4-Evaluación Calidad Pupas Moscas-Rev.00

COPEG
PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
1.0
OBJETIVO:
Describir las pruebas de evaluación de la calidad de las pupas y moscas estériles de GBG
producidas en la Planta productora de moscas estériles, desde su llegada, procesamiento
hasta el estado adulto (mosca).
2.0
ALCANCE:
Preparación de equipo, material y alimento, recepción del insecto en su fase de pupa,
procesamiento y dispersión de la mosca en campo
3.0
PROCEDIMIENTO:
Paso
Descripción
Responsable
PREPARACIÓN PARA RECEPCIÓN DE ENVÍO DE PUPAS:
Preparación de alimento para moscas:
El gel para alimentar a las moscas emergidas en cada criba de las
torres, y en pruebas de laboratorio se debe preparar a
proporciones así:



3.1
1 litro de agua corriente
12.25 gr de gel carín (carragenina)
0.4 libras de azúcar no refinada
Para completar un litro de gel líquido, el cual será distribuido en
bandejas plásticas, 5 litros en cada una. Los Biotécnicos de control
de calidad determinan los litros a preparar por los técnicos y
auxiliares en producción de insectos, para cada envío
dependiendo de las cantidades de hieleras a recibir, calculando 1
bandeja de 5lts para cada hielera con 44 litros (estimado).
El alimento es preparado el día anterior al envío, un vez gelificado
es cortado en 72 pastillas con un cortador especial. Colocándose
una pastilla por criba (PT-DIS-3.27).
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
Técnicos y
Auxiliares de
producción de
insectos
Biotécnicos de
Control de
Calidad
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
Preparación de instrumentos de medición:
En el laboratorio se preparan los instrumentos de medición, en el
higrotermógrafo a utilizar se coloca el papel especial previamente
identificado con su número de envío, fecha, hora de montaje y
responsable. Para monitorear su calibración correcta, se encienden
termómetros digitales y de pluma, son colocados en el cuarto de
prueba junto al higrotermógrafo hasta el arribo del envío. Una vez
que llega el envío se verifica la calibración de los equipos y se
anotan las medidas en el formato no controlado Verificación de
instrumentos de medición.
El higrotermógrafo y un instrumento digital son llevados a la
unidad correspondiente, colocados en la parte anterior de la
cámara. En el sistema de aletargamiento y cruce se le coloca una
jaula protectora al higrotermógrafo y 4 horas después de
encendida la unidad al momento de verificación de instrumentos
se retira el digital, indicándoles a los Técnicos en producción de
insectos que se puede sellar las puertas de la cámara de
emergencia.
En el sistema de torres se mantienen en la parte anterior de la
cámara de aletargamiento el higrotermógrafo y el digital hasta
finalizar el proceso, haciendo lecturas paralelas a las de
emergencia en cribas. Formato no controlado: Reporte del envío
Técnicos y
Auxiliares de
producción de
insectos
Biotécnicos de
Control de
Calidad
VERIFICACIÓN DE UNIDAD DE PROCESAMIENTO:
3.2
En el sistema de cruce y aletargamiento el Biotécnico verifica flujo
de aire, cortinas, luces, anaqueles, de cada cámara etc. Antes del
cierre de las de emergencia. En el sistema de torres verificará las
cantidades de torres servidas, las tapas y el funcionamiento de los
extractores, esta última será verificada al momento de las lecturas
de la emergencia en cribas.
Biotécnicos de
Control de
Se le indicará al personal de Operaciones de Mantenimiento o al
Técnico de Producción de Insectos las observaciones que ameriten
cambios.
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
3.3
3.4
Descripción
Las muestras de pupas debidamente identificadas en los platos
petri, son llevadas al laboratorio, se realizan homogenizados por
cada subgrupo, y se hace el montaje de la Prueba de emergencia
de pupas al interior de cámara por subgrupo (sistema
aletargamiento y cruce). En el sistema de torres se monta la
Prueba de emergencia en cribas. Formato: Recepción de envío
PRUEBA DE EMERGENCIA DE PUPAS
Sistema de cruce y aletargamiento:
Del homogenizado por subgrupo se coloca una muestra de 500
pupas en una caja de emergencia, ubicando una caja sobre los
anaqueles servidos con ese mismo subgrupo al interior de ambas
cámaras de emergencia.
Formato: Recepción de envío
Responsable
Biotécnicos de
Control de
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Sistema Torres: EMERGENCIA DE PUPAS y SEXADO DE
MOSCAS / CRIBAS (Paso:3.18)
Una vez definida la última colecta (PT-DIS-01 paso 3.41), se
retiran las cajas de emergencia por subgrupos y tiempos de
enfriamiento de las cámaras de emergencia, el contenido es
vaciado en un plato petri y se contabilizan las moscas muertas;
luego son sopladas las muertas y pupas vacías para contar Moscas
no emergidas y determinar el porcentaje de emergencia, no
emergencia y mortalidad. Formato: Emergencia al Interior de las
Cámaras, Recepción de envío.
3.5
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
Biotécnicos de
Control de
Calidad
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
Cálculos:
a- Moscas Emergidas =
500* - Moscas no Emergidas
b- Porcentaje de No Emergencia =
Moscas No emergidas x 100
500
c- Porcentaje de Emergencia =
3.6
100% - Porcentaje de No Emergencia
Biotécnicos de
Control de
Calidad
d- Porcentaje de Mortalidad =
Moscas Muertas x 100
Moscas Emergidas
* 500 = pupas en cada muestra
PRUEBA DE EMERGENCIA EN CÁMARA – ANTERIOR Y
POSTERIOR – Sistemas Cruce Y Aletargamiento
3.7
Se realiza un homogenizado del total de las muestras por
subgrupos de enfriamiento. Se escogen al azar 500 pupas para ser
colocadas en cajas de emergencia rotuladas como anterior 1 y 3 y
posterior 1 y 3, las cuales se colocan sobre anaqueles en la parte Biotécnicos de
Control de
anterior y posterior de ambas cámaras de emergencia. Se procede
Calidad
a retirar las mismas siguiendo el paso 3.3.
Formato: Emergencia al Interior de las Cámaras
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
PRUEBA TESTIGO - Sistemas Cruce Y Aletargamiento –
Sistema torres
Del homogenizado de todos los subgrupos (paso 3.7), se sacan al
azar 500 pupas, las cuales son colocadas en una caja de emergencia
con alimento (gel), es sellada introducida al cuarto de pruebas,
anotando la hora del montaje en el Formato: Testigo y post vuelo.
3.8
Al momento de la apertura de cámara (Sistema con
aletargamiento), o una vez ha salido el último vuelo (Sistema de
Torres), la caja es abierta dentro de un cajón oscuro al medio
ambiente para liberar las moscas voladoras, contar las moscas
muertas y las caminadoras, luego el contenido de la caja se
deposita en un plato petri y soplando sobre el plato eliminamos
desechos, para poder contabilizar las pupas no emergidas.
Además, se registra la temperatura, humedad relativa y
condiciones climatológicas ambientales al momento de la prueba.
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Formato: Testigo y post vuelo
PRUEBA DE EMERGENCIA ESPECIAL– CADA 2 HORAS –
Sistemas Cruce Y Aletargamiento – Torres Tween Y Worley
3.9
3.10
Del homogenizado total de las muestras por subgrupos de
enfriamiento se cuentan 500 pupas, se colocan en un plato Petri
dentro de una jaula pequeña. La jaula se mantiene dentro del
cuarto de pruebas a temperatura y humedad controlada (28 -32° C
o 82 a 90°F, y 50-70% de humedad relativa). En caso del sistema
aletargamiento y cruce se montarán 2 pruebas, una para cada
cámara de emergencia.
El monitoreo inicia al montar la prueba de emergencia,
contabilizando cada 2 horas el número de moscas emergidas en la
jaula, retirando el plato Petri con las pupas que aún no han
emergido y colocándolo en otra jaula limpia, se cierra con una liga
la manga y se continúa corriendo la prueba. Las moscas
emergidas que se quedaron en la jaula se llevan al congelador por
10 minutos para poder contabilizarlas y se le realizará un sexado
de referencia.
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Biotécnicos de
Control de
Calidad
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
3.11
Se registra la temperatura y la humedad del cuarto de prueba y
los resultados obtenidos una vez contabilizados las moscas que
nacieron en este periodo en el formulario Prueba de Emergencia
Especial c / 2horas.
Este proceso se efectúa hasta realizar la
apertura de cámara (PT-DIS-01 paso 3.41).
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Cálculos:
a- % de Emergencia por Jaula =
3.12
Número de Emergidas Acumulado x 100
500
Biotécnicos de
Control de
Calidad
* 500 = Número de muestra
3.13
3.14
3.15
SEXADO DE EMERGENCIA CADA 2 HORAS
– Sistemas Cruce Y Aletargamiento – Torres Tween Y Worley
Las moscas de cada lectura son sexadas hasta finalizar la prueba
obteniendo al final el número acumulado de machos y hembras.
Se realiza bajo observación fenotípica de la distancia entre ojos del
insecto (hembra: separados – machos: unidos)
Formulario: Prueba de Emergencia Especial c/2 horas
PRUEBA DE EMERGENCIA ESPECIAL – 24 HORAS Y A LA
APERTURA DE CÁMARAS – Sistema Cruce y Aletargamiento:
Del homogenizado de las cámaras de emergencia 1 y 3 se cuentan
500 pupas (PT-DIS-01 paso 3.41), se colocan en un plato Petri
dentro de una jaula pequeña. Las jaulas se mantienen dentro del
cuarto de pruebas a temperatura y humedad controlada (28 -32° C
o 82 a 90°F, y 50-70% de humedad relativa).
Tomando como referencia la hora de emergencia del 1% de moscas
(5 moscas de 500 pupas), en la Prueba especial cada 2 horas (Paso
3.7), se espera a cumplir 24 horas para contabilizar la mortalidad
de las moscas emergidas, colocando la jaula en un área iluminada
que permita visualizar en el piso de la misma las muertas. La pupa
no emergida se transfiere a otra jaula limpia igualmente etiquetada
para continuar con la prueba hasta la apertura de cámara. Las
moscas emergidas son congeladas por 30 minutos y cuantificadas.
Formato: Emergencia 24 horas y a la apertura de cámaras.
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Biotécnicos de
Control de
Calidad
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
3.16
Por diferencia de las moscas emergidas se determinará el
porcentaje de emergencia y la no emergencia. Formato:
Emergencia 24 horas y a la apertura de cámaras.
Biotécnicos de
Control de
Calidad
3.17
Paralelo a la apertura de la cámara, se contabilizan las moscas
muertas al interior de la jaula, se retira el plato Petri con las pupas
y se lleva la jaula con las moscas emergidas al congelador por 30
minutos antes de ser contadas. El resultado final será producto de
la suma de lo emergido más la lectura de la prueba a las 24 horas,
al igual que la mortalidad, obteniendo los resultados finales de
emergencia y mortalidad. Formato: Emergencia 24 horas y a la
apertura de cámaras.
Cálculos:
Biotécnicos
de Control de
Calidad
a- N° de Emergidas =
500 - N° de pupas No Emergidas
b- Porcentaje de Emergencia =
Biotécnicos de
Control de
Calidad
N° total de Emergidas x 100
500
3.18
c- Porcentaje de Mortalidad =
N° de Moscas Muertas x 100
N° de Moscas Emergidas
* 500 = Número de muestra
EMERGENCIA DE PUPAS y SEXADO DE MOSCAS / CRIBASSistema Torres “Tween” Y “Worley”
3.19
Los platos petri con el homogenizado de pupas por subgrupos de
enfriamiento son llevados al laboratorio para dispensar 200 pupas
escogidas al azar y distribuirlas en las tablillas de emergencia,
colocando una pupa en cada cuadrante de la parrilla. Éstas son
tapadas con material transparente, y selladas con cinta adhesiva
alrededor.
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
Biotécnicos de
Control de
Calidad
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
3.20
Descripción
Cada tablilla de emergencia es rotulada con su número de
subgrupo de enfriamiento, son colocadas dentro de la cámara de
emergencia sobre una mesa en la parte anterior de la cámara
correspondiente. Se registra a partir de las 20 horas la emergencia
cada 2 horas. Una vez alcanzado el 90% de emergencia, repetido
en más de 2 lecturas un porcentaje o transcurridas un máximo de
36 horas de procesamiento, las tablillas deberán pasar con sus
torres respectivas a la antecámara y posteriormente a la cámara
fría por los Técnicos en producción de Insectos, de donde son
retiradas por los Biotécnicos para contar la emergencia final y
hacer el sexado por subgrupo de enfriamiento. Registro en
formato interno % de emergencia en torres / cribas, no
controlado.
Cálculos:
b- % de Emergencia por tablilla =
3.21
Número de Emergidas Acumulado x 100
200
Responsable
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Técnicos de
producción de
insectos
Biotécnicos de
Control de
Calidad
* 200 = Número de muestra
PRUEBA DE PUPAS POR LITRO Y PESO DE PUPA
– Sistemas Cruce Y Aletargamiento – Torres Tween Y Worley
3.22
3.23
Del homogenizado de ambas cámaras (sistema aletargamiento y
cruce), o de un homogenizado de las muestras recolectadas en los
platos petri luego de montada la prueba de emergencia en cribas
(sistema Torres) (PT-DIS-01 – paso 3.11), se mide una muestra de
½ litro de pupa en una probeta de plástico. Una vez tomada la
muestra se congela por 30 minutos para detener la emergencia,
solo en caso de alta emergencia, si la misma es normal se procede
de inmediato a la revisión de muestra.
Se revisa minuciosamente la muestra, eliminando la basura
existente (aserrín, larvas muertas y la contaminación de otros
insectos).
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Biotécnicos de
Control de
Calidad
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
3.24
El medio litro de muestra es pesado en porciones de 50ml cada
una, colocadas en 10 vasos químicos con la misma capacidad.
Biotécnicos de
Control de
Calidad
3.25
Una vez pesados, se cuentan las pupas de cada medida dividiendo
el valor numérico de peso de los 50 ml entre el total de pupas de
su muestra, obteniendo finalmente el peso promedio de la pupa de
cada medida y se registra. Formato: Peso de Pupa en Grupos (mg)
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Cálculo:
a- Peso de Pupa por repetición=
Peso de Pupas en 50ml____
Número de Pupas de cada Muestra
b.- Peso de pupas en grupo=
Promedio de peso de pupas por repetición
3.26
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Cálculo:
a- Pupas en ½ litro=
Sumatoria de recuento de pupas de los 10 vasos muestra
b- Pupas / litro= Pupas en ½ litro X 2
Peso de 200 pupas en 10 Grupos:
Se seleccionan al azar 200 pupas de cada una de las 10
repeticiones anteriores para ser pesadas, una vez obtenidos los
resultados, son promediados.
Biotécnicos de
Control de
Calidad
3.27
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
Cálculo:
a- Peso de 200 pupas=
Peso de cada Muestra
200
3.28
Biotécnicos de
Control de
Calidad
a- Peso Promedio Grupo de 200 Pupas=
Sumatoria de peso de Muestras
10
3.29
Los dos resultados promedio de pesajes (peso de 200 pupas en 10
Grupos y Peso de pupas en grupo), se suman y se dividen para
obtener el peso promedio de pupa por envío.
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Cálculo peso promedio del envío:
3.30
Peso de pupas en grupo + Peso Promedio Grupo de 200 Pupas
2
Biotécnicos de
Control de
Calidad
IDENTIFICACIÓN DE MALFORMES Y PUPAS DOMÉSTICAS
– Sistemas Cruce Y Aletargamiento – Torres Tween Y Worley
De la misma muestra de ½ litro para determinar el peso y pupas
por litro (Paso: 3.18), se realiza la identificación de las
malformaciones según el diagrama inferior al momento de
limpiarlo. Las cantidades son multiplicadas por dos para registrar
el total por litro. Formato: Peso de Pupa en Grupos (mg)
Biotécnicos de
Control de
Calidad
3.31
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
MALFORMACIONES A NIVEL DE PUPA
Cochliomyia hominivorax
A
B
C
Biotécnicos de
Control de
Calidad
3.32
D
E
F
A- NORMAL, B- BOLA BOLICHE; FORMA INTENSA,
CBOLA BOLICHE; FORMA MEDIA, D- LARVIFORME,
E- ESTRANGULADA, F- CABEZA EVERTIDA.
PRUEBA DE NO VIABILIDAD DE PUPAS:
– Sistemas Cruce Y Aletargamiento – Torres Tween Y Worley
3.33
Del homogenizado de cada subgrupo (plato petri), se sacan al
azar 100 pupas, colocadas en cinta adhesiva procediendo a abrirlas
para verificar la presencia o no de un insecto viable. Para ser
restado al total de pupas del envío y realizar los cálculos
posteriores de rendimiento.
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
Biotécnicos de
Control de
Calidad
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
Cálculo:
3.34
No viabilidad =
Pupas no viables X 100
100
Biotécnicos de
Control de
Calidad
NÚMERO DE MOSCAS POR LITRO Y MARCAJE DE VUELOS
– Sistemas Cruce Y Aletargamiento – Torres Tween Y Worley
3.35
3.36
Antes de la salida de los vuelo diarios, en la cámara fría, el
Biotécnico de Control de Calidad hace un muestro aleatorio de
moscas que represente a cada subgrupo colectado (sistema torres),
o número de colecta (cruce y aletargamiento), hasta completar ½
litro, el cual es sometido a elevadas temperaturas por 1:30 minutos
(microonda), para facilitar el conteo, el cual se realiza separando 4
insectos a la vez manualmente y utilizando un contador, la cifra
final del contador se multiplica por 4 obteniendo las moscas por
medio litro que al doblarlo da el mosca por litro. El mosca por
litro permite determinar los vuelos a realizar y los litros de moscas
a dispersar por vuelo según las millas a recorrer de cada uno
(Marcaje de vuelos). La información de los litros por cada vuelo es
entregada a los Técnicos en Producción de Insectos para realizar el
empaque del vuelo.
Formatos: % Machos y conteo de moscas por litro. Llenado de
Contenedores
NÚMERO DE MUESTRA /VUELO EN 100ml
– Sistemas Cruce Y Aletargamiento – Torres Tween Y Worley
Biotécnicos de
Control de
Calidad
En la cámara de aletargamiento, de las moscas seleccionadas para
cada vuelo, se toma una muestra representativa de los subgrupos
de enfriamiento (Sistema Torres), ó de las colectas (sistema cruce y
Biotécnicos de
aletargamiento), hasta completar ½ litro de moscas. Una vez
Control de
homogenizada la muestra, se divide en 5 porciones de 100 ml
Calidad
cada. Una muestra se coloca en plato petri, es llevada al
laboratorio para su congelamiento, para contar manualmente la
cantidad de moscas, determinando el Número de muestra para la
prueba de Agilidad de vuelo de prevuelo.
Formato: % Machos y conteo moscas por litro
Código:
PT-DISP-04
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
AGILIDAD DE VUELO PRE-VUELO - Sistemas de Torres Cruce y aletargamiento:
3.37
Dentro de la cámara de aletargamiento, tres muestras de 100 ml de
las 4 restantes, son depositadas en cajas de emergencia
respectivamente. Son llevadas al laboratorio, debidamente
rotuladas con los vuelos a dispersar. Tres son sometidas a calor de
luz artificial por 45 minutos, aplicando movimientos suaves cada
15 minutos, para despertar los insectos.
Cada una de las tres cajas es abierta dentro de cajones oscuros
colocados al medio ambiente, cuyas condiciones de temperatura,
humedad relativa y clima son registrados; luego se contabilizan
los insectos no voladores y los muertos.
El promedio de las tres agilidades de vuelo determinará la
agilidad prevuelo de cada vuelo y el promedio de los vuelos será
la agilidad del envío procesado.
Formato: Resultados de agilidad de vuelo pre-vuelo
SEXADO DE VUELOS – Sistemas de Torres - Cruce y
aletargamiento:
3.38
Se realiza un homogenizado de los 100ml restantes del muestreo
de cada vuelo (Paso 3.32). De éste nuevo homogenizado se
separan 50ml a los cuales se les realizará un sexado bajo
observación fenotípica de la distancia entre ojos del insecto
(hembra: separados – machos: unidos). Este resultado se considera
para el envío (Sistema Aletargamiento), y su promedio con el
sexado de las cribas será el sexado del envío en el Sistema Torres.
Formato: % Machos y conteo moscas por litro
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
3.39
PESO DE MOSCA - Sistemas Torres - Cruce y aletargamiento:
Del homogenizado del paso 3.33, se congela por 30 minutos
aproximadamente un grupo de moscas (+ 100), se verifican 100
moscas y son pesadas en 2 grupos de 50 insectos. Se saca un
promedio (1).
Se homogenizan nuevamente los dos grupos de 50 moscas y se
retiran al azar 50, siendo pesadas de manera individual. Se saca
otro promedio de ese pesaje (2).
Se promedian ambos resultados (1 y 2), para obtener el peso
promedio de mosca del envío.
Biotécnicos de
Control de
Calidad
LONGEVIDAD CON Y SIN ALIMENTO - Sistemas Torres Cruce y aletargamiento:
3.40
Del homogenizado del paso 3.33, se escogen al azar 25 machos y
25 hembras los cuales son colocados en una jaula con alimento (gel
y agua), de igual manera se prepara otra jaula sin gel con agua
(longevidad sin alimento). Una vez montadas ambas pruebas se
inicia la lectura (día 1), leyendo cada 24 horas la mortalidad hasta
su totalidad. En la prueba con alimento se considerará como
mortalidad del envío los días correspondientes a la muerte del
50% de los insectos. Y en la prueba sin alimento los días al 100%.
Formato: Longevidad con / sin alimento
AGRESIVIDAD
aletargamiento:
3.41
SEXUAL
-
Sistemas
Torres
-
Cruce
y
Del homogenizado del paso 3.33, se escogen al azar 15 machos y
35 hembras los cuales son colocados en una jaula con alimento (gel
y agua), previo forrado del piso de la jaula con papel manila. Una
vez transcurridos 5 días se retiran 7 hembras para ser disectadas y
determinar su desarrollo oogénico y la agresividad sexual del
macho mediante la observación de espermatozoides móviles o no
en cada una de las 3 o 4 espermatecas de las hembras. Al séptimo
día se vuelve a realizar la misma técnica disectando 10 moscas.
Código:
PT-DISP-04
Revisión: 00
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Aprobado por: Directores Técnicos
Biotécnicos de
Control de
Calidad
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PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
Descripción
Responsable
3.42
Se hace un registro del total de espermatecas visualizadas en las 7
hembras disectadas (5° día), y 10 hembras disectadas (7° día),
estableciendo
como
positivas
aquellas
que
contienen
espermatozoides móviles o no, y se realiza una sumatoria total de
las positivas y negativas, registrándose en el formato de monitoreo
interno no controlado Resultados de agresividad sexual y en el de
Agresividad sexual y Desarrollo oogénico (controlado). Además,
se monitorea la movilidad o no de los espermatozoides.
Biotécnicos de
Control de
Calidad
DESARROLLO OOGÉNICO - Sistemas Torres - Cruce y
aletargamiento:
De las moscas disectadas en la prueba de agresividad sexual se
verifica el desarrollo oogénico. Se extrae un ovario de cada mosca
el cual es colocado sobre un porta objeto y presionado con otro. Se
lleva a evaluación por microscopia simple, observando las
características morfológicas de sus estructuras para determinar el
estadio. Cada observación es registrada primero en el formato de
monitoreo interno no controlado Resultados de agresividad sexual
y su resumen en el de Agresividad sexual y Desarrollo oogénico
(controlado). El desarrollo oogénico del envío corresponde al
mayor estadio detectado.
3.43
Código:
SISTEMA REPRODUCTOR – HEMBRA
Cochliomyia hominivorax
PT-DISP-04
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
Biotécnicos de
Control de
Calidad
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COPEG
PROCEDIMIENTOS PARA EVALUACIÓN DE LA
CALIDAD DE PUPAS Y MOSCAS ESTÉRILES
Paso
3.44
3.45
Descripción
ANÁLISIS DE DESECHO - Sistemas Cruce y aletargamiento:
Una vez realizada la apertura los Biotécnicos recogen desecho del
piso de la parte anterior, media y posterior hasta completar ½ litro
en un embase cerrado. Este homogenizado se congela por 30
minutos y se procede a limpiarlo, separando manualmente las
moscas del resto, y se mide el volumen de moscas. Formato:
Resumen de envío.
Cálculo:
Desecho del envío=:
ml de moscas en ½ litro x litros totales de desecho
SEXADO DEL DESECHO: - Sistemas Cruce y aletargamiento:
3.46
Del volumen de moscas del desecho (Paso 3.42), se sacan 50ml
para realizar el sexado según sus características fenotípicas
(hembras: ojos separados, Machos: ojos juntos). Formato: Sexado
del desecho
Cálculo:
% de Machos=
3.47
No de Machos x 100
Total de moscas
4.0
Responsable
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Biotécnicos de
Control de
Calidad
Biotécnicos de
Control de
Calidad
DOCUMENTOS DE REFERENCIA
Recepción de Envío
Resultados de agresividad sexual
% de emergencia en torres / cribas
Verificación de instrumentos de medición
5.0
HISTORIAL DE MODIFICACIONES
FECHA
Código:
PT-DISP-04
MODIFICACIONES
Revisión: 00
Aprobado por: Directores Técnicos
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