas de 42. 85%.
A las 24 horas la sangre tipo “A”, se mantuvo constante que la reacción
observada a los 15 minutos, la sangre tipo “B”, presento una reacción positiva de
28.57 % y un reacción negativa de 71.4%, la sangre tipo “AB”, presento una reacción
positiva de 51.7%, y una reacción negativa de 42.85%, la sangre tipo “O”, presento
valores similares a la sangre tipo “B”.
Es importante destacar que las reacciones positivas “B, AB y O”, fueron constantes a
los 15 minutos presentando diferencias a las 24 horas.
El posible factor que interfiere en los resultados de estas reacciones, es el cambio de
suspensiones de eritrocitos humanos (antígenos), ya que se estaba trabajando con
la misma mancha de sangre animal pero con diferente sangre del tipo “ A, B ;AB y
O”.
TABLA No. 4
PORCENTAJES DE REACCIONES POSITIVAS Y NEGATIVAS
Especie
Animal
Sangre
Humana
Reacción a los 15 minutos
+
Caballo
A
B
AB
O
Reacción a las 24 hrs
-
+
-
F
%
F
%
F
%
F
%
3
4
4
4
42.85
57.1
57.1
57.1
4
3
3
3
57.1
42.85
42.85
42.85
3
2
4
2
42.85
28.57
57.1
28.57
4
5
3
5
57.1
71.4
42.85
71.4
Gráfica No.7 Reacciones (+ y -, en intervalo de 15 min) de la sangre líquida
humana con sangre seca de Caballo.
60
50
40
Positivas
30
Negativas
20
10
0
A
B
AB
O
Grafica No.8 reacciones (+ y -, en intervalo de 24 hrs.) de la sangre líquida
humana con sangre seca de Caballo.
80
70
60
50
40
Positivas
30
Negativas
20
10
0
A
B
AB
O
Reacción Negativa (No aglutinación) observada
En el método de Lattes, de sangre humana con
Sangre Animal. Microscopio Leica 40x
Reacción Positiva (Aglutinación) observada en
Método de Lattes, de sangre humana con sangre
Animal, Microscopio Leica 40 x
I X.- CONCLUSIONES
1. La
sangre
humana
y
la
sangre
animal,
presentan
diferencias
de
concentraciones en sus componentes, en el siguiente cuadro se resaltan
algunas de ellas.
Elementos
Plasma
Glóbulos rojos
Glóbulos blancos
Plaquetas
Sangre Humana
Líquido
amarillento
incoloro
Sangre Animal
e Es incoloro pero su
tonalidad varia según la
especie.
Diámetro de 7.2 micras, Diámetro de 7 a 8.4
grosor 2.4 micras en la micras, varia de forma y
periferia y una micra en el tamaño según su especie.
centro.
Periodo de vida varia
Periodo de vida 120 días según la especie
en circulación
Van de 4000 a 11000 Varían su cantidad según
leucocitos por mm cúbicos la especie.
de sangre.
Van
de
150.000
a Varían según la especie
500.000 mm cúbicos de
sangre.
2. La utilización del método de Lates para la determinación de la especie en las
reacciones de sangre líquida humana (antígeno), con sangre seca
(anticuerpo), de algunas especies animales tales como: sangre de vaca,
sangre de perro y sangre de caballo, no es viable. Ya que los resultados de
las reacciones presentan muchas variaciones por lo que no es posible
establecer patrones de comportamiento.
3. La sangre seca de pollo, con sangre líquida humana, presentó uniformidad en
las reacciones de todos los grupos sanguíneos. Este patrón de reacción puede
confundirse con los resultados que se obtienen al tipificar una mancha de
sangre humana del tipo sanguíneo “AB”.
X.- RECOMENDACIONES
De acuerdo a los resultados se hacen las siguientes recomendaciones:
1.- Tomar en cuenta los
resultados del comportamiento de sangre
líquida humana con sangre seca de de algunas especies animales, tales
como vaca, perro, caballo y pollo, para futuros estudios, realizando estos
ensayos con un margen mayor de tiempo.
2.- Realizar la prueba de CHISTOVICH HUCHLENHUT, en manchas que
se presume que son de sangre humana, o que se encuentren
en
prendas de vestir, ya que cabe la posibilidad de ser sangre animal o una
mezcla de sangre humana con sangre animal. Si se utiliza el método de
Lattes, para tipificar los grupos sanguíneos resultan las mismas
posibilidades de reacción positivas y negativas de esta investigación.
3.- Se puede trabajar una mancha de sangre animal, hasta los 20 días ya
que los anticuerpos presentes en esta, todavía son viables para su
estudio, si se realiza la prueba de CHISTOVICH HUCHLENHUT.
XI- Bibliografía
Folletos de post-grado en biología forense, Septiembre 23 – 2002 – 15
de…Marzo 2003
Manual Básico de criminalistica I, Republica de Nicaragua
Ministerio publico Biblioteca básica. Proyecto
institucional Checchi USAID 2002
de
fortalecimiento
Montiel Sosa Juventino (1990). Manual de Criminalística I. Editorial, ciencia y
Técnica.
Folleto de Post-Grado de Biología. (2002-2003) Sangre y Componentes Seguros
Reimann. W (1987) Vademecum de Medicina Legal Editorial Científico Técnica.
Policía de Argentina (Folleto). Gendarmería Nacional.
Dukes Hung. (1999). Fisiología de Animales Domésticos Editorial Uteha.
XII- ANEXOS
Ministerio de Gobernación
Policia Nacional
Laboratorio de Criminalística
Ficha de registro diario
Comportamiento de la sangre animal con la sangre humana
Día: 01
Sangre animal
seca
Fecha:12-03-03.
Sangre humana,
suspensión de
eritrocitos al 2%
A
Ganado
Bovino
B
AB
0
A
Ganado
equino
B
AB
0
A
Perro
B
AB
0
A
Pollo
B
AB
0
Reacción a los
15 minutos
Reacción a las 24
horas (incubación, 4
grados centígrados)
-
-
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
Observaciones
Ministerio de Gobernación
Policía Nacional
Laboratorio de Criminalística
Ficha de registro diario
Comportamiento de la sangre animal con la sangre humana
Día: 02
Sangre animal
seca
Ganado
Bovino
Fecha:13-03-03.
Sangre humana,
suspensión de
eritrocitos al 2%
A
B
AB
0
A
Ganado
equino
B
AB
0
A
Perro
B
AB
0
A
Pollo
B
AB
0
Reacción a los
15 minutos
Reacción a las 24
horas (incubación, 4
grados centígrados)
-
-
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
Observaciones
Ministerio de Gobernación
Policía Nacional
Laboratorio de Criminalística
Ficha de registro diario
Comportamiento de la sangre animal con la sangre humana
Día: 03
Sangre animal
seca
Ganado
Bovino
Fecha:18-03-03.
Sangre humana,
suspensión de
eritrocitos al 2%
A
B
AB
0
A
Ganado
equino
B
AB
0
A
Perro
B
AB
0
A
Pollo
B
AB
0
Reacción a los
15 minutos
Reacción a las 24
horas (incubación, 4
grados centígrados)
-
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
-
Observaciones
Ministerio de Gobernación
Policía Nacional
Laboratorio de Criminalística
Ficha de registro diario
Comportamiento de la sangre animal con la sangre humana
Día: 04
Sangre animal
seca
Ganado
Bovino
Fecha:19-03-03.
Sangre humana,
suspensión de
eritrocitos al 2%
A
B
AB
0
A
Ganado
equino
B
AB
0
A
Perro
B
AB
0
A
Pollo
B
AB
0
Reacción a los
15 minutos
Reacción a las 24
horas (incubación, 4
grados centígrados)
-
-
-
-
Observaciones
Ministerio de Gobernación
Policía Nacional
Laboratorio de Criminalística
Ficha de registro diario
Comportamiento de la sangre animal con la sangre humana
Día: 05
Sangre animal
seca
Ganado
Bovino
Fecha:20-03-03.
Sangre humana,
suspensión de
eritrocitos al 2%
A
B
AB
0
A
Ganado
equino
B
AB
0
A
Perro
B
AB
0
A
Pollo
B
AB
0
Reacción a los
15 minutos
Reacción a las 24
horas (incubación, 4
grados centígrados)
-
-
-
-
Observaciones
Ministerio de Gobernación
Policía Nacional
Laboratorio de Criminalística
Ficha de registro diario
Comportamiento de la sangre animal con la sangre humana
Día: 06
Sangre animal
seca
Ganado
Bovino
Fecha:25-03-03.
Sangre humana,
suspensión de
eritrocitos al 2%
A
B
AB
0
A
Ganado
equino
B
AB
0
A
Perro
B
AB
0
A
Pollo
B
AB
0
Reacción a los
15 minutos
Reacción a las 24
horas (incubación, 4
grados centígrados)
-
-
+
+
+
-
+
+
+
-
Observaciones
Ministerio de Gobernación
Policía Nacional
Laboratorio de Criminalística
Ficha de registro diario
Comportamiento de la sangre animal con la sangre humana
Día: 07
Sangre animal
seca
Ganado
Bovino
Fecha:26-03-03.
Sangre humana,
suspensión de
eritrocitos al 2%
A
B
AB
0
A
Ganado
equino
B
AB
0
A
Perro
B
AB
0
A
Pollo
B
AB
0
Reacción a los
15 minutos
Reacción a las 24
horas (incubación, 4
grados centígrados)
-
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
-
Observaciones
REGISTRO TOTAL DE LAS REACCIONES POSITIVAS Y NEGATIVAS
Especie Sangre
Ganado
Bovino
Ganado
Equino
A
B
AB
O
A
B
AB
O
A
Pollo
Perro
B
AB
O
A
B
AB
O
Reacción a los 15 min.
1
2
3
4
5
6
7
Reacción a las 24 hrs.
1
2
3
4
5
6
7
-
-
+
+
+
-
+
-
-
+
+
+
+
+
-
+
-
-
+
-
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
-
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
-
-
-
+
-
+
+
-
+
+
-
+
+
+
-
+
-
-
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
-
-
-
+
+
+
+
+
-