PRUEBAS DIAGNOSTICO

NATALIA GUADALUPE PALMA CASARRUBIAS
PRUEBAS DE DIAGNOSTICO MICROBIOLÓGICO
Tipo de prueba
Características
Técnica de toma de muestra
Parámetro de resultados
Microscopio
Con este instrumento es posible
conocer
en
detalle
la
ultraestructura de los organelos
intracelulares
de
los
microorganismos más grandes
(parásitos, hongos y bacterias)
además de poderse visualizar los
virus.
El microscopio de luz, el de
campo oscuro y el de contraste de
fases han sido de gran utilidad
para el análisis en fresco del
tamaño
y
de
la
forma,
particularmente en el caso de
treponemas,
espiroquetas,
protozoarios y para el estudio de
las formas vegetativas en los
microcultivos micológicos
La
clasificación
de
los
microorganismos ha dependido de
las diferencias morfológicas y
propiedades tintoriales.
Citocentrífuga
Este instrumento se utiliza para
concentrar
especímenes,
particularmente líquidos orgánicos
y
preparar
laminillas
para
evaluación en el laboratorio.
Las
aplicaciones
de
esta
tecnología son múltiples, ya que
se puede concentrar muestras de
prácticamente cualquier líquido
orgánico en cuestión de minutos
para estudios citológicos y
microbiológicos,
los
cuales
pueden
ser
sometidos
a
microscopia de luz, microscopia
electrónica,
citoquímica,
clonación, etc.
Después
de
procesar
las
muestras,
se
obtiene
un
sedimento de aproximadamente 6
mm de diámetro consistente en
una monocapa de células y
microorganismos
bien
preservados y desplegados.
Citometría de flujo
Los contadores de partículas se
se han desarrollado instrumentos
Los citómetros de flujo permiten
utilizan en el laboratorio clínico
capaces
una alta predicción de los cultivos
particularmente en el área de
Estos instrumentos encuentran su
que
hematología donde sin duda han
principal
UFC/mL,
tenido un gran impacto en la
detección de piuria y bacteriuria,
de
contar
aplicación
bacterias.
en
la
tendrán
>
además
de
de
100,000
poder
discriminar los casos en los que
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realización
de
la
biometría
permitiendo hacer un escrutinio de
existe
hemática, siendo capaces en la
qué
muestra.
actualidad de hacer un análisis
microbiológico y cuáles pueden
completo
roja,
ser como negativas a priori con
cuenta total de leucocitos, análisis
una confiabilidad determinada a
diferencial de la fórmula blanca,
través
además de número y tamaño de
negativo de 99%, sobre todo
plaquetas.
cuando la piuria se encuentra en
de la fórmula
orinas
ameritan
del
valor
cultivo
contaminación
de
la
o
las
predictivo
niveles de > 50 leucocitos/mm3 .
Taxonomía por pruebas rápidas
Pruebas
taxonómicas
Estas
pruebas
permiten
El
a
géneros
condiciones
de
cultivo
dependientes del
metabolismo,
diferenciar
capacidad
síntesis
y
patógenos de los saprofíticos, los
factores determinantes, pero si
cualidades de reproducción que
cuales aunque menos virulentos
serán factores críticos la técnica
por su rapidez, bajo costo y
no deben ser subestimados, ya
de
suficiente
que está bien demostrado que se
cromosómico y la amplificación.
pueden
como
es imprescindible la electroforesis
oportunistas, particularmente en
del producto de PCR en gel de
casos
agarosa. Debe observarse una
de
especificidad
son
ampliamente aceptadas.
los
medio
comportar
de
pacientes
inmunocomprometidos.
de
extracción
incubación
del
ADN
sola banda (perteneciente a un
único amplicón) con el tamaño
adecuado.
Medios de cultivo
Necesitan una fuente de energía,
una fuente de carbono, una fuente
de nitrógeno, algunas sales,
oligoelementos y agua. Todos los
medios de cultivo han de cumplir
En los medios de cultivo las
bacterias se multiplican y es
necesario esperar al menos 18-24
horas para visualizarlas.
Agua: recipientes dónde se
almacena el agua debe ser inerte.
pH: la medida a 25 oC. pH +0.2.
ajuste el pH con 1 M NaOH o 1M
CLH
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como mínimo con estos requisitos
pero en muchas ocasiones se
necesitan
además
otras
sustancias
adicionales
como
vitaminas, factores o aminoácidos
esenciales.
Inmunodiagnóstico
El
inmunodiagnóstico
generalmente es complementario
al
diagnóstico
clínico
y
microbiológico, pero en ciertos
casos como enfermedades virales
o autoinmunes es la única clave
con la que se cuenta para
establecer un diagnóstico.
fundir en el agua hirviente
volúmenes < 6
15 ml de espesor agar en placas
petri 90 mm.
Secado de placas estufa 25-55 oC
(20 min.) o en flujo laminar.
Incubación: las pilas de platos < 6.
Se necesitan sueros pareados de
la fase aguda y convaleciente, por
lo cual es útil guardar muestras en
las primeras tomas de sangre,
sobre todo si el paciente va a ser
transfundido.
Detección del antígeno.
Cuantificación de anticuerpos
(IgG/IgM)
Intradermorreacciones.