ESPIROQUETAS Microbiología Universidad de Granada (UGR) 7 pag. Document shared on www.docsity.com Downloaded by: danna-sophia-sanabria-vargas ([email protected]) MICROBIOLOGIA II (JESÚS GONZALEZ) J. A. G. Q TEMA 6: BACTERIAS ESPIROQUETAS (PHYLUM SPIROCHAETA) • • • • • Las espiroquetas se caracterizan porque son bacterias móviles de morfología helicoidal, Gram-negativas y cuya pared celular tiene un espacio periplásmico. Son bacterias móviles mediante filamentos axiales o endoflagelos (flagelos que se encuentran en el espacio periplásmico). Aunque son bacterias Gram negativas, el corpúsculo basal es el propio de las Gram positivas. El número de endoflagelos del que disponen varía con la especie pero siempre están dispuestos en parejas. Son bacterias saprófitas y las hay patógenas de animales y de humanos. El hábitat de las espiroquetas es muy diverso: suelos, aguas, cuerpo humano, animales… El movimiento de las espiroquetas es como el de un sacacorchos no rígido, sino flexible, cuya velocidad es muy rápida. Con este movimiento penetran las mucosas, hecho que causa la patogenicidad. Hay 8 géneros importantes dentro de las espiroquetas pero estudiaremos tres: Treponema, Borrelia y Leptospira. Género Treponema • • • • • • • Espiroquetas de morfología helicoidal con espiras regulares o irregulares Tamaño: 0,1 µm de diámetro (una E. Coli mide 2-3 µm) y hasta 15 µm de longitud (estirada). Microorganismos difíciles de teñir (no se tiñen con la tinción de Gram). Al ser muy delgados y muy pequeños no se ven bien con microscopía óptica de fondo claro. Para observarlas se puede usar microscopio óptico de campo oscuro porque se ve mejor. También se puede usar tinciones especiales de impregnación argéntica (utiliza una “lluvia” de precipitado de nitrato de plata que proporciona a la célula una especie de coraza y aumenta su tamaño y visibilidad. Quimiorganotrofos, anaerobios estrictos y fermentadores Parásitos y patógenos de humanos y animales. Pueden aparecer como microbiota normal (en la boca, aparato digestivo, genitales…) donde no son patógenas Hay 2 especies importantes que son patógenas humanas: Treponema pallidum y Treponema carateum. Treponema carateum produce una enfermedad de ámbito extraeuropeo llamada “pinta”. Treponema pallidum ▪ ▪ ▪ ▪ ▪ Tiene 3 subespecies, la más importante es la subespecie Treponema pallidum sub. pallidum que es el agente etiológico de la sífilis venérea. La espiroqueta Treponema pallidum es un agente patógeno estricto de los humanos. Vive solamente dentro de los humanos de forma estricta aunque se ha conseguido inocular el microorganismo en animales de laboratorio de forma artificial. Tiene un diámetro de 0,1 µm de diámetro y 15 µm de longitud (estirada). Es un microorganismo anaerobio estricto de distribución mundial y circula con los humanos ya que se contagia por contacto sexual directo. 1 Document shared on www.docsity.com Downloaded by: danna-sophia-sanabria-vargas ([email protected]) MICROBIOLOGIA II (JESÚS GONZALEZ) ▪ ▪ ▪ J. A. G. Q Es un microorganismo muy lábil a las condiciones adversas, por ejemplo, a la desecación, al pH ácido o a los desinfectantes. Es muy vulnerable fuera de los seres humanos y por eso no suele contagiarse sin haber contacto sexual. Sin embargo se puede contagiar de madre a hijo (sífilis congénita) o mediante transfusión sanguínea, pero actualmente esto está muy controlado y no suele pasar con frecuencia. No se puede cultivar en laboratorio mediante cultivos celulares ordinarios (medios de agar convencionales) pero, por ejemplo, se pueden cultivar en células epiteliales de conejos. PATOGENICIDAD ▪ ▪ ▪ La sífilis natural es una enfermedad de transmisión sexual y ocupa la tercera posición a nivel mundial en número de casos. La incidencia de la sífilis ha disminuido debido a la mayor información a la población y a la eficacia de los antibióticos existentes. ESTADIOS DE LA SÍFILIS a) Sífilis primaria (Fase del chancro sifilítico): El chancro sifilítico aparece en el punto donde se produce la inoculación del microorganismo (mucosas de los genitales masculinos y femeninos) donde empiezan a multiplicarse. El chancro es una úlcera con una cierta elevación y es duro e indoloro (no es un dolor apreciable). Si se toma una muestra del chancro se pueden observar las espiroquetas. A partir de la úlcera, el microorganismo se disemina por todo el organismo humano. El chancro aparece a los pocos días del contacto sexual y después de unos 2 meses desaparece lo que no quiere decir que la enfermedad haya desaparecido. En varones, el chancro es más fácilmente detectable y más doloroso que en las mujeres. Se pueden detectar chancros en la boca y en el ano (chancro anal). b) Sifilis secundaria (Fase “florida”): Se produce cuando el microorganismo se ha diseminado por todo el organismo y se manifiesta principalmente por un eritema o exantema muco-cutáneo generalizado (enrojecimiento de la piel). Ocurre en todo el cuerpo y se observa muy fácilmente en forma de pápula en la mucosa del labio inferior. Esta fase aparece a los 3 o 4 meses iniciales y después de un par de meses desaparece, e igualmente se puede pensar que la enfermedad ha desaparecido pero no es así. c) Sífilis terciaria (o tardía): Se produce cuando el microorganismo llega a órganos y tejidos. Por ejemplo, la sífilis terciaria cerebral causa demencia. Otros ejemplos podrían ser la sífilis terciaria cardíaca, hepática, etc… 2 Document shared on www.docsity.com Downloaded by: danna-sophia-sanabria-vargas ([email protected]) MICROBIOLOGIA II (JESÚS GONZALEZ) J. A. G. Q DIAGNÓSTICO a) Técnicas microscópicas - - Se utilizan en los estadios de sífilis primaria, secundaria o terciaria. En el caso de la sífilis primaria, el diagnóstico se realiza mediante microscopía óptica de campo oscuro. La toma de muestra se toma de los exudados de las lesiones cutáneas (chancros). La muestra debe analizarse inmediatamente, ya que el treponema no resiste mucho en el medio ambiente. A la muestra se le hace una extensión entre porta y cubre y lo que se detecta es su movimiento. Las muestras de boca no deben analizarse ya que hay otras espiroquetas en la boca que no son patógenas. Requiere de un microscopista bastante experto Existe otras técnicas como la microscopía de fluorescencia en la cual se utilizan anticuerpos antitreponema marcados con fluorescencia. En el caso de sífilis congénita y terciaria se suele hacer una biopsia seguida de una tinción anatomopatológica del tejido. b) Pruebas inmunoserológicas: Detección de anticuerpos anti-treponema en el suero sanguíneo. Hay dos tipos de pruebas: o Inespecíficas (no treponémicas): No se detectan anticuerpos específicos de treponema. Se estudia el suero sanguíneo (sangre sin elementos formes) del enfermo y se buscan anticuerpos del tipo IgG y IgM que se producen en respuesta a lípidos que generan las células humanas dañadas por una infección por Treponema. Estos lípidos por sí solos no generan inmunoglobulinas pero adquieren antigenicidad al adherirse al Treponema y adquieren el peso molecular necesario para que los linfocitos puedan detectarlos. Es entonces cuando los linfocitos B crean anticuerpos contra estos lípidos. Se conoce un antígeno inespecífico llamado cardiolipina que se encuentra en el corazón de las vacas y que produce una reacción cruzada con los antígenos de los lípidos producidos por células dañadas por treponema. La prueba se hace en un porta, se ponen dos gotas, una con el suero y otra con la cardiolipina, se mezclan y se observa si hay reacción antígeno-anticuerpo manifestada por floculación. Existen en el mercado dos test comerciales inespecíficos que se realizan en porta: VDRL (Venereal Diseases Research Laboratories) y RPR (Rapid Protein Reaction). Tienen una especificidad entre el 95-98%, por tanto, son muy fiables. Los enfermos que dan positivo a la prueba inespecífica, se les hace luego la prueba específica ya que esta última es cara como para hacerla directamente. o específicas (treponémicas): Se detectan anticuerpos específicos de treponema. Se suele utilizar una prueba de microhemaglutinación llamada MHA-TP (Microhemaaglutination Assay- Treponema palidum) que es cara pero tiene una fiabilidad del 99%. Una persona puede estar tratada de sífilis y aún seguir dando positivo en los test. 3 Document shared on www.docsity.com Downloaded by: danna-sophia-sanabria-vargas ([email protected]) MICROBIOLOGIA II (JESÚS GONZALEZ) J. A. G. Q TRATAMIENTO Fármacos de elección: las penicilinas En fases iniciales: P-BENZATINA (de acción prolongada) En fase tardía/congénita: PENICILINA G En caso de alergia a penicilinas: DOXICICLINA PREVENCIÓN No usar los antibióticos para prevención debido a que se pueden crear resistencias. Se debe prevenir el contagio mediante el sexo seguro (parejas estables, no promiscuidad, uso de preservativo, sexo con personas de fiar). Género Borrelia • • • • • • • Espiroqueta Gram negativa, microaerófila, patógena del ser humano y de animales Morfología helicoidal con espiras bastante irregulares. Se tiñen bien con los colorantes derivados de la anilina (fuchina, safranina, violeta de genciana…). Difíciles de cultivar pero es posible hacerlo en embriones de pollo. Su temperatura de crecimiento está entre 26-30ºC, por tanto, es mesófila. Algunas especies son saprofitas y existen muchas especies con numerosas serovariedades. Borrelia recurrentis es el agente etiológico de las fiebres recurrentes y de la enfermedad de Lyme o borreliosis. Borrelia recurrentis ▪ Agente etiológico de las fiebres recurrentes que pueden ser endémicas o epidémicas. PATOLOGÍA 1) Fiebres recurrentes ▪ ▪ ▪ ▪ Las fiebres recurrentes endémicas se transmiten mediante vectores (piojo humano). También se transmite ocasionalmente como fiebres recurrentes epidémicas (el vector en esta ocasión es la garrapata). Los síntomas aparecen de forma brusca y en 3 formas: dolor de cabeza, escalofríos y malestar general (3-7 días). Durante los síntomas, el microorganismo aparece en sangre 4 Document shared on www.docsity.com Downloaded by: danna-sophia-sanabria-vargas ([email protected]) MICROBIOLOGIA II (JESÚS GONZALEZ) ▪ ▪ ▪ J. A. G. Q Luego los síntomas desaparecen 1 semana y vuelven a aparecer de nuevo durante otra semana, hecho que ocurre una o dos veces más. En las fiebres recurrentes endémicas, los síntomas aparecen de forma múltiple. La mortalidad de las fiebres recurrentes endémicas es muy baja comparada con las epidémicas que puede llegar hasta un 40% de mortalidad. 2) Enfermedad de Lyme Sus síntomas son dolores de cabeza y un eritema en la zona de la picadura que es migratorio y se hace cada vez más grande. En ocasiones, de forma tardía, la enfermedad de Lyme deriva en ciertas patologías del Sistema Nervioso Central o del Sistema cardiovascular. DIAGNÓSTICO El diagnóstico depende del tipo de afección: Fiebres recurrentes a) Microscopía óptica: Se toma una muestra de sangre en periodo febril, se hace una extensión en porta y se le hace una tinción citológica como la tinción de Giemsa. b) Cultivo: No muy realizado debido a su dificultad. c) Pruebas serológicas: Las formas tienen antígenos muy variables por lo que no es muy recomendable la detección de antígenos. d) Pruebas inmunológicas: ELISA, PCR. Enfermedad de Lyme a) Pruebas serológicas: Es recomendada ya que los antígenos en la Enfermedad de Lyme son más estables. TRATAMIENTO Fiebres recurrentes Los antibióticos sanan al enfermo sin dejar secuelas. Fármaco de elección: TETRACICLINA (no recomendado para niños y embarazadas) Alternativo: ERITROMICINA (para niños y embarazadas) Enfermedad de Lyme: DOXICICLINA y AMOXICILINA (vía oral) 5 Document shared on www.docsity.com Downloaded by: danna-sophia-sanabria-vargas ([email protected]) MICROBIOLOGIA II (JESÚS GONZALEZ) J. A. G. Q PREVENCIÓN Control de vectores: despiojar a los niños, desparasitar a los perros y otros animales domésticos. Género Leptospira • • • • • • • • • • • Espiroquetas Gram negativas, helicoidales “muy flexibles” (tienen capacidad para cambiar mucho de presentación) Tamaño: 0,1 µm de diámetro y hasta 6-12 µm de longitud (estirada). Difíciles de teñir, se observan mediante microscopía óptica de campo oscuro. Con frecuencia tienen forma de gancho o herradura. Microorganismos que en la naturaleza están distribuidos encontrándose especies y cepas que son patógenas humanas o saprofitas. Quimiorganotrofa, aerobia estricta. Catalasa +, Oxidasa + Fuentes de carbono: ácidos grasos o graso-alcoholes de cadena larga (pueden tener unos 15 átomos de carbono) Ejemplos de especies: Leptospira interrogans (tiene forma de interrogación) y Leptospira biflexa (flexible por los dos extremos). Estas dos especies tiene muchas serovariedades, de Leptospira interrogans se conocen más de 200 cepas distintas que son patógenos humanos, por tanto, L. interrogans se asocia con las leptospiras patógenas. Leptospira biflexa de la que hay descritas más de 60 cepas, se incluyen en ellas las leptospiras saprofritas. Leptospira interrogans es un microorganismo que puede producir varios cuadros clínicas de leptospirosis en humanos. PATOLOGÍA La leptospirosis en los humanos pude pasar por una manifestación subclínica o asintomática en la que el enfermo sufre la infección pero no se manifiestan los síntomas, por una etapa febril parecida a la gripe, o bien una enfermedad sistémica (cuando hay diseminación múltiple del microorganismo por el cuerpo). Cuando la leptospirosis cursa con una manifestación sistémica se le llama Enfermedad de Weil. La Enfermedad de Weil puede cursar no solo con una manifestación febril sino que, con cierta frecuencia, cursa también con complicaciones que determinan insuficiencia hepática y/o renal. También puede producir miocarditis, afecciones del corazón… que pueden producir el fallecimiento del enfermo por “muerte dulce” (fallo renal) o paro cardíaco, etc… Leptospira puede penetrar en nuestro organismo fundamentalmente por dos mecanismos: a) Por las mucosas (la más frecuente) b) A través de pequeños cortes o abrasiones en la piel. A través de la mucosa, penetra con movimiento a modo de sacacorchos y traspasa la mucosa ya que no está pensada para proteger frente al medio externo. En el caso de la piel, la leptospira no penetra pero si 6 Document shared on www.docsity.com Downloaded by: danna-sophia-sanabria-vargas ([email protected]) MICROBIOLOGIA II (JESÚS GONZALEZ) J. A. G. Q tenemos un corte o herida, si puede hacerlo si metemos la zona lesionada en agua contaminada con leptospira. Una vez que el microorganismo ha entrado, se extiende por todos los tejidos e incluso el LCR. La presencia del microorganismo en sangre o LCR es detectable al inicio de la enfermedad. En estadios tardíos de la enfermedad (unas 3 semanas), la leptospira se detecta también en orina. La leptospirosis es una enfermedad de distribución universal. Los reservorios normales de las leptospiras son los roedores, perros y animales de granja, que son los que con más frecuencia son el origen del contagio de los humanos. La contaminación por vía cutánea también se produce frecuentemente cuando nos bañamos en ríos o aguas estancadas ricas en materia orgánica que se contaminan con orina de animales infectados y tenemos una herida. No hay casos conocidos de transmisión de leptospirosis humano-humano. DIAGNÓSTICO a) Cultivo: Leptospira es cultivable y crecen bien entre 28-30ºC y en aerobiosis. Para ello es necesario utilizar medios complejos y ricos. Un ejemplo es el medio Tween 80 adicionado de albúmina sobre el cual se pueden desarrollar colonias de leptospira. El crecimiento de leptospira es muy lento, para ver colonias tendríamos que estar observando el medio hasta 4 meses aunque normalmente, las colonias visibles se suelen observar a las 2 semanas. La toma de muestra para hacer el cultivo, hasta los 10 primeros días, Leptospira interrogans se puede aislar del LCR y, a partir de los 7 días hasta los 3 meses aproximadamente, se puede aislar de la orina. ES UN PROCESO LENTO. b) Técnicas moleculares: PCR utilizando primers (sondas) específicos del microorganismo. c) Pruebas inmunológicas: Son más fáciles y rápidas que las pruebas de cultivo (no se puede tener hasta 4 meses al enfermo esperando). Son pruebas de reacción antígeno-anticuerpo en las que buscamos anticuerpos en el suero del enfermo contra leptospira. Estas pruebas son normalmente de aglutinación microscópica y no se deben hacer hasta como mínimo 2 semanas después del inicio de la infección ya que hasta entonces las aglutininas (anticuerpos) no están en suficiente concentración para que la prueba sea fiable. TRATAMIENTO El tratamiento que se utiliza para combatir la leptospirosis depende de la naturaleza de la misma. La leptospirosis no suele ser mortal, especialmente cuando no hay ictericia. Incluso cuando hay una ictericia leve, no es mortal normalmente. Si solo hay fiebre y no hay ictericia, no hay daño hepático y la enfermedad no suele causar daños graves ni es mortal. No obstante, si la enfermedad es grave, donde existe ictericia importante con destrucción de hepatocitos, el tratamiento debe ser inmediato ya que se están produciendo daños graves. El tratamiento consiste fundamentalmente en 2 antibioticos: la PENICILINA y la AMPICILINA, y la administración será por vía intravenosa ya que es la vía más rápida de administración. En el caso de leptospirosis menos graves se utilizan antibióticos por via oral: AMPICILINA o AMOXICILINA. PREVENCIÓN ▪ ▪ Es muy difícil elaborar un plan de prevención ya que el microorganismo está muy extendido en la naturaleza. Sin embargo, se puede mitigar un poco usando vacunas para el ganado y para las mascotas que son muy eficaces. 7 Document shared on www.docsity.com Downloaded by: danna-sophia-sanabria-vargas ([email protected])