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XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
EVALUACIÓN DEL EFECTO DEL FACTOR DE CRECIMIENTO DE
HEPATOCITOS (HGF) EN LA EXPRESIÓN DEL VIRUS DE LA HEPATITIS C
(VHC) Y SU RELACIÓN CON EL ESTRÉS OXIDATIVO
José Gabriel López Guerrero. Universidad Autónoma de Chiapas. [email protected]
Asesora: Dra. Ana María Guadalupe Rivas Estilla. Universidad Autónoma de Nuevo León.
[email protected]
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.
La hepatitis C es un problema de salud global causado por la infección con el virus
de la hepatitis C (VHC), La infección por VHC evoluciona hacia la cronicidad en 60
a 85% de los sujetos que la sufren y ocasiona cirrosis hepática y carcinoma
hepatocelular. El tratamiento estándar actual consiste en interferón-α pegilado
combinado con ribavirina, el cual es frecuentemente difícil de tolerar y resulta en
una respuesta viral sostenida (RVS) en alrededor del 50% de los pacientes. Es
importante la búsqueda de nuevas alternativas de tratamiento para el VHC. Se ha
reportado que en pacientes sometidos a diálisis existe un aumento en los niveles
séricos de factor de crecimiento hepatocelular (HGF) y al mismo tiempo que
disminuyen los niveles de RNA de VHC, sin embargo, no se sabe si existe una
relación entre estos dos factores o bien son eventos independientes.
El presente trabajo tiene la finalidad de evaluar dicho efecto en células que
expresan constitutivamente las proteínas estructurales y no estructurales del VHC,
y la relación que esto tenga en la modulación del balance redox.
METODOLOGÍA.
Se preparo stock de virus de vaccinia (VV), empleando células HeLa, una vez
preparado el stock, se infectaron células de hepatoma humano Huh7 y se evaluó
la aparición de efecto citopático. Las células se sembraron y se transfectaron con
plásmidos de proteínas estructurales y no estructurales del virus, con el fin de
observar el efecto citopático. Se prosiguió a emplear células Huh7 con replicón y
sin replicón, sembrándose e incubándose con 50 ng/ml de HGF durante diferentes
tiempos con sus respectivos controles. Todos los estudios antes mencionados se
realizaron por triplicado.
Se procedió a la extracción de ARN y proteínas, evaluando la expresión VHC en
células Huh7 con y sin replicón, por medio de RT-PCR cuantitativa en tiempo real,
y por Western Blot respectivamente. Se procedió a medir los marcadores de
estrés oxidativo; como especies reactivas de oxígeno y determinar proteínas
oxidadas.
CONCLUSIONES.
Se logró observar el efecto citopático en las células Huh7 infectadas con el stock
de VV, y se obtuvo proteínas para realizar el ensayo de Western Blot; y aunque el
estudio aún no ha concluido; esta investigación, pretende evaluar el efecto que
tiene el HGF de manera in vitro en células que expresan las proteínas
estructurales y no estructurales del VHC, y la relación que tenga en la modulación
del estrés oxidativo.
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Pacífico
Agosto 2014