un iv ers id adpol it é cn ic asales ia nasedequ it o

U N IV E R S ID A D P O L I T É C N IC A S A L E S I A N A
S E D E Q U IT O
C A R R E R A : IN G E N IE R ÍA E N B IO T E C N O L O G ÍA D E L O S R E C U R S O S
N A T U R A LE S
T e s i s p r e v i a a l a o b t e n c i ó n d e l t ít u l o d e :
IN G E N IE R O
E N B IO T E C N O L O G ÍA D E L O S R E C U R S O S N A T U R A L E S
TE M A :
V A L ID A C IÓ N D E U N M É T O D O
M IC R O B IO L Ó G IC O
P A R A E L A N Á L IS IS D E
C O L IF O R M E S T O T A L E S Y F E C A L E S E N A G U A S C L A R A S Y R E S ID U A L E S ,
P A R A E L C E N TR O
D E IN V E S T IG A C IO N E S Y C O N T R O L A M B IE N T A L
(C IC A M ) D E L A E S C U E L A P O L IT É C N IC A N A C IO N A L .
A U TO R :
C A R L A R A Q U E L B E L T R Á N C H IP A N T IZ A
D IR E C T O R :
P A B LO
C O B A S A N T A M A R IA
Q u ito ,
ju lio d e l 2 0 1 3
D E C L A R A T O R IA D E R E SP O N S A B IL ID A D
Y A U T O R IZ A C IÓ N D E U SO D E L
T R A B A JO D E G R A D O
Y o C a r l a B e l tr á n a u t o r i z o a l a U n i v e r s i d a d P o li t é c n i c a S a l e s i a n a l a p u b li c a c i ó n t o t a l o
p a r c i a l d e e st e t ra b a j o d e g r a d o y s u r e p r o d u c c i ó n s i n f i n e s d e l u c r o .
A dem ás
d e c laro
que
lo s
c o n c e pto s
y
a n á l is i s
d e s a rr o l la d o s
p r e s e n t e t r a b a j o s o n d e e x c l u s i v a r e s p o n s a b il i d a d d e l a u t o r .
Q u i t o , J u li o
2013
f:_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
C a r l a R a q u e l B e lt r á n C h i p a n t iz a
C C : 1712532108
y
la s
c o n clu sio ne s
del
D E D IC A T O R IA
A m is p a d res q u ie n e s ha n sid o m i fortale z a
y a p o y o e n e s t e l a r g o c a m i n o , a m is a m i g o s y
a t o d a s la s p e r s o n a s q u e h i c i e r o n p o s i b l e e s te l o g r o .
A G R A D E C IM IE N T O
A
la E s c u e la P o lité c nic a N a c io n a l, e n e s p e cia l a l C e n tro d e In v e stig ac i o n e s y C o n tro l
A m b ie n tal (C IC A M ), p o r el a p o y o
F ie rro
y a
la
D r a . A n it a
V e la sc o
y
a p ertura
p o r la
o frec id a; e n
c o nfia n za
b ri n d a d a
e sp e cia l a
d u ra n t e l a
la In g . C a ro la
eje c u ció n
del
p re se n te tra b ajo .
A l D r . P a b l o C o b a , p o r s u c o n o c i m i e n t o , c o l a b o ra c i ó n , c o n s e j o s y c r ít ic a s c o n s t r u c t i v a s
q u e h i c i e r o n p o s i b l e e l d e s a rr o ll o y c u lm i n a c i ó n d e l p r o y e c t o .
ÍN D IC E
I N T R O D U C C I Ó N ........................................................................................................... 1
C A P Í T U L O I .................................................................................................................... 4
A N T E C E D E N T E S ........................................................................................................... 4
1 .1
J U S T I F I C A C IÓ N ................................ ................................................................ ..... 4
1 .2
O B JE T IV O S ................................ ................................ ................................ ............ 5
1 .2 .1
O b j e t i v o G e n e r a l.............................................................................................. 5
1 .2 .2
O b j e t i v o s E s p e c í fi c o s ...................................................................................... 5
C A P Í T U L O I I .................................................................................................................. 7
M A R C O T E Ó R I C O ........................................................................................................ 7
2 .1
G e n e r a l i d a d e s ...................................................................................................... 7
2 .1 .1
P r o p i e d a d e s f í s i c o – q u ím i c a s ................................................................ ......... 7
2 .1 .2
D i s t r i b u c i ó n d e l a g u a e n la T i e rr a ................................................................ ... 9
2 .2
E l a g u a c o m o R e c u rs o ......................................................................................... 9
2 .2 .1
F u e n t e s d e A g u a ............................................................................................ 1 0
2 .2 .2
C l a s i fi c a c i ó n d e l A g u a ................................................................................... 1 0
2 .2 .2 .1
E l a g u a e n l a n a t u r a l e z a .......................................................................... 1 0
2 .2 .2 .2
E l a g u a y e l h o m b r e ................................................................................ 1 3
2 .3
C a l i d a d d e l a g u a p a r a u s o y c o n s u m o h u m a n o ................................................. 1 5
2 .3 .1
E c o l o g í a d e l a g u a ........................................................................................... 1 6
2 .3 .1 .1 B a c t e r i a s d e o ri g e n d e l a f u e n t e ................................................................ 1 7
2 .3 .1 .2
P a r á m e t r o s m i c r o b i o l ó g i c o s ..................................................................... 1 8
2 .3 .2 A n á l i s i s m ic r o b i o l ó g i c o d e l a g u a ................................................................ .... 2 0
2 .4
M é t o d o s d e a n á l is i s m i c r o b i o l ó g i c o s ................................................................ 2 0
2 .4 .1 M é t o d o d e l N ú m e r o m á s P r o b a b l e p a r a l a d e te c c i ó n d e c o l if o rm e s t o t a l e s y
f e c a l e s . ...................................................................................................................... 2 1
2 .4 .2 C o n t a m i n a c i ó n m i c r o b i a n a e n e l a g u a ............................................................. 2 3
2 .5 V a l i d a c i ó n .............................................................................................................. 2 5
2 .5 .1 T i p o s d e V a l i d a c i ó n ......................................................................................... 2 6
2 .5 .2 E x t e n s i ó n d e l a v a li d a c i ó n ................................................................ ............... 2 7
2 .5 .3 R e q u i s i t o s p a r a l a v a li d a c ió n ................................ ................................ ........... 2 7
2 .5 .3 .1 I n s t a l a c i o n e s y c o n d i c i o n e s a m b i e n t a l e s ................................................... 2 7
2 .6 P a r á m e t r o s d e d e s e m p e ñ o ...................................................................................... 2 8
2 .6 .1
E x a c t i t u d ........................................................................................................ 2 8
2 .6 .2
P r e c i si ó n ........................................................................................................ 2 9
2 .6 .3
I n c e r ti d u m b r e ................................ ................................................................ . 3 1
2 .6 .3 .1
C u l t i v o s y m a t e r i a l d e r e f e r e n c i a ............................................................ 3 3
C A P Í T U L O I I I ............................................................................................................... 3 5
M A R C O M E T O D O L Ó G I C O ...................................................................................... 3 5
3 .1 V e r i f i c a c i ó n d e l f u n c i o n a m i e n t o d e l o s e q u i p o s .................................................... 3 5
3 .2 C o n t r o l d e a m b i e n t e s .............................................................................................. 3 5
3 .3 V e r i f i c a c i ó n d e l o s M e d i o s d e C u lt i v o ................................................................ ... 3 6
3 .4 R e v i t a li z a c i ó n d e l a s c e p a s b a c t e ri a n a s A T C C ...................................................... 3 7
3 .5 P r e p a r a c i ó n d e l a E s c a l a M c F a r l a n d ...................................................................... 3 8
3 .6 P r e p a r a c i ó n d e i n o c u l o s .......................................................................................... 4 1
3 .7 P r e p a r a c i ó n d e e s tá n d a r e s ................................ ...................................................... 4 1
3 .8 A n á l i s i s d e c o li f o rm e s t o t a l e s p o r e l m é t o d o d e fe r m e n t a c i ó n e n t u b o s m ú lt i p l e s 4 4
3 .9 P r o c e d i m i e n t o d e N M P p a r a c o li f o r m e s f e c a le s ................................ .................... 4 9
3 .1 0 M é t o d o d e s i e m b r a p o r v e rt i d o e n p l a c a p a r a c o l i f o r m e s t o t a l e s y f e c a le s .......... 5 2
C A P Í T U L O I V ............................................................................................................... 5 4
R E S U L T A D O S .............................................................................................................. 5 4
4 .1 D i s e ñ o E x p e r im e n t a l ................................ .............................................................. 5 4
4 .2 P a r á m e t r o s d e a n á l is i s ................................ ................................ ............................ 6 3
C O N C L U S I O N E S .......................................................................................................... 8 4
R E C O M E N D A C I O N E S ................................................................................................ 8 6
L I S T A D E R E F E R E N C I A S ......................................................................................... 8 7
ÍN D IC E D E T A B L A S
T a b l a 1 C a r a c t e r í st i c a s fí s i c a s d e l a g u a c l a r a ..................................................................... 8
T a b l a 2 C a r a c t e r í s t i c a s q u ím i c a s d e s u s t a n c ia s p r e s e n t e s e n e l a g u a c l a r a ........................ 8
T a b l a 3 D i s tr i b u c i ó n d e l a g u a e n l a t i e rr a ................................ ................................ .......... 9
T a b l a 4 A g e n t e s p a t ó g e n o s y o r g a n i sm o s p r o d u c t o r e s d e t o x i n a s e n e l a g u a ................. 1 7
T a b l a 5 E s c a l a d e M c F a rl a n d ........................................................................................... 3 9
T a b l a 6 V a l o r d e l r a n g o te ó r ic o d e l o s e s t á n d a r e s . ................................ .......................... 5 4
T a b l a 7 R e s u l t a d o s d e l r e c u e n t o d e m i c r o o r g a n is m o s e n e l r a n g o d e 3 0 0 U F C / m L , p a r a
e l m é t o d o d e N M P u t il i z a d o p o r e l l a b o r a t o ri o y e l d e r e f e r e n c i a ( S t a n d a r M e t h o d s ) . ... 5 5
T a b l a 8 R e s u l t a d o s d e l r e c u e n t o d e m i c r o o r g a n is m o s e n e l r a n g o d e 1 0 0 U F C / m L , p a r a
e l m é t o d o d e N M P u t il i z a d o p o r e l l a b o r a t o ri o y e l d e r e f e r e n c i a ( S t a n d a r M e t h o d s ) . ... 5 7
T a b la 9 R e s u lta d o s d e l rec u e n to d e m ic ro o rg a nism o s e n e l ra n g o d e 1 0 U F C /m L , p a ra e l
m é t o d o d e N M P u ti li z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c i a ( S t a n d a r M e t h o d s ) . ....... 5 9
12
T a b l a 1 0 R e s u l t a d o s d e l re c u e n t o d e m i c r o o r g a n i s m o s e n e l r a n g o d e 1 0
U F C /m L , p a ra
e l m é t o d o d e N M P u t il i z a d o p o r e l l a b o r a t o ri o y e l d e r e f e r e n c i a ( S t a n d a r M e t h o d s ) . ... 6 1
T a b l a 1 1 T a b l a e s t a d ís t ic a p a r a e l r a n g o t e ó ri c o d e 3 0 0 U F C p a r a c o li f o rm e s t o t a l e s .... 6 3
T a b l a 1 2 T a b l a e s t a d ís t ic a p a r a e l r a n g o t e ó ri c o d e 3 0 0 U F C p a r a c o li f o rm e s f e c a le s ... 6 5
T a b l a 1 3 T a b l a e s t a d ís t ic a p a r a e l r a n g o t e ó ri c o d e 1 0 0 U F C p a r a c o li f o rm e s t o t a l e s .... 6 7
T a b l a 1 4 T a b l a e s t a d ís t ic a p a r a e l r a n g o t e ó ri c o d e 1 0 0 U F C p a r a c o li f o rm e s f e c a le s ... 6 9
T a b l a 1 5 T a b l a e s t a d ís t ic a p a r a e l r a n g o t e ó ri c o d e 1 0 U F C p a r a c o li f o rm e s t o t a l e s ...... 7 1
T a b l a 1 6 T a b l a e s t a d ís t ic a p a r a e l r a n g o t e ó ri c o d e 1 0 U F C p a r a c o li f o rm e s f e c a le s ..... 7 3
12
T a b l a 1 7 T a b l a e s t a d ís t ic a p a r a e l r a n g o t e ó ri c o d e 1 0
U F C p a r a c o l if o rm e s t o t a le s ... 7 5
12
T a b l a 1 8 T a b l a e s t a d ís t ic a p a r a e l r a n g o t e ó ri c o d e 1 0
U F C p a r a c o l if o rm e s f e c a l e s .. 7 7
T a b l a 1 9 P r u e b a d e S h a p i r o - W i l k p a r a e l r a n g o d e 3 0 0 U F C / m L ................................... 7 9
T a b l a 2 0 P r u e b a d e S h a p i r o - W i l k p a r a e l r a n g o d e 1 0 0 U F C / m L ................................... 7 9
T a b l a 2 1 P r u e b a d e S h a p i r o - W i l k p a r a e l r a n g o d e 1 0 U F C / m L ..................................... 8 0
12
T a b la 2 2 P ru e b a d e S h a piro -W ilk p ara e l ra n g o d e 1 0
U F C / m L .................................. 8 0
T a b l a 2 3 R e s u l t a d o s d e E x a c t it u d p a r a c o l if o rm e s t o ta l e s y f e c a l e s p a r a l o s r a n g o s d e
12
300, 100, 10 y 10
U F C / m L ............................................................................................ 8 1
T a b l a 2 4 R e s u l t a d o s d e P r e c is i ó n p a r a c o li f o rm e s t o ta l e s y f e c a l e s p a r a l o s r a n g o s d e
12
10
, 3 0 0 , 1 0 0 , 1 0 y U F C / m L .......................................................................................... 8 2
T a b l a 2 5 R e s u lt a d o s d e I n c e rt i d u m b r e p a r a c o l i f o r m e s t o ta l e s y f e c a l e s p a r a e l r a n g o d e
3 0 0 U F C / m L .................................................................................................................... 8 2
T a b l a 2 6 R e s u lt a d o s d e I n c e rt i d u m b r e p a r a c o l i f o r m e s t o ta l e s y f e c a l e s p a r a e l r a n g o d e
1 0 0 U F C / m L .................................................................................................................... 8 3
T a b l a 2 7 R e s u lt a d o s d e I n c e rt i d u m b r e p a r a c o l i f o r m e s t o ta l e s y f e c a l e s p a r a e l r a n g o d e
1 0 U F C / m L ...................................................................................................................... 8 3
ÍN D IC E D E F IG U R A S
F i g u r a 1 D i a g r a m a e s q u e m á ti c o p a r a d e t e c t a r c o l if o rm e s t o t a le s y f e c a l e s .................... 2 2
F i g u r a 2 C o n t r o l d e e s t e ri l i d a d d e l o s m e d i o s d e c u lt i v o ................................ ................. 3 6
TM
F ig u ra 3 U n id a d K W IK -S T IK
..................................................................................... 3 8
F i g u r a 4 S o l u c i o n e s p a r a l a E s c a l a M c F a r l a n d ................................................................ 4 0
F ig u ra 5
E s c a l a d e m c f a rl a n d .......................................................................................... 4 0
F i g u r a 6 E s t á n d a r e s p a r a a g u a s c l a r a s .............................................................................. 4 2
F i g u r a 7 E s t á n d a r e s p a r a a g u a s r e s i d u a l e s ....................................................................... 4 3
F i g u r a 8 S i e m b r a d e m u e st r a s .......................................................................................... 4 5
F i g u r a 9 T u b o c o n R e s u lt a d o P o s it i v o ................................ ............................................. 4 6
F i g u r a 1 0 T u b o s c o n R e s u lt a d o N e g a ti v o ................................ ................................ ........ 4 6
F i g u r a 1 1 S i e m b r a d e t u b o s p o s i ti v o s ................................ .............................................. 4 7
F i g u r a 1 2 T u b o s c o n R e s u lt a d o P o s i t i v o ................................ ................................ ......... 4 8
F i g u r a 1 3 T u b o s c o n R e s u lt a d o P o s i t i v o ................................ ................................ ......... 5 0
F i g u r a 1 4 S i e m b r a d e t u b o s c o n R e s u l t a d o P o s i ti v o ................................ ........................ 5 1
F i g u r a 1 5 T u b o s c o n R e s u lt a d o N e g a ti v o ................................ ................................ ........ 5 1
F i g u r a 1 6 T u b o s c o n R e s u lt a d o P o s i t i v o ................................ ................................ ......... 5 2
F i g u r a 1 7 C a j a c o n r e s u lt a d o P o s i t i v o ................................ ............................................. 5 3
ÍN D IC E D E E C U A C IO N E S
E c u a c i ó n 1 t d e S t u d e n t ..… … … … … … … … … … … … … … … … … … … ..… … … … ..2 9
E c u a c i ó n 2 P o r c e n t a j e d e R e c u p e r a c i ó n … … … … … … … … … … … … … … … … ..… ...2 9
E c u a c i ó n 3 P o r c e n t a j e d e R e p r o d u c i b i l i d a d … … … … … … … … … … … … … … … … ...3 0
E c u a c i ó n 4 D e s v i a c i ó n e s tá n d a r re l a t i v a d e P o i s s o n … … … … … … … … … … … … … ...3 0
E c u a c i ó n 5 I n c e r t i d u m b r e d e l v a l o r d e re f e r e n c i a … … … … ..… … … … … … … … … … .3 1
E c u a c i ó n 6 I n c e r t i d u m b r e d e l v a l o r d e la m u e s t r a … … … … … … … … … … … … … … .3 2
E c u a c i ó n 7 I n c e r t i d u m b r e a s o c i a d a a l a r e p r o d u c i b il i d a d … … … … … … … … … … … ..3 2
E c u a c i ó n 8 I n c e r t i d u m b r e d e l p o r c e n t a j e d e r e c u p e r a c i ó n … … … … … … … … ..… … … 3 2
E c u a c i ó n 9 I n c e r t i d u m b r e e x p a n d i d a … … … … … … … … … … … … … … … … ..… … ...3 3
ÍN D IC E D E A N E X O S
A n e x o 1 : C e r t if i c a d o d e c e p a
E s c h e ri c h i a c o l i A T C C 8 7 3 9 ........................................ 8 8 9
A n e x o 2 : C e r t if i c a d o d e c e p a
E s c h e ri c h i a c o l i A T C C 2 5 9 2 2 ...................................... 9 0 0
A n e x o 3 : C e r t if i c a d o d e c e p a
S h i g e l l a s o n e i A T C C 2 5 9 3 1 .......................................... 9 1 1
A n e x o 4 : C e r t if i c a d o d e c a li b r a c i ó n d e l a i n c u b a d o r a M e m m e rt e 5 9 6 .0 2 3 9 ................ 9 2 2
A n e x o 5 : I n f o rm e d e m a n t e n i m ie n t o d e l a c a b i n a d e f l u j o l a m i n a r
L a b c o n c o ............. 9 5 5
A n e x o 6 : I n f o rm e d e c a l i b ra c i ó n d e l a b a la n z a a n a lí ti c a M e t tl e r t o l e d o ......................... 9 6
A n e x o 7 : C u a d r o d e v e r if i c a c i ó n d e l o s e q u i p o s d e l a b o r a t o r i o . ..................................... 9 8
A n e x o 8 : P r o c e d im i e n t o p a r a l a r e c o n s t it u c i ó n d e u n a c e p a A T C C ................................ 9 9
A n e x o 9 : R e s u l t a d o s h is t ó ri c o s d e l 2 0 1 2 p a r a c o li f o rm e s t o t a l e s y f e c a le s e n m u e s t r a s d e
a g u a . ............................................................................................................................. 1 0 1 1
A n e x o 1 0 : Í n d i c e d e N M P p a r a d i s t i n t a s c o m b i n a c i o n e s d e r e s u lt a d o s p o s it i v o s c u a n d o
s e u s a n 5 t u b o s p o r d il u c i ó n . ................................ ................................ ........................ 1 0 3 3
A n e x o 1 1 : T a b l a d e N M P p a r a v a r i a s c o m b i n a c i o n e s d e re s u lt a d o s p o s i t i v o s u t il i z a n d o 3
t u b o s p o r d il u c i ó n ................................ ................................ ......................................... 1 0 4 4
A nexo
1 2 : R e sulta d o s d e l rec u e n to d e m icro o rg a nism o s e n e l ra n g o d e 3 0 0 U F C /m L ,
p a r a e l m é t o d o d e N M P u ti li z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c i a ( S ta n d a r M e t h o d s ) .
...................................................................................................................................... 1 0 5 5
A nexo
1 3 : R e sulta d o s d e l rec u e n to d e m icro o rg a nism o s e n e l ra n g o d e 1 0 0 U F C /m L ,
p a r a e l m é t o d o d e N M P u t i l i z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c ia ( S t a n d a r M e t h o d s ) .
.................................................................................................................................... 1 0 8 0 8
A nexo
1 4 : R e s u l t a d o s d e l r e c u e n t o d e m i c r o o r g a n i s m o s e n e l ra n g o d e 1 0 U F C / m L ,
p a r a e l m é t o d o d e N M P u ti li z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c i a ( S ta n d a r M e t h o d s ) .
.................................................................................................................................... 1 1 1 1 1
12
A n e x o 1 5 : C á l c u l o s r e a l iz a d o s p a r a l a e x a c t it u d d e l o s r a n g o s d e 1 0
, 300, 100 y 10
U FC … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 114
4
12
A nexo
1 6 : C á l c u l o s r e a l i z a d o s p a r a l a p re c i si ó n d e l o s ra n g o s d e 1 0
, 300, 100 y 10
U F C .............................................................................................................................. 1 1 6 6
A n e x o 1 7 : C á l c u l o s r e a li z a d o s p a r a l a i n c e rt i d u m b r e d e l o s r a n g o s d e 3 0 0 , 1 0 0 y 1 0
U F C ............................................................................................................................ 1 1 9 1 9
R E SU M E N
El
p r e s e n te
p ro y e cto
m ic ro bio ló gic o
p ara
re sid u ale s, p a ra
el
de
el
T itula c ió n
a n á li s is
C e n tro
de
de
tu v o
por
o b jeto
c o li f o rm e s
I n v e s ti g a c i o n e s
la
tota les
y
V a li d a c i ó n
y
C o n tro l
fe c ale s,
de
en
A m b ie n t a l
un
aguas
m é to d o
cla ras
(C IC A M )
de
y
la
E s c u e l a P o li t é c n i c a N a c i o n a l e n la c i u d a d d e Q u it o .
E n e l tr a b a j o , s e l l e v o a c a b o l a v a l i d a c i ó n d e l m é t o d o d e N ú m e r o m á s P r o b a b l e ( N M P )
e n C a l d o V e r d e B r i l l a n t e u ti l iz a n d o t r e s t u b o s d e e n s a y o p o r c a d a d i l u c i ó n . L a s e l e c c i ó n
y v a l i d a c i ó n d e l m é t o d o d e a n á li s is s e ll e v ó a c a b o e n u n p l a z o a p r o x im a d o d e 1 2 m e s e s .
D u r a n t e e l p r o c e s o d e v a l i d a c i ó n s e r e a l iz a r o n p r u e b a s p a r a e v a l u a r l o s p a r á m e t r o s d e
e x a c t it u d , p r e c i s i ó n
e i n c e rt i d u m b r e
d e la s té c nic a s s e le cc io n a d a s; la
m eto d o lo gía
se
lle v o a ca b o c o n e stá n d a res p re p ara d o s e n el la b ora torio c o n u n n ú m e ro c o n o c id o d e
m i c r o o r g a n is m o s , d e l m i s m o m o d o , p a r a e l r a n g o a lt o d e a g u a s r e s i d u a l e s s e t o m ó c o m o
e s t á n d a r e l a g u a d e l rí o M a c h á n g a r a , r e c o g i e n d o m u e s tr a s p e ri ó d i c a s p a r a l o s a n á l i s i s .
Los
r e s u lt a d o s
e stá n d a r
o b te nid o s
r e l a ti v a
y
fu ero n
m e d i a n te
la
e stu d ia d o s
d i s tr i b u c i ó n
m e d ia nte
de
el
S h a p iro
a n á li s i s
–
W ilk
de
p a ra
la
d e svia c ió n
com p ro b ar
la
n o r m a li d a d d e l o s d a t o s , p o s t e r i o r a e s t o s e r e a li z a r o n l o s c á l c u l o s r e s p e c ti v o s p a r a c a d a
p a rá m etro d e v alid a ció n .
A l f i n a l d e l p r o c e d i m i e n t o d e v a l i d a c i ó n e l a n á l i s i s e s t a d í s ti c o d e l o s r e s u l t a d o s m u e s t r a
que
e l m é to d o
u t il i z a d o
p o r e l l a b o ra t o ri o
p ro p orc io n a
re sulta d o s p re ciso s
y e x a c to s
h a s t a u n r a n g o d e 3 0 0 U F C / m L , d e l m i s m o m o d o e l p o r c e n t a je d e i n c e r ti d u m b r e d e l
m é t o d o e s t a d e n t r o d e l o s n i v e l e s a c e p t a d o s p o r l a E n t i d a d N a c i o n a l d e A c r e d it a c i ó n
( E N A C ) ; d e b i d o a l o d e s c r it o a n t e r i o rm e n te s e c o n s i d e r a a l m é t o d o V a li d a d o .
PA LA B R A S
C L A V E : v a l i d a c i ó n , c o li f o rm e s t o t a l e s y
i n c e r ti d u m b r e .
f e c a l e s , e x a c ti t u d , p r e c is i ó n
e
A B ST R A C T
T h i s p r o j e c t w a s a i m e d D e g r e e V a li d a ti o n o f a m i c r o b i o l o g i c a l m e t h o d f o r t h e a n a l y s i s
of
to tal
and
fecal
c o li f o rm s ,
in
c le ar
w a ter
and
w a ste w ate r,
for
th e
C e n tro
de
I n v e s ti g a c i o n e s y C o n t r o l A m b i e n t a l ( C I C A M ) o f t h e E s c u e l a P o li t é c n i c a N a c i o n a l i n
Q u ito .
A t
w o rk ,
w as
c arrie d
out
v a li d a ti o n
m e th o d
M ost
P ro b a ble
N u m b er
(M P N )
u sin g
B r i l li a n t G r e e n B r o t h t h re e t e s t t u b e s p e r d i l u t i o n . T h e s e l e c t i o n a n d v a l i d a t i o n o f t h e
a n a l y ti c a l m e t h o d w a s p e r f o rm e d i n a p p r o x im a te l y 1 2 m o n t h s .
D u rin g
th e
v a lida tio n
p rocess
tests
w ere
c o n d u cte d
to
e v a lu ate
th e
p ara m ete rs
of
a c c u r a c y , p r e c is i o n a n d u n c e r t a i n t y o f s e l e c t e d te c h n i q u e s , t h e m e t h o d o l o g y w a s c a r r i e d
o u t w i t h s t a n d a r d l a b o r a t o r y p r e p a r e d w it h a k n o w n n u m b e r o f m i c r o o rg a n i s m s , i n t h e
s a m e w a y f o r h i g h r a n g e w a s t e w a t e r w a s t a k e n a s s t a n d a r d M a c h á n g a r a ri v e r w a t e r ,
c o l l e c t i n g p e r i o d i c s a m p l e s f o r a n a l y s is .
T h e r e s u lt s w e r e s t u d i e d b y a n a l y z i n g t h e r e l a ti v e s t a n d a r d d e v i a t i o n a n d b y d i s t ri b u t i n g
S h a p i r o - W il k t o t e s t t h e n o r m a li t y o f t h e d a t a s u b s e q u e n t t o t h is r e s p e c t i v e c a l c u l a t i o n s
w e r e p e r f o rm e d f o r e a c h v a l i d a t i o n p a r a m e t e r .
A t t h e e n d o f t h e v a l i d a t i o n p r o c e d u r e t h e s t a t is t ic a l a n a l y s is o f t h e r e s u lt s s h o w s t h a t t h e
m e t h o d u s e d b y t h e l a b o r a t o r y p r o v i d e s p r e c i s e a n d a c c u r a t e re s u lt s t o a r a n g e o f 3 0 0
C FU
/ m L , t h e s a m e w a y t h e p e r c e n ta g e u n c e r t a i n t y o f t h e m e t h o d i s w i t h i n t h e l e v e l s
a c c e p te d
by
N a ti o n a l
A c c r e d it a ti o n
E n ti t y
(E N A C ),
because
as
d e s c ri b e d
above
is
c o n sid e re d V alid ate d m eth o d .
K E Y W O R D S : v a l i d a t i o n , t o t a l a n d f e c a l c o l i f o r m s , a c c u r a c y , p r e c is i o n a n d u n c e r t a i n t y .
IN T R O D U C C IÓ N
L a v a l i d a c i ó n d e u n m é t o d o e s u n p a s o f u n d a m e n t a l p a r a a s e g u ra r q u e l o s r e s u l t a d o s
e n t r e g a d o s p o r e l m i s m o s e a n c o n fi a b le s . C u a n d o s e r e a l i z a l a v a li d a c i ó n d e u n m é t o d o
p o r p a r te d e l l a b o r a t o ri o s e b u s c a p o d e r d e t e rm i n a r e n b a s e a u n f u n d a m e n t o e s t a d í s t i c o
q u e é s t e e s a d e c u a d o y c o n f i a b l e p a ra l o s fi n e s p re v i st o s . P o r l o t a n t o s e p u e d e d e fi n i r
v a l i d a c i ó n c o m o l a : “ v e r if i c a c i ó n d e d e t e rm i n a d o s p a r á m e t r o s d e u n m é t o d o e n l a q u e
l o s r e q u i s it o s e s p e c if i c a d o s p a r a e s t o s , d e m u e s t ra n q u e e l m é t o d o e s i d ó n e o p a r a u n u s o
p re v isto ” (V IM , 2 0 0 7).
E s i m p o r t a n t e q u e p a r a e l p r o c e s o d e v a l i d a c i ó n s e a s i g n e a u n r e s p o n s a b l e p a r a r e a li z a r
d ic h a
ta re a . D e
m an era
q u e , la
v alid ac ió n
se
efe ctú e
en
f o rm a
m etó d ic a , o rd e n a d a ,
t r a z a b l e y c o n fi a b l e .
“Las
p rim era s
v a li d a c i o n e s
r e p o rt a d a s
c o rr e s p o n d e n
a
las
de
m é to d o s
a n a l ít i c o s
q u ím ic os, te nie n d o u n e sp e cia l a u ge a c o m ie n z o s d e la
d é c a d a d e lo s 9 0 , y h a n sid o
a m p l ia m e n t e
re g ula d o re s ”
a b o rd a d as
por
d if e r e n t e s
o rg a nism os
(U n ite d
Sta te s
P h a r m a c o p e i a C o n v e n t i o n ; 1 9 9 0 ) . P o s te r i o r m e n t e s e c o n s i d e r ó im p o rt a n t e l a v a li d a c i ó n
d e l o s m é t o d o s d e a n á li s is m i c r o b i o l ó g i c o y a q u e é s t o s s o n u ti li z a d o s , l a m a y o r í a d e l a s
veces, en
e l c o ntrol d e
c alid a d
de
ag uas
y
a li m e n t o s
re l a c i o n a d a s
a la
d e te c c i ó n
de
m i c r o o r g a n is m o s q u e r e fi e r e n s u c a li d a d s a n it a ri a .
A d e m á s d e p r o p o r c i o n a r r e s u l t a d o s c e r te r o s , l a v a l i d a c i ó n d e l o s m é t o d o s d e e n s a y o d e
u n l a b o r a t o r i o e s i m p o r t a n t e y a q u e l e p e r m i t e a é s t e p o d e r s e r A c r e d i t a d o , p e r m it i e n d o
d e te rm in a r sus c o m p ete n c ias p a ra re aliz ar d e term ina d o s tip os d e e n sa y o s, m e dic io n es y
c a l i b ra c i o n e s .
P o r l o t a n t o : “ l a A c r e d it a c i ó n e s e l p r o c e s o m e d ia n t e e l c u a l u n o r g a n is m o
a u toriz a d o
r e a l iz a l a a t e s t a c i ó n d e t e r c e r a p a r t e d e l a c o m p e t e n c i a d e l o s O r g a n i s m o s d e E v a l u a c i ó n
d e l a C o n f o rm i d a d , ( O E C ) . L a a u t o r i d a d d e u n o r g a n i s m o d e a c r e d i t a c i ó n g e n e r a lm e n t e
s e d e r i v a d e l g o b ie r n o ” ( O A E , 2 0 0 5 ) .
1
“ E l O r g a n i s m o d e A c r e d it a c i ó n d e b e s e r u n a e n t i d a d s i n fi n e s d e l u c r o e i n t e g r a r s e y
fu n c io n a r d e a c u e rd o c o n lo e s ta ble cid o e n la s n o rm a s d e l S iste m a” (V á z q u e z , 2 0 0 3 ).
En
Ecuador
O rg a n ism o s
el
de
O rg a nism o
E v alu a ció n
en cargad o
de
la
de
la
C a l if i c a c i ó n
C o n form ida d ,
es
el
y
A c r e d it a c i ó n
O rg a nism o
de
de
lo s
A c r e d it a c i ó n
E c u a to ria n o (O A E ).
S e g ú n e l O A E , a e s c a l a i n t e r n a c i o n a l s e e s ta b l e c e l a a c r e d it a c i ó n c o m o h e r ra m ie n t a p a r a
g e n e r a r c o n f i a n z a s o b r e l a a c t u a c i ó n d e u n ti p o d e t e r m i n a d o d e o r g a n i z a c i o n e s , q u e s e
d e n o m in a n d e m a n e ra g e n era l O rg a nism o s d e E v alu a c ió n d e la C o n fo rm id a d (O E C ) y
q u e a b a rc a a lo s L a b o ra torio s d e e n s a y o , L a b ora torio s d e C alib rac ió n , O rga n ism o s d e
c e r t if i c a c i ó n , O r g a n i s m o s d e I n s p e c c i ó n .
V ázquez,
2003,
m e n c io n a
a lg u n os
b e n eficio s
q ue
o fr e c e
la
A c r e d it a c i ó n
de
un
L a b o r a t o ri o , y e n tr e e ll o s s e e n c u e n t ra n :
-
R e d u c c i ó n d e r i e s g o s , p u e s p e r m i t e a l l a b o r a t o ri o d e t e rm i n a r s i e st á r e a l i z a n d o
s u t r a b a j o c o rr e c t a m e n te y d e a c u e r d o a l a s n o r m a s a p r o p ia d a s .
-
C o m p r o m is o
de
to d o
e l p e r s o n a l d e l l a b o ra t o ri o
con
e l c u m p li m i e n t o
de
lo s
re q u isito s d e lo s clie nte s .
-
M e j o r a c o n t i n u a d e l s i s t e m a d e g e s t i ó n d e l la b o r a t o r i o .
-
R e c o n o c i m ie n t o
in tern a c io na l,
p or
m e d io
de
los
a c u erd o s
de
m ucho
r e c o n o c im i e n t o e n tr e l o s o r g a n is m o s d e a c r e d it a c i ó n d e l o s d i s t i n t o s p a í s e s .
-
M e j o r a d e l a im a g e n e i n c r e m e n t o d e l a c o n f i a n z a y s a ti s f a c c i ó n d e l o s c li e n te s .
-
A cceso
c o sto
de
a
nuevos
los
c lie n te s, p u e s
fa bric a nte s
y
e l re c o n o c im i e n t o
e x p orta d ore s
in tern a c io na l d ism in u y e
a l re d u cir o
elim in a r la
n e c esid a d
el
de
r e a l iz a r p r u e b a s e n o tr o p a ís .
E l p r e s e n te
p ro y e cto
se
d e s a r r o ll ó
en
los
l a b o ra t o ri o s
d el C e n tro
d e I n v e s ti g a c i ó n
y
C o n t r o l A m b i e n t a l ( C I C A M ) d e l a E s c u e l a P o l it é c n i c a N a c i o n a l ( E P N ) e n l a c i u d a d d e
Q u ito , E c u a d o r.
2
E l C IC A M
p r e s t a s e r v i c i o a l p ú b li c o d e s d e 1 9 9 5 , o f r e c e s e r v i c i o s d e a n á l i s i s , s o p o r t e
t é c n i c o y c a p a c it a c i ó n a l a i n v e s t i g a c i ó n y a l a i n d u s t ri a ; y e s u n l a b o r a t o r i o A c r e d i t a d o
p o r el O A E d esd e m arzo de 2 0 0 7 .
S in
em b arg o
m o tiv o
se
no
v io
d isp o n e
de
re le va n te
m é to d os
v a li d a r
un
de
ensayo
m éto d o
m ic ro bio ló gic o s
m icro b ioló g ic o
v a li d a d o s , p o r e s t e
p ara
la
d e te c ció n
de
c o l i f o r m e s t o ta l e s y f e c a le s e n a g u a s c l a r a s y r e s i d u a l e s .
P o r t a l m o ti v o
ensayo
y
u ti l iz a d o s
en
base
a lo
c it a d o
a n t e ri o r m e n t e l a
p o r e l l a b o ra t o ri o , c o n t e m p l a n
v alid a ció n
r e p r o d u c i b i li d a d
d e lo s
y
m é to d o s
de
c o r r o b o ra c i ó n
de
d a t o s y p o r c o n s e c u e n c ia l a s a t is f a c c i ó n d e l c l ie n t e .
E l C e n t r o p o d r á b ri n d a r u n m e j o r s e r v i c i o a l o s u s u a ri o s , p r o p o r c i o n a n d o d a t o s p r e c i s o s
y
re su lta d os
a n á lisis
de
c o n fia ble s
c oliform e s
m e d i a n te
tota les
y
la
v a li d a c i ó n
fe c ale s,
en
d el
aguas
m é to d o
c lara s
i m p l e m e n ta c i ó n d e l p r o t o c o l o e s t a b l e c i d o p a r a d i c h o a n á li s i s .
3
y
m ic ro bio ló gic o
resid u ale s;
a sí
p ara
el
com o
la
C A P ÍT U L O I
A N T E C E D E N T E S
1 .1 J u s t i fi c a c i ó n
S e g ú n R o m á n y J a r a ( 2 0 0 2 ) , e l E c u a d o r e s u n o d e l o s p a í s e s c o n m a y o re s r e se r v a s d e
a g u a e n A m é r i c a d e S u r . E l p a í s c u e n ta c o n u n g r a n n ú m e r o d e f u e n t e s d e a g u a s c l a ra s y
d e n t r o d e e s ta s s e e n c u e n t r a n : rí o s , v e r t ie n t e s , a g u a s s u b t e r r á n e a s , t o m a n d o e n c u e n t a
q u e u n a d e l a s p r i n c i p a l e s e s la p r e c i p i t a c i ó n y a q u e E c u a d o r p r e s e n t a e n p r o m e d i o 2 0 0 0
m i lí m e t r o s c ú b i c o s .
M e n c i o n a n t a m b i é n q u e l a im p o r ta n c i a d e m a n t e n e r l i b re d e c o n t a m i n a c i ó n la s f u e n t e s
d e a g u a c l a r a r a d i c a e n q u e l a d i s p o n i b il i d a d d e a g u a d u l c e p o r h a b i t a n t e p o r a ñ o , e n e l
Ecuador es
c u atro
v e c es
m ás
qu e
e l pro m e dio
a
n i v e l m u n d i a l ( 7 .4 2 0
m 3
/ hab
vs.
2 8 .4 0 0 m 3 / h a b ) .
T a m b ié n
re sid u al
es
a
im p o rt a n t e
a q u e ll a
que
to m ar
re c ibe
en
c u e n ta
d esech os
la s
aguas
re sid u ale s.
h u m a n o s, a nim ale s
e
“Se
d e n om in a
i n d u st ri a l e s
y
agua
p re s e n t a
d e t e r i o r o d e s u s c a r a c t e r ís ti c a s f ís i c a s , q u í m ic a s o b i o l ó g i c a s ” ( B o rj a y S u a r e z , 2 0 0 1 ) .
L o s p r i n c i p a l e s ti p o s d e a g u a r e s i d u a l q u e s e e n c u e n tr a e n e l p a í s s o n : a g u a s n e g r a s
d o m e s ti c a s ,
agu as
n egras
i n d u s tr i a l e s ,
a g u as
n e g ras
sa nitaria s
y
aguas
re sid u a le s
c o m b in a d as.
Es
n e c e s a ri o
re aliza r
un
a n álisis
m icro b ioló g ic o
de
aguas
cla ra s
y
r e s i d u a le s
p ara
d e t e r m i n a r s i é s t a s c u m p l e n c o n l a s n o r m a s y p a r á m e t r o s re q u e r i d o s p a r a s u u s o . B o r ja y
S u arez,
(2 0 0 1 ),
pla n te a n
que
el
m ejo r
m é to d o
p ara
la
e v alu a c ió n
de
la
p rese n c ia
m i c r o b i o l ó g i c a d e u n a f u e n te d e a g u a , e s e l u s o d e o r g a n i s m o s i n d i c a d o r e s ; e s t o s e d e b e
a
la
f a l ta
de
p r o c e d im i e n t o s
d irec to s
de
p ru eb a
c a p ac e s
de
d e te cta r y
c u a n ti fi c a r e l
e s p e c t r o t o t a l d e l o s p a t ó g e n o s e i d e n t if i c a r s u s f u e n t e s .
D e n t r o d e l o s o r g a n i s m o s q u e a y u d a n a d e te r m i n a r e l e s t a d o d e l a g u a s e e n c u e n t r a n :
c o l i f o r m e s t o t a l e s y f e c a l e s ; e l g r u p o c o li f o r m e e s t á f o rm a d o p o r l o s s i g u i e n t e s g e n e r o s :
4
E s c h e r i c h i a , K l e b s i e ll a , E n t e r o b a c t e r
y
C i tr o b a c t e r ;
e n c o ntra n d o
a
E s c h e ric h ia
c o li
c o m o s u m a y o r r e p r e s e n ta n t e .
“ L a d e t e r m i n a c i ó n d e m i c r o o r g a n is m o s e n e l a g u a e s d e g r a n i m p o r t a n c i a y a q u e e s t o s
son
re sp o n sa b les
de
un
g ran
n ú m ero
de
en ferm ed ad es,
p rinc ip alm e nte
i n t e s ti n a l e s
( d i s e n t e rí a ) , p u d ie n d o o c a s i o n a r g r a n d a ñ o a l a s a l u d h u m a n a ” ( A tl a s , 2 0 0 2 ) .
P o r e s t e m o t i v o e s i m p o r t a n t e e l e g i r , d e t e rm i n a r y v a l i d a r u n m é t o d o m ic r o b i o l ó g i c o
p a r a e l a n á l i s i s d e m u e s tr a s d e a g u a s c l a r a s y r e s i d u a l e s . P a r a l a e le c c i ó n d e l m é t o d o a
v a l i d a r e l l a b o ra t o ri o d e b e t o m a r e n c u e n t a a q u e l q u e s e a d a p t e m e j o r a s u s o b je t i v o s y
p o s t e ri o r m e n t e d e b e s e r d e b i d a m e n t e d o c u m e n t a d o .
E l p r e s e n t e p r o y e c t o b u s c a v a l i d a r u n m é t o d o d e e n s a y o m i c r o b i o l ó g i c o p a r a e l a n á li s i s
de
aguas
c la ra s
y
re sid u ale s, q u e
p e rm ita
d e m o s t ra r q u e
é ste
es
c o n f ia b l e , e fi c a z
y
e f i c ie n t e .
1 .2 O b j e ti v o s
1 .2 .1
O b j e ti v o G e n e r a l
V a l i d a r u n m é t o d o m i c r o b i o l ó g i c o p a r a e l a n á li s i s d e c o l i f o r m e s t o t a l e s y f e c a l e s e n
aguas
c la ras
y
re sid u ale s,
p a ra
el
C e n tro
de
I n v e s ti g a c i o n e s
y
C o n tro l
A m b ie nta l
( C I C A M ) d e l a E s c u e l a P o l it é c n i c a N a c i o n a l .
1 .2 .2
O b j e ti v o s E s p e c íf i c o s
D e f i n i r e i d e n t i fi c a r l o s m é t o d o s e x i s t e n t e s p a r a e l a n á l is i s m i c r o b i o l ó g i c o d e
c o l i f o r m e s t o ta l e s y f e c a le s e n a g u a s c l a r a s y r e s i d u a l e s .
S e le c c io n ar
y
v alid ar
m e d ia nte
la
f a c t i b i li d a d
loc a l
un
m éto d o
de
a n á li s i s
m i c r o b i o l ó g i c o p a r a c o l if o rm e s t o t a le s y f e c a l e s e n a g u a s c la r a s y r e s i d u a l e s .
5
E v a lu a r
lo s
re sulta d o s,
de finir
la
g e s ti ó n
c o n d i c i o n e s d e l C e n t r o d e I n v e s ti g a c i o n e s
E s c u e l a P o li t é c n i c a N a c i o n a l .
6
y
m eto d o lo gía
a p ro pia d a
p ara
la s
y C o n t r o l A m b i e n ta l ( C I C A M ) d e l a
C A P ÍT U L O II
M A R C O T E Ó R IC O
2 .1 G e n e r a li d a d e s
“ E l a g u a e s u n l í q u i d o i n c o l o r o , i n o d o r o e i n s í p i d o q u e h i e r v e a 1 0 0 ° C (a u n a a t m ó s f e r a
d e p re sió n ) y s e c o n ge la a 0 ° C , e stá c om p u e sta p o r d o s áto m os d e hid ró g e n o y u n o d e
O ) y s u p e s o m o l e c u l a r p r o m e d i o e s 1 8 g / m o l” ( A r c e , 2 0 0 6 ) . S e g ú n G l y n n
o x íg e n o (H
2
(1 9 9 9 ), es
e l c o m p o n e nte p rin cip a l d e la m a teria v iv a , y a q u e , e s in disp e n sa ble p a ra la
s u p e r v i v e n c i a d e t o d a s l a s f o r m a s d e v i d a q u e s e c o n o c e n , c o n s t it u y e d e l 5 0 a l 9 0 % d e l a
m a sa d e lo s o rg a nism o s v iv o s y se la p ue d e e n c o ntra r e n esta d o líq uid o , sólid o (h ielo ) o
g aseo so (v ap or).
E l a g u a ti e n e u n g r a n n ú m e r o d e f u n c i o n e s b i o l ó g i c a s b a s a d a s e n s u c a p a c i d a d fí s i c a
p ara
tr a n s p o rt a r s u s t a n c i a s , d i s o l v e r
otra s
y
m a n te n erla s
ta nto
en
so luc ió n
com o
en
s u s p e n s i ó n c o l o i d a l y t a m b i é n e n s u r e a c t i v i d a d q u í m i c a , a l i n t e r v e n i r e n l a f o t o s í n te s i s
y e n m u c h a s re a c c i o n e s .
A s i m i s m o , A r c e e n e l 2 0 0 6 , i n d i c a q u e e l a g u a e s u n m e d i o e n e l c u a l p u e d e n p r o l if e r a r
l o s m i c r o o r g a n i s m o s , t a l e s c o m o b a c t e r i a s y p r o t o z o a ri o s d e v i d a li b r e ; o b i e n , s e r u n
v e h íc u lo
h e lm into s
p ara
en
la
su
t r a n s m is i ó n
fa se
de
p a rá sito s ,
i n f e c ti v a . L a
com o
p re se n c ia
de
lo s
esta s
p r o t o z o a ri o s
f o rm a s
de
p a tó g e n o s
vid a
y
re p re se nta
lo s
un
p e l i g r o p a r a la s a l u d p ú b l i c a y p o r e ll o d e b e n c o n t r o l a r s e .
2 .1 .1
P r o p i e d a d e s f í s i c o – q u ím i c a s
D e b i d o a l a f o r m a c i ó n d e e s t r u c t u r a s t r i d i m e n s i o n a l e s m e d i a n te p u e n t e s d e h i d r ó g e n o , e l
a g u a m u e st r a p r o p i e d a d e s m u y p a rt i c u l a r e s .
El
c a lo r
de
d i e l é c t ri c a s ,
v a p o ri z a c i ó n ,
con
por
el
m ucho
c alo r
m uy
e s p e c íf i c o ,
p e c u l ia r e s
se m e ja nte s.
7
y
su
c o n d u c ti v i d a d ,
m uy
d is ti n t a s
a
sus
la s
de
p ro pie d a d e s
m o lé c u l a s
B a d u i, 2 0 0 6 , se ñ a la
que
e l ele v a d o
c alo r
late n te
de
v a p oriz ac ió n
( 2 ,2 6 0
k J/g
o
539
k c a l / g ) , r e p r e s e n t a l a e n e r g í a n e c e s a r i a p a r a t ra n s f o rm a r u n k i l o g r a m o d e a g u a lí q u i d a e n
v a p o r a 1 0 0 ° C , l a q u e s e r e q u i e r e p a r a r o m p e r l a s f u e r z a s a tr a c ti v a s , d e t a l m a n e r a q u e
la s m olé c u las in d ivid u a les p u e d a n e sc a p ar y p a sa r a la fa se g a se osa . E l p ro c e so in v e rso
a l d e la v a p o riz a ció n , la c o n d e n sa ció n , e s e x o té rm ic o y lib era u n a c a n tid a d se m e ja nte d e
c a l o r . D e l m is m o m o d o , e l a l t o c a l o r e s p e c í f ic o d e l a g u a ( 4 ,1 8 6 k J / g ° K
o 1 c a l/g °C a
2 0 ° C ) i n d i c a l a n e c e s i d a d d e a p li c a r m u c h a e n e r g í a p a r a i n c re m e n t a r s u t e m p e r a t u r a , y a
q u e u n a b u e n a p r o p o r c i ó n s e c o n s u m e e n v i b ra r l a m o l é c u l a d e b i d o a s u g r a n m o m e n t o
d i p o l a r y a r o m p e r l o s p u e n t e s d e h i d r ó g e n o , p e r o n o a c a l e n t a rl a . C o m o d i s o l v e n t e , e l
agua
tie ne
una
g ra n
infin ida d
de
a plic a cio n e s e n
l a n a t u ra l e z a , e x i s t i e n d o d il u c i o n e s
c o m o o c é a n o s, m a re s, la g o s, río s, etc .
T A B L A 1 C a ra cterística s física s d el a g u a cla ra
C a r a c t e r í s ti c a s f í si c a s
E xpresadas com o
V a lo r m á x im o a ce p ta b le
C o lo r a p a re nte
U n i d a d e s d e P l a t i n o C o b a lt o
15
(U P C )
O lo r y sa b o r
A c e p t a b l e o n o a c e p t a b le
A c e p ta b le
T u rb ie d a d
U n id a d e s n e felo m etrica s d e
2
tu rb ie d ad (U N T )
F u en te: C arrillo , 2 0 0 8
T A B L A 2 C a ra cterística s q u ím ica s d e su sta n cia s p r es en tes en el a g u a cla ra
C o m p u e sto s q u ím ic o s q u e a fe cta n la
E x p r e sió n
sa lu d h u m a n a
V a lo r m á x im o a ce p ta b le
(m g /L )
C a rb o n o o rg á n ic o to tal
C O T
5 .0
N i t r it o s
N O
2
0 .1
N itra tos
N O
3
10
F lu o ru ro s
F
F u en te: C arrillo , 2 0 0 8
8
1 .0
2 .1 .2
D istr ib u c ió n d el a g u a e n la T ier r a
T A B L A 3 D istrib u ció n d el a g u a e n la tierr a
3
S itu a c ió n d e l a g u a
C a n tid a d d e a g u a (k m
)
P o rcen ta je (% )
O céan o s y m ares
1370000000
9 3 ,8 4
C o rte z a terre stre
60000000
4 .1 1
G la c ia res y n ie v e s pe rp etu a s
29170000
2
Lagos
750000
0 .0 5
H u m e d a d d e l su elo
65000
0 .0 0 4 5
V a p o r a t m o sf é ri c o
14000
0 .0 0 0 9 6
R ío s
1000
0 .0 0 0 0 7
F u en te: A rce, 200 6
2 .2 E l a g u a c o m o R e c u r s o
“ E l a g u a e s u n b i e n d e p r im e ra n e c e s i d a d p a r a l o s s e r e s v i v o s y u n e l e m e n t o n a t u r a l
i m p r e s c i n d i b l e e n l a c o n fi g u r a c i ó n d e l o s s i st e m a s m e d i o a m b i e n t a l e s ” ( L ó p e z , 2 0 0 6 ) . E l
h o m b r e h a i d o a u m e n ta n d o s u s r e q u e r im i e n t o s , p e r o e s u n r e c u r s o li m i t a d o p u e s t o q u e l a
c a n t i d a d d is p o n i b l e v i e n e c o n d ic i o n a d a p o r s u d e s i g u a l d i s tr i b u c i ó n e n e l e s p a c i o y e n e l
tie m p o .
C e r c a d e d o s m i l m i l l o n e s d e p e r s o n a s e n e l m u n d o v i v e n e n p a ís e s c o n e s tr é s h í d r i c o
con
un
consum o
s u p e ri o r a l 1 0 %
de
sus
rec u rso s re n o v a b les
de
agua
d u lc e . (A tla s,
2 0 0 2 ).
P o r o tro la d o e l a g u a e s u n re c urso n atu ral re n o v a ble y a q u e , se re g e n era c o ntin u am e n te
m e d ia nte e l cic lo d el a g u a o c iclo h idro ló gic o . E n 1 9 9 9 , G ly n n , in d ic a q u e , el a g u a c o m o
re c u rs o p u e d e c o ns id era rs e d es d e d o s p u n tos d e v ista : p or la c a ntid a d dis p o n ible y p o r s u
c a l i d a d ; s i n e m b a r g o l a s d o s p a rt e s s o n e n r e a li d a d u n a s o l a , y a q u e , s i s e d is p o n e d e
a g u a p e r o é s t a e st á c o n t a m i n a d a , n o p u e d e c o n s i d e ra r s e p o t a b l e ; y e q u i v a l e a n o t e n e r ,
p o r e s t e m o ti v o l a s o s t e n i b il i d a d f u t u r a d e l a g u a d e p e n d e rá d e c ó m o s e p l a n i fi q u e y
g e stio n e dic h o rec u rso .
9
2 .2 .1
F u en tes d e A g u a
El agua
se
e n c u e n t ra
so b re la
T ie r r a e n
d iv erso s lu g a res: e n la
atm o sfe ra (v a p o r d e
a g u a ) , e n e l a ir e ( n u b e s ) , e n e l s u b s u e l o o a g u a s u b t e rr á n e a , q u e f l u y e a l a s u p e r fi c ie p o r
l o s m a n a n t i a l e s , e n l a s u p e r fi c i e e n f o rm a d e la g o s , rí o s y g la c i a r e s , e n e l m a r ( a g u a
s a l a d a ) . S e g ú n G u e rr e r o , 1 9 9 1 , e l a g u a c i rc u l a c o n ti n u a m e n t e a tr a v é s d e l i n te r m i n a b l e
c ic lo
h id roló g ic o
de
pre c ipita ció n
o
lluv ia ,
e s c u rr im i e n t o ,
i n f il t r a c i ó n ,
re te nc ió n
o
a l m a c e n a m ie n t o , e v a p o r a c i ó n , p r e c i p i t a c i ó n , y a s í c o n ti n u a m e n t e .
A t l a s , 2 0 0 2 , d e fi n e c o m o f u e n t e d e a b a s t e c i m i e n t o d e a g u a “ a q u e l p u n t o o f a s e d e l c i c l o
n a t u r a l d e l c u a l s e d e s v í a o a p a r t a e l a g u a , t e m p o r a lm e n te , p a r a s e r u s a d a , re g r e s a n d o
f i n a lm e n te a l a n a t u r a l e z a ” . E s t a a g u a p u e d e o n o v o l v e r a s u f u e n t e o r i g i n a l , l o c u a l
d e p e n d e d e l a f o rm a e n q u e s e d is p o n g a d e l a s a g u a s d e d e s p e r d i c i o . E n a l g u n o s l u g a r e s
h a l l e g a d o a s e r m u y im p o rt a n t e l a d i s m i n u c i ó n d e l o s m a n t o s a c u íf e r o s s u b t e r r á n e o s
c a u sa d a p o r la a c c ió n d e l h om b re .
P ara
el
a b a s t e c im i e n t o
p ú blic o
de
agua
se
usan
c o m ú nm e n te
ta nto
lo s
re c u r s o s
s u p e r f ic i a l e s c o m o l o s s u b te r r á n e o s . “ L a s r a z o n e s p a r a e l e g i r u n o u o t r o s o n m u c h a s , e
i n c l u y e n c o n s i d e r a c i o n e s t a l e s c o m o l a c a l i d a d , l a c a n ti d a d d i s p o n i b l e , l a s e g u r i d a d d e l
a b a s t e c i m i e n t o y e l c o s t o d e c o n s tr u c c i ó n y o p e r a c i ó n ” ( G u e rr e r o , 1 9 9 1 ) .
2 .2 .2
C l a s i f ic a c i ó n d e l A g u a
E l a g u a p u e d e s e r c l a s i fi c a d a d e s d e m u c h o s p u n t o s d e v is t a , c o m o s o n : s u o ri g e n , u s o ,
c a n tid a d d e m in era les, y
pro p ie da d e s
p ara
e l c o n s u m o , e n t re
otro s. D e b id o
a que
su
c l a s if i c a c i ó n e s m u y e x t e n s a , e n e l p re s e n te t r a b a j o s e d e s c r i b i r á l a c l a s i fi c a c i ó n d e l a g u a
desde
dos
p u n to s
de
vista , q ue
son:
el
agua
en
la
n atu rale z a
y
el
agua
en
el
us o
a n t r o p o c é n t r ic o .
2 .2 .2 .1 E l a g u a e n l a n a t u r a l e z a
E x i s t e n u n s i n n ú m e r o d e f u e n te s d e a g u a e n l a n a t u r a l e z a , s i n e m b a r g o e s t a s p u e d e n s e r
a g r u p a d a s d e a c u e r d o a s u f u e n t e d e o ri g e n p r i n c i p a l . D e b i d o a e s t o s e p u e d e c l a s i fi c a r
e l a g u a d e f u e n t e n a t u r a l s e g ú n s u o ri g e n c o m o s e i n d i c a a c o n t i n u a c i ó n :
10
A g u a a t m o s f é r ic a
“ L a h u m e d a d d e l a s n u b e s q u e s e p r e c i p i t a c o m o n i e v e , g ra n i z o y l l u v i a , c o n s t it u y e e l
a g u a a t m o s fé r ic a ” ( P e l c z a r , 1 9 7 7 ) . L a f l o r a m i c r o b i a n a d e e s t e ti p o d e a g u a p r o v i e n e d e l
a i r e ; é s t e e s “ l a v a d o ” p o r e l a g u a a tm o s f é r i c a , q u e c a r g a c o n l a s p a rt í c u l a s d e p o l v o e n
l a s c u a le s e s t á n l o s m i c r o o r g a n i s m o s .
A g u a su p e r fic ia l
“ L a s a g u a s s u p e r f i c i a le s d e r í o s y l a g o s s o n f u e n t e s im p o rt a n t e s d e a b a s t e c im i e n t o d e
a g u a s p ú b l i c a s e n v i rt u d d e l a s a lt a s t a s a s d e e x t r a c c i ó n q u e s o p o r t a n n o r m a lm e n t e , s i n
e m b a r g o e s ta s f u e n t e s d e a g u a s o n m u y s u s c e p t i b l e s d e c o n t a m i n a c i ó n ” ( G l y n n , 1 9 9 9 ) .
P o r l o g e n e r a l , l a s g r a n d e s c i u d a d e s d e p e n d e n d e a b a s t e c im i e n t o s s u p e r fi c ia l e s , y e n l a
m a y o r í a d e l o s c a s o s l a s a g u a s s u p e r f i c i a l e s , y a s e a n d e c o r ri e n te s , l a g o s o e m b a l s e s , n o
so n se g u ra s p ara e l c o n su m o h um a n o y re q uie re n de trata m ie n to .
E n 1 9 9 1 , G u e r r e r o , r e a l i z a u n a c l a s i fi c a c i ó n d e l a s a g u a s s u p e rf i c i a l e s , i n c l u y e n d o c o m o
p rin c ip ale s la s q u e se m e n cio n a n a c o ntin u a ció n :
-
R ío s:
lo s
ríos
nacen
s u b t e r rá n e a s
o
n a c im ie n to
sig u e n
a b a ste cim ie n to s
recu rso s
p ara
en
m a n a n ti a l e s
l u g a re s
de
su
en
la
en
lo s
que
p e n die n te
agua
de
lo s
tratam ie nto .
lo s
se
d el
rí o s
La
en
que
su rgen
fu n d e n lo s
terre n o
r e q u ie r e n
t u rb i e d a d ,
la
s u p e r fi c i e
g la cia res. A
h a sta
po r lo
o
a
ll e g a r
com ú n
p a r t ir d e
al
de
e n tu rbia m ie n to ,
aguas
m ar.
los
el
su
Los
m ay o res
c o nte n id o
m in e ral y el g ra d o d e c o nta m in a c ió n va ría n c o n sid era b lem e nte d e u n d ía a otro .
-
L agos
n a tu r a le s:
e x c e p c io n alm e nte
Los
la g o s
p ued en
b u e n a , e x c e p to c e rc a d e
p r o p o rc i o n a r
sus
m árg e n e s y
agua
e n la
de
c alid a d
v e cin d a d
de
d e s c a r g a s d e d r e n a j e s o d e c o r ri e n te s f u e rt e s . A d e m á s d e n e c e s i t a r u n t r a t a m i e n t o
m í n im o ,
la
d is p o n i b il i d a d
de
c a ntid a de s
c o n s t it u y e u n a v e n t a j a d e c i s i v a .
11
de
aguas
p r á c t i c a m e n te
i li m it a d a s
-
E m b a l s e s : L a c a n ti d a d d e a g u a q u e ll e v a u n a c o rr i e n t e e s t á s u j e ta a m u y g r a n d e s
v a ria cio n e s
de un
C uando
consum o
el
día
a o tr o , a s í c o m o
de
agua
es
d u ra n t e l a s d if e r e n t e s
m ay o r,
o
in clu so
c erc a n o
ép ocas
al
d el a ñ o .
cau dal
de
la
c o r r i e n t e , p u e d e s e r n e c e s a ri o c o n s t r u ir u n a r e p r e s a , c r e a n d o a s í u n e m b a l s e p a r a
a l m a c e n a r e l a g u a d u r a n t e l a t e m p o r a d a d e l l u v i a s . L o s e m b a l s e s ti e n e n , a d e m á s ,
l a v e n t a j a d e e li m i n a r l a m a y o r p a r te d e l l o d o o e n t u r b i a m i e n t o d e l a g u a , p o r
s e d i m e n t a c i ó n , d u r a n te e l a l m a c e n a m i e n t o .
A g u a su b terrá n ea
“ L a s a g u a s s u b t e r r á n e a s s o n a q u e l l a s q u e s e h a fi l tr a d o d e s d e l a s u p e r f i c i e d e l a ti e r r a
h a c i a a b a j o p o r l o s p o r o s d e l s u e l o . L a s f o rm a c i o n e s d e s u e l o y r o c a q u e s e h a n s a t u r a d o
d e l í q u i d o s e c o n o c e n c o m o d e p ó s it o s d e a g u a s u b t e r r á n e a , o a c u í f e r o s ” ( G l y n n , 1 9 9 9 ) .
L a s b a c t e r i a s y l a s p a r tí c u l a s e n s u s p e n s i ó n s o n s e p a r a d a s d e l a g u a p o r f i lt r a c i ó n e n
v a r i o s g ra d o s s e g ú n l a p e rm e a b il i d a d d e l s u e l o y l a p r o f u n d i d a d a l a q u e p e n e tr a e l a g u a .
S e g ú n G u t i é r r e z , 2 0 0 8 , e x i s t e n d o s f u e n t e s p r i n c i p a le s d e a g u a s s u b t e rr á n e a s :
-
P o z o s p o c o p r o f u n d o s : A u n q u e n o e x i s te u n l ím it e e x a c t o q u e d i s t i n g a e n t r e
p o z o s p o c o p r o f u n d o s y p o z o s p r o f u n d o s , u s u a lm e n te s e c l a s i fi c a n c o m o “ p o c o
p ro fu n d o s”
a q u e ll o s
cuya
p rofu n d id a d
es
m en or
de
30
m e tr o s
y
com o
“ p r o f u n d o s ” c u y a p r o f u n d i d a d e s s u p e r i o r a d i c h o l ím it e .
-
M a n a n t i a l e s: L o s m a n a n t i a l e s s o n a g u a p r o f u n d a q u e a f l o r a a l a s u p e rf i c i e p o r
u n a f i s u r a e n l a s r o c a s o s u e l o p o r o s o . L o s p o z o s s e h a c e n e n t e r ra n d o u n t u b o
q u e p e n e tra h asta el n iv el d e l a g u a p ro fu n da .
Los
pozos
y
p re c a u c io n es
lo s
p ara
m a n a n t ia l e s
e v i ta r
la
p ro d u cen
agua
de
c o n tam in a ció n ,
el
i m p o rt a n c ia .
12
m uy
buena
c o n te nid o
c a li d a d ,
si
m icro b ia n o
se
no
to m a n
tie n e
2 .2 .2 .2 E l a g u a y e l h o m b r e
C o m o s e m e n c i o n a a n t e ri o rm e n t e , e l a g u a e s u n e l e m e n t o i n d i s p e n s a b l e p a ra t o d a f o r m a
d e v i d a . E x i s t e n m u c h o s a b a s t e c i m i e n t o s d e a g u a e n l a n a t u r a l e z a , c o m o r í o s , la g o s y
m a n a n ti a l e s
(m e nc io n a d o s
a n t e r i o rm e n t e ) ,
el
ser
h um an o
tom a
agua
de
e sto s
a b a s t e c i m i e n t o s y l a t r a t a s e g ú n s u s n e c e s i d a d e s , e n c o n tr a n d o a s í l o s s i g u i e n t e s ti p o s d e
agua:
A g u a p o ta b le
“ E s e l a g u a c u y a s c a r a c t e r ís ti c a s fí s ic a s , q u ím i c a s y m i c r o b i o l ó g i c a s h a n s i d o t r a t a d a s a
f i n d e g a ra n t iz a r s u a p t it u d p a r a e l c o n s u m o h u m a n o ” ( N T E I N E N 1 1 0 8 : 2 0 1 1 ) .
A g u a d e a d u c c ió n
G u t i é r r e z , e n e l 2 0 0 8 , l a d e fi n e
com o
e l a g u a p ro v e nie n te d e l a c u e d u cto ; s u
c alid a d
d e p e n d e d e s u o r i g e n y d e l o s t r a ta m i e n t o s a l o s q u e h a s i d o s o m e t i d a , d e b e s e r u n a g u a
p o ta b le . E n
l a i n d u st ri a , u n o
d e su s p rinc ip ale s
uso s
e s e l la v a d o d e m a teriale s y
la
lim pie z a d e difere n te s á re a s.
A g u a a b la n d a d a o su a v iz a d a
“ E s u n a g u a c o n u n e s c a s o o n u l o c o n t e n i d o d e h i e r r o y m e t a l e s a l c a li n o t é r r e o s q u e n o
c o r t a e l j a b ó n , n i d e j a d e p ó s i t o s e n l o s r e c i p i e n t e s e n q u e s e l e h i e rv e ” ( A t la s , 2 0 0 2 ) . A
e s t a a g u a s e l e h a r e m o v i d o s u d u r e z a p r o d u c i d a p o r l a p r e s e n c i a d e s a le s c o m o s u lf a t o s ,
c lo ru ro s
y
p r e c i p it a c i ó n
de
io n e s
com o
u t il i z a n d o
ca l
el
o
c alc io
d ió x id o
y
de
el
m a g n esio .
c arb o n o
y
por
U su alm e nte
i n te r c a m b i o
se
o b ti e n e
por
c a t i ó n ic o .
El
a b l a n d a m i e n t o d e l a g u a e s n e c e s a r i o p o r q u e e l a g u a d u r a r e d u c e l a e fi c i e n c i a d e l j a b ó n y
c a u s a l a f o rm a c i ó n d e d e p ó s i t o s m i n e r a l e s q u e s o n d i f íc i le s d e r e m o v e r . E n l a i n d u s t r i a
s e u t il i z a e n l o s s i s t e m a s d e e n f r i a m i e n t o y e n e l l a v a d o d e r e c i p ie n t e s , t a m b i é n c o m o
m a t e ri a p ri m a p a r a p r o d u c i r o t r o s t i p o s d e a g u a .
13
A g u a d e s m i n e r a li z a d a o d e s i o n i z a d a
C o m o s u n o m b r e l o i n d i c a , e s u n a g u a li b r e d e m i n e r a l e s o d e i o n e s q u e s e o b t i e n e p o r
un
m é to d o
b asa d o
en
la
rem o c ió n
de
im pu re z a s, m e dia n te la
u ti li z a c i ó n
de
resin a s
s i n t é t i c a s q u e ti e n e n a fi n i d a d p o r l a s s a l e s i o n i z a d a s d i s u e lt a s .
A gua de proceso
“ E s e l a g u a q u e p u e d e s e r u ti li z a d a c o m o m a t e ri a p ri m a p a r a l a e l a b o r a c i ó n d e d i v e r s o s
p ro d u c to s ”
(A rce,
2006).
U s u a lm e n te
es
un
agua
o b te n id a
por
ó s m o sis
i n v e rs a
o
d e s t il a c i ó n .
A g u a s r e sid u a le s
El
agua
resid u al
“es
a q u e ll a
b io ló gic a s;
d ic h o
que
p re se nta
q u ím ica s
o
e le m e nto
sólid o , líq uid o , g ase o so , ra d io ac tiv o
p a r c i a l o t o t a lm e n t e s u u s o
d e t e ri o r o
se
d e t e ri o r o
puede
o
dar
en
p or
c u alq u ier
sus
la
c a r a c t e rí s ti c a s
influ e n cia
otra
de
f ís i c a s ,
c u alq u ie r
s u s ta n c i a , q u e
lim ite
p a r a fi n e s d o m é s ti c o s , i n d u s tr i a l e s , a g r í c o l a s , e n t r e o t r o s ”
( 0 r ti z , 1 9 8 9 ) .
E x iste n v ario s tip o s d e a g u a s resid u ale s:
-
A g u a s r e s i d u a l e s c o m b i n a d a s : s e o r i g i n a n d e l a m e z c la d e a g u a s d e d e s e c h o d e
o r i g e n s a n i t a r i o y a g u a s q u e s e e n c u e n t r a n e n l a s u p e r fi c i e .
-
A guas
n eg ras
d o m e stic as :
se
d eriv a n
p ri n c i p a l m e n t e
de
v ivie n d a s,
e d i fi c i o s
c o m e r c i a l e s , i n s t it u c i o n e s o s im i la r e s .
-
A guas
n eg ras
i n d u s t ri a le s :
son
aguas
de
desecho
con
g ran
c a n ti d a d
de
c o m p o n e n t e s p r o v e n ie n t e s d e l a i n d u s tr i a .
-
A g u a s n e g r a s s a n i t a ri a s: a g u a s q u e c o n t i e n e n d e s e c h o s h u m a n o s .
-
A g u a s d e l l u v i a : s o n a g u a s n e g r a s q u e p r o c e d e n d e l e x c e s o d e ll u v i a q u e s e f il t r a
s o b r e l a s u p e r fi c i e d e l te r r e n o ( O r ti z , 1 9 8 9 ) .
-
A g u a s r e s i d u a l e s g a n a d e r a s : e l t i p o d e c o n t a m i n a n t e v a a s e r m a te r i a o r g á n i c a y
m i c r o o r g a n is m o s . P u e d e n c o n t a m i n a r p o z o s y a g u a s s u b t e rr á n e a s c e r c a n a s .
14
-
A guas
re sid u ale s
a gríc ola s:
lo s
c o n tam in a nte s
que
c o n ti e n e n
son
m a te r i a
o r g á n i c a ( f e r ti li z a n t e s , p e s t i c i d a s ) . P u e d e n c o n t a m i n a r a g u a s s u b t e r rá n e a s , r í o s ,
m a r e s , e m b a ls e s , e t c .
-
M areas
n e gra s: la
d i r e c ta s
de
p e tró le o
m ás
causa
de
h idro c a rb u ros,
i m p o rt a n te s
e sta s
sie n d o
la s
es
e l v e r ti d o
la s
fu e n tes
c o n s ti t u i d a s
de
p e tr ó l e o
de
c o n tam in a ció n
p o r la s
d e bid o
o p e rac io n e s
de
a
p érd id a s
m a ri n a
por
l im p i e z a
y
l a s tr a d o d e l a s p l a n t a s p e t r o lí f e r a s . ( C a rr a s c o , 2 0 0 4 ) .
E l a g u a s e p u e d e s o m e t e r a d if e r e n t e s tr a t a m i e n t o s p a ra e l im i n a r s u s im p u r e z a s q u ím i c a s
y m i c r o b i o l ó g i c a s . P a ra l o g r a r e s t e o b j e ti v o , e x i s te n p la n t a s d e t r a t a m i e n t o q u e p e r m i t e n
o b t e n e r e l a g u a p o t a b l e q u e p u e d e s e r u t il i z a d a p a ra e l c o n s u m o y p o r o t ra p a rt e m u c h a s
i n d u s t ri a s t i e n e n s u p r o p i o si s t e m a d e t r a t a m i e n t o p a r a o b t e n e r e l a g u a a d e c u a d a p a r a l a
e la b o ra ció n d e su s pro d u c to s.
2 .3 C a l i d a d d e l a g u a p a r a u s o y c o n s u m o h u m a n o
S e g ú n F a i r , 1 9 8 9 , l a c a l i d a d d e l a g u a s e r e f i e re a la s c o n d ic i o n e s e n q u e s e e n c u e n tr a e l
a g u a r e s p e c t o a s u s c a r a c t e r í s t i c a s f ís i c a s , q u í m ic a s y b i o l ó g i c a s , e n s u e s ta d o n a t u r a l o
d e sp u é s d e se r altera d a s p or e l a c cio n a r h um a n o .
S e c o n sid e ra q u e el a g u a e s d e b u e n a
c a l i d a d c u a n d o e s t á e x e n t a d e s u s t a n c i a s y m i c r o o r g a n i s m o s q u e s e a n p e li g r o s o s p a r a l o s
c o n s u m i d o r e s y e s t á e x e n t a d e s u s t a n c i a s q u e t r a n s m i ta n s e n s a c i o n e s d e s a g r a d a b l e s p a r a
e l c o n s u m o , c o m o e l c o l o r , e l o lo r , e l s a b o r o t u r b i e d a d .
L a im p o rta n cia d e la c a lida d d e l a g u a ra d ic a e n q u e e s u n o d e lo s p rin c ip a les m e d io s
p a r a la tr a n s m i s i ó n d e m u c h a s e n f e r m e d a d e s q u e a f e c t e n a l s e r h u m a n o . L e n n t e c h , e n e l
2 0 0 6 , c ita c om o fa cto re s q ue d e term in a n la ca lida d d e l a g u a a lo s sig u ie nte s:
-
F a c to re s
fí s i c o s :
la
c alid a d
del agua
m o d i fi c a d a
p o r s u sta n c ias
puede
no
ser
t ó x i c a , p e r o c a m b i a e l a s p e c t o d e l a g u a , e n t re e l la s l o s s ó l i d o s e n s u s p e n s i ó n , l a
t u r b i d e z , e l c o l o r y la t e m p e r a t u r a .
15
-
F a c t o r e s q u ím i c o s : l a s a c ti v i d a d e s
i n d u s t ri a le s
g e ne ra n c o n tam in a ció n
al a g u a
c u a n d o h a y p r e s e n c i a d e m e t a l e s p e s a d o s t ó x i c o s p a ra l o s h u m a n o s t a l e s c o m o
a r s é n i c o , p l o m o , m e r c u ri o
y
cro m o . L a
a ctivid a d
a gríc ola
c o nta m in a
cuando
e m p l e a f e rt il i z a n t e s q u e s o n a r r a s t r a d o s h a c i a l a s a g u a s , e s p e c i a l m e n t e n i t ra t o s y
n i t ri t o s . A d e m á s , e l u s o i n a d e c u a d o d e p l a g u i c i d a s c o n tr i b u y e a c o n t a m i n a r e l
a g u a c o n su sta nc ia s to x ic as p a ra lo s h u m a n o s.
-
F a c to re s
b i o l ó g i c o s - b a c te r i o l ó g i c o s :
e x iste n
div e rsos
o rga n ism o s
que
c o n ta m in a n el a g u a . L a s b a c terias so n u n o de lo s p rinc ip ale s c o nta m in a n tes d e l
a g u a . L o s c o l i f o rm e s c o n b u e n o s i n d i c a d o r e s m ic r o b ia n o s d e l a c a l i d a d d e l a g u a .
T a m b ié n c o nta m in a n e l a g ua v irus, a lg a s, pro to z o os y h o n g o s.
2 .3 .1
E c o lo g ía d e l a g u a
T o d o s l o s o r g a n i s m o s q u e s e e n c u e n t r a n e n e l a g u a s o n i m p o rt a n t e s p a r a e l c o n t r o l d e l a
c a lid a d d el a g u a sin c o n sid e rar:
-
Si
ti e n e n
su
m e dio
n atu ral
de
vid a
en
el
agua
o
p e rt e n e c e n
a
p o b lac io n e s
t r a n si t o ri a s i n t r o d u c i d a s p o r e l h o m b r e y s u s o b r a s .
-
S i s u c r e c im i e n t o l o p r o p i c i a n l o s n u t ri e n t e s p r e s e n t e s e n e l e s c u r ri m i e n t o n a t u r a l
y e n a g u a s r e s i d u a l e s m u n i c i p a l e s , o l o i n h i b e n l o s v e n e n o s a m b i e n t a le s d e l o s
d r e n a j e s a g r í c o l a s y e f l u e n t e s i n d u s tr i a l e s .
-
S i s o n c a p a c e s d e i n f e c t a r o e n v e n e n a r a l h o m b r e y l o s a n i m a l e s s u p e ri o r e s o s i
p o s e e n l a c a p a c i d a d d e d e s tr u ir r e s i d u o s o r g á n i c o s y r e s t it u i r a l a g u a s u p u r e z a
n a t u r a l . ( F a ir , 1 9 8 9 ) .
16
T A B L A 4 A g en te s p a tó g en o s y o r g a n ism o s p ro d u cto r es d e to x in a s en el a g u a
B a c te r ia s
E sc h e ric hia
c o li,
S a l m o n e ll a ,
S h i g e ll a ,
V ib rio
c h o lera e ,
Y e rsinia
e n t e r o c o l i ti c a , C a m p i l o b a c t e r je j u n i .
V ir u s
E n t e r o v i r u s , R o t a v ir u s , A d e n o v ir u s
P ro to zo o s
G i a r d i a a , C r y p t o s p o r i d i u m , E n t a m o e b a h i s t o l y ti c a
H e lm in to s
A s c a r i s , T r i c h u r is , T a e n i a
C y a n o b a cter
A n a b a e n a , M i c r o c y s t is
F u en te: L e n n tec h
, 20 06
2 .3 .1 .1 B a c t e r i a s d e o r i g e n d e l a f u e n t e
E n 1 9 8 9 , F a i r , c l a s i f i c a d e n t r o d e t r e s g r a n d e s g r u p o s a l a s b a c t e ri a s q u e s e e n c u e n t r a n
p re se n tes
en
el a g u a:
b a c t e ri a s
n atu rale s
d e l a g u a , b a c te r i a s
d el su elo
y
b a c t e ri a s
de
o rig e n inte stin al o d e a g u a s n e gra s .
B a c te r ia s n a tu r ale s d el a g u a
D e n t r o d e e s t e g r u p o d e b a c te r i a s l a s m á s c o m u n e s s o n l a s d e l g e n e r o P s e u d o m o n a s ( P s .
f l u o r e s c e n s y P s . a e r u g i n o s a ) , e s t o s m i c r o o r g a n is m o s p r o d u c e n u n p i g m e n t o s o l u b l e e n
a g u a d á n d o l e fl u o r e s c e n c i a v e r d e . A d e m á s d e s e r b a c t e ri a s p e r j u d i c ia l e s p a r a l a s a l u d
h u m a n a , o c a s i o n a n i n c o n v e n i e n te s e n a l g u n o s p r o c e s o s i n d u s t ri a l e s , e s t o s e d e b e a q u e
s o b r e v i v e n a l o s p r o c e s o s d e p u ri f i c a c i ó n y p u e d e n s e r c a u s a n t e s d e s a b o r e s e x tr a ñ o s e n
p r o d u c t o s a l im e n ti c i o s .
B a c te r ia s d el su e lo
C u a n d o s e p r e s e n t a n l l u v i a s i n t e n s a s e i n u n d a c i o n e s s e e n c u e n t r a n m u c h a s b a c te r i a s e n
l a s a g u a s d e l a s u p e r fi c ie . N o r m a l m e n t e e s t a s b a c te r i a s n o v i v e n m u c h o t i e m p o f u e r a d e
su
a m b ie nte
n a tura l y
su
e l im i n a c i ó n
del agua
es
a c ti v a
p o r la
s e d im e n t a c i ó n
de
la
tu rb ie d ad q u e a c o m p a ña su p rese n c ia .
D e n tro d e e s p e cie s m á s c o m u n es se e n c u e ntra n las d el g é n ero B a cillus ( B . c e r e us , v a r .
m y c o i d e s y B . s u b ti l is ) .
17
M i c r o o r g a n is m o s d e o r i g e n i n t e s t i n a l
E x is te n m icro o rg a nis m os p a tó ge n o s q u e p u e d e n e sta r p re s e nte s e n el a g u a c ru d a , e n tre
lo s
m ás
i m p o rt a n te s
e n c o ntram o s:
S a l m o n e ll a
sp,
S h ig ella
sp,
c o l if o rm e s
to tale s
y
f e c a l e s , l o s c u a l e s h a n s i d o e n c o n t r a d o s e n a b a s t e c im i e n t o s d e a g u a s .
L a s b a c t e ri a s c o l i f o r m e s s o n e l p r i n c i p a l i n d i c a d o r d e l a a d e c u a c i ó n d e l a g u a p a r a u s o
i n d u s t ri a l o d o m e s ti c o . L a d e n s i d a d d e l o s c o li f o rm e s i n d i c a l a c a l i d a d s a n i t a r i a d e l a g u a
así
com o
su
g rad o
de
c o nta m in a c ió n .
A l
ser
f á c il e s
de
c o n tar
y
e n u m e rar ,
e sto s
m i c r o o r g a n is m o s s o n u n b u e n i n d ic a d o r d e l a c a li d a d d e l a g u a .
L a p r e s e n c i a d e E .c o l i e n e l a g u a p o t a b le i n d ic a u n a f a l l a e n e l tr a t a m ie n t o d e e s t a .
-
S a l m o n e ll a s p p
L a S a l m o n e l l a e s u n b a c i l o c o rt o g r a m
con
fla g e lo s
p e ri tr i c o s . E l g é n e r o
n e g a t i v o , n o e s p o r u l a d o y g e n e r a lm e n t e m ó v i l
S a lm o n ella
c o n ti e n e
unas
2000
cepas
d i s ti n ta s
de
a c u e rd o a su s a ntíg e n os O y H .
Se
c a ra c teriz a
bio q u ím ic am e n te
por
su
ca p a c id a d
de
fe r m e n t a r
la
g lu c o sa
con
p ro d u c c ió n d e á cid o y g a s y p o r su c a p a c ida d d e h id roliza r la la cto sa y la sa c aro sa . S u
t e m p e ra t u ra
o p t im a
de
c re cim ie n to , c om o
la
m a y o rí a
de
la s
b a c t e ri a s
c a usa n te s
de
i n f e c c i o n e s a li m e n t a ri a s e s t a p r ó x im a a l o s 3 7 ° C ; s o n r e l a ti v a m e n t e f o t o s e n s i b l e s y s e
d e stru y e n a 6 0 °C e n u n o s 1 5 -2 0 m in u to s, sie n d o in c a p a c es d e c r e c e r p o r d e b a jo d e lo s 7
– 8 ° C ( C a r r i ll o , 2 0 0 8 ) .
2 .3 .1 .2
Según
P a r á m e t r o s m i c r o b i o l ó g ic o s
A tla s, 2 0 0 2 , la
S h ig e lla
e n lo s
d ete c c ió n d e
c o n trole s
de
rutin a
v erd adero s
seria
una
e nte ro p ató g e n o s c o m o
tare a
d i fí c i l e
S alm o n e lla
i n c i e r ta . E n
o
c a m b io , lo s
a n á l i s i s b a c t e ri o l ó g i c o s d e a g u a p o t a b le d e t e r m i n a n s i m p l e m e n t e l a p re s e n c ia y e l g r a d o
d e c o n t a m i n a c i ó n f e c a l d e l a m u e s tr a d e a g u a , m e d i a n te l a d e t e c c i ó n d e l o s d e n o m i n a d o s
o rg a n ism o s in dic a d o res .
18
O r g a n ism os in d ic a d o re s
“ L a d e te c c ió n d e a g e n te s p a tó ge n o s
poco
p rá c tic a
en
lo s
a n álisis
e n e l a g u a e s d ifícil, e c o n ó m ic a m e n te c o sto s a y
r u ti n a ri o s
del
agua.
En
su
lu g a r,
el
agua
se
v a lo ra
e m p le a n d o u n s u stituto , q u e ac tú a c om o u n in d ic a d or d e c o nta m in a c ió n fe c al ” (G ly n n ,
1 9 9 9 ) . P u e s t o q u e l o s o r g a n i s m o s n o p a t ó g e n o s t a m b i é n h a b it a n e n g ra n n ú m e r o e n e l
in te stin o y e s tá n s iem p re p re s e nte s e n las h e c e s , ju n to c o n los a g e nte s p ató g e n o s q u e
p u d ie ra h a b er, p u e d e n serv ir c o m o in dic a d ore s d e c o nta m in a c ió n fe c a l.
L a s p r i n c i p a l e s c a r a c t e rí s ti c a s d e u n b u e n o r g a n is m o i n d i c a d o r s o n :
-
S u a u s e n c i a i m p li c a l a i n e x i s te n c i a d e p a t ó g e n o s e n t é ri c o s .
-
L a d e n s i d a d d e o r g a n i s m o s i n d i c a d o r e s e s t á r e l a c i o n a d a c o n l a p r o b a b i li d a d d e l a
p r e s e n c ia d e p a t ó g e n o s .
-
En
el
m e d io
lo s
o rg a nism os
in dic a d ore s
sob re v ive n
un
p oco
m ás
que
lo s
p a tó g e n o s .
D e t o d o s l o s m i c r o o r g a n i s m o s i n d i c a d o r e s , la s b a c te r ia s c o li f o rm e s t o t a l e s s o n l a s q u e s e
usan
con
a e ro b ia s
fo rm a
de
m a y o r fre c u e n cia . E ste
y a n a e ro bia s
b a stó n
gru p o
fa c u lt a ti v a s . G r a m
q u e fe rm e n ta n la cto sa
in clu y e
por
d e f i n ic i ó n , “ t o d a s
n e g a ti v a s , n o
c o n f o rm a c i ó n
form ad oras
de
g a ses
de
a n tes
las
b a c teria s
esp o ra s
de
48
y
con
h oras
a
3 5 ° C ” ( A P H A e t a l ., 1 9 8 5 ) .
E l o r g a n i s m o i n d ic a d o r q u e s e u ti li z a m á s f r e c u e n t e m e n t e p a r a l a c o n t a m i n a c i ó n fe c a l e s
e l n o rm alm e n te
p a t ó g e n o E s c h e r i c h i a c o l i . L o s t e s t p o s it i v o s p a r a E . c o li n o d e m u e s t r a n
la
org a n ism o s
p rese n c ia
de
e n te ro pa tó g e n o s, p e ro
si la
p osibilida d
de
su
p rese n c ia .
“ C o m o E . c o l i e s a b u n d a n t e y m á s f á c il d e c u lt i v a r q u e l o s e n t e r o p a t ó g e n o s , e s t a p r u e b a
tie n e
un
fa cto r
de
s e g u ri d a d
i n t rí n s e c o
p o t e n c i a l m e n t e p e li g r o s a ” ( A tl a s , 2 0 0 2 ) .
19
p ara
de te c ta r
c o n tam in a ció n
fec a l
y
2 .3 .2 A n á l i s i s m i c r o b i o l ó g i c o d e l a g u a
C h a c ó n , e n e l 2 0 0 9 , e x p li c a q u e e l a n á l is i s m ic r o b i o l ó g i c o d e m u e s tr a s d e a g u a ti e n d e a
d e t e r m i n a r l a c a li d a d s a n it a r ia d e é s t a s y s u a p ti t u d p a r a d i s t i n t o s u s o s . E n g e n e r a l , l o s
m é t o d o s u ti l iz a d o s e s t á n d i s e ñ a d o s d e m o d o d e d e te c t a r e l g r a d o d e c o n t a m i n a c i ó n d e l
agua
con
desechos
tra d icio n alm e nte
de
o rig e n
en say os
p a ra
hum ano
y/o
a n im al.
la d e term in a c ió n d e
Por
e ste
m o tiv o
se
han
usado
m i c r o o r g a n i s m o s i n d ic a d o r e s m á s
q u e p a r a l a d e t e rm i n a c i ó n d e p a t ó g e n o s .
E l g r u p o d e b a c t e ri a s c o li f o rm e s h a s i d o s i e m p r e e l p r i n c i p a l i n d i c a d o r d e c a li d a d d e l o s
d i s ti n t o s t i p o s d e a g u a ; e l n ú m e r o d e c o li f o rm e s e n u n a m u e s t r a s e u s a c o m o c ri t e r i o d e
c o n t a m i n a c i ó n y p o r l o t a n t o , d e c a l i d a d s a n it a ri a d e la m is m a .
U n m é t o d o m u y u t il iz a d o p a r a e l r e c u e n t o d e c o l if o rm e s e n a g u a h a s i d o s i e m p r e e l
N ú m ero
m ás
P ro b a ble
(N M P ),
p ero
han
id o
v aria n d o
lo s
m e dio s
de
c u lt i v o ,
la s
c o n d i c i o n e s y l a s t é c n i c a s d e m a n e r a d e o b t e n e r c a d a v e z m a y o r s e n s i b il i d a d y p r e c i s i ó n
h a s t a h a c e rl o a c e p t a b l e c o m o m é t o d o e s t á n d a r . “ L a p r e c i si ó n d e e s t e m é t o d o d e p e n d e
del
n ú m ero
re p o rta d os
de
tu b os
N M P,
lo
u t il i z a d o s ,
que
cual
b a sa d o
e stá
pueden
en
ser
t re s
ta b las
o
de
c in c o .
Los
p r o b a b il i d a d
re sulta d o s
e sta d ística
son
ya
e s t a n d a ri z a d a s” . ( M é n d e z , 2 0 0 4 ) .
O t r o m é t o d o m u y u ti li z a d o p a r a e l a n á l is i s m i c r o b i o l ó g i c o d e l a g u a e s l a fi lt r a c i ó n p o r
m e m b r a n a . “ L a t é c n ic a d e f il t ra c i ó n p o r m e m b ra n a u ti li z a u n m e c a n i s m o m e d i a n te e l
c u a l s e a tr a p a n
e n l a s u p e rf i c i e
de
u na
m em b rana
m ic ro org a n ism o s c u y o
tam a ñ o
en
m a y o r q u e e l ta m a ñ o d e l p o r o ” ( C a r ri ll o , 2 0 0 8 ) . E s t a t é c n i c a e s a lt a m e n t e r e p r o d u c i b l e y
p r o p o r c i o n a r e s u l t a d o s n u m é ri c o s .
2 .4
En
el
M é t o d o s d e a n á li s i s m i c r o b i o l ó g i c o s
caso
de
un
m i c r o o r g a n is m o s
m u e s tr a s
c u l ti v o
c o n ti e n e .
a x é n ic o
En
b a c ter ia n o , e s
c a m bio ,
a m bie nta le s, e l p ro ble m a e s
cuando
se
m ucho m ás
r e l a ti v a m e n t e
m a n eja n
c om p lejo
c a s o s , n o p u e d e li m i t a r s e a u n a r e s p u e s t a s i m p le y a b s o l u t a .
20
fá c il
saber
c om u n id a de s
y, en
c u á n to s
m ixta s
l a m a y o rí a
de
de
lo s
H ay
dos
e n f o q u e s p ri n c i p a l e s
o b se rv a c ió n
dire cta
(o
p ara lle v ar a c a b o
re c u e nto
d ire cto )
y
el
el rec u e n to
uso
de
de
m ic ro org a n ism o s: la
p ro c e dim ie n tos
i n d i re c t o s
(o
r e c u e n t o d e v i a b l e s ) . O c a s i o n a l m e n t e e l n ú m e r o d e m i c r o o r g a n is m o s t a m b i é n s e c a l c u l a
a p a r ti r d e m é t o d o s q u e d e t e r m i n a n l o s c o n s t it u y e n t e s b i o q u í m i c o s e s p e c í fi c o s d e e s t o s ,
a u n q u e d e b e ría te n erse e n c u e n ta q u e e ste m éto d o e n re a lid a d lo q u e m id e e s la c a n tid a d
d e b i o m a s a . C a d a m é t o d o p o s e e v e n t a j a s y l im it a c i o n e s . ( A tl a s , 2 0 0 2 )
E n tre
lo s m é t o d o s d e
a n á l is i s m ic r o b i o l ó g i c o s
que son
u sad os
c o n m a y o r frec u e n c ia
e n c o n t r a m o s : T é c n i c a d e f il t r a c i ó n p o r m e m b r a n a , R e c u e n t o y s i e m b r a e n p r o f u n d i d a d y
s u p e r f ic i e , R e c u e n t o e n P l a c a s P e t r if il m , P r u e b a s d e A u s e n c i a - P r e s e n c i a , M é t o d o d e l
N u m e ro m á s Pro b a b le (N M P ).
2 .4 .1 M é t o d o d e l N ú m e r o m á s P r o b a b l e p a r a l a d e t e c c i ó n d e c o l if o r m e s t o t a l e s y
fe c a le s.
E l M é t o d o d e l N ú m e r o m á s P r o b a b l e ( N M P ) e s u n a a l te r n a t i v a a l m é t o d o d e r e c u e n t o e n
p l a c a p a r a l a d e t e r m i n a c i ó n d e m i c r o o r g a n is m o s v i a b l e s . D i c h o m é t o d o e m p l e a a n á li s i s
e s t a d ís t ic o s y d il u c i o n e s s u c e s i v a s d e l a m u e s tr a p a r a a l c a n z a r u n p u n t o d e e x ti n c i ó n .
L a s r e p l i c a s d e l a s d il u c i o n e s , n o rm a lm e n te d e 3 a 1 0 re p li c a s d e c a d a n i v e l d e d il u c i ó n ,
se
p u n tú a n
e s t a d ís t ic o s
com o
p o s it i v a s
a p ro pia d o s
para
o
n e g a tiva s,
o bte n e r
el
y
se
e m p le a
N ú m ero
m ás
c o n j u n ta m e n t e
P ro b a ble
de
con
a n á li s i s
m icro o rg a nism o s
v i a b l e s . L o s p a tr o n e s e s t a d í s ti c o s d e l o s r e s u l ta d o s p o s it i v o s y n e g a ti v o s p a r a 3 , 5 y 1 0
r e p l i c a s s u e l e n e s t a r re c o g i d o s e n t a b l a s N M P , l o c u a l s im p li f ic a e l p r o c e s o d e c o n v e rt i r
lo s
r e s u l ta d o s
p r o c e d im i e n t o
e x p erim e n tale s
N M P
en
p r o p o rc i o n a
n úm ero
un
m ás
c á lc ulo ,
pro b a b le
con
base
de
m ic ro org a n ism o s .
e s t a d í s ti c a ,
d el
n úm ero
El
de
m i c r o o r g a n is m o s e n u n a m u e s t r a , y c u a n d o s e e m p l e a n re l a t i v a m e n t e p o c o s t u b o s d e
ré p lica , lo s
inte rv alo s
de
c o n fi a n z a
son
b a s ta n t e
a m plios. E l
m é to d o
N M P
p ara
el
r e c u e n t o d e b a c t e ri a s p r e s e n ta l a v e n t a j a d e p e r m i ti r e l u s o d e c u l t i v o l í q u i d o , e v it a n d o l a
n e c e s i d a d d e a ñ a d ir u n a g e n t e s o l i d i fi c a n t e c o m o e l a g a r , c o n l o s p o s i b l e s c o n tr a ti e m p o s
que
e ste p u e d e
c o n t e n e r , p e r o e s m á s l a b o ri o s o
p l a c a . ( A tl a s , 2 0 0 2 ) .
21
y m en os
p re ciso
q ue
e l re c ue n to
en
E l m é t o d o s e b a s a e n q u e l a s b a c t e r i a s c o l if o r m e s , f e rm e n t a n la l a c t o s a i n c u b a d a s a 3 5 ±
1°C
d u ra n te
m a n i fi e st a
24
en
la s
a
48
h o ras,
cam panas
r e s u lt a n d o
de
una
f e rm e n ta c i ó n
p ro d u c ció n
y
de
a c id o
e l c r e c im i e n t o
y
g as
ta m b ié n
es
el
c u al
se
v e r if i c a d o
m e d ia nte la pre se n cia d e turb id e z e n e l m e d io .
E l p r i m e r p a s o e s s i e m p r e l a s i e m b r a d e 1 m L d e m u e s t r a lí q u i d a e n t u b o s d e a l g ú n c a l d o
l a c t o s a d o , c o n o s i n i n h i b i d o r e s , c o n t u b o d e f e r m e n t a c i ó n p a ra r e c o g e r e l g a s q u e p u e d a
p ro d u c irse .
A
e sto
sig u e
una
c o n fi r m a c i ó n
en
un
m e d io
líq uid o
se le ctiv o
y /o
una
d e t e r m i n a c i ó n d e l o s c o l if o r m e s f e c a l e s c u y a d i f e r e n c ia c i ó n s e r e a l i z a e n b a s e a l h e c h o
d e q u e p u e d a p r o d u c i r g a s d e l a c t o s a e n u n m e d i o a p r o p i a d o c u a n d o s e i n c u b a a 4 4 ,5 ºC
m i e n tr a s q u e l o s d e m á s c o li f o r m e s n o . ( C h a c ó n , 2 0 0 9 ) .
F IG U R A 1 D ia g ra m a e sq u em á tico p a ra d etecta r c o lifo rm es to ta les y fec a les
F u en te: (C arrasc o , 2 0 0 4 )
22
2 .4 .2 C o n t a m i n a c i ó n m i c r o b i a n a e n e l a g u a
Se
sabe
que
lo s
m ic ro o rg a nism os
p a tó g e n o s
que
lle g a n
a
lo s
d e p o s it o s
de
agua,
p r o c e d e n d e l a s d e s c a r g a s i n t e s ti n a l e s d e h o m b r e s y a n i m a l e s . A d e m a s , c i e rt a s e s p e c i e s
de
b a c t e ri a s ,
p a r ti c u l a r m e n t e
E sc h eric hia
c o li ,
y
v a ri o s
m icro o rg a nism o s
s im il a r e s ,
d e n o m i n a d o s c o l if o r m e s , e s tr e p t o c o c o s f e c a l e s y C l o s tr i d i u m p e r f r i g e n s , s o n h a b it a n t e s
n o r m a l e s d e l i n t e s t i n o g r u e s o d e h o m b r e s y a n i m a l e s y e n c o n s e c u e n c i a s ie m p r e e s t a n e n
l a s m a t e ri a s f e c a le s . A s í p u e s , l a p r e s e n c i a d e c u a l q u i e r a d e e s t a s e s p e c ie s e n e l a g u a e s
e v i d e n c i a d e c o n t a m i n a c i o n f e c a l y e l c a m i n o e s t a a b i e rt o
a lo s p ató g e n o s y a q u e se
e n c u e n t r a n e n l a s m a t e ri a s f e c a le s . L o s m i c r o o r g a n i s m o s c o l if o rm e s
pre se nta n
v aria s
v e n ta ja s q u e so n :
1.
L o s m i c r o o r g a n i s m o s c o li f o r m e s , s o b r e t o d o E . c o li , h a b it a n c o n s t a n t e m e n t e e n
el
i n t e s ti n o
h um an o
en
gran d es
c a n ti d a d e s .
Se
e s ti m a
que
una
p erso n a ,
en
p ro m e d io , e x c reta a l dia m iles d e m illo ne s d e e sto s m ic ro org a n ism o s .
2.
E s to s m ic ro o rga n ism o s v iv e n m a s tiem p o e n e l a g u a q u e los p a tó g e n o s .
3.
U n a p e r s o n a s a n a e n g e n e ra l n o e li m i n a m i c r o o r g a n i s m o s p a t ó g e n o s , p e r o p u e d e
d e s a r r o l l a r s e u n a i n f e c c i ó n i n t e s ti n a l y e s o s m i c r o o r g a n i s m o s a p a r e c e ra n e n l a s
m a t e ri a s f e c a le s , a s i , l a p r e s e n c i a d e c o l if o rm e s e n e l a g u a s e t o m a c o m o s e ñ a l d e
a l a r m a , p u e s h a s i d o c o n t a m i n a d a p e li g r o s a m e n te . ( P e l c z a r , 1 9 7 7 ) .
C o lifo r m es to tale s
S o n b a c te rias G ra m
n e g a t i v a s c a p a c e s d e c re c e r e n p r e s e n c ia d e s u s t a n c i a s t e n s o a c t i v a s
c o n p r o p i e d a d e s i n h i b i t o r i a s c o m o l a s s a le s b il i a r e s .
p ro d u c c ió n
de
á cid o , g a s
y
a ld e híd o
en
un
F e rm e n t a n l a l a c t o s a a 3 5 - 3 7 ° C c o n
p e río d o
c o m pre n d id o
de
24
a
48
h o ras.
I n c l u y e a l a s b a c t e ri a s d e l g é n e r o E s c h e r i c h i a , C i tr o b a c t e r , E n t e r o b a c t e r y K l e b s ie l l a .
L a s b a c t e ri a s E n t e r o b a c t e r c l o a c a e y C it r o b a c t e r fr e u n d ii p u e d e n e n c o n t r a rs e e n h e c e s y
a m b i e n t e s c o m o s u e l o s y a g u a s c o n e x c e s o d e n u tr i e n t e s y m a t e r i a o r g á n i c a .
L a s b a c t e r i a s c o li f o rm e s t o t a l e s s o n a m p l i a m e n t e u ti li z a d a s c o m o i n d i c a d o r e s d e b i d o a
su
p re se n cia
a b u n d a nte
en
heces. L a
d esv e n taja
d e e s to s m ic ro o rga n ism o s
es que
el
e n c o n t r a r l o s n o s i e m p r e e s i n d i c a ti v o d e c o n t a m i n a c i ó n f e c a l o p re s e n c i a d e p a t ó g e n o s
en
e l a g u a . Sin
e m b a r g o , v a ri o s e s t u d i o s
han
23
d e m o s tr a d o
que
E . c oli y la s
ba c teria s
c o liform es
son
m enos
res iste n tes
a
c o n d ic io ne s
a d v e rsa s
que
o tro s m icro o rg a nism o s
i n d i c a d o r e s , c o m o l o s o n l o s e s t re p t o c o c o s f e c a l e s , e n t e r o c o c o s y c l o st r i d i o s r e d u c t o r e s
d e s u l fi t o .
L a u t il i z a c i ó n d e c o li f o rm e s t o t a l e s c o m o i n d i c a d o r e s d e c o n t a m i n a c i ó n f e c a l s e v e m u y
l i m i t a d a d e b i d o a q u e e s t e g r u p o c o m p r e n d e b a c te r ia s d e o r i g e n f e c a l y n o f e c a l . S i n
e m b a rg o la
p r e s e n c ia
de
e sta s
b ac teria s su g iere
u n t r a ta m i e n t o i n a d e c u a d o
del ag u a,
c o n t a m i n a c i ó n p o s t tr a t a m i e n t o o p r e s e n c i a d e e x c e s o d e n u t r ie n t e s o r g á n i c o s e n e l a g u a .
S i s e e n c u e n tr a c o li f o rm e s t o t a l e s e n a u s e n c i a d e E . c o li y c o l if o rm e s t e r m o t o l e r a n t e s ,
d e b e i d e n t if i c a r s e a l a s e s p e c i e s b a c t e ri a n a s p re s e n t e s o b u s c a r o t r o s m i c r o o r g a n i s m o s
in d ic a d ore s. (M é n d e z , 2 0 0 4 ).
La
p ru eb a
m ás
e f e c ti v a
p a ra
la
i d e n ti f i c a c i ó n
de
C o li f o r m e s , e s
la
h i d r ó li s i s
de
la
l a c t o s a . C u a n d o e s t e d i s a c á r i d o s e r o m p e e s c a t a li z a d o p o r la B - D - G a l a c t o s i d a s a . L a
g a l a c t o s a q u e d e s p u é s e s t r a n s f o r m a d a e n g l u c o s a , s o n m e t a b o l iz a d a s a t r a v é s d e l c i c l o
g l i c o lí ti c o y c i c l o d e l c i t r a t o . L o s p r o d u c t o s m e t a b ó l i c o s d e e s t o s c i c l o s s o n á c i d o s y / o
C O
2
. ( C a r r i ll o , 2 0 0 8 ) .
A l g u n a s d e l a s v e n t a ja s d e l N M P s o n :
1.
La
c a p a c id a d
de
e s ti m a r
tam a ñ o s
p o b la c i o n a l e s
b asad os
en
a t ri b u t o s
r e l a c i o n a d o s a u n p r o c e s o (s e l e c t i v i d a d ) .
2.
P r o v e e u n a r e c u p e r a c i ó n u n i f o r m e d e l a s p o b l a c i o n e s m ic r o b ia n a s .
3.
D e t e r m in a s o l o o r g a n i s m o s v i v o s y a c t i v o s m e t a b ó l i c a m e n t e .
4.
S u e le
ser m ás
rá p id o
e
ig u al
de
c o nfia ble
que
lo s
m é to d o s
tra dic io n ale s
de
e s p a r c im i e n t o e n p la t o s d e c u l ti v o , e n tr e o tr o s . ( A tl a s , 2 0 0 2 ) .
C o lifo r m es fe c ale s
L a c o n t a m i n a c i ó n f e c a l h a s i d o , y s i g u e s i e n d o , e l p ri n c i p a l r ie s g o s a n it a ri o e n e l a g u a ,
y a q u e s u p o n e la i n c o r p o r a c i ó n d e m i c r o o r g a n is m o s p a t ó g e n o s p r o c e d e n te s d e e n f e r m o s
y
p o r t a d o re s , y
la
tr a n s m i s i ó n h í d ri c a
a la
24
p o bla c ió n su sc e ptible . P o r ello
el c o ntro l
s a n i t a r i o d e ri e s g o s m i c r o b i o l ó g i c o s e s t a n im p o rt a n t e , y c o n s t it u y e u n a m e d i d a s a n i ta r i a
b á s i c a p a r a m a n t e n e r u n g r a d o d e s a l u d a d e c u a d o e n l a p o b la c i ó n .
L o s c o l i f o r m e s f e c a l e s s o n u n s u b g r u p o d e l o s c o li f o rm e s t o t a l e s , c a p a z d e f e rm e n ta r l a
l a c t o s a a 4 4 ,5 º C . A p r o x i m a d a m e n t e e l 9 5 %
d e l g r u p o d e l o s c o n if o rm e s p r e s e n t e s e n
h e c e s e s t á n f o r m a d o s p o r E s c h e r i c h i a c o l i y c i e rt a s e s p e c i e s d e K l e b s i e ll a . ( C a r ri l l o ,
2 0 0 8 ).
E sc h e ric h ia c oli
L a E s c h e r i c h i a c o li , e n s u h á b i t a t n a t u r a l , v i v e e n l o s i n t e s ti n o s d e l a m a y o r p a rt e d e l o s
m a m íf e r o s s a n o s . E s e l p ri n c i p a l o r g a n i s m o a n a e r o b i o f a c u lt a ti v o d e l s i s t e m a d i g e s t i v o .
En
in d iv id u o s
sano s,
es
d e cir,
si
la
b a c t e ri a
no
a d q u i e re
e le m e nto s
g e n étic o s q u e
c o d i f i c a n f a c t o r e s v ir u l e n t o s , l a b a c t e ri a a c t ú a c o m o u n c o m e n s a l f o rm a n d o p a r t e d e l a
f l o r a i n t e s t i n a l y a y u d a n d o a s í a la a b s o r c i ó n d e n u t ri e n t e s . E n h u m a n o s , l a E s c h e r i c h i a
c o l i c o l o n i z a e l tr a c t o g a s tr o i n te s ti n a l d e u n n e o n a t o a d h i ri é n d o s e a l a s m u c o s i d a d e s d e l
i n t e st i n o g r u e s o p l a z o d e 4 8 h o r a s d e s p u é s d e l a p ri m e r a c o m i d a .
E . c o l i ti e n e
c a r a c te r ís ti c a s
q u í m ic a s
im p o rt a n t e s
que
p e rm it e n
la d ifere n cia c ió n
con
o t r o s c o l i f o r m e s , c o m o s e r p o s it i v o a l a p r u e b a d e i n d o l .
2 .5 V a l i d a c i ó n
“ V a lid a r
es
d e m o strar
con
un
a lto
g rad o
de
c o n fia n z a ,
por
m e dio
de
e v id e n c ia
d o c u m e n t a d a q u e u n p r o c e s o e s p e c í fi c o p r o d u c ir á d e f o r m a c o n s i s t e n t e p r o d u c t o s q u e
r e u n i r á n l a s c a r a c t e r ís ti c a s d e c a l i d a d p r e d e f i n i d a s ” ( C O R T E S , 2 0 0 2 ; F D A , 1 9 8 7 ) . L a
i m p o rt a n c ia d e e s t e p r o c e s o ra d i c a e n q u e o fr e c e e v i d e n c i a d e q u e u n m é t o d o e s c a p a z
d e s e r v i r p a ra s u p r o p ó s it o p l a n t e a d o , p a r a t a l fi n s e d e b e n r e fl e j a r l a s c o n d ic i o n e s re a l e s
de
ensayo,
esto
p u ede
c o n se g uirse
usando
pro d u c to s
c o n tam ina d o s
o
pro d u c to s
in o c u la d o s c o n u n n u m e ro c o n o c id o d e m icro o rg a n ism os.
E l l a b o r a t o r i o d e b e v a li d a r , c o n e l fi n d e c o m p r o b a r q u e s o n a p r o p i a d o s p a r a e l u s o
p re v isto :
25
-
M é t o d o s n o n o rm a li z a d o s
-
M é t o d o s d is e ñ a d o s / d e s a rr o ll a d o s i n t e r n a m e n t e
-
A m p l i a c i o n e s y m o d i fi c a c i o n e s d e m é t o d o s n o r m a l i z a d o s
2 .5 .1 T i p o s d e V a l i d a c i ó n
En
el
2006,
S o ler
m e n c io n a
tres
m éto d o s
prin cip a les
de
v alid a ció n ,
los
c u ale s
se
e x p lic a n a c o n tin ua c ió n:
V a lid a c ió n C o n c u r r e n te
E s c o n s i d e ra d a c o m o u n a e v a l u a c i ó n c o n t i n u a d e l p r o c e s o . E s e l e s t u d i o p a r a d e m o st r a r
y e s ta b le ce r e v id e n cia d o c u m e n ta d a d e q u e u n p ro c e s o h a ce lo q u e d e b e h a c e r b a sa d o e n
i n f o rm a c i ó n
g enerad a
d u ra n t e
una
im ple m e nta c ió n
real
del
p ro ce so .
La
v a li d a c i ó n
c o n c u r r e n t e e s m u y u ti li z a d a c u a n d o s e h a v a r i a d o u n a e t a p a d e l p r o c e s o y p r o p o r c i o n a
i n f o rm a c i ó n m u y v a li o s a p a r a m o d i f ic a r y c o rr e g ir e l p r o c e s o .
V a l i d a c i ó n P r o s p e c ti v a
Es
la
v a li d a c i ó n
re aliz a d a a n te s d e
la e je c u ció n
de
u n m é to d o
o p ro ceso , d o n de
la s
r e v i s i o n e s p u e d e n a f e c ta r l a s c a r a c t e rí s t i c a s d e l m é t o d o o p l a n e a r l o q u e p u e d e l l e g a r a
o c u r r ir c o n e l p r o c e s o . S u o b j e ti v o p r i n c i p a l e s p r e v e r e r r o re s o l im it a r e l r i e s g o d e q u e
e sto s se pre se nte s d u ra nte el p ro c e so .
V a lid a c ió n R e tr o sp e ctiv a
E s l a v a li d a c i ó n d e u n p r o c e s o p a r a u n m é t o d o q u e y a s e h a v e n i d o r e a l iz a n d o , b a s a d a e n
d a to s a c u m ula d o s d e p ro d u c c ió n , d e p ru e b a y d e c o n trol, lo s c u a les se h a c e n re v isa n d o
el
h is t o ri a l d e
d o c um e n tos
com o
c o ntro l d e
m a terias
p ri m a s , c o n tr o l e s
a m b ie nta le s,
e q u i p o s , p r o c e d i m i e n t o s , m é t o d o s a n a l í ti c o s e t c .
C u a lq u ie ra
de
e sto s
tip o s
de
v alid a ció n
es
a c e p ta d o
y
v alid o
para
d ar
e vid e n c ia
d o c u m e n t a d a y d e m o s tr a r q u e u n p r o c e s o h a c e l o q u e d e b e h a c e r . S i n e m b a r g o , c a d a
a p r o x i m a c i ó n ti e n e s u s c a r a c t e r í s t i c a s y l im it a c i o n e s y p o r l o t a n t o , a n t e s d e d e s a r r o l l a r
26
u n a v a l i d a c i ó n d e b e r á e v a l u a rs e q u é ti p o d e v a li d a c i ó n p u e d e d a r l a m a y o r i n f o rm a c i ó n
s o b r e l a s e g u r i d a d y e s t a b i li d a d d e l p r o c e s o .
2 .5 .2 E x t e n s i ó n d e l a v a l i d a c i ó n
V a le ra ,
2007,
se ñ a la
que,
la
v alid ac ió n
es
un
e q u i li b ri o
e ntre
c osto s,
ri e s g o s
y
p o s i b il i d a d e s t é c n i c a s ; d e b i d o a e s t o c a d a l a b o r a t o ri o d e b e e s t a b l e c e r l o s r e q u is i t o s q u e
d e b e c u m p l i r e l m é t o d o , c o n l a f i n a l i d a d d e d e m o s tr a r q u e e s a d e c u a d o p a r a l a f i n a l i d a d
r e q u e r i d a . D e l m i s m o m o d o l a e x te n s i ó n d e l a v a l i d a c i ó n y r e v a li d a c i ó n d e p e n d e r á d e l a
n a t u r a le z a d e l o s c a m b i o s re a li z a d o s .
C a m b io s o h e c h o s ha b itua le s q u e ob liga n a re v alid ar so n :
-
C a m b i o s e n c o m p o n e n t e s c r ít i c o s ( c a l i d a d d e l a s m a t e r i a s p r im a s , p r o v e e d o r e s ,
e t c .) .
-
C a m b i o s o s u s t it u c i o n e s d e p i e z a s d e e q u i p o s o d e m a t e ri a le s .
-
C a m b i o s e n la p l a n t a o i n s t a la c i o n e s ( l o c a l iz a c i o n e s o t a m a ñ o ) .
-
C a m b io s e n el p e rso n al.
2 .5 .3 R e q u i s i t o s p a r a l a v a li d a c i ó n
La
E n tid a d
N a c io n al
de
A c r e d it a c i ó n
(EN A C )
d isp o n e
de
alg u n o s
c ri t e r i o s
de
a c e p t a c i ó n p a r a v a l i d a r , e n tr e e ll o s c o n s t a n l o s c it a d o s a c o n t i n u a c i ó n :
2 .5 .3 .1 I n s t a l a c i o n e s y c o n d i c i o n e s a m b i e n t a l e s
P a r a a s e g u r a r l o s r e s u lt a d o s d e l a v a l i d a c i ó n s e d e b e n t e n e r e n c u e n t a l o s s i g u i e n t e s
a s p e c to s:
-
V ig ila r, c o n trola r y re g istrar la s c o n d icio n e s am b ie nta le s .
-
E v ita r la c o n tam in ac ió n cru z a d a .
-
S e p a ra c ió n d e la s áre a s y c o ntro l de a c c e s o a la s m ism a s .
-
P l a n i fi c a r m o n it o r e o s a m b i e n t a l e s y d e s u p e r f ic i e s . ( A p o l o , 2 0 0 2 ) .
27
M o n ito r e o A m b ie nta l
“ L a c a l i d a d m ic r o b i o l ó g i c a d e l a i r e y l a s s u p e rf i c i e s d e l l a b o r a t o r i o s o n u n i n d i c a d o r d e
l a e f e c t i v i d a d d e l a s t a re a s r e a l iz a d a s s e g ú n e l p r o g ra m a d e l im p i e z a y d e s i n fe c c i ó n ”
( A p o l o , 2 0 0 2 ) . P o r e s t e m o t i v o e s re c o m e n d a b l e r e a li z a r c o m o m í n i m o l o s s i g u i e n t e s
c o n t r o l e s m i c r o b i o l ó g ic o s :
-
M o n i t o re o d e l a c a l i d a d d e l a i r e p o r e x p o s i c i ó n d e p l a c a s .
-
M o n i t o re o
de
la
c a li d a d
m ic ro b ioló g ica
de
la s
s u p e rf i c i e s
de
tr a b a j o ,
por
f r o t a c i ó n c o n h is o p o s .
-
C o n t r o l d e d o ta c i ó n y d e p e r s o n a l .
E s i m p o r t a n t e l im p i a r y d e s i n f e c t a r e l e s p a c i o d e a m b i e n te c o n t r o la d o , e n e l c u a l s e
d e s a r r o l l a e l p r o c e d im i e n t o . E s t e p e r m i ti r á a l a e m p r e s a / l a b o r a t o ri o m a n t e n e r u n n i v e l
m í n im o c o n s i s t e n te d e c o n t a m i n a c i ó n e n p i s o s y m e s ó n d e m u e s t ra s , e s i m p o r t a n t e t e n e r
e n c u e n t a q u e e n l a s c a b i n a s s e e x i g e c e r o c o n t a m i n a c i o n e s . U n m é t o d o e fi c i e n t e e s l a
d e sin fe cc ió n
a p ro pia d a
m e dia n te
un
sis tem a
de
ro tac ió n
de
d e s i n f e c ta n t e s ,
u sando
g e n e r a lm e n t e l o s d e t i p o fe n ó l ic o s .
2 .6
P a r á m e tr o s d e d e sem p e ñ o
S o n l a s p r o p ie d a d e s , c a r a c te r ís t ic a s o c a p a c i d a d e s d e l m é t o d o .
2 .6 .1
E x a c titu d
L a e x a c t i tu d , e s l a c e r c a n í a d e u n r e s u lt a d o a l v a l o r v e r d a d e r o p o r c o m p a r a c i ó n c o n l o s
v a l o r e s d e r e f e r e n c i a d e u n m a te r i a l c a r a c t e ri z a d o (m a t e r i a l d e r e f e r e n c ia ) . E s i d e a l q u e
e l m a t e ri a l d e re f e r e n c i a s e a d e m a t r iz n a t u r a l l o m a s s i m i l a r p o s i b l e a la s m u e s tr a s d e
in te rés . P o r lo ta nto se p u e d e d e finir c o m o e x a ctitu d “ al g ra d o d e c o n c o rd a n cia e ntre lo s
r e s u lt a d o s
de l m é to d o
e v alu a d o
y
lo s
o b te nid o s
u t il i z a n d o
un
m é to d o
de
re c o n o c id o ” (R o d ríg u e z , 2 0 0 4).
L a E N A C s u g i e r e r e a l i z a r e l T e s t t d e s t u d e n t , m e d i a n te l a s i g u i e n t e f ó r m u l a :
28
re fere n c ia
E C U A C IÓ N 1 t d e stu d en t
D onde:
d = m e d i a d e la s d if e r e n c i a s e n t r e l o s v a l o r e s d e l o s d o s m é t o d o s e n s a y a d o s .
= p r o m e d i o d e l a s d if e r e n c i a s .
S d = d e s v i a c i ó n e s t á n d a r d e l a s d i f e r e n c ia s .
n = n ú m e r o d e m u e s t ra s .
L a e x a c t it u d s e e x p re s a c o m o e l p o rc e n t a j e d e r e c u p e r a c i ó n d e l o s m ic r o o r g a n i s m o s .
T r a n s f o rm a d o s a l o g a r it m o l a f ó r m u l a d e r e c u p e r a c i ó n r e la ti v a m e d i a e s :
E C U A C IÓ N
2 P o r cen ta je d e R ecu p er a ció n
D onde:
R e c % = p o rc e n taje d e re c u pe ra ció n .
= p ro m e d io d e d .
C r ite rio d e A c e p ta ció n
Se
c o n s i d e ra
a c e pta b le
cuan d o
l a e s ti m a c i ó n
d e m icro o rg a nism o s v ia ble
es m ayor o
i g u a l a l 9 0 % d e l a p r o v is t a p o r e l v a l o r d e r e f e r e n c i a .
2 .6 .2
P r e c isió n
L a s d o s m e d i d a s m á s c o m u n e s d e l a p r e c i s i ó n , q u e g e n e r a lm e n t e s e d e fi n e e n t é rm i n o s
de
d e sv ia ció n
e stá n da r
o
el
c o e f ic i e n t e
de
v a ri a c i ó n
son
la
r e p e t i b i li d a d
y
la
r e p r o d u c i b i li d a d . “ L a r e p e ti b il i d a d , d a u n a i d e a d e la v a r i a b i li d a d q u e s e e s p e r a c u a n d o
u n p ro ceso
29
es
a p lic a d o
por
un
solo
a n a l is t a
en
un
e q u ip o
d u ra nte
un
p e rio d o
c o rt o .
La
r e p r o d u c i b i li d a d , e s la q u e r e p r e s e n t a l a v a ri a b il i d a d q u e s e o b ti e n e c u a n d o u n p r o c e s o
es
a n a l i z a d o p o r d i f e r e n te s
a n a l is t a s o e n
d if e r e n t e s d í a s , l o c u a l t i e n e u n
v alo r m á s
a m p lio” . (R o d ríg ue z , 2 0 0 4 ).
C uando
se
tra n sfo rm a n
lo s
d ato s
a
l o g a r it m o s
se
c a lc u l a
el
p o rc e nta je
de
r e p r o d u c i b i li d a d c o n la f o rm u l a q u e s e m u e s t ra a c o n ti n u a c i ó n :
E C U A C IÓ N 3 P o r cen ta je d e R ep r o d u cib ilid a d
D onde:
R p = p o r c e n t a j e d e r e p r o d u c i b il i d a d .
s d = d e s v i a c i ó n e s t á n d a r d e la d i f e r e n c i a e n tr e l o s d o s m é t o d o s
P o ste riorm e nte
se
c a lc ula
la
d e sv ia ció n
e stá n d ar
re lativ a
de
P o isso n
(R S D )
con
la
s i g u i e n t e f ó r m u la :
E C U A C IÓ N 4 D es v ia ció n está n d a r rela tiv a d e P o iss o n
D onde:
R S D ( % ) = d e s v i a c i ó n e s t á n d a r r e l a ti v a d e P o is s o n
c = m e d i a d e v a l o r e s o b t e n i d o s e n e l m é t o d o a v a li d a r ( N M P d e l l a b o r a t o ri o )
C r ite rio d e A c e p ta ció n
U n re su lta d o m e n or a 2 e n la d ivisió n d e R p p a ra R S D (P o isso n ), in d ic a q u e el m é to d o
t i e n e p re c i si ó n .
30
2 .6 .3
In c e r tid u m b re
D e a c u e r d o a l a n o m a I S O ( A n o n , 1 9 9 5 ) , e s u n p a r á m e t r o a s o c i a d o c o n e l r e s u lt a d o d e
una
m e d ició n , q u e
c a r a c t e ri z a
el g ra d o
de
d is p e rsió n
de
lo s
v alo res
p re cisió n
de
re sultad o s
que
pueden
ser
a t r i b u i d o s ra z o n a b l e m e n te a l m e s u r a n d o .
E x iste n
v a ri o s
r e q u i ri e n d o
fa cto re s
que
de un adecuado
i n fl u y e n
en
pro g ram a
la
d e c o n tr o l d e
ca lida d
m icro b ioló g ic o s,
c o n e l fi n
d e m in im iz a r
d ic h a influ e n cia .
-
M u e stre o
-
M é to d o d e a n álisis
-
M e d i o s d e c u l ti v o y r e a c t i v o s
-
P r o c e d i m i e n t o a n a lí t ic o
-
E q u ip a m ie nto
-
P erso n al
S e d e b e t o m a r c a d a f u e n te d e i n c e r ti d u m b r e y tr a t a r l a s p o r s e p a r a d o p a r a l u e g o c a lc u l a r
una
i n c e r ti d u m b r e
c o n j u n ta ; p o r l o
cual es
n e c e s a ri o
la
a p li c a c i ó n
fo rm ula s:
a)
C á l c u l o d e la
in c ertid um b re de l v alo r d e refe re nc ia
E C U A C IÓ N 5 In certid u m b re d el v a lo r d e refe ren cia
D onde:
= i n c e r ti d u m b re d e l v a l o r d e r e f e r e n c i a .
w = c o n sta n te q u e d e p e n d e d el n ú m ero d e d ato s
o b te n id o s
= d e s v i a c i ó n e s t á n d a r d e l a s u m a t o r ia d e l o s l o g a ri tm o s d e y
n = n ú m e ro d e d a tos
31
de
la s
sig uie n te s
b)
C á l c u l o d e la i n c e r t i d u m b r e d e l v a l o r d e la m u e s t r a
E C U A C IÓ N 6 In certid u m b re d el v a lo r d e la m u e stra
D onde:
= i n c e r ti d u m b re d e l v a l o r d e r e f e r e n c i a
w = c o n sta n te q u e d e p e n d e d el n ú m ero d e d ato s o b te nid o s
= d e s v i a c i ó n e s t á n d a r d e l a s u m a t o r ia d e l o s l o g a ri tm o s d e x
n = n ú m e ro d e d a tos
c)
C á l c u l o d e la i n c e r t i d u m b r e a s o c i a d a a l a r e p r o d u c i b il i d a d
E C U A C IÓ N 7 In certid u m b re a so cia d a a la r ep r o d u cib ilid a d
D onde:
= i n c e r ti d u m b re d e l v a l o r d e l a m u e s t ra
C = m e d id a d e la sum ato ria de lo s v alo re s o b te nid o s e n e l e n sa y o
n d = c a n tid a d d e n úm e ro s d e d (re p eticio n e s p or d ía )
d)
C á lc u lo d e l a in c ertid um b re de l p o rce n taje d e re c u pe ra ció n
E C U A C IÓ N 8 In certid u m b re d el p o rce n ta je d e re cu p era ció n
32
D onde:
= i n c e r ti d u m b re d e l p o r c e n t a j e d e re c u p e r a c i ó n
R e c = p o r c e n t a j e d e r e c u p e r a c i ó n ( e x a c ti t u d )
C = m e d i a d e l a s u m a to r i a d e l o s v a l o r e s o b t e n i d o s e n e l e n s a y o
e)
C á l c u l o d e la i n c e r t i d u m b r e e x p a n d i d a
E C U A C IÓ N 9 In certid u m b re ex p a n d id a
D onde:
I = i n c e rt i d u m b r e
k = c o n sta n te p ara e l n úm e ro d e da to s
P e r m it e c a l c u l a r e l g ra d o d e e rr o r d e l a n á li s is .
2 .6 .3 .1
C u ltiv o s y m ate r ial d e r e fer e n c ia
A f i n d e d e m o s tr a r l a tr a z a b i li d a d : l a s c e p a s d e r e f e r e n c i a d e b e n o b t e n e r s e d i re c t a m e n t e
de
una
c ole c ció n
con
la
reseña
n a cio n a l
o
in tern a c io n al
de
c u lt i v o
de
re fere n c ia
re c o n o c id o (M o n to y a , 1 9 9 4 ).
L a n o rm a IS O
1 1 1 3 3 -1 :2 0 0 0 , d efin e a las c e p a s d e refe re nc ia c om o “m icro o rg a nism o s
d e f i n i d o s , p o r l o m e n o s a n i v e l d e g é n e r o y e s p e c ie , c a ta l o g a d o s m u y c a r a c t e ri z a d o s , d e
o rig e n c o n o cid o ” .
Son
d i s t ri b u i d a s
y
p re se nta d a s
c o m e r c i a lm e n t e
l i o f il i z a d a s ;
los
o r g a n is m o s
de
a c r e d it a c i ó n s o n l o s e n c a r g a d o s d e c o n s i d e r a r v á l i d a la f u e n t e d e p r o c e d e n c i a d e l a c e p a
a f i n d e q u e s e c u m p l a c o n e l r e q u i s it o d e p r e v e n i r m u t a c i o n e s , d e t e r i o r o o a lt e r a c i ó n d e
l a s c a ra c t e r í st i c a s t í p i c a s d e l a s c e p a s .
33
E l n ú m e r o d e re p i q u e s a p a r ti r d e l a c e p a d e r e f e r e n c i a a d e s e r li m i t a d o , a c e p t á n d o s e
h a s t a c u a t r o p a s e s c o m o m á x im o a p a rt ir d e l a c e p a o s e m i ll a o ri g i n a l d e r e f e r e n c i a .
“ L a s c e p a s d e r e f e r e n c i a s o n i m p r e s c i n d i b l e s p a r a d e m o s tr a r q u e l o s m e d i o s
d e c ultiv o
p o s e e n c a r a c t e rí s ti c a s a c e p t a b l e s , p a r a v a li d a r m é t o d o s y p a r a c o n t r o l a r q u e l o s r e a c t i v o s
y m e d i o s d e c u l ti v o m a n t i e n e n s u s
c a r a c t e r í st i c a s ” ( N o rm a I S O 1 7 0 2 5 ) .
U n a c e p a d e r e f e re n c i a d e b e c u m p l i r c o n v a r i o s r e q u i s it o s :
1.
S e r v i a b le
2.
P o s e e r i n st r u c c i o n e s p a r a r e c o n s t r u i rl a
3.
Ser
g e n é tica m e nte
e s ta b l e s ,
sie n d o
un
r e q u i s it o
fu n d am e n tal
que
se
e s t a b il i d a d y e l m a n t e n i m ie n t o d e c a r a c te r ís ti c a s g e n o t í p ic a s y f e n o t í p i c a s .
34
dé
la
C A P ÍT U L O III
M A R C O M E T O D O L Ó G IC O
L a s m u e st r a s d e a g u a r e c o l e c t a d a s f u e r o n g u a r d a d a s e n r e c i p i e n t e s d e p l á st i c o e st é ri l e s
d e a p r o x i m a d a m e n t e 1 0 0 m L , l o s e s t á n d a r e s u ti li z a d o s f u e r o n p r e p a r a d o s e n f r a s c o s d e
v id rio
de
250
m L
p r e v ia m e n t e
e s t é ri l e s .
Las
m u estras
o bte n id as
fuero n
lle v a da s
a
r e f ri g e r a c i ó n h a s t a e l m o m e n t o d e r e a l iz a r l o s a n á li s is r e s p e c ti v o s .
A n te s
d e r e a li z a r l a s
p rueb as
d e v alid a ció n
d el m é to d o , se
v e r if i c a r o n l o s
p u nto s
de
m a y o r i m p o rt a n c i a d e n tr o d e l p r o c e s o ; c o m o s o n : e l f u n c i o n a m i e n t o d e l o s e q u i p o s , l a
l i m p i e z a d e l a s á r e a s d e s i e m b r a ( m o n i t o r e o a m b i e n t a l ) y l a c o r r e c t a e s te r il i z a c i ó n d e l o s
m e d i o s d e c u l ti v o .
3 .1 V e r i f i c a c i ó n d e l f u n c i o n a m ie n t o d e l o s e q u i p o s
S e r e v i s ó l a c a l i b r a c i ó n , m a n t e n i m i e n t o y re g i st r o s d e u s o d e c a d a u n o d e l o s e q u i p o s
q u e f u e r o n u t il i z a d o s ; p a r a l o s e q u i p o s q u e n o s e e n c o n t r a b a n c a li b r a d o s s e r e a li z ó u n a
v e r i fi c a c i ó n ,
de
e ste
m odo
se
puede
ase g u ra r
que
lo s
re sulta d o s
o bte n id o s
son
c o n f i a b le s . E n e l A n e x o 5 s e p u e d e o b s e r v a r u n e j e m p l o p a r a r e g i s t r a r l a fr e c u e n c i a d e
c a l i b ra c i ó n d e l o s e q u i p o s .
3 .2 C o n t r o l d e a m b i e n te s
E l la b o ra torio fu e m o nito rea d o se m a n alm e nte , la s á re as a n a liza d a s fu e ro n e l aire , e l á re a
d e p r e p a r a c i ó n d e m a t e ri a le s y l a c a b i n a d e f l u j o ( á re a d e s ie m b r a ) .
E l a i r e s e m o n i t o r e ó m e d i a n t e la t é c n ic a d e s e d im e n t a c i ó n , s e c o l o c a r o n c a ja s c o n m e d i o
d e c u l ti v o p a r a b a c t e ri a s ( A g a r n u t ri ti v o ) y p a r a h o n g o s ( A g a r S a b o u r a u d ) e n d i f e r e n t e s
p u n to s d e l c ua rto d e siem b ra d ura n te 1 5 m in uto s.
D e l m i s m o m o d o l a s s u p e r fi c ie s f u e r o n m o n i t o r e a d a s m e d i a n t e u n h i s o p a d o , s e t o m ó
2
una
m u e s tr a
r e p r e s e n t a ti v a
de
una
áre a
a pro x im a d a
de
25
cm
.
P o st e ri o r m e n t e
l l e v a r o n l a s m u e s t r a s t o m a d a s , a i n c u b a c i ó n a 3 5 y 2 2 ° C r e s p e c ti v a m e n t e .
35
se
D espués
del
e v id e n c ia n d o
ti e m p o
q ue
de
no
in c u b a ció n
e x ista
se
r e a li z ó
c o n ta m i n a c i ó n
el
en
el
c o nte o
á rea , d e
de
cada
e s ta
u na
f o rm a
de
se
la s
c a ja s
a se g u ro
el
r e s u lt a d o d e l o s a n á l i s i s y a q u e c o n l a l im p i e z a d e l l a b o r a t o ri o y d e l á re a d e s i e m b r a s e
e v i t ó la c o n t a m i n a c i ó n c r u z a d a .
3 .3 V e r i f i c a c i ó n d e l o s M e d i o s d e C u l ti v o
L o s m e d i o s d e c u l ti v o u ti li z a d o s e n l o s e n s a y o s d e la b o r a t o r i o p a s a r o n p o r d i f e r e n t e s
c o n t r o l e s : c o n t r o l m a c r o s c ó p ic o , c o n t r o l d e p H a 2 5 ° C y u n c o n t r o l d e e s t e ri li d a d .
C o n tr o l m a c r o sc ó pic o
M e d i a n te u n e x a m e n v i s u a l s e re v i s ó l a c o n s i s te n c i a d e l m e d i o (l í q u i d o o s ó li d o ) , s u
c o l o r y s u a s p e c t o ( tr a n s p a r e n t e , t u r b i o , c o n o s i n p re c i p i t a d o ) ; y s i e s t a s d e s c ri p c i o n e s
co rresp o n d en
a
la s
e s p e c i f ic a c i o n e s
d e l m e d io
e x p u e s ta s
en
la
fi c h a
té c n i c a
de
lo s
m ism o s .
C o n t r o l d e e s t e r i li d a d
L a s c a j a s p e t r i y l o s t u b o s d e e n s a y o f u e r o n d i s t ri b u i d o s c o n e l m e d i o s e le c c i o n a d o p a r a
la
sie m bra
re sp e ctiv a . L a s
c a jas
y
tu b o s
con
e l m e d io
de
c u ltiv o
fu ero n
lle v a da s
a
i n c u b a c i ó n a 3 5 ° C d u r a n t e 4 8 h o r a s . F i n a li z a d o e l t i e m p o d e i n c u b a c i ó n s e v e r i fi c ó l a
a u s e n c i a d e c r e c im i e n t o e n l a s c a j a s y d e t u r b i d e z e n l o s t u b o s d e e n s a y o . D e e s t a f o r m a
f u e c o m p r o b a d a l a c o r r e c t a e s t e ri l iz a c i ó n d e l o s m e d i o s p a r a la s i e m b r a .
F IG U R A 2 C o n tro l d e e sterilid a d d e lo s m ed io s d e cu ltiv o
F u en te: C arla B eltran
36
C o n tro l d e p H
S e to m ó u n a m u e stra de l m e d io pre p a ra da a u n a te m pe ra tura d e 2 5 ° C , se d e term in ó e l
p H c o n p a p e l i n d i c a d o r , s e d e b e v e r if i c a r q u e e l v a l o r o b t e n i d o c o r r e s p o n d a a l i n d i c a d o
e n l a f i c h a t é c n ic a d e c a d a u n o d e l o s m e d i o s d e c u l ti v o ( E l i n t e r v a l o d e a c e p t a c i ó n e s d e
+ /- 2 ).
3 .4 R e v i t a l iz a c i ó n d e l a s c e p a s b a c t e r i a n a s A T C C
L a s c e p a s A T C C ( A m e r i c a n T y p e C u l t u r e C o l l e c t i o n ) f u e r o n r e v it a li z a d a s , s i g u i e n d o e l
p r o c e d im i e n t o a d j u n t o a l a s c e p a s d e r e f e r e n c i a a d q u i ri d a s (M i c r o b i o l o g i c s , 2 0 1 1 ) .
-
TM
L a u n id a d K W IK -S T IK
fu e sa c a d a d e l a lm a c e n a m ie n to a 4 °C y se la d ejó e n e l
á r e a d e s i e m b ra h a s t a q u e a l c a n c e l a t e m p e r a t u r a a m b i e n te .
-
P o ste riorm e nte e l líq uid o
h i d r a t a n t e f u e li b e r a d o p e ll i z c a n d o l a
a m p o ll a
d e la
t a p a d e l e q u i p o p a r a r o m p e r l a y p e r m i t ie n d o q u e e l l í q u i d o h i d r a t a n t e f l u y a p o r e l
r a l l o d e l h is o p o a l a p a r t e i n f e r i o r , d o n d e e s t á l a p a s t il l a d e g e l a t i n a .
-
L a p a r t e i n f e ri o r d e l a u n i d a d d e b e p e l li z c a r s e p a r a t ri t u r a r l a p a s t i ll a y m e z c la r l a
c o n e l l í q u i d o , h a s t a q u e l a s p a r tí c u l a s d e l a p a s t il l a t e n g a n u n t a m a ñ o u n if o r m e y
la s u s p e n sió n te n ga u n a s p e cto h o m o g é n e o .
-
S e s a t u r ó i n m e d i a t a m e n te e l h i s o p o c o n e l m a t e r i a l h i d r a t a d o y s e t r a n s fi r i ó e l
m a t e ri a l
a
un
m e d io
a p r o p ia d o
no
s e l e c ti v o ,
re a li z a n d o
una
siem b ra
de
a g o t a m i e n t o p o r e s tr í a s .
-
E l m e d i o i n o c u l a d o f u e i n c u b a d o a la t e m p e ra t u r a y c o n d i c i o n e s a p r o p i a d a s p a r a
e l m ic r o o r g a n i s m o .
D e s p u é s d e l a i n o c u l a c i ó n , s e s e l e c c i o n a r o n c o l o n i a s r e p r e s e n t a ti v a s b i e n a i s l a d a s p a r a
l a s tr a n s f e r e n c ia s r e q u e r i d a s .
37
S e d e s c a rt ó t o d o e l m a t e ri a l h i d r a t a d o r e s t a n t e s e g ú n e l p r o t o c o l o d e l l a b o r a t o ri o p a ra l a
e l i m i n a c i ó n d e m a t e ri a l b i o l ó g i c o p e li g r o s o .
F IG U R A 3 U n id a d K W IK -S T IK
T M
F u e n te : C a rla B e lt rá n
3 .5 P r e p a r a c i ó n d e l a E s c a l a M c F a r l a n d
M a t e r i a l e s y R e a c ti v o s
F u ero n
u t i li z a d o s : t u b o s
de
ensayo
de
20
m L
con
ta p ó n
p l á s t i c o , g r a d il l a , p i p e t a
y
m i c r o p i p e ta ( B O E C O 1 0 0 0 µ l ) s o l u c i ó n d e Á c i d o S u l f ú ri c o a l 1 % y s o l u c i ó n d e C l o r u r o
d e B a rio a l 1% .
P r o c e d im ie nto
-
S e t o m ó 1 0 t u b o s d e e n s a y o d e 2 0 m L , e s t o s f u e r o n i d e n t i fi c a d o s c o r re c t a m e n t e ,
c o l o c a n d o e l n ú m e r o d e t u b o a l q u e c o r re s p o n d a la p r e p a ra c i ó n .
38
-
L a s o l u c i ó n d e Á c i d o S u l f ú r i c o f u e p r e p a r a d a c o l o c a n d o 5 ,2 0 m L d e á c i d o e n u n
b a l ó n d e 5 0 0 m L y s e a f o r ó c o n a g u a d e s ti l a d a .
-
L a s o l u c i ó n d e C l o r u r o d e B a ri o f u e p r e p a r a d a p e s a n d o 0 ,9 8 8 7 g d e c l o r u r o d e
b a r i o e n u n b a l ó n d e 1 0 0 m L , s e a f o r ó c o n a g u a d e s ti l a d a .
-
E n c a d a u n o de los tu b o s se c olo c ó la s ca n tida d e s d e s olu c ió n n e c e s aria s p a ra
c o m p l e t a r 1 0 m L p o r t u b o , c o m o s e o b s e r v a e n la T a b l a 5 .
-
Los
tu b o s
fuero n
sella d os
con
ta p o n e s
de
p lá stic os , d e
e sta
fo rm a
a g ita ció n se p u d o m e z c lar la so lu ció n p re p ara d a .
T A B L A 5 E sca la d e M c F a rla n d
S u sp e n sió n
C o n te n id o (m L )
b a c te r ia n a
T ubo N o.
C lo r u r o d e
A c id o S u lfú r ic o
por m L
b a r io 1 %
1%
8
(x 1 0 )
1
0 ,1
9 ,9
3
2
0 ,2
9 ,8
6
3
0 ,3
9 ,7
9
4
0 ,4
9 ,6
12
5
0 ,5
9 ,5
15
6
0 ,6
9 ,4
18
7
0 ,7
9 ,3
21
8
0 ,8
9 ,2
24
9
0 ,9
9 ,1
27
10
1 ,0
9 ,0
30
F u en te: G am azo, 20 05
39
m e dia n te
E l t u b o s e l e c c i o n a d o p a r a e l a n á l i s i s f u e a g i t a d o a n t e s d e s u u ti l iz a c i ó n , d e e s t e m o d o l a
so lu c ió n se h o m o g e niz o y se p u d o c o m p a ra r su turb id e z c o n la su sp e nsió n d e b a c teria s
n e c e s a ri a .
F IG U R A 4 S o lu cio n es p a ra la E sca la M cF a rla n d
F u en te: C arla B eltrán
F IG U R A 5
E s ca la d e M cF a rla n d
F u en te: C arla B eltrán
40
3 .6 P r e p a r a c i ó n d e i n o c u l o s
M a t e r i a l e s , R e a c ti v o s y E q u i p o s
S e u t i li z a r o n : t u b o s d e e n s a y o d e 1 0 ,0 m L c o n t a p a r o s c a , ll e n o s c o n a g u a d e p e p t o n a y
e s t é ri l e s,
c u l ti v o
de
re fe re n cia
(C ep a
A T C C ),
asa
de
c u ltiv o
y
una
in c u b a d o ra
( M E M M E R T E 5 9 6 .0 2 3 9 ) a 3 5 ° C .
P r o c e d im ie nto
-
S e t o m a r o n d e 3 a 5 c o l o n i a s d e l c u lt i v o d e r e f e r e n c i a ( C e p a A T C C ) .
-
L a s c o l o n i a s s e l e c c i o n a d a s a n t e ri o r m e n t e f u e r o n t o m a d a s c o n e l a s a d e c u lt i v o y
c a d a u n a d e e l la s s e t ra n s fi r i ó a u n t u b o d e e n s a y o c o n 5 m L d e a g u a d e p e p t o n a
e s t é ri l .
-
U n a v e z q u e l a s c o l o n i a s s e e n c u e n t r e n e n e l t u b o d e e n s a y o é s t e f u e ll e v a d o a
i n c u b a c i ó n a 3 5 ° C p o r 2 4 h o r a s a p r o x im a d a m e n t e .
-
Pasadas
la s
in o c u la d o s
24
h o ras
sea
de
in c u b a ció n
ó p ti c a m e n t e
se
v e r i fi c ó
c o m p a ra b l e
con
q ue
la
la
d el
tu rb id ez
de
e s tá n d a r
lo s
tu b o s
M c F arla n d
se le c cio n a d o .
3 .7 P r e p a r a c i ó n d e e s t á n d a r e s
M a t e r i a l e s , R e a c ti v o s y E q u i p o s
S e u t il i z a r o n : t u b o s d e e n s a y o d e 1 5 m L c o n a g u a d e p e p t o n a e s t é ri l , f r a s c o s d e 2 5 0 m L
c o n t a p a r o s c a , a g u a d e s t il a d a e s t é r il , e s p e c t r o f o t ó m e t r o ( H A C H D R 2 8 0 0 ) , m i c r o p i p e t a
(B O E C O
1 0 0 0 µ l ) , p r o b e ta 1 0 0 m L , c a b i n a d e fl u j o l a m i n a r ( L A B C O N C O ) , a u t o c l a v e
(T u ttn a u er B R IN K M A N N 2 3 4 0 E ).
P r o c e d im ie nto p a r a la p r e p a r a ció n d e e stá n d a r es p a r a a g u a c la r a
-
Se
p a rtió
de
una
su spe n sió n
b a c t e ri a n a
(c olo n ia s
E . c o li +
agua
de
p e p to n a )
u f c / m L , d e d e n s i d a d ó p t ic a 0 ,1 0 – 0 ,1 3 , l o q u e i n d i c a u n a c o n c e n t r a c i ó n d e 1 0
u fc /m L .
41
8
-
P o s t e r i o r m e n t e s e r e a li z ó u n a d i l u c i ó n 1 : 1 0 0 ( 0 ,1 m L d e s u s p e n s i ó n b a c t e r i a n a +
6
9 ,9 m L d e a g u a d e a g u a d e s t il a d a e s t é r il ) , o b t e n i e n d o u n a c o n c e n tr a c i ó n d e 1 0
u fc /m L .
-
6
L a c o n c e n tra c ió n d e 1 0
s e d il u y ó e n p r o p o r c i ó n 1 : 1 0 0 ( 0 ,1 m L d e s u s p e n s i ó n
b a c t e ri a n a + 9 ,9 m L d e a g u a d e s t i l a d a e st é ri l ) , o b t e n i e n d o u n a c o n c e n t r a c i ó n d e
4
10
-
U F C /m L .
4
S e d i l u y e la c o n c e n t r a c i ó n 1 0
e n p ro p orc ió n 1 :1 0 (5 m L d e su sp e nsió n + 4 5 m L
3
d e a g u a d e s t il a d a e s t é r il ) , p a r a f i n a l m e n t e o b t e n e r l a c o n c e n tr a c i ó n 1 0
u f c /m L
q u e s e u t il i z ó c o m o s o l u c i ó n m a d r e .
-
A p a r t i r d e l a s o l u c i ó n m a d r e , s e p r e p a r a r o n 3 s o l u c i o n e s e s tá n d a r ( A , B y C ) .
-
E l e stá n d ar A
agua
d e s t il a d a
fu e p re p ara d o tom a n d o 1 5 m L d e s u s p e n sió n m a dre y 3 0 m L d e
e st é ri l ,
se
o btu v o
así
una
c o n ce n trac ió n
a p ro xim a da
de
300
U F C /m L .
-
P a ra la p re p ara c ió n d e l e stá nd a r B se tom a ro n 1 5 m L d e l e stá n da r A y 3 0 m L d e
a g u a d e s ti l a d a e s t é ri l , l o q u e d a u n a c o n c e n t ra c i ó n a p r o x i m a d a d e 1 0 0 u f c / m L .
-
El
e stá n d ar
C
se
p rep aró
to m a n d o
3
m L
del
e stá n d a r
B
y
d e s t il a d a e s t é ri l , o b t e n i e n d o u n a c o n c e n tr a c i ó n d e 1 0 U F C / m L .
F IG U R A 6 E stá n d a re s p a ra a g u a s cla r a s
F u en te: C arla B eltrán
42
27
m L
de
agua
P r e p a r a c ió n d e e s tá n d a r e s p a r a a g u as r e sid u a le s
-
S e t o m ó c o m o e s t á n d a r a l i n o c u l o i n ic i a l d e s u s p e n s i ó n ( c o l o n i a s E . c o li + a g u a
de
p e p to n a )
a rro jó
un
U F C /m L , q u e
v alo r
que
a l le e r la
o s c il a
e n tr e
d e n sid a d
0 .1 0 - 0 .1 3 ,
ó ptic a e n
lo
que
es
e l e sp e ctrofo tóm e tro
in d ica tiv o
de
una
8
c o n c e n tra ció n d e 1 0
-
U F C /m L .
11
S e p re p a ró u n se g u n d o e stá n d a r d e 1 2 x 1 0
U F C /m L ,
p a ra e sto se p re p aró u n
i n o c u l o ( 2 4 h o r a s ) , s e r e a li z a r o n 3 d i l u c i o n e s h a s t a q u e a l c o m p a r a r c o n l a e s c a l a
d e M c F a r l a n d e l t u b o m o s tr ó l a m i s m a t u r b i d e z d e l t u b o n u m e r o 4 , l o q u e d a u n a
11
c o n c e n tra ció n d e 1 2 x 1 0
U F C /m L .
F IG U R A 7 E stá n d a re s p a ra a g u a s re sid u a le s
F u en te: C arla B eltrán
L a c o n c e n t r a c i ó n d e l o s e s t á n d a r e s f u e e s c o g i d a e n r e l a c i ó n a l o s r e s u lt a d o s h i s t ó r i c o s
o b t e n i d o s p o r e l l a b o r a t o r i o , l o s c u a l e s s e i n d ic a n e n e l A n e x o 2 .
43
3 .8 A n á l i s i s d e c o l if o r m e s t o t a l e s p o r e l m é t o d o d e f e r m e n t a c i ó n e n t u b o s m ú l ti p l e s
La
p ru eb a
está n d ar
p ara
el
g ru p o
c o li f o r m e
se
r e a li z ó
m e d ia n t e
la
té c nic a
de
f e r m e n t a c i ó n e n t u b o s m ú l ti p l e s ; l o s r e s u l t a d o s d e l e s t u d i o d e l o s t u b o s y d i l u c i o n e s s e
c o m u n i c a n e n t é rm i n o s d e N ú m e r o m á s p r o b a b l e ( N M P ) d e m i c r o o r g a n i s m o s e x i s t e n te s .
M a t e r i a l e s , R e a c ti v o s y E q u i p o s
E l á r e a d e t r a b a j o c o n s t a d e u n a s u p e r f i c i e a m p li a y p l a n a , s e v e r i fi c ó
q u e é sta e sté
l i m p i a , b i e n il u m i n a d a , r a z o n a b l e m e n t e li b r e d e p o l v o s ; d e l a m i s m a f o rm a e l á re a d e
a l m a c e n a m ie n t o e s t u v o li b r e d e p o l v o e i n s e c t o s .
D e n t r o d e l o s m a t e ri a le s , i n s u m o s y e q u i p o s q u e f u e r o n u t il i z a d o s e n c o n tr a m o s : C a l d o
L a c t o s a ( L a c t o s a B r o t h M e r k ) , C a l d o v e r d e b il is b r i ll a n t e ( B ri ll a n t G r e e n B i l e B r o t h
M e rk ), A g u a d e P e p to n a B u ffe ra d a (B u ffe re d P e p to n e W ate r M e rk), tu b o s d e e n sa y o ,
tu b o s
d u rh am ,
a lg o d ó n ,
p a p el
a lum inio ,
A u to c la v e (T u ttn a ue r B R IN K M A N N
vasos
2340
de
pre c ipitac ió n ,
p ipe ta
E ), In cu b ad o ra (M E M M E R T
de
25
m L,
E 5 9 6 .0 2 3 9 ) ,
M ic ro pip e ta (B O E C O 1 0 0 0 µ L ), c a b in a d e flujo lam in ar ( L A B C O N C O ).
P r o c e d i m i e n t o d e a n á l is i s
M é to d o d e R e fe r e n c ia (S ta n d a r M e th o d s)
F a se P r e su n tiv a
-
S e a ñ a d ió
e l c a l d o l a c t o s a a l a g u a d e s t i la d a , a g it a n d o c o n s t a n t e m e n t e h a s t a s u
d iso lu ció n .
-
1 0 m L d e l m e d i o p r e p a r a d o f u e r o n c o l o c a d o s e n l o s t u b o s d e f e rm e n t a c i ó n c o n
u n v i a l i n v e r ti d o ( c a m p a n a d e D u r h a m ) .
-
C e rra r los tu b o s c o n ta p o n e s d e a lg o d ó n .
-
D e s p u é s d e l a e s t e ri li z a c i ó n s e c o m p r o b ó q u e e l p H f u e r a d e 7 .
-
L o s tu b o s d e fe rm e n tac ió n fu e ro n a g ru pa d o s e n h ile ras d e c in c o e n u n a g ra d illa
p ara
tu b os
d e e n sa y o (e l n um e ro d e lo s tu b o s
c a r a c t e r í st i c a s d e l a g u a q u e s e v a y a a e s t u d i a r) .
44
sele c cio n a d o s
dep en d en
d e la s
-
A n t e s d e r e a l i z a r l a s i e m b r a s e a g it a r o n l a s m u e s tr a s y l a s d i l u c i o n e s u n a s 2 5
veces.
-
S e in o c u ló c a d a tu b o c o n 1 m L d e m u e stra .
-
L o s t u b o s i n o c u la d o s f u e r o n i n c u b a d o s a 3 5 ° C . P a s a d a s 2 4 h o r a s , s e a g i ta r o n l o s
t u b o s y s e o b s e r v ó p r o d u c c i ó n d e g a s o c r e c i m i e n t o á c i d o ( c o l o r a m a ri ll o ) . E n
-
c a s o c o n t ra r i o s e
re in c u b a r o n y se o b s e rv ar o n re s ulta d os 4 8 h o ra s de s p u é s .
Se
tu b o s
c o n ta ro n
lo s
con
r e s u lt a d o
p o s i ti v o
( p re s e n c ia
re g istra n d o la a u s e n ci a o p res e n c ia .
F IG U R A 8 S iem b r a d e m u e stra s
F u en te: C arla B eltrán
45
de
gas
o
tu rbid e z )
F IG U R A 9 T u b o co n R e su lta d o P o sitiv o
F u en te: C arla B eltrán
F IG U R A 1 0 T u b o s co n R es u lta d o N e g a tiv o
F u en te: C arla B eltrán
46
F a se C o n fir m a to ria
-
S e a ñ a d i ó e l c a l d o v e r d e b r il la n t e a l a g u a d e s t il a d a , p a r a p r e p a ra r e l m e d i o v e r d e
b r i ll a n t e l a c t o s a b il i s , a g i ta n d o c o n s ta n t e m e n t e h a s t a s u d i s o l u c i ó n .
-
E l m e d i o p r e p a ra d o f u e c o l o c a d o e n t u b o s d e f e rm e n t a c i ó n c o n u n v i a l i n v e r t i d o ,
l a c a n ti d a d d e m e d i o d e b e s e r s u f i c i e n t e p a r a c u b ri rl o .
-
C e rra r los tu b o s c o n ta p o n e s d e a lg o d ó n .
-
D e s p u é s d e l a e s t e ri li z a c i ó n s e c o m p r o b ó q u e e l p H f u e r a d e 7 .
-
S e a g itaro n
l o s t u b o s p r im a ri o s d e l a fa s e p re s u n ti v a q u e p r e s e n te s u n p o s i b l e
r e s u lt a d o p o s it i v o .
-
C o n u n a s a e s té r il d e 3 m m
d e d iá m e t r o , s e p a s ó u n a s a c o m p l e t a d e c u l ti v o a l
t u b o d e f e rm e n ta c i ó n q u e c o n t i e n e e l m e d i o v e r d e b ri l la n t e .
-
E l m e d i o d e v e r d e b r il l a n t e d e l a c t o s a b i li s
fu e in c u b a d o
a 35 °C
d u ra n te 4 8
h o ras.
-
L a f o rm a c i ó n d e c u a l q u ie r c a n ti d a d d e g a s e n e l v i a l i n v e r ti d o e n e l m e d i o d e
f e r m e n t a c i ó n v e r d e b r il l a n t e d e l a c t o s a b il i s c o n s ti t u y e u n r e s u l t a d o p o s it i v o e n
l a f a s e c o n f ir m a t o r ia .
-
S e r e g i s t r ó e l v a l o r d e l N M P a p a rt ir d e l n ú m e r o d e t u b o s p o s i t i v o s .
F IG U R A 1 1 S iem b ra d e tu b o s p o sitiv o s
F u en te: C arla B eltrán
47
C a l d o V e r d e B r i l l a n t e ( M é t o d o u ti li z a d o p o r e l L a b o r a t o r i o )
-
S e a ñ a d i ó e l c a l d o v e r d e b r il la n t e a l a g u a d e s t il a d a , p a r a p r e p a ra r e l m e d i o v e r d e
b r i ll a n t e l a c t o s a b il i s , a g i ta n d o h a s ta s u d i s o l u c i ó n .
-
4
m L
d e l m e dio p re p ara d o fu e ro n c olo c a d o s e n tu b os d e fe rm e n ta ció n c o n u n
v i a l i n v e r ti d o .
-
C e rra r los tu b o s c o n ta p o n e s d e a lg o d ó n .
-
D e s p u é s d e l a e s t e ri li z a c i ó n s e c o m p r o b ó q u e e l p H f u e r a d e 7 .
-
S e c o l o c ó 1 m L d e m u e s tr a y d e la s d il u c i o n e s r e s p e c t i v a s .
-
I n c u b a r e l m e d i o d e v e r d e b r il l a n t e d e l a c t o s a b i li s a 3 5 ° C d u r a n t e 4 8 h o r a s .
-
L a f o rm a c i ó n d e c u a l q u ie r c a n ti d a d d e g a s e n e l v i a l i n v e r ti d o e n e l m e d i o d e
f e r m e n t a c i ó n v e r d e b r il l a n t e d e l a c t o s a b i li s c o n s ti t u y ó u n r e s u l t a d o p o s it i v o e n
l a f a s e c o n f ir m a t o r ia .
-
S e r e g i s t r ó e l v a l o r d e l N M P a p a rt ir d e l n ú m e r o d e t u b o s p o s i t i v o s .
F IG U R A 1 2 T u b o s co n R es u lta d o P o sitiv o
F u en te: C arla B eltrán
48
3 .9 P r o c e d i m i e n t o d e N M P p a r a c o l if o r m e s f e c a le s
La
p ru eb a
p ara
c o l if o r m e s
fe c ale s
(co n
m e d io
EC )
se
a p l ic ó
p ara
e l e stu d io
de
lo s
c o l i f o r m e s f e c a l e s p r e s e n t e s e n l a s m u e s t r a s d e a g u a . L a p r u e b a p a ra c o l if o rm e s f e c a l e s
p e r m it i ó d i f e r e n c ia r e n t r e l o s c o l if o rm e s d e o r i g e n f e c a l (i n t e s ti n o d e l o s a n i m a l e s d e
s a n g r e c a l i e n t e ) y l o s p r o c e d e n t e s d e o t r a s f u e n te s .
M a t e r i a l e s , e q u i p o s y r e a c ti v o s
D e n t r o d e l o s m a t e ri a le s , i n s u m o s y e q u i p o s q u e f u e r o n u t il i z a d o s e n c o n tr a m o s : C a l d o
E C ( E C B r o t h M e r k ) , C a l d o v e r d e b i li s b ri ll a n t e ( B ri ll a n t G r e e n B il e B r o t h M e r k ) , A g u a
d e P e p to n a B u ffe ra d a (B u ffere d P e p to n e W a te r M erk ), tu b o s d e e n sa y o , tu b o s d u rh a m ,
a l g o d ó n , p a p e l a l u m i n i o , v a s o s d e p r e c i p it a c i ó n , p i p e t a d e 2 5 m L , A u t o c la v e ( T u tt n a u e r
B R IN K M A N N
2340E ),
In cu b ad o ra
(M E M M E R T
E 5 9 6 .0 2 3 9 ) ,
M ic r o p i p e t a
(B o eco
1 0 0 0 µ l), ca b in a d e flu jo lam in a r (L A B C O N C O ).
P r o c e d im ie n to d e A n á lisis
M é to d o d e R e fe r e n c ia (S ta n d a r M e th o d s)
-
Se
a ñ a d ió
el
C a ld o
EC
al
agua
d e s t il a d a , a g it a n d o
c o n s t a n t e m e n te
h a sta
su
d iso lu ció n .
-
E l m e d i o p r e p a r a d o f u e c o l o c a d o e n t u b o s d e fe r m e n t a c i ó n c o n u n v i a l i n v e r t i d o
( l a c a n t i d a d d e m e d i o d e b e s e r s u f i c i e n te p a r a c u b r i rl o ) .
-
C e rra r los tu b o s c o n ta p o n e s d e a lg o d ó n .
-
D e s p u é s d e l a e s t e ri li z a c i ó n s e c o m p r o b ó q u e e l p H f u e r a d e 7 .
-
Se
se le c c io n aro n
y
a g ita ro n
lo s
tu b os
p rim ario s
de
la
fa se
p r e s u n ti v a
que
p r e s e n t a r o n u n p o s i b l e r e s u lt a d o p o s it i v o
-
C o n u n a s a e s t é r i l , s e p a s ó e l c u l ti v o d e c a d a t u b o d e f e rm e n t a c i ó n p o s it i v o a l
m e d io E C .
-
Los
tu b o s
i n o c u la d o s
con
m e dio
EC
fu ero n
in c u b a d o s
a
4 4 ,5
°C
d u r a n te
24
h o ras.
-
S e c o n s i d e r ó c o m o r e a c c i ó n p o si t i v a l a a p a ri c i ó n d e g a s e n u n m e d i o E C a l a s 2 4
h o ra s o m e n os d e in c u b a ció n .
49
F IG U R A 1 3 T u b o s co n R es u lta d o P o sitiv o
F u en te: C arla B eltrán
C a l d o V e r d e B r i l l a n t e ( M é t o d o u ti li z a d o p o r e l L a b o r a t o r i o )
-
Se
añ ad ió
e l c a ld o
v erd e
b ri ll a n t e
al a g u a
d e s t il a d a , p a r a
p re p a r a r e l m e d i o ,
a g i t a n d o c o n s t a n t e m e n t e h a s t a s u d is o l u c i ó n .
-
4
m L
d e l m e dio p re p ara d o fu e ro n c olo c a d o s e n tu b os d e fe rm e n ta ció n c o n u n
v i a l i n v e r ti d o ( C a m p a n a d e D u r h a m ) .
-
C e rra r los tu b o s c o n ta p o n e s d e a lg o d ó n .
-
D e s p u é s d e l a e s t e ri li z a c i ó n s e c o m p r o b ó q u e e l p H f u e r a d e 7 .
-
Se
se le c cio n a ro n
y a g it a r o n l o s
tu b os
p ri m a r i o s
q ue
p re se nta ro n u n
re sulta d o
p o s i ti v o .
-
C o n u n a s a e s t é ri l , s e p a s ó u n a s a c o m p l e ta d e c u lt i v o a l t u b o d e f e r m e n t a c i ó n
q u e c o n t i e n e e l m e d i o v e rd e b r il l a n t e .
-
Los
tu b o s
i n o c u la d o s
con
el
m e dio
v erd e
b ri ll a n t e
de
la cto sa
b i li s
fu ero n
in c u b a d o s a 4 4 °C d u ra nte 4 8 h o ras.
-
L a f o rm a c i ó n d e c u a l q u ie r c a n ti d a d d e g a s e n e l v i a l i n v e r ti d o e n e l m e d i o d e
f e r m e n t a c i ó n v e r d e b ri ll a n te d e l a c t o s a b i li s c o n s t i t u y ó u n r e s u l t a d o p o s i ti v o .
-
S e r e g i s t r ó e l v a l o r d e l N M P a p a rt ir d e l n ú m e r o d e t u b o s p o s i t i v o s .
50
F IG U R A 1 4 S iem b ra d e tu b o s c o n R e su lta d o P o sitiv o
F u en te: C arla B eltrán
F IG U R A 1 5 T u b o s co n R es u lta d o N e g a t iv o
F u en te: C arla B eltrán
51
F IG U R A 1 6 T u b o s co n R es u lta d o P o sitiv o
F u en te: C arla B eltrán
3 .1 0 M é t o d o d e s i e m b r a p o r v e r ti d o e n p l a c a p a r a c o l i f o r m e s t o t a le s y f e c a l e s
L a s i e m b r a p o r v e rt i d o e n p l a c a f u e r e a li z a d a c o m o f o r m a d e v e ri fi c a c i ó n d e l m é t o d o
d e s c r it o a n t e r i o r m e n t e .
M a t e r i a l e s , R e a c ti v o s y E q u i p o s
L o s m a t e ri a l e s , i n s u m o s y e q u i p o s q u e f u e r o n u ti li z a d o s s o n : c a j a s p e t ri , A g a r n u t ri t i v o
( N u t r i e n t A g a r ) , v a s o s d e p r e c i p i ta c i ó n , A u t o c l a v e ( T u t t n a u e r B R I N K M A N N
In cu b ad o ra
(M E M M E R T
E 5 9 6 .0 2 3 9 ) ,
M ic ro pip e ta
(B o eco
1 0 0 0 µ l) ,
c a b in a
2340 E),
de
flu jo
la m ina r (L A B C O N C O ).
P r o c e d i m i e n t o d e a n á l is i s
-
C on
la
m ic r o p i p e t a
se
tom ó
1
m L
d e m u e stra
de cada
una
de
la s d iluc io n e s
r e s p e c ti v a s .
-
S e c o l o c ó l a m u e st r a e n u n a c a j a p e t r i ( p r e v i a m e n t e e st e ri l i z a d a ) .
-
E l m e d i o d e c u lt i v o n o m u y c a li e n t e f u e v e rt i d o s o b r e l a c a j a p e tr i , c u b r i e n d o
to d a su su p erficie .
52
-
S e r e a l i z a r o n m o v im i e n t o s c i r c u l a r e s p e r m i ti e n d o a s í q u e l a m u e s t r a y e l m e d i o
d e c u l ti v o f o rm e n u n a m e z c l a h o m o g é n e a .
-
L a s c a j a s p e tr i s e m b r a d a s s e d e j a r o n e n fr i a r h a s t a q u e e l m e d i o d e c u lt i v o s e
so lidific ó .
-
U n a v e z o b t e n i d a l a si e m b r a s e c e rr a r o n y s e l l a r o n l a s c a j a s p e t r i c o n p a r a fi l m
p a r a e v it a r l a c o n t a m i n a c i ó n .
-
P o s t e r i o r m e n t e s e l l e v a r o n a i n c u b a c i ó n a 3 5 ° C d u ra n t e 4 8 h o ra s .
-
L a s c o lo n ias p re se nte s fue ro n c o nta d a s y re p orta da s c o m o U F C /m L .
F IG U R A 1 7 C a ja co n re su lta d o P o sitiv o
F u en te: C arla B eltrán
53
C A P ÍT U L O IV
R E SU L T A D O S
C on
lo s
d a to s
o b te n id os
p r e c i s i ó n , li m i t e
de
se
c a lc uló :
la
m e d ia , la
c u a n ti fi c a c i ó n , i n c e r t i d u m b r e
d e svia ció n
y
ran g o;
e stá n d ar, la
con
la
e x a ctitu d ,
u ti l iz a c i ó n
de
la s
fo rm ula s p rese n ta d as a n teriorm e nte .
4 .1 D i s e ñ o E x p e r i m e n t a l
C o m p a r a c ió n d e m é to d o s
8
P a ra la s a g u as c lara s se p artió d e u n in o c u lo d e 1 0
U F C / m L , s e p r e p a ra r o n 3 e s tá n d a r e s ,
l o s q u e s e r v ir á n c o m o r a n g o s t e ó ri c o s p a r a l a c o m p a r a c i ó n d e r e s u l t a d o s . L a t a b l a
6
i n d i c a l o s v a l o r e s p e r t e n e c i e n te s a c a d a e s t á n d a r .
T A B L A 6 V a lo r d el ra n g o teó rico d e lo s e stá n d a re s.
E stá n d a r
R a n g o d e R e c u e n to U F C /m L
A
300
B
100
C
10
F u en te: C arla B eltrán
12
P a r a l a s a g u a s re s i d u a l e s se t o m o e l t u b o d e l a e s c a l a M c F a r l a n d d e 1 0
U F C /m L , y a
q u e s u v a l o r e s c o r r e s p o n d i e n te a l r e s u lt a d o o b t e n i d o p r e v i a m e n t e d e l R i o M a c h á n g a r a ,
e l c u a l f u e t o m a d o c o m o r e f e r e n c i a p a r a e l a n á li s is d e l a s a g u a s re s i d u a l e s .
U n a v e z o b t e n i d o s l o s e s t á n d a r e s , s e s e m b r ó 1 m L d e c a d a u n o e n l o s m e d i o s d e c u lt i v o s
c o r r e s p o n d i e n t e s . E n l a s t a b l a s 6 , 7 , 8 y 9 , s e p u e d e n o b s e r v a r l o s r e s u lt a d o s o b te n i d o s :
54
T A B L A 7 R e s u l t a d o s d e l r e c u e n t o d e m i c r o o r g a n is m o s e n e l r a n g o d e 3 0 0
U F C / m L , p a r a e l m é t o d o d e N M P u t i li z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c i a
(S ta n d a r M eth o d s).
V e r d e B r illa n te (N M P /1 0 0 m L )
C a ld o la c to sa (N M P /1 0 0m L )
R e p e tic ió n
C . F e c a le s
C . T o ta le s
C . F e c a le s
C . T o ta le s
1
240
240
300
300
2
460
460
300
300
3
290
290
240
240
4
240
240
280
280
5
240
240
350
350
6
240
240
300
300
7
290
290
300
300
8
290
290
300
300
9
290
290
280
280
10
290
290
300
300
11
290
290
280
280
12
290
290
300
300
13
290
290
280
280
14
240
240
300
300
15
240
240
300
300
16
290
290
280
280
17
290
290
280
280
18
290
290
300
300
19
290
290
300
290
20
240
240
300
240
21
290
290
300
240
22
240
240
300
300
23
290
290
280
280
24
290
290
350
300
25
290
290
280
280
55
C o n tin u a c ió n T A B L A 7
T A B L A 7 R e s u l t a d o s d e l r e c u e n t o d e m i c r o o r g a n is m o s e n e l r a n g o d e 3 0 0
U F C / m L , p a r a e l m é t o d o d e N M P u t i li z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c i a
(S ta n d a r M eth o d s).
V e r d e B r illa n te (N M P /1 0 0 m L )
C a ld o la c to sa (N M P /1 0 0m L )
R e p e tic ió n
C . F e c a le s
C . T o ta le s
C . F e c a le s
C . T o ta le s
26
290
290
280
280
27
290
290
300
290
28
240
240
300
300
29
290
290
350
300
30
290
290
280
280
31
240
240
300
300
32
240
240
350
300
33
290
290
300
300
34
290
290
280
280
35
290
290
300
300
36
290
290
280
280
37
290
290
300
300
38
290
290
280
280
39
240
240
300
300
40
240
240
300
300
41
290
290
300
300
42
240
290
280
280
43
240
240
300
300
44
290
290
350
300
45
290
290
280
280
46
240
240
300
300
47
290
290
300
300
48
240
240
300
300
49
290
290
280
280
50
290
290
280
280
F u en te: C arla B eltrán
L a ta b la in dic a e l n úm e ro d e d ato s y
l o s re c u e n t o s ( v a l o r e s n u m é r i c o s ) o b t e n i d o s p o r
c a d a m é to d o pa ra el ra n g o d e 3 0 0 U F C /m L , e v id e nc ia n d o u n to tal d e 5 0 d a tos.
56
T A B L A 8 R e s u l t a d o s d e l r e c u e n t o d e m i c r o o r g a n is m o s e n e l r a n g o d e 1 0 0
U F C / m L , p a r a e l m é t o d o d e N M P u t i li z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c i a
(S ta n d a r M eth o d s).
R e p e tic ió n
V e r d e B r illa n te (N M P /1 0 0 m L )
C a ld o la c to sa (N M P /1 0 0m L )
C . T o ta le s
C . F e c a le s
C . T o ta le s
C . F e c a le s
1
93
93
80
80
2
93
93
90
90
3
93
93
90
90
4
120
120
90
90
5
93
93
130
130
6
93
93
130
110
7
95
95
110
110
8
93
93
130
130
9
95
93
110
110
10
120
120
80
80
11
93
93
130
130
12
93
93
90
90
13
93
93
110
110
14
95
95
130
110
15
95
95
110
110
16
120
120
110
110
17
93
93
130
130
18
93
93
110
110
19
120
120
110
110
20
95
95
80
80
21
120
120
110
110
22
93
93
110
110
23
93
93
110
110
24
95
95
130
130
25
95
95
110
110
57
C o n tin u a c ió n T A B L A 8
T A B L A 8 R e s u l t a d o s d e l r e c u e n t o d e m i c r o o r g a n is m o s e n e l r a n g o d e 1 0 0 U F C / m l ,
p a r a e l m é t o d o d e N M P u t il i z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c i a ( S t a n d a r
M eth o d s).
V e r d e B r illa n te (N M P /1 0 0 m L )
C a ld o la c to sa (N M P /1 0 0m L )
R e p e tic ió n
C . F e c a le s
C . T o ta le s
C . F e c a le s
C . T o ta le s
26
120
120
130
110
27
120
120
110
110
28
93
93
110
110
29
93
93
90
90
30
120
120
110
90
31
120
120
110
110
32
93
93
110
110
33
95
95
90
90
34
95
95
110
110
35
93
93
80
80
36
93
93
90
90
37
95
95
90
90
38
120
120
90
90
39
95
95
110
110
40
120
120
90
90
41
95
95
110
110
42
95
93
110
90
43
120
120
80
80
44
93
93
110
110
45
95
95
90
90
46
95
93
110
90
47
93
93
80
80
48
93
93
90
90
49
95
95
90
90
50
120
95
90
90
F u en te: C arla B eltrán
L a ta b la in dic a e l n úm e ro d e d ato s y
l o s re c u e n t o s ( v a l o r e s n u m é r i c o s ) o b t e n i d o s p o r
c a d a m é to d o pa ra el ra n g o d e 1 0 0 U F C /m L , e v id e nc ia n d o u n to tal d e 5 0 d a tos.
58
T A B L A 9 R e s u l t a d o s d e l r e c u e n t o d e m i c r o o r g a n is m o s e n e l r a n g o d e 1 0 U F C / m L ,
p a r a e l m é t o d o d e N M P u t il i z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c i a ( S t a n d a r
M eth o d s).
V e r d e B r illa n te (N M P /1 0 0 m L )
C a ld o la c to sa (N M P /1 0 0m L )
R e p e tic ió n
C . F e c a le s
C . T o ta le s
C . F e c a le s
C . T o ta le s
1
9 .2
9 .2
13
13
2
9 .1
9 .1
13
13
3
9 .2
9 .2
8
8
4
12
12
13
13
5
11
11
13
13
6
11
11
11
11
7
11
11
11
11
8
9 .3
9 .3
11
11
9
11
11
9
9
10
11
11
13
13
11
11
11
14
14
12
7 .3
7 .3
13
13
13
9 .1
9 .1
11
11
14
12
12
11
11
15
11
11
9
9
16
13
13
9
9
17
11
11
11
11
18
11
11
11
11
19
9 .1
9 .1
13
13
20
11
9 .1
11
11
21
11
9 .1
11
11
22
13
11
11
11
23
9 .1
9 .1
9
9
24
11
11
11
9
25
9 .1
9 .1
8
8
59
C o n tin u a c ió n T A B L A 9
T A B L A 9 R e s u l t a d o s d e l r e c u e n t o d e m i c r o o r g a n is m o s e n e l r a n g o d e 1 0 U F C / m L ,
p a r a e l m é t o d o d e N M P u t il i z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c i a ( S t a n d a r
M eth o d s).
R e p e tic ió n
V e r d e B r illa n te (N M P /1 0 0 m L )
C a ld o la c to sa (N M P /1 0 0m L )
C . T o ta le s
C . F e c a le s
C . T o ta le s
C . F e c a le s
26
9 .1
9 .1
13
11
27
9 .1
11
13
13
28
11
9 .1
9
9
29
11
11
9
9
30
13
11
11
9
31
11
9 .1
9
8
32
11
11
11
11
33
11
11
13
11
34
9 .1
9 .1
13
9
35
11
9 .1
13
11
36
13
12
9
9
37
9 .1
9 .1
11
11
38
11
9 .1
11
11
39
9 .1
9 .1
9
9
40
7 .3
7 .3
8
8
41
7 .3
7 .3
11
9
42
9 .1
9 .1
11
9
43
11
11
11
9
44
11
11
9
8
45
9 .1
9 .1
11
11
46
9 .1
9 .1
9
9
47
11
9 .1
9
9
48
12
11
9
8
49
7 .3
7 .3
11
9
50
11
9 .1
11
9
F u en te: C arla B eltrán
L a ta b la in dic a e l n úm e ro d e d ato s y
l o s re c u e n t o s ( v a l o r e s n u m é r i c o s ) o b t e n i d o s p o r
c a d a m é to d o pa ra el ra n g o d e 1 0 U F C /m L , e v id e nc ia n d o u n to tal d e 5 0 d a tos.
60
12
T A B L A 1 0 R e s u l t a d o s d e l r e c u e n t o d e m i c r o o r g a n is m o s e n e l r a n g o d e 1 0
U F C / m L , p a r a e l m é t o d o d e N M P u t i li z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c i a
(S ta n d a r M eth o d s).
V e r d e B r illa n te (N M P /1 0 0 m L )
C a ld o la c to sa (N M P /1 0 0m L )
R e p e tic ió n
C . T o ta le s
C . F e c a le s
12
1
11 x10
9
9 .1 x 1 0
12
2
9 .1 x 1 0
3
11 x10
4
9 .4 x 1 0
9 .1 x 1 0
12
9 .4 x 1 0
6
12 x10
8
9 .2 x 1 0
9 .2 x 1 0
10
9 .2 x 1 0
11
9 .3 x 1 0
11 x10
13
9 .1 x 1 0
9 .1 x 1 0
15
7 .3 x 1 0
9
11 x10
9 .2 x 1 0
18
9 .1 x 1 0
12
20
11 x10
9
21
9 .1 x 1 0
22
7 .3 x 1 0
7 .3 x 1 0
24
7 .3 x 1 0
25
11 x10
12
9 x10
9
12
9 x10
9
12
61
9
8 x10
12
11 x10
9
9 .2 x 1 0
9
8 x10
12
9 x10
7 .3 x 1 0
9
12
9 x10
7 .3 x 1 0
9
11x10
12
9
7 .3 x 1 0
9
8 x10
8 x10
7 .3 x 1 0
9
9 x10
12
9
12
23
12
9
12
9
9 x10
9 x10
7 .3 x 1 0
12
8 x10
9 x10
9
12
9
12
8 x10
9 .1 x 1 0
9
11 x10
12
8 x10
9 .1 x 1 0
12
11 x10
12
9
7 .3 x 1 0
9
8 x10
9 x10
9
9 .2 x 1 0
9
9 x10
12
9
12
19
12
11 x10
9 .2 x 1 0
9
11 x10
8 x10
9 .1 x 1 0
9
11 x10
12
9
12
17
12
9 x10
9 .2 x 1 0
9
9 x10
9 x10
9
12
16
12
9
12
9
8 x10
9 x10
7 .3 x 1 0
9
8 x10
9 x10
7 .3 x 1 0
12
14
12
12
9
12
9
9 x10
11 x10
7 .3 x 1 0
9
8 x10
12
9
12
8 x10
9 x10
11 x10
9
12
9 x10
9
12
12
11 x10
9 .1 x 1 0
12
9
11 x10
12
9
12
9
12
9
7 .3 x 1 0
9
9 x10
11 x10
9 .1 x 1 0
12
11 x10
9 x10
9
9 .1 x 1 0
9
12
9 x10
9
12
7
9 x10
7 .3 x 1 0
12
9
11 x10
12
9
7 .3 x 1 0
C . F e c a le s
12
12 x10
9
12
5
C . T o ta le s
9
11 x10
12
11 x10
9
11 x10
C o n tin u a c ió n T A B L A 1 0
12
T A B L A 1 0 R e s u l t a d o s d e l r e c u e n t o d e m i c r o o r g a n is m o s e n e l r a n g o d e 1 0
U F C / m L , p a r a e l m é t o d o d e N M P u t i li z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o y e l d e r e f e r e n c i a
(S ta n d a r M eth o d s).
V e r d e B r illa n te (N M P /1 0 0 m L )
C a ld o la c to sa (N M P /1 0 0m L )
R e p e tic ió n
C . F e c a le s
C . T o ta le s
C . F e c a le s
12
26
9
12 x10
11 x10
12
27
11 x10
28
9 .2 x 1 0
11 x10
12
11 x10
30
9 .3 x 1 0
31
9 .2 x 1 0
9
12
33
7 .3 x 1 0
9 .3 x 1 0
35
11 x10
36
11 x10
38
11 x10
9 .2 x 1 0
40
9 .2 x 1 0
12
9 .3 x 1 0
42
9 .3 x 1 0
43
9 .3 x 1 0
45
7 .3 x 1 0
47
9 .2 x 1 0
9 .1 x 1 0
49
11 x10
50
7 .3 x 1 0
12
11 x10
9
9 .2 x 1 0
12
12
8 x10
9
9 x10
12
11 x10
9
7 .3 x 1 0
9
10 x10
12
9
9 .1 x 1 0
9
11 x10
9 x10
9
12
9
11 x10
12
11 x10
9 .1 x 1 0
9
8 x10
9
12
9
8 x10
12
9
12
48
12
9 x10
7 .3 x 1 0
9
9 x10
9 x10
7 .3 x 1 0
12
9 .2 x 1 0
12
9
7 .3 x 1 0
9
9 x10
11 x10
9
12
46
11 x10
9 .1 x 1 0
12
9
9 x10
12
9
12
7 .3 x 1 0
12
9 x10
7 .3 x 1 0
9
8 x10
9
9 .1 x 1 0
9
8 x10
12
9
12
44
12
9 x10
7 .3 x 1 0
9
12 x10
9 x10
9
7 .3 x 1 0
9
12 x10
12
9
12
41
12
12 x10
11 x10
12
9
9 x10
12 x10
9
12
39
12
9
9 .1 x 1 0
9
8 x10
11 x10
11 x10
12
9
9 x10
12
9
12
9 .2 x 1 0
12
9 x10
11 x10
9
8 x10
9 x10
9
9 .1 x 1 0
9
8 x10
12
9
12
37
12
9 x10
7 .3 x 1 0
12
9
8 x10
8 x10
9
12
34
12
9
7 .2 x 1 0
9
9 x10
8 x10
9 .1 x 1 0
9
8 x10
12
9
12
7 .2 x 1 0
12
9 x10
9 .3 x 1 0
9
11 x10
8 x10
9
11 x10
9
11 x10
12
11 x10
7 .3 x 1 0
12
32
12
12 x10
9
12
29
C . T o ta le s
9
8 x10
12
8 x10
9
8 x10
F u en te: C arla B eltrán
L a ta b la in dic a e l n úm e ro d e d ato s y
l o s re c u e n t o s ( v a l o r e s n u m é r i c o s ) o b t e n i d o s p o r
12
c a d a m é to d o pa ra el ra n g o d e 1 0
U F C /m L , e v id e n cia n d o u n tota l d e 5 0 da to s.
62
4 .2 P a r á m e t r o s d e a n á li s i s
P a r a e l t ra t a m i e n t o e s t a d ís t ic o d e l a i n f o rm a c i ó n , e s n e c e s a ri o l a p re v i a t r a n s f o rm a c i ó n
d e l o s d a t o s o b t e n i d o s a l o g a r it m o b a s e s 1 0 , d e e s t e m o d o s e f a c i li ta r a e l a n á li s is d e l o s
r e s u lt a d o s .
E n l a s ta b l a s 1 1 y 1 2 s e p u e d e o b s e r v a n l o s r e c u e n t o s m ic r o b i a n o s p a r a e l r a n g o d e 3 0 0
U F C p a r a c o l i f o rm e s t o t a l e s y f e c a le s ; s u s m e d ia s , d e s v ia c i o n e s e s t á n d a r y l a r e l a c i ó n
d i f e r e n c i a l e n t re l o s l o g a ri tm o s d e l o s m is m o s .
T A B L A 1 1 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 3 0 0 U F C p a r a c o lifor m e s
to ta le s
N M P C a ld o
N M P V erde
L a cto sa (y )
B r illa n te (x )
1
300
2
R e p e tic io n e s
d
L o g (y )
L o g (x )
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
300
460
2 .4 7 7 1 2
2 .6 6 2 7 6
- 0 .1 8 5 6 4
3
240
290
2 .3 8 0 2 1
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 8 2 1 9
4
280
240
2 .4 4 7 1 6
2 .3 8 0 2 1
0 .0 6 6 9 5
5
350
240
2 .5 4 4 0 7
2 .3 8 0 2 1
0 .1 6 3 8 6
6
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
7
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
8
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
9
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
10
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
11
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
12
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
13
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
14
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
15
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
16
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
17
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
63
(lo g x - lo g y )
C o n tin u a c ió n T A B L A 1 1
T A B L A 1 1 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 3 0 0 U F C p a r a c o lifor m e s
to ta le s
N M P C ald o
N M P V erd e
L actosa (y)
B rilla n te (x )
18
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
19
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
20
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
21
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
22
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
23
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
24
350
290
2 .5 4 4 0 7
2 .4 6 2 4 0
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25
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
26
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
27
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
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28
300
240
2 .4 7 7 1 2
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29
350
290
2 .5 4 4 0 7
2 .4 6 2 4 0
0 .0 8 1 6 7
30
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
31
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
32
350
240
2 .5 4 4 0 7
2 .3 8 0 2 1
0 .1 6 3 8 6
33
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
34
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
35
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
36
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
37
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
38
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
39
300
240
2 .4 7 7 1 2
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40
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
41
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
42
280
240
2 .4 4 7 1 6
2 .3 8 0 2 1
0 .0 6 6 9 5
43
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
44
350
290
2 .5 4 4 0 7
2 .4 6 2 4 0
0 .0 8 1 6 7
45
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
46
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
47
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
48
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
49
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
50
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
M ed ia (d )
297
2 7 6 .4
2 .4 7 1 6 9
2 .4 3 8 4 6
0 .0 3 3 2 3
SD
2 1 .4 0 4 7 5
3 5 .6 1 4 7 2
0 .0 3 0 6 1
0 .0 5 0 7 7
0 .0 6 3 4 2
R ep eticio n e s
L og (y)
d
(lo g
x - lo g y )
F u en te: C arla B eltrán
64
L og (x)
T A B L A 1 2 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 3 0 0 U F C p a r a c o lifor m e s
fe c a le s
d
N M P C a ld o
R e p e tic io n e s
L a cto sa (y )
N M P V erde
B r illa n te (x )
L o g (y )
L o g (x )
(lo g x - lo g
y)
1
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
2
300
460
2 .4 7 7 1 2
2 .6 6 2 7 6
- 0 .1 8 5 6 4
3
240
290
2 .3 8 0 2 1
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 8 2 1 9
4
280
240
2 .4 4 7 1 6
2 .3 8 0 2 1
0 .0 6 6 9 5
5
350
240
2 .5 4 4 0 7
2 .3 8 0 2 1
0 .1 6 3 8 6
6
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
7
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
8
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
9
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
10
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
11
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
12
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
13
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
14
300
240
2 .4 7 7 1 2
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15
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
16
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
17
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
18
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
19
290
290
2 .4 6 2 4 0
2 .4 6 2 4 0
0 .0 0 0 0 0
20
240
240
2 .3 8 0 2 1
2 .3 8 0 2 1
0 .0 0 0 0 0
21
240
290
2 .3 8 0 2 1
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 8 2 1 9
22
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
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23
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
24
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
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25
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
26
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
27
290
290
2 .4 6 2 4 0
2 .4 6 2 4 0
0 .0 0 0 0 0
28
300
240
2 .4 7 7 1 2
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29
300
290
2 .4 7 7 1 2
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30
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
65
C o n tin u a c ió n T A B L A 1 2
T A B L A 1 2 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 3 0 0 U F C p a r a c o lifor m e s
fe c a le s
N M P C a ld o
N M P V erde
L a cto sa (y )
B r illa n te (x )
31
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
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32
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
33
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
34
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
35
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
36
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
37
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
38
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
39
300
240
2 .4 7 7 1 2
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40
300
240
2 .4 7 7 1 2
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41
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
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42
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
43
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
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44
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
45
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
46
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
47
300
290
2 .4 7 7 1 2
2 .4 6 2 4 0
0 .0 1 4 7 2
48
300
240
2 .4 7 7 1 2
2 .3 8 0 2 1
0 .0 9 6 9 1
49
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
50
280
290
2 .4 4 7 1 6
2 .4 6 2 4 0
- 0 .0 1 5 2 4
M e d ia (d )
2 9 0 .2
2 7 7 .4
2 .4 6 1 8 7
2 .4 4 0 1 1
0 .0 2 1 7 6
SD
1 7 .7 8 4 4 2
3 5 .2 7 2 1 2
0 .0 2 7 3 8
0 .0 5 0 1 8
0 .0 6 1 3 2
R e p e tic io n e s
d
L o g (y )
L o g (x )
(lo g x - lo g y )
F u en te: C arla B eltrán
E n l a s ta b l a s 1 3 y 1 4 s e p u e d e o b s e r v a n l o s r e c u e n t o s m ic r o b i a n o s p a r a e l r a n g o d e 1 0 0
U F C p a r a c o l i f o rm e s t o t a l e s y fe c a l e s ; s u s m e d ia s , d e s v i a c i o n e s e s tá n d a r y l a r e l a c i ó n
d i f e r e n c i a l e n t re l o s l o g a ri tm o s d e l o s m is m o s .
66
T A B L A 1 3 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0 0 U F C p a r a c o lifor m e s
to ta le s
N M P C a ld o
N M P V erde
R e p e tic io n e s
d
L o g (y )
L o g (x )
L a cto sa (y )
B r illa n te (x )
1
80
93
1 .9 0 3 0 9
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 6 5 3 9
2
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
3
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
4
90
120
1 .9 5 4 2 4
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 2 4 9 4
5
130
93
2 .1 1 3 9 4
1 .9 6 8 4 8
0 .1 4 5 4 6
6
130
93
2 .1 1 3 9 4
1 .9 6 8 4 8
0 .1 4 5 4 6
7
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
8
130
93
2 .1 1 3 9 4
1 .9 6 8 4 8
0 .1 4 5 4 6
9
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
10
80
120
1 .9 0 3 0 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 7 6 0 9
11
130
93
2 .1 1 3 9 4
1 .9 6 8 4 8
0 .1 4 5 4 6
12
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
13
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
14
130
95
2 .1 1 3 9 4
1 .9 7 7 7 2
0 .1 3 6 2 2
15
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
16
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
17
130
93
2 .1 1 3 9 4
1 .9 6 8 4 8
0 .1 4 5 4 6
18
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
19
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
20
80
95
1 .9 0 3 0 9
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 7 4 6 3
21
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
22
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
23
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
24
130
95
2 .1 1 3 9 4
1 .9 7 7 7 2
0 .1 3 6 2 2
25
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
67
(lo g x - lo g y )
C o n tin u a c ió n T A B L A 1 3
T A B L A 1 3 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0 0 U F C p a r a c o lifor m e s
to ta le s
N M P C a ld o
N M P V erde
L a cto sa (y )
B r illa n te (x )
26
130
120
2 .1 1 3 9 4
2 .0 7 9 1 8
0 .0 3 4 7 6
27
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
28
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
29
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
30
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
31
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
32
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
33
90
95
1 .9 5 4 2 4
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 2 3 4 8
34
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
35
80
93
1 .9 0 3 0 9
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 6 5 3 9
36
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
37
90
95
1 .9 5 4 2 4
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 2 3 4 8
38
90
120
1 .9 5 4 2 4
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 2 4 9 4
39
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
40
90
120
1 .9 5 4 2 4
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 2 4 9 4
41
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
42
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
43
80
120
1 .9 0 3 0 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 7 6 0 9
44
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
45
90
95
1 .9 5 4 2 4
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 2 3 4 8
46
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
47
80
93
1 .9 0 3 0 9
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 6 5 3 9
48
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
49
90
95
1 .9 5 4 2 4
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 2 3 4 8
50
90
120
1 .9 5 4 2 4
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 2 4 9 4
R e p e tic io n e s
d
L o g (y )
L o g (x )
(lo g x - lo g y )
M e d ia (d )
104
1 0 0 .6 6
2 .0 1 2 0 0
2 .0 0 0 2 2
0 .0 1 1 7 8
SD
1 5 .9 0 7 9 0
1 1 .6 1 2 1 2
0 .0 6 7 1 8
0 .0 4 7 4 5
0 .0 8 6 3 9
F u en te: C arla B eltrán
68
T A B L A 1 4 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0 0 U F C p a r a c o lifor m e s
fe c a le s
N M P C a ld o
N M P V erde
R e p e tic io n e s
d
L o g (y )
L o g (x )
L a cto sa (y )
B r illa n te (x )
1
80
93
1 .9 0 3 0 9
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 6 5 3 9
2
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
3
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
4
90
120
1 .9 5 4 2 4
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 2 4 9 4
5
130
93
2 .1 1 3 9 4
1 .9 6 8 4 8
0 .1 4 5 4 6
6
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
7
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
8
130
93
2 .1 1 3 9 4
1 .9 6 8 4 8
0 .1 4 5 4 6
9
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
10
80
120
1 .9 0 3 0 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 7 6 0 9
11
130
93
2 .1 1 3 9 4
1 .9 6 8 4 8
0 .1 4 5 4 6
12
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
13
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
14
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
15
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
16
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
17
130
93
2 .1 1 3 9 4
1 .9 6 8 4 8
0 .1 4 5 4 6
18
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
19
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
20
80
95
1 .9 0 3 0 9
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 7 4 6 3
21
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
22
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
23
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
24
130
95
2 .1 1 3 9 4
1 .9 7 7 7 2
0 .1 3 6 2 2
25
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
69
(lo g x - lo g y )
C o n tin u a c ió n T A B L A 1 4
T A B L A 1 4 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0 0 U F C p a r a c o lifor m e s
fe c a le s
N M P
d
R e p e tic io n e s
N M P C a ld o
V erde
L a cto sa (y )
B r illa n te
L o g (y )
L o g (x )
(lo g x - lo g
y)
(x )
26
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
27
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
28
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
29
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
30
90
120
1 .9 5 4 2 4
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 2 4 9 4
31
110
120
2 .0 4 1 3 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
32
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
33
90
95
1 .9 5 4 2 4
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 2 3 4 8
34
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
35
80
93
1 .9 0 3 0 9
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 6 5 3 9
36
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
37
90
95
1 .9 5 4 2 4
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 2 3 4 8
38
90
120
1 .9 5 4 2 4
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 2 4 9 4
39
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
40
90
120
1 .9 5 4 2 4
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 2 4 9 4
41
110
95
2 .0 4 1 3 9
1 .9 7 7 7 2
0 .0 6 3 6 7
42
90
95
1 .9 5 4 2 4
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 2 3 4 8
43
80
120
1 .9 0 3 0 9
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 7 6 0 9
44
110
93
2 .0 4 1 3 9
1 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
45
90
95
1 .9 5 4 2 4
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 2 3 4 8
46
90
95
1 .9 5 4 2 4
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 2 3 4 8
47
80
93
1 .9 0 3 0 9
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 6 5 3 9
48
90
93
1 .9 5 4 2 4
1 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
49
90
95
1 .9 5 4 2 4
1 .9 7 7 7 2
- 0 .0 2 3 4 8
50
90
120
1 .9 5 4 2 4
2 .0 7 9 1 8
- 0 .1 2 4 9 4
M e d ia (d )
1 0 1 .6
1 0 0 .6 2
2 .0 0 2 4 2
2 .0 0 0 0 4
0 .0 0 2 3 8
SD
1 4 .7 5 7 9 1
1 1 .6 3 5 4 3
0 .0 6 3 2 3
0 .0 4 7 5 5
0 .0 8 4 6 0
F u en te: C arla B eltrán
E n l a s t a b l a s 1 5 y 1 6 s e p u e d e o b s e r v a n l o s r e c u e n t o s m i c r o b ia n o s p a r a e l r a n g o d e 1 0
U F C p a r a c o l i f o rm e s t o t a l e s y f e c a le s ; s u s m e d ia s , d e s v ia c i o n e s e s t á n d a r y l a r e l a c i ó n
d i f e r e n c i a l e n t re l o s l o g a ri tm o s d e l o s m is m o s .
70
T A B L A 1 5 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0 U F C p a r a c o lifor m e s
to ta le s
N M P
N M P
C a ld o
V erde
L a cto sa
B r illa n te
(y )
(x )
1
13
9 .2
1 .1 1 3 9 4
0 .9 6 3 7 9
0 .1 5 0 1 6
2
13
9 .1
1 .1 1 3 9 4
0 .9 5 9 0 4
0 .1 5 4 9 0
3
8
9 .2
0 .9 0 3 0 9
0 .9 6 3 7 9
- 0 .0 6 0 7 0
4
13
12
1 .1 1 3 9 4
1 .0 7 9 1 8
0 .0 3 4 7 6
5
13
11
1 .1 1 3 9 4
1 .0 4 1 3 9
0 .0 7 2 5 5
6
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
7
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
8
11
9 .3
1 .0 4 1 3 9
0 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
9
9
11
0 .9 5 4 2 4
1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
10
13
11
1 .1 1 3 9 4
1 .0 4 1 3 9
0 .0 7 2 5 5
11
14
11
1 .1 4 6 1 3
1 .0 4 1 3 9
0 .1 0 4 7 4
12
13
7 .3
1 .1 1 3 9 4
0 .8 6 3 3 2
0 .2 5 0 6 2
13
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
0 .9 5 9 0 4
0 .0 8 2 3 5
14
11
12
1 .0 4 1 3 9
1 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
15
9
11
0 .9 5 4 2 4
1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
16
9
13
0 .9 5 4 2 4
1 .1 1 3 9 4
- 0 .1 5 9 7 0
17
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
18
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
19
13
9 .1
1 .1 1 3 9 4
0 .9 5 9 0 4
0 .1 5 4 9 0
20
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
21
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
22
11
13
1 .0 4 1 3 9
1 .1 1 3 9 4
- 0 .0 7 2 5 5
23
9
9 .1
0 .9 5 4 2 4
0 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
24
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
25
8
9 .1
0 .9 0 3 0 9
0 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
R e p e tic io n e s
L o g (y )
L o g (x )
d
(lo g x - lo g y )
71
C o n tin u a c ió n T A B L A 1 5
T A B L A 1 5 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0 U F C p a r a c o lifor m e s
to ta le s
N M P C a ld o
N M P V erd e
L actosa (y)
B rilla n te (x )
26
13
9 .1
1 .1 1 3 9 4
0 .9 5 9 0 4
0 .1 5 4 9 0
27
13
9 .1
1 .1 1 3 9 4
0 .9 5 9 0 4
0 .1 5 4 9 0
28
9
11
0 .9 5 4 2 4
1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
29
9
11
0 .9 5 4 2 4
1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
30
11
13
1 .0 4 1 3 9
1 .1 1 3 9 4
- 0 .0 7 2 5 5
31
9
11
0 .9 5 4 2 4
1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
32
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
33
13
11
1 .1 1 3 9 4
1 .0 4 1 3 9
0 .0 7 2 5 5
34
13
9 .1
1 .1 1 3 9 4
0 .9 5 9 0 4
0 .1 5 4 9 0
35
13
11
1 .1 1 3 9 4
1 .0 4 1 3 9
0 .0 7 2 5 5
36
9
13
0 .9 5 4 2 4
1 .1 1 3 9 4
- 0 .1 5 9 7 0
37
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
0 .9 5 9 0 4
0 .0 8 2 3 5
38
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
39
9
9 .1
0 .9 5 4 2 4
0 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
40
8
7 .3
0 .9 0 3 0 9
0 .8 6 3 3 2
0 .0 3 9 7 7
41
11
7 .3
1 .0 4 1 3 9
0 .8 6 3 3 2
0 .1 7 8 0 7
42
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
0 .9 5 9 0 4
0 .0 8 2 3 5
43
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
44
9
11
0 .9 5 4 2 4
1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
45
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
0 .9 5 9 0 4
0 .0 8 2 3 5
46
9
9 .1
0 .9 5 4 2 4
0 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
47
9
11
0 .9 5 4 2 4
1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
48
9
12
0 .9 5 4 2 4
1 .0 7 9 1 8
- 0 .1 2 4 9 4
49
11
7 .3
1 .0 4 1 3 9
0 .8 6 3 3 2
0 .1 7 8 0 7
50
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
M ed ia (d )
1 0 .8 4
1 0 .3 2 4
1 .0 2 9 9 4
1 .0 0 9 2 4
0 .0 2 0 7 0
SD
1 .6 5 8 1 3
1 .4 7 9 1 8
0 .0 6 8 2 5
0 .0 6 4 8 4
0 .0 9 6 1 7
R ep eticio n e s
L og (y)
d
(lo g x - lo g y )
F u en te: C arla B eltrán
72
L og (x)
T A B L A 1 6 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0 U F C p a r a c o lifor m e s
fe c a le s
N M P C a ld o
N M P V erd e
L actosa (y)
B rilla n te (x )
1
13
9 .2
1 .1 1 3 9 4
0 .9 6 3 7 9
0 .1 5 0 1 6
2
13
9 .1
1 .1 1 3 9 4
0 .9 5 9 0 4
0 .1 5 4 9 0
8
9 .2
0 .9 0 3 0 9
0 .9 6 3 7 9
- 0 .0 6 0 7 0
4
13
12
1 .1 1 3 9 4
1 .0 7 9 1 8
0 .0 3 4 7 6
5
13
11
1 .1 1 3 9 4
1 .0 4 1 3 9
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6
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
8
11
9 .3
1 .0 4 1 3 9
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9
11
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1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
10
13
11
1 .1 1 3 9 4
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14
11
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1 .0 4 1 3 9
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12
13
7 .3
1 .1 1 3 9 4
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13
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
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14
11
12
1 .0 4 1 3 9
1 .0 7 9 1 8
- 0 .0 3 7 7 9
9
11
0 .9 5 4 2 4
1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
16
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13
0 .9 5 4 2 4
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17
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
18
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
13
9 .1
1 .1 1 3 9 4
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20
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
0 .9 5 9 0 4
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21
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
0 .9 5 9 0 4
0 .0 8 2 3 5
22
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
23
9
9 .1
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24
9
11
0 .9 5 4 2 4
1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
25
8
9 .1
0 .9 0 3 0 9
0 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
R ep eticio n e s
3
7
11
15
19
73
L og (y)
L og (x)
d
(lo g x - lo g y )
C o n tin u a c ió n T A B L A 1 6
T A B L A 1 6 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0 U F C p a r a c o lifor m e s
fe c a le s
N M P C a ld o
N M P V erd e
L actosa (y)
B rilla n te (x )
26
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
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0 .0 8 2 3 5
27
13
11
1 .1 1 3 9 4
1 .0 4 1 3 9
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28
9
9 .1
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29
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11
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9
11
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1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
31
8
9 .1
0 .9 0 3 0 9
0 .9 5 9 0 4
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32
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
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33
11
11
1 .0 4 1 3 9
1 .0 4 1 3 9
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34
9
9 .1
0 .9 5 4 2 4
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35
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
0 .9 5 9 0 4
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36
9
12
0 .9 5 4 2 4
1 .0 7 9 1 8
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37
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
0 .9 5 9 0 4
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38
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
0 .9 5 9 0 4
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39
9
9 .1
0 .9 5 4 2 4
0 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
40
8
7 .3
0 .9 0 3 0 9
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9
7 .3
0 .9 5 4 2 4
0 .8 6 3 3 2
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42
9
9 .1
0 .9 5 4 2 4
0 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
43
9
11
0 .9 5 4 2 4
1 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
44
8
11
0 .9 0 3 0 9
1 .0 4 1 3 9
- 0 .1 3 8 3 0
45
11
9 .1
1 .0 4 1 3 9
0 .9 5 9 0 4
0 .0 8 2 3 5
46
9
9 .1
0 .9 5 4 2 4
0 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
47
9
9 .1
0 .9 5 4 2 4
0 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
48
8
11
0 .9 0 3 0 9
1 .0 4 1 3 9
- 0 .1 3 8 3 0
49
9
7 .3
0 .9 5 4 2 4
0 .8 6 3 3 2
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50
9
9 .1
0 .9 5 4 2 4
0 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
M ed ia (d )
1 0 .3
9 .9 3 8
1 .0 0 7 1 3
0 .9 9 3 3 6
0 .0 1 3 7 6
SD
1 .7 0 5 3 3
1 .3 3 2 0 1
0 .0 7 1 1 5
0 .0 5 9 6 0
0 .0 8 6 4 3
R ep eticio n e s
L og (y)
d
(lo g x - lo g y )
F u en te: C arla B eltrán
74
L og (x)
12
T A B L A 1 7 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0
U F C p a r a c o lifo rm e s
to ta le s
N M P C a ld o
N M P V erd e
L actosa (y)
B rilla n te (x )
1
1 .2 E + 1 3
1 .1 E + 1 3
1 3 .0 7 9 1 8
1 3 .0 4 1 3 9
0 .0 3 7 7 9
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9 .0 E + 1 2
9 .1 E + 1 2
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9 .0 E + 1 2
1 .1 E + 1 3
1 2 .9 5 4 2 4
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- 0 .0 8 7 1 5
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1 .1 E + 1 3
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5
1 .1 E + 1 3
9 .4 E + 1 2
1 3 .0 4 1 3 9
1 2 .9 7 3 1 3
0 .0 6 8 2 6
6
9 .0 E + 1 2
1 .2 E + 1 3
1 2 .9 5 4 2 4
1 3 .0 7 9 1 8
- 0 .1 2 4 9 4
9 .0 E + 1 2
1 .1 E + 1 3
1 2 .9 5 4 2 4
1 3 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
8
1 .1 E + 1 3
9 .2 E + 1 2
1 3 .0 4 1 3 9
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9
9 .0 E + 1 2
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10
9 .0 E + 1 2
9 .1 E + 1 2
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1 2 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
9 .0 E + 1 2
9 .3 E + 1 2
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- 0 .0 1 4 2 4
12
9 .0 E + 1 2
1 .1 E + 1 3
1 2 .9 5 4 2 4
1 3 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
13
8 .0 E + 1 2
9 .1 E + 1 2
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1 2 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
14
1 .1 E + 1 3
9 .1 E + 1 2
1 3 .0 4 1 3 9
1 2 .9 5 9 0 4
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9 .0 E + 1 2
7 .3 E + 1 2
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16
8 .0 E + 1 2
1 .1 E + 1 3
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17
8 .0 E + 1 2
9 .2 E + 1 2
1 2 .9 0 3 0 9
1 2 .9 6 3 7 9
- 0 .0 6 0 7 0
18
9 .0 E + 1 2
9 .1 E + 1 2
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1 2 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
9 .0 E + 1 2
1 .1 E + 1 3
1 2 .9 5 4 2 4
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- 0 .0 8 7 1 5
20
8 .0 E + 1 2
1 .1 E + 1 3
1 2 .9 0 3 0 9
1 3 .0 4 1 3 9
- 0 .1 3 8 3 0
21
9 .0 E + 1 2
9 .1 E + 1 2
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22
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9 .0 E + 1 2
7 .3 E + 1 2
1 2 .9 5 4 2 4
1 2 .8 6 3 3 2
0 .0 9 0 9 2
24
1 .1 E + 1 3
7 .3 E + 1 2
1 3 .0 4 1 3 9
1 2 .8 6 3 3 2
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25
1 .1 E + 1 3
1 .1 E + 1 3
1 3 .0 4 1 3 9
1 3 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
R ep eticio n e s
3
7
11
15
19
23
75
L og (y)
L og (x)
d
(lo g x - lo g y )
C o n tin u a c ió n T A B L A 1 7
12
T A B L A 1 7 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0
U F C p a r a c o lifo rm e s
to ta le s
N M P C a ld o
N M P V erd e
L actosa (y)
B rilla n te (x )
26
1 .2 E + 1 3
1 .2 E + 1 3
1 3 .0 7 9 1 8
1 3 .0 7 9 1 8
0 .0 0 0 0 0
27
1 .1 E + 1 3
1 .1 E + 1 3
1 3 .0 4 1 3 9
1 3 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
28
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9 .0 E + 1 2
1 .1 E + 1 3
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1 3 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
30
8 .0 E + 1 2
9 .3 E + 1 2
1 2 .9 0 3 0 9
1 2 .9 6 8 4 8
- 0 .0 6 5 3 9
31
8 .0 E + 1 2
9 .2 E + 1 2
1 2 .9 0 3 0 9
1 2 .9 6 3 7 9
- 0 .0 6 0 7 0
32
9 .0 E + 1 2
7 .2 E + 1 2
1 2 .9 5 4 2 4
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9 .0 E + 1 2
7 .3 E + 1 2
1 2 .9 5 4 2 4
1 2 .8 6 3 3 2
0 .0 9 0 9 2
34
9 .0 E + 1 2
9 .3 E + 1 2
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1 2 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
35
1 .1 E + 1 3
1 .1 E + 1 3
1 3 .0 4 1 3 9
1 3 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
36
1 .2 E + 1 3
1 .1 E + 1 3
1 3 .0 7 9 1 8
1 3 .0 4 1 3 9
0 .0 3 7 7 9
1 .2 E + 1 3
9 .2 E + 1 2
1 3 .0 7 9 1 8
1 2 .9 6 3 7 9
0 .1 1 5 3 9
38
9 .0 E + 1 2
1 .1 E + 1 3
1 2 .9 5 4 2 4
1 3 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
39
9 .0 E + 1 2
9 .2 E + 1 2
1 2 .9 5 4 2 4
1 2 .9 6 3 7 9
- 0 .0 0 9 5 5
40
9 .0 E + 1 2
9 .2 E + 1 2
1 2 .9 5 4 2 4
1 2 .9 6 3 7 9
- 0 .0 0 9 5 5
1 .1 E + 1 3
9 .3 E + 1 2
1 3 .0 4 1 3 9
1 2 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
42
1 .1 E + 1 3
9 .3 E + 1 2
1 3 .0 4 1 3 9
1 2 .9 6 8 4 8
0 .0 7 2 9 1
43
9 .0 E + 1 2
9 .3 E + 1 2
1 2 .9 5 4 2 4
1 2 .9 6 8 4 8
- 0 .0 1 4 2 4
44
9 .0 E + 1 2
7 .3 E + 1 2
1 2 .9 5 4 2 4
1 2 .8 6 3 3 2
0 .0 9 0 9 2
1 .1 E + 1 3
7 .3 E + 1 2
1 3 .0 4 1 3 9
1 2 .8 6 3 3 2
0 .1 7 8 0 7
46
1 .1 E + 1 3
9 .2 E + 1 2
1 3 .0 4 1 3 9
1 2 .9 6 3 7 9
0 .0 7 7 6 0
47
9 .0 E + 1 2
9 .2 E + 1 2
1 2 .9 5 4 2 4
1 2 .9 6 3 7 9
- 0 .0 0 9 5 5
48
8 .0 E + 1 2
9 .1 E + 1 2
1 2 .9 0 3 0 9
1 2 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
1 .1 E + 1 3
1 .1 E + 1 3
1 3 .0 4 1 3 9
1 3 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
50
8 .0 E + 1 2
7 .3 E + 1 2
1 2 .9 0 3 0 9
1 2 .8 6 3 3 2
0 .0 3 9 7 7
M ed ia (d )
9 .5 8 E + 1 2
9 .4 8 E + 1 2
1 2 .9 7 7 6 9
1 2 .9 7 2 1 1
0 .0 0 5 5 8
SD
1 .2 8 E + 1 2
1 .3 6 E + 1 2
0 .0 5 6 1 9
0 .0 6 3 9 0
0 .0 7 7 0 8
R ep eticio n e s
29
33
37
41
45
49
d
L og (y)
(lo g x - lo g y )
F u en te: C arla B eltrán
76
L og (x)
12
T A B L A 1 8 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0
U F C p a r a c o lifo rm e s
fe c a le s
N M P
N M P C a ld o
V erde
L a c to sa (y )
B r illa n te
d
R e p e tic io n e s
L o g (y )
L o g (x )
(lo g x - lo g y )
(x )
1
1 .1 E + 1 0
9 .1 E + 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
9 .9 5 9 0 4
0 .0 8 2 3 5
2
9 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
3
9 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .8 6 3 3 2
0 .0 9 0 9 2
4
1 .1 E + 1 0
7 .3 E + 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
9 .8 6 3 3 2
0 .1 7 8 0 7
5
8 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
6
8 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
7
9 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .8 6 3 3 2
0 .0 9 0 9 2
8
8 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
9
8 .0 E + 0 9
1 .1 E + 1 0
9 .9 0 3 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
- 0 .1 3 8 3 0
10
9 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .8 6 3 3 2
0 .0 9 0 9 2
11
1 .1 E + 1 0
7 .3 E + 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
9 .8 6 3 3 2
0 .1 7 8 0 7
12
1 .1 E + 1 0
7 .3 E + 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
9 .8 6 3 3 2
0 .1 7 8 0 7
13
9 .0 E + 0 9
9 .2 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .9 6 3 7 9
- 0 .0 0 9 5 5
14
8 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
15
1 .1 E + 1 0
9 .2 E + 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
9 .9 6 3 7 9
0 .0 7 7 6 0
16
8 .0 E + 0 9
9 .2 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .9 6 3 7 9
- 0 .0 6 0 7 0
17
9 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .8 6 3 3 2
0 .0 9 0 9 2
18
9 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
19
8 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
20
1 .1 E + 1 0
7 .3 E + 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
9 .8 6 3 3 2
0 .1 7 8 0 7
21
9 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .8 6 3 3 2
0 .0 9 0 9 2
22
8 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .8 6 3 3 2
0 .0 3 9 7 7
23
8 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .8 6 3 3 2
0 .0 3 9 7 7
24
1 .1 E + 1 0
7 .3 E + 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
9 .8 6 3 3 2
0 .1 7 8 0 7
25
1 .1 E + 1 0
9 .2 E + 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
9 .9 6 3 7 9
0 .0 7 7 6 0
77
C o n tin u a c ió n T A B L A 1 8
12
T A B L A 1 8 T a b la e sta d ístic a p a r a el r a n g o te ór ic o d e 1 0
U F C p a r a c o lifo rm e s
fe c a le s
N M P C a ld o
N M P V erd e
L actosa (y)
B rilla n te (x )
26
1 .1 E + 1 0
27
R ep eticio n e s
d
L og (y)
L og (x)
1 .1 E + 1 0
1 0 .0 4 1 3 9
1 0 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
1 .1 E + 1 0
1 .1 E + 1 0
1 0 .0 4 1 3 9
1 0 .0 4 1 3 9
0 .0 0 0 0 0
28
8 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .8 6 3 3 2
0 .0 3 9 7 7
29
9 .0 E + 0 9
1 .1 E + 1 0
9 .9 5 4 2 4
1 0 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
30
8 .0 E + 0 9
9 .3 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .9 6 8 4 8
- 0 .0 6 5 3 9
31
8 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
32
8 .0 E + 0 9
7 .2 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .8 5 7 3 3
0 .0 4 5 7 6
33
9 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .8 6 3 3 2
0 .0 9 0 9 2
34
8 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
35
9 .0 E + 0 9
1 .1 E + 1 0
9 .9 5 4 2 4
1 0 .0 4 1 3 9
- 0 .0 8 7 1 5
36
1 .2 E + 1 0
1 .1 E + 1 0
1 0 .0 7 9 1 8
1 0 .0 4 1 3 9
0 .0 3 7 7 9
37
1 .2 E + 1 0
9 .1 E + 0 9
1 0 .0 7 9 1 8
9 .9 5 9 0 4
0 .1 2 0 1 4
38
8 .0 E + 0 9
1 .1 E + 1 0
9 .9 0 3 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
- 0 .1 3 8 3 0
39
8 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .8 6 3 3 2
0 .0 3 9 7 7
40
9 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .8 6 3 3 2
0 .0 9 0 9 2
41
9 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 0 4 8 0
42
9 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .8 6 3 3 2
0 .0 9 0 9 2
43
8 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
44
8 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .8 6 3 3 2
0 .0 3 9 7 7
45
1 .1 E + 1 0
7 .3 E + 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
9 .8 6 3 3 2
0 .1 7 8 0 7
46
1 .1 E + 1 0
7 .3 E + 0 9
1 0 .0 4 1 3 9
9 .8 6 3 3 2
0 .1 7 8 0 7
47
1 .0 E + 1 0
9 .1 E + 0 9
1 0 .0 0 0 0 0
9 .9 5 9 0 4
0 .0 4 0 9 6
48
9 .0 E + 0 9
9 .2 E + 0 9
9 .9 5 4 2 4
9 .9 6 3 7 9
- 0 .0 0 9 5 5
49
8 .0 E + 0 9
9 .1 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .9 5 9 0 4
- 0 .0 5 5 9 5
50
8 .0 E + 0 9
7 .3 E + 0 9
9 .9 0 3 0 9
9 .8 6 3 3 2
0 .0 3 9 7 7
M ed ia (d )
9 .2 2 E + 0 9
8 .5 9 E + 0 9
9 .9 6 0 6 1
9 .9 2 9 0 0
0 .0 3 1 6 1
SD
1 .3 1 E + 0 9
1 .3 1 E + 0 9
0 .0 5 9 7 5
0 .0 6 4 7 3
0 .0 8 7 5 9
(lo g x - lo g y )
F u en te: C arla B eltrán
P ara
la
v alid e z
tra n sform a d os
a
de
la s
pru eb as
l o g a r it m o s
T,
se
o bte n id os
deb e
en
co m pro b ar
los
m éto d o s
la
de
n o rm a li d a d
estu d io ,
de
e sto
los
se
m e d i a n t e l a p r u e b a d e S h a p i r o - W i l k , u t il i z a n d o e l p r o g r a m a S t a ti s ti x V e r s i ó n 8 .0 .
78
d a to s
re aliz o
T A B L A 1 9 P r u e b a d e S h a p ir o -W ilk p a r a e l r a n g o d e 3 0 0 U F C /m L
S h a p i r o - W i l k N o r m a l it y T e s t
R ango 300 U F C
C . T o ta le s
C . F e c a le s
V a r ia b le
N
W
W
C a ld o L a c to sa
50
0 .7 5 9 1
0 .7 2 2 8
50
0 .6 3 5 0
0 .6 2 7 0
C a ld o V e r d e
B r illa n te
F u en te: C arla B eltrán
L o s r e s u lt a d o s o b t e n i d o s p a r a e l r a n g o d e 3 0 0 U F C
V erd e
B r i ll a n t e
p ara
C o li f o rm e s
to tale s
d i s t ri b u c i ó n n o r m a l c o r r e s p o n d i e n t e a
y
e n el C a ld o L a c to sa y e n el C a ld o
fe c a l e s
fu ero n
0 .0 5 , p o r l o t a n t o l o s
m ay ores
al
v a lor
de
v a l o r e s t r a n s f o rm a d o s
la
a
l o g a r it m o s i g u e n u n a d i s tr i b u c i ó n n o rm a l .
T A B L A 2 0 P r u e b a d e S h a p ir o -W ilk p a r a e l r a n g o d e 1 0 0 U F C /m L
S h a p i r o - W i l k N o r m a l it y T e s t
R ango 100 U F C
C . T o ta le s
C . F e c a le s
V a r ia b le
N
W
W
C a ld o L a c to sa
50
0 .8 6 2 1
0 .8 5 4 3
50
0 .6 0 4 9
0 .6 0 3 3
C a ld o V e rd e
B rilla nte
F u en te: C arla B eltrán
L o s r e s u lt a d o s o b t e n i d o s p a r a e l r a n g o d e 1 0 0 U F C
e n el C a ld o L a c to sa y e n el C a ld o
V e r d e B r il l a n t e p a r a C o li f o rm e s t o t a l e s y f e c a l e s s o n m a y o r e s a l v a l o r d e l a d is t ri b u c i ó n
n o r m a l c o r r e s p o n d i e n t e a 0 .0 5 , p o r l o t a n t o l o s v a l o r e s t r a n s f o rm a d o s a l o g a r i tm o s i g u e n
u n a d i s tr i b u c i ó n n o r m a l .
79
T A B L A 2 1 P r u e b a d e S h a p ir o -W ilk p a r a e l r a n g o d e 1 0 U F C /m L
S h a p i r o - W i l k N o r m a l it y T e s t
R ango 10 U F C
V a r ia b le
N
C . T o ta le s
C . F e c a le s
W
W
C a ld o L a c to sa
50
0 .8 7 1 4
0 .8 7 5 9
C a ld o V e rd e
50
0 .8 6 1 8
0 .8 4 8 8
B rilla nte
F u en te: C arla B eltrán
L o s re su lta d os o b te n id os p a ra e l ra n g o d e 1 0 U F C
V e r d e B r i l l a n t e p a ra C o l i f o r m e s t o t a l e s
e n e l C a ld o L a c to sa y e n e l C a ld o
y f e c a l e s s o n m a y o r e s a l v a l o r d e l a d is t ri b u c i ó n
n o r m a l c o r r e s p o n d i e n t e a 0 .0 5 , p o r l o t a n t o l o s v a l o r e s t r a n s f o rm a d o s a l o g a r i tm o s i g u e n
u n a d i s tr i b u c i ó n n o r m a l .
12
T A B L A 2 2 P r u e b a d e S h a p ir o -W ilk p a r a e l r a n g o d e 1 0
U F C /m L
S h a p i r o - W i l k N o r m a l it y T e s t
12
R ango 10
V a r ia b le
U FC
N
C . T o ta le s
C . F e c a le s
W
W
C a ld o L a c to sa
50
0 .8 2 7 4
0 .8 0 1 0
C a ld o V e rd e
50
0 .8 5 5 1
0 .7 9 1 0
B rilla nte
F u en te: C arla B eltrán
L o s r e s u lt a d o s o b t e n i d o s p a r a e l r a n g o d e 1 0 0 U F C
e n el C a ld o L a c to sa y e n el C a ld o
V e r d e B r il l a n t e p a r a C o li f o rm e s t o t a l e s y f e c a l e s s o n m a y o r e s a l v a l o r d e l a d is t ri b u c i ó n
n o r m a l c o r r e s p o n d i e n t e a 0 .0 5 , p o r l o t a n t o l o s v a l o r e s t r a n s f o rm a d o s a l o g a r i tm o s i g u e n
u n a d i s tr i b u c i ó n n o r m a l .
80
E x a c titu d
S e c a l c u l ó la t d e s t u d e n t c o n u n n i v e l d e c o n fi a n z a d e l 9 5 % , n e c e s a ri a p a r a e v a l u a r s i
e x i s t e o n o d i f e r e n c i a s i g n i f ic a ti v a e n tr e l o s d o s m é t o d o s .
L a e x a c ti t u d f u e c a l c u la d a c o n l a E c u a c i ó n 2
p o r c e n t a j e d e r e n d im i e n t o , o b t e n i e n d o l o s
s i g u i e n t e s re s u lt a d o s p a ra l o s d i f e r e n t e s r a n g o s :
T A B L A 2 3 R e s u l t a d o s d e E x a c t i t u d p a r a c o li f o r m e s t o t a l e s y f e c a l e s p a r a l o s
12
rangos de 300, 100, 10 y 10
U F C /m L
12
R ango 10
U FC
R ango 300 U F C
R ango 100 U F C
R ango 10 U F C
C .
C .
C .
C .
C .
C .
C .
C .
T o ta le s
F e c a le s
T o ta le s
F e c a le s
T o ta le s
F e c a le s
T o ta le s
F e c a le s
0 .5 1
2 .5 5
3 .7 0
2 .5 1
0 .9 6
0 .7 2
1 .5 2
1 .1 3
1 .6 7
1 .6 7
1 .6 7
1 .6 7
1 .6 7
1 .6 7
1 .6 7
1 .6 7
9 8 .7 2
9 2 .9 8
9 2 .6 3
9 5 .1 1
9 7 .3 2
9 8 .0 4
9 5 .3 4
9 6 .8 8
t
c a lc u la d a
t
ta b u la d a
% R e c .R e l
F u en te: C arla B eltrán
P a r a e l r a n g o d e 3 0 0 U F C / m l e l r e s u l ta d o d e l a t c a l c u l a d a e s m a y o r q u e l a t t a b u l a d a ,
ta n to
p ara
c o l if o r m e s
t o t a le s
com o
fe ca le s,
lo
que
in dic a
que
e x iste n
d i f e re n c i a s
s i g n i fi c a t i v a s e n t r e e l m é t o d o u t i li z a d o p o r e l la b o r a t o r i o y e l d e l S t a n d a r M e t h o d s .
12,
E n e l c a so d e los ra n g os d e 1 0
que
el de
la
t ta b u la d a lo
1 0 0 y 1 0 U F C / m l e l v a l o r d e l a t c a l c u la d a e s m e n o r
c u al in dic a
que
no
e x i s te n
d i fe r e n c i a s
si g n i fi c a t i v a s e n t r e
a m b o s m éto d o s .
P r e c isió n
P a r a la v a l i d e z d e l a p r u e b a l a d i v is i ó n e n t re e l p o r c e n t a j e d e r e p r o d u c i b i li d a d (% R e p ) y
el
p o r c e n t a je
de
la
d e svia ció n
e s t á n d a r r e la t i v a
r e s u lt a d o m e n o r a 2 .
81
de
P oisso n
(% R S D ), d eb e
te n e r
un
T A B L A 2 4 R e su lta d o s d e P r e c isió n p a r a c olifor m e s to ta les y fe c ale s p a r a lo s
12
rangos de 10
10
%
%
R ep
R S D P o iss o n
%
R ep /R S D
12
U F C /m L
, 3 0 0 , 1 0 0 , 1 0 y U F C /m L
3 0 0 U F C /m L
1 0 0 U F C /m L
1 0 U F C /M l
C .
C .
C .
C .
C .
C .
C .
C .
T o ta les
F eca le s
T o ta les
F eca le s
T o ta les
F eca le s
T o ta les
F eca le s
1 8 .2 6
1 1 .5 8
1 1 .1 6
1 8 .0 3
1 7 .6 7
1 9 .8 6
1 8 .0 4
6 .0 1
6 .0 0
9 .9 7
9 .9 7
3 1 .1 3
3 1 .7 2
1 .9 3
1 .8 6
1 .8 1
1 .7 7
0 .6 4
0 .5 7
1 6 .2 6
3 .2 x 1 0
5x10
-5
1 .0 x 1 0
5
1 .7 x 1 0
-3
4
F u en te: C arla B eltrán
In c e r tid u m b re
S e c a l c u l ó l a i n c e r ti d u m b r e d e f o r m a g l o b a l , e s d e c ir a g r u p a n d o l o s p o s i b l e s f a c t o r e s d e
e r r o r p r e s e n t e s e n e l a n á l is i s , u ti li z a n d o l a s
e c ua c io n e s 5 , 6 , 7 y 8
p re se n ta d a s e n e l
c a p ítulo a n terio r.
E l p o r c e n t a je d e i n c e r ti d u m b re s e o b t i e n e tr a s l a r e la c i ó n e n tr e e l v a l o r d e i n c e r ti d u m b r e
c o m b i n a d a c o n l a m e d i d a d e l o s re c u e n t o s d e l m é t o d o u ti l iz a d o p o r e l l a b o r a t o r i o . D i c h o
v a l o r e s e l e m p l e a d o c o m o i n c e r ti d u m b re d e l m é t o d o .
L o s r e s u l ta d o s o b t e n i d o s s e p u e d e n o b s e r v a r e n l a s t a b l a s : 2 7 , 2 8 y 2 9 ; y l o s c á l c u l o s
c o rre sp o n die n tes e n e l A n e x o 1 2 .
T A B L A 2 5 R e s u l t a d o s d e I n c e r t i d u m b r e p a r a c o l if o r m e s t o t a l e s y fe c a l e s p a r a e l
r a n g o d e 3 0 0 U F C /m L
C o lifo r m es
C o lifo r m es
T o ta le s
F e c a le s
a n tilo g
U 2
A n tilo g
U 2
U vr
0 .0 0 4 3
1 .0 0 9
1 .0 1 8
U vr
0 .0 0 3 9
1 .0 0 9
1 .0 1 8
U vm
0 .0 0 7 1
1 .0 1 6
1 .0 3 2
U vm
0 .0 0 7 1
1 .0 1 6
1 .0 3 2
U rep
1 6 .6 2
2 7 6 .2
U rep
1 6 .6 5
2 7 7 .2
U rec
1 1 .7 6
1 3 8 .3
U rec
7 .8 3
6 1 .3
4 1 6 .5 5
3 4 0 .5 5
I
4 0 .8 2
I
3 6 .9 1
% I
1 4 .7 7
% I
1 3 .3 0
F u en te: C arla B eltrán
82
T A B L A 2 6 R e s u l t a d o s d e I n c e r t i d u m b r e p a r a c o l if o r m e s t o t a l e s y fe c a l e s p a r a e l
r a n g o d e 1 0 0 U F C /m L
C o lifo r m es
C o lifo r m es
T o ta le s
F e c a le s
a n tilo g
U 2
a n tilo g
U 2
U vr
0 .0 0 9 5
1 .0 2 2
1 .0 4 4
U vr
0 .0 0 9 3
1 .0 2 1
1 .0 4 3
U vm
0 .0 0 6 7
1 .0 1 5
1 .0 3 1
U vm
0 .0 0 6 7
1 .0 1 5
1 .0 3 1
U rep
1 0 .0 3
1 0 0 .6
U rep
1 0 .0 3
1 0 0 .6
U rec
1 .5 5
2 .4
U rec
1 .1 4
1 .3
1 0 5 .0 7 5
1 0 3 .9 7 4
I
2 0 .5 0
I
2 0 .3 9
% I
2 0 .3 7
% I
2 0 .2 6
F u en te: C arla B eltrán
T A B L A 2 7 R e s u l t a d o s d e I n c e r t i d u m b r e p a r a c o l if o r m e s t o t a l e s y fe c a l e s p a r a e l
r a n g o d e 1 0 U F C /m L
C o lifo r m es
C o lifo r m es
T o ta le s
F e c a le s
a n tilo g
U 2
U vr
0 .0 0 9 6
1 .0 2 2
1 .0 4 5
1 .0 2 1
U vm
0 .0 0 9 2
U rep
3 .2 1
U rec
0 .2 7
a n tilo g
U 2
U vr
0 .0 1
1 .0 2 3
1 .0 4 7
1 .0 4 3
U vm
0 .0 0 8 4
1 .0 1 9
1 .0 3 9
1 0 .3
U rep
3 .1 5
0 .0 7
U rec
0 .1 8
1 2 .4 5 8
9 .9
0 .0 3
1 2 .0 1 6
I
7 .0 6
I
6 .9 3
% I
6 8 .4 0
% I
6 9 .7 5
F u en te: C arla B eltrán
83
C O N C L U SIO N E S
–
A l r e a l i z a r l a s p r u e b a s d e S h a p ir o
W ilk , se p u d o c o m pro b a r q u e los c u a tro
r a n g o s e n e s t u d i o c u m p le n c o n u n a d i s tr i b u c i ó n n o rm a l , y a q u e l o s r e s u l t a d o s
o b t e n i d o s f u e r o n m a y o r e s a l 0 ,0 5 l o q u e d e t e r m i n a l a n o r m a l i d a d d e l o s d a t o s .
En
el
ran g o
m é to d o s
de
o b te n ie n d o
de
300
e stu dio ,
U F C /m l
sin
r e s u lt a d o s
de
e x i s te n
e m b arg o
9 2 ,6 3
y
se
d i f e re n c i a s
d e m u e stra
9 5 ,1 1
%
p ara
s i g n if i c a t i v a s
la
p rese n c ia
c o li f o rm e s
e n tre
de
t o t a le s
los
dos
e x a ctitu d ,
y
fec a le s
r e s p e c ti v a m e n t e , l o c u a l e s m a y o r a l v a l o r d e a c e p ta c i ó n p r o p u e s t o p o r l a E N A C
(9 0 % ).
12
P a ra lo s ra n g o s de 1 0
, 1 0 0 y 1 0 U F C / m l , n o e x i s t e n d i f e r e n c ia s s i g n i fi c a t i v a s
e n t r e l o s m é t o d o s d e e s t u d i o , y l o s v a l o r e s d e e x a c t it u d s o n m a y o r e s a l 9 0 % , p o r
l o q u e e x i s t e e x a c ti t u d e n e s t o s tr e s r a n g o s , t a n t o p a r a c o li f o r m e s t o t a l e s c o m o
p a r a c o li f o rm e s fe c a l e s .
12
P a r a e l ra n g o d e 1 0
U F C / m l e l v a l o r o b t e n i d o t r a s l a c o m p a r a c i ó n e n tr e l o s
p o r c e n t a j e s f u e m a y o r a 2 t a n t o p a r a c o li f o r m e s t o t a l e s c o m o p a r a l o s f e c a l e s ,
e s t o i n d i c a q u e e l m é t o d o u ti li z a d o p o r e l l a b o r a t o r i o n o e s p r e c i s o p a r a u n r a n g o
12
m ayor a 10
U F C /m l.
P a ra los ra n g os d e
300, 100 y 10
U F C /m l se o b se rv a n re sulta d os d e ntro d e la
e s p e c i fi c a c i ó n p o r l o c u a l s e c o n si d e r a q u e e l m é t o d o e s p r e c i s o e n e st o s r a n g o s
t a n t o p a r a c o li f o rm e s t o t a l e s c o m o p a r a c o l if o r m e s f e c a l e s .
E l p o r c e n t a j e d e i n c e r ti d u m b re d e l m é t o d o a u m e n t a m i e n tr a s m e n o r e s e l n ú m e r o
d e m i c r o o r g a n i s m o s p r e s e n t e s e n l a m u e s t r a . P o r l o t a n t o s e p u e d e c o n c l u ir q u e
la s m u e stra s c o n u n c o n te nid o b a jo d e m ic ro o rga n ism o s p re s e nta n re s ulta d os c o n
m e n o r e rr o r .
84
N o e x i s t e d i f e r e n c i a s i g n if i c a t i v a e n t r e l o s d o s m é t o d o s d e e s t u d i o , s i n e m b a r g o
e n l a s t a b l a s d e r e s u lt a d o s s e p u e d e o b s e r v a r q u e e l N ú m e r o m á s P r o b a b l e d e l
S t a n d a r M e t h o d s p r o p o r c i o n a r e s u l t a d o s m á s c e r c a n o s a l o s e st á n d a re s .
El
m éto d o
d i s t ri b u c i ó n
u ti li z a d o
p or
el
la b o rato rio
n o r m a l , e x a c t o s , p r e c is o s
y
p r o p o rc i o n a
con
un
re sulta d o s
p o rc e n taje
de
con
in c ertid um b re
a c e p t a b le , p o r l o c u a l s e l o c o n s i d e r a V a li d a d o , h a s t a e l r a n g o d e 3 0 0 U F C .
85
una
R E C O M E N D A C IO N E S
Es
n e c e sa rio
m a n te ne r
to d o
el
m a t e r ia l
de
la b ora torio
c a l i b ra d o ,
y
r e a li z a r
re v isio n e s p e rió dic a s d el fu n c io n am ie nto d e lo s e q u ip o s , d e e s te m o d o s e p u e d e
a s e g u r a r q u e l o s a n á l i s i s y re s u lt a d o s e n t r e g a d o s s o n c o n fi a b l e s .
P a ra a g u a s re sid u a les e s
n e c e s a r i o r e a l iz a r d il u c i o n e s p r e v ia s a n t e s d e l a s i e m b r a
d e e s t e m o d o s e o b t e n d r á n v a l o r e s d e n t r o d e l o s r a n g o s v a li d a d o s , a s e g u r a n d o a s í
lo s re sulta d os.
A
pesar
de
que
el
m é to d o
pro p o rcio n a
r e s u lt a d o s
pre ciso s
y
e x a c tos,
es
r e c o m e n d a b l e c a m b i a rl o , u ti li z a n d o u n m é t o d o d e a n á li s i s d e r e c u e n t o , c o n e l
c u a l s e p u e d e o p t im i z a r ti e m p o , e s p a c i o y r e c u r s o s .
E l m o n i t o r e o a m b i e n t a l d e l l a b o r a t o r i o d e b e r e a l i z a r s e d e f o r m a p e ri ó d i c a , d e
e ste m o d o se a se g ura q u e n o h a y a c o n tam in a ció n cru z a d a q ue p u e d a in terferir
c o n e l r e s u l t a d o d e l o s a n á l is i s .
Es
n e c e s a ri o
que
p re vio
la
siem b ra ,
la s
m u e s tr a s
sea n
c o r re c t a m e n t e
h o m o g e n i z a d a s p a r a o b t e n e r u n a s u s p e n s i ó n d e b a c te r i a s u n i f o r m e p e rm it i e n d o
q u e e l v o l u m e n s e m b r a d o ( 1 m L ) r e p r e s e n t e a la p o b l a c i ó n t o t a l d e l a m u e s t ra .
86
L IST A D E R E F E R E N C IA S
A m e r ic a n T y p e C u lt u r e C o lle c t io n , ( 2 0 1 2 ) . B a c t e r ia A T C C n u m b e r 1 1 2 2 9 , R e c u p e r a d o
m ayo d e 2012, d e
el
31
de
h t t p : / / w w w . a tc c . o r g / A T C C A d v a n c e d C a t a lo g S e a r c h / P r o d u c t D e t a ils /
t a b id / 4 5 2 / D e f a u lt . a s p x ? A T C C N u m = 1 1 2 2 9 & T e m p la t e = b a c t e r ia .
A m e r ic a n W a t e r W o r k s A s s o c ia t i o n . ( 1 9 6 8 ) . A g u a s u c a li d a d y t r a t a m ie n t o . M é x ic o D F , M é x ic o :
H is p a n o A m e r ic a n a .
A p h a - A w a w p c f . ( 1 9 9 2 ) . M é t o d o s n o r m a liz a d o s p a r a e l a n á li s is d e a g u a s p o t a b le s y r e s i d u a le s .
M a d r id , E s p a ñ a : D ía z d e S a n t o s .
A p o lo ,
P.
(2002).
V a lid a c i ó n
d e l m é to d o
m e s ó f ilo s a e r o b io s e m p le a n d o
1
de
f ilt r a c ió n
m l de
po r
m u e stra
de
m e m b ra n a
ag ua.
para
e l re c u e n to
de
Q u it o , E c u a d o r : P o n t if ic ia
U n iv e r s id a d C a t ó lic a d e l E c u a d o r .
A rc e ,
A .
( s .f .) .
Fundam entos
R e c u p e ra d o
el
t é c n ic o s
18
de
p a ra
m ayo
el
m u e stre o
y
de
2011,
de
a n á l is i s
de
a gu as
r e s i d u a le s .
h t t p : / / w w w . b v s d e . p a h o .o r g /
b v s a c d / c d 6 7 / F u n d a m e n t o s _ T e c n ic o s .p d f
A r c e , O . ( 2 0 0 6 ) . I n d ic a d o r e s b io l ó g ic o s d e l a c a li d a d
2011,
de:
d e l a g u a . R e c u p e ra d o
e l 1 d e ju n io
de
h t t p : / / w w w . f c y t . u m s s . e d u . b o / d o c e n t e s / 2 9 / d o c u m e n t o s / in d ic a d o r e s
B io lo g ic o s C a lid a d A g u a . p d f .
A t la s ,
R.
(2002).
E c o lo g ía
M ic r o b i a n a
y
M ic r o b io l o g í a
a m b ie n t a l
(4
e d .).
M a d r id ,
E sp a ñ a :
P e a rso n .
B a d u i, S . ( 2 0 0 6 ) . Q u ím ic a d e lo s a lim e n t o s . M é x ic o D F . , M é x ic o : P e a r s o n .
B a n k s , H . ( 2 0 0 0 ) . C o n t r o l d e C a li d a d . M é x ic o D F . , M é x ic o : L im u s a .
C a r r illo , E . ( 2 0 0 8 ) . V a lid a c ió n d e l M é t o d o d e D e t e c c ió n d e C o lif o r m e s T o t a le s y F e c a le s e n A g u a
P o t a b le
u t iliz a n d o
A ga r
C h ro m o c u lt .
B o g o tá ,
C o lo m b ia :
P o n t if ic ia
U n iv e r s id a d
J a v e r ia n a ,
C a r r i l l o , L . ( 2 0 0 3 ) . M ic r o b i o l o g í a
A g r íc o l a . M ic r o o r g a n i s m o s . R e c u p e r a d o
el 24
d e m ayo
de
2 0 1 2 , d e h t t p : / / w w w . u n s a . e d u . a r / m a t b ib / m i c r a g r i / m i c a g r i c a p 1 . p d f .
G a m a z o , C . ( 2 0 0 5 ) . M a n u a l p r á c t ic o d e M ic r o b io lo g ía . B a r c e lo n a , E s p a ñ a : M a s s o n
F a ir , G . ( 1 9 8 9 ) . P u r if ic a c ió n d e A g u a s y T r a t a m ie n t o y R e m o c ió n d e A g u a s R e s id u a le s ( V o l. 2 ) .
M é x ic o D F , M é x ic o : L im u s a .
G ly n n , J . ( 1 9 9 9 ) . I n g e n ie r ía A m b ie n t a l ( 2 e d . ) . M é x ic o D F . , M é x ic o : P r e n t ic e H a ll.
87
G u t ié r r e z ,
S.
(2008).
A gu a.
R e c u p e ra d o
el
24
de
e n e ro
de
2013,
de
h t t p : / / w w w . u c v . v e / f ile a d m in / u s e r _ u p lo a d / f a c u lt a d _ fa r m a c ia / c a t e d r a M ic r o / 0 8 T e -m a _ 1 6 _ A g u a.p d f
Ló p e z,
C.
(200 6).
A gua.
R e c u p e ra d o
el
20
de
n o v ie m b r e
de
2012,
de
h t t p : / / b o o k s .g o o g le . c o m . e c / b o o k s ? id = p 1 jY C A i0 Q u c C & p g = P A 9 9 & d q = e l+ a g u a
+ c o m o + r e c u r s o & h l= e s 1 9 & s a = X & e i= z L s Z U a H x K 4 u L 0 Q G A n I H w C g & v e d = 0 C F
U Q 6 A E w C A # v = o n e p a g e & q = e l% 2 0 a g u a % 2 0 c o m o % 2 0 r e c u r s o & f = fa ls e
M o n t o y a , M a r ía . ( s . f .) . L A S C E P A S A T C C : H e r r a m ie n t a i n d is p e n s a b le e n e l
C a lid a d I n t e r n o e n M ic r o b i o lo g ía . R e c u p e r a d o e l 1 9 d e
C o n tro l
n o v ie m b r e d e
2012
de
de,
h t t p : / / w w w . g o o g le . c o m . e c /u r l? s a c u lt iv o s % 2 0 d e % 2 0 r e f e r e n c ia & s o u r c e = w e b & c d = 1 &
c a d = r ja & v e d C e p a s _ r e f _ c e r t if ic a d a s. p p t
N T E I N E N 1 1 0 8 . ( 2 0 0 6 ) . A g u a P o t a b le . R e q u is it o s . R e c u p e r a d o e l 1 2 d e ju lio d e 2 0 1 1 , d e h t t p : / /
w w w . d s p a c e . e s p o l. e d u . e c / b it s t r e a m / 1 2 3 4 5 6 7 8 9 / 1 0 6 0 8 / 8 / N o r m a % 2 0
I n e n % 2 0 A g u a 1 1 0 8 - 2 . p d f.
O r t iz , C . ( 1 9 8 9 ) . D i a g n ó s t ic o d e c o n t a m in a c ió n in d u s t r ia l p o r d e s c a r g a d e a g u a s , e n e l s e c t o r d e l
I n c a d e la c i u d a d d e Q u it o . Q u it o , E c u a d o r : E s c u e la P o lit é c n ic a N a c io n a l.
P e lc z a r , M . ( 1 9 7 7 ) . M ic r o b io lo g ía I n d u s t r ia l. M é x ic o D F . , M é x ic o : M c G r a w H ill H ig h e r E d u c a t io n
R o d r íg u e z , R . ( 2 0 0 4 ) . V a li d a c ió n d e p r o c e s o s , T a lle r d e v a li d a c ió n O M S . E x p e r t a
M e d ic a m e n t o s F D A , G u a t e m a la . R e c u p e r a d o e l 2 1 d e m a y o d e
2012,
N a c io n a l
de
de
h ttp :/ / w w w .
p a h o . o r g / S p a n is h / A D / T H S / E V / b p m - v a lid a c io n - p r o c e s o s - f d a .p p t .
S o le r , J . ( 2 0 0 6 ) . V a li d a c ió n s e c u n d a r ia
d e l m é to d o
d e N ú m e ro
m á s P r o b a b le y
R e c u e n to e n
P la c a P r o f u n d a P a r a C o lif o r m e s T o t a le s y F e c a le s e n M u e s t r a s d e A lim e n t o s b a s a d a e n
la N o r m a I S O N T C 1 7 0 2 5 . B o g o t á , C o lo m b ia : P o n t if ic ia U n iv e r s id a d J a v e r ia n a .
T r e lle s , R . ( 1 9 7 4 ) . L o s p r o f e t a s d e la c o n t a m i n a c ió n . B u e n o s A ir e s , A r g e n t in a : C r e s p illo .
V a le r a , J . ( 2 0 1 2 ) . E s t im a c ió n d e la I n v e r t i d u m b r e y a s e g u r a m ie n t o d e la c a l id a d e n m é t o d o s
m ic r o b io l ó g ic o s E N A C - O A E . Q u it o , E c u a d o r .
V á z q u e z , A . ( 2 0 0 3 ) . A c r e d it a c ió n d e L a b o r a t o r io s . R e c u p e r a d o e l 1 0
d e n o v ie m b r e d e 2 0 1 2 ,
d e : h t t p : / / w w w . e s t r u c p la n . c o m . a r / a r t ic u lo s / v e r a r t ic u lo . a s p ? I d a r t ic u lo = 5 0 9
Z a r c o , A . ( s .f .) . C a lid a d M ic r o b io l ó g ic a d e l a g u a . R e c u p e r a d o e l 1 9 d e n o v ie m b r e d e 2 0 1 2 , d e
h t t p : / / w w w 2 . in e . g o b . m x / e m a p a s / d o w n lo a d / lc h c a lid a d m ic r o b io lo g i c a .p d f
88
A N E X O S
A N E X O 1: C E R T IF IC A D O D E C E P A
E sc h e ric h ia c oli A T C C 8 7 3 9
89
A N E X O 2: C E R T IF IC A D O D E C E P A
E sc h e ric h ia c oli A T C C 2 5 9 2 2
90
A N E X O 3: C E R T IF IC A D O D E C E P A
S h ig e lla so n e i A T C C 2 5 9 3 1
91
A N E X O
4:
C E R T IF IC A D O
D E
C A L IB R A C IÓ N
M E M M E R T E 5 9 6 .0 2 3 9
92
D E
L A
IN C U B A D O R A
93
94
A N E X O
5:
L A M IN A R
IN F O R M E
D E
M A N T E N IM IE N T O
L A B C O N C O
95
D E
L A
C A B IN A
D E
F L U JO
A N E X O
6:
IN F O R M E
D E
C A L IB R A C IÓ N
M E T T L E R T O L E D O
96
D E
L A
B A L A N Z A
A N A L ÍT IC A
97
A N E X O
7:
C U A D R O
D E
V E R IF IC A C IÓ N
D E
L O S
E Q U IP O S
L A B O R A T O R IO .
E Q U IP O
R E Q U ISIT O S
F R E C U E N C IA
V e r i f i c a r l a e s t a b i li d a d d e
Incubadora
D ia ria m e n te
la tem p e ratu ra .
V e r i f i c a r l a s c a r a c t e rí st i c a s
A u to c la v e
C ada 2 años
p a ra c a rg as.
V e rifica r c o n u n a p e sa d e
B a la n z a
D ia ria m e n te
c o n tro l.
M ic r o p ip eta s
V e r i f i c a r l a e x a c ti t u d
M e n s u a lm e n t e
C o n tro l d e aire y
s u p e r f ic i e s p a r a c o n t r o la r l a
C o n d ic io n e s a m b ie nta le s
c o n ta m in a c ió n m icro b ia n a .
S e m a n a lm e n t e
(m ic r o bio ló gic a s)
Y a se g u ra rse d e la d o tac ió n
a p ro p ia d a d el p e rso na l.
C o n d ic io n e s a m b ie nta le s
C o n t r o l d e la t e m p e r a t u r a y
(T em p era tu ra y
D ia ria m e n te
h u m e d a d d e l l a b o r a t o ri o .
H um edad)
98
D E
A N E X O
8: P R O C E D IM IE N T O
PA R A
L A
R E C O N S T IT U C IÓ N
D E U N A
C E P A
A T C C
TM
La
u n id a d
K W IK -S T IK
c o n ti e n e
una
p a s ti ll a
li o fi li z a d a
de
u na
cepa
ú nic a
de
m i c r o o r g a n is m o , u n d e p ó s i t o d e lí q u i d o h i d r a t a n te y u n h i s o p o i n o c u l a r . C a d a e q u i p o
v i e n e s e ll a d o e n u n a b o l s a l a m i n a d a q u e c o n ti e n e u n d e s e c a n t e p a r a e v it a r l a f o rm a c i ó n
TM
de
hum edad. C ada
p re p ara d a
li o fi l iz a d o
de
lo s
m icro o rg a nism os
K W IK -S T IK
es
m e n o r o i g u a l q u e ( 4 ) p a s a j e s d e u n c u l ti v o d e r e f e r e n c i a .
TM
1.
S a q u e la u n id a d K W IK -S T IK
d e l a lm a c e n a m i e n t o a 2 - 8 ° C
y p e rm it a q u e l a
b o l s a c e rr a d a a l c a n c e l a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e .
2.
A b ra la b o lsa y sa q u e la u nid a d .
3.
Q u i t e l a p a r t e r e m o v i b l e d e l a e t i q u e ta d e l e q u i p o K W I K - S T I K
TM
. L a e tiq u e ta
p u e d e u s a r s e c o m o i d e n t if i c a c i ó n .
4.
T o m e n o t a d e l a p o s i c i ó n d e l a p a s ti ll a e n e l f o n d o d e l e q u i p o y d e l d e p ó s it o d e l
l í q u i d o h i d r a ta n t e e n l a p a r t e s u p e r i o r ( t a p a ) d e l e q u i p o . N o d e s a rm e e l e q u i p o
d u r a n t e l a h i d ra t a c i ó n .
5.
L i b e r e e l lí q u i d o h i d r a ta n t e p e l l iz c a n d o l a a m p o l la d e l a t a p a d e l e q u i p o p a r a
r o m p e rl a . P e r m i t a q u e e l l í q u i d o h i d r a t a n te f l u y a p o r e l r a ll o d e l h i s o p o a l a p a r t e
i n f e ri o r d e l a u n i d a d , d o n d e e s t á l a p a s t il l a d e g e l a t i n a .
6.
S o s t e n g a e l e q u i p o e n p o s i c i ó n v e r t ic a l , c o n l a t a p a h a c ia a r r i b a , y g o l p e e l a b a s e
d e l e q u i p o s u a v e m e n t e c o n tr a e l m o s t r a d o r p a r a f a c i li t a r e l f l u j o d e l l í q u i d o .
7.
P e l l i z q u e la p a rt e i n f e r i o r d e l a u n i d a d p a ra tr it u r a r l a p a s t i ll a
y m e z c l a rl a e n e l
l í q u i d o , h a s ta q u e l a s p a r tí c u l a s d e l a p a s t il l a t e n g a n u n t a m a ñ o u n i f o r m e y l a
su sp e n sió n te n g a u n a sp ec to h o m o gé n e o .
8.
S a t u r e i n m e d i a t a m e n t e e l h i s o p o c o n e l m a te r ia l h i d r a t a d o y t r a n s f i e re e l m a t e ri a l
a u n m e d i o a p r o p i a d o n o s e l e c t i v o , y a s e a u n n u t ri e n te o u n a g a r e n ri q u e c i d o .
G i r e e l h i s o p o a p li c a n d o l e v e p r e s i ó n , p a r a i n o c u l a r e n u n á r e a c i r c u l a r ( d e u n a
p u lg a d a o 2 5 m m d e diá m etro) d e l m e dio d e l a g ar. U s e e l m ism o h is o p o a u n la d o
e s t é ri l
p ara
ra y ar
y
hacer
su rco s
re p etid am e nte
in o c u la d a y lu e g o sig a ra y a n d o .
99
(1 0
a
20
v e c e s)
en
el
área
9.
In cu b e
i n m e d i a ta m e n t e
e l m e dio
in o c ula d o
con
la
tem p e ratu ra
y
c o n d ic i o n e s
a p r o p i a d a s p a r a e l m ic r o o r g a n i s m o .
1 0 . D e s p u é s d e la i n o c u l a c i ó n , s e l e c c i o n e c o l o n i a s r e p re s e n t a t i v a s b ie n a is l a d a s p a r a
l a s tr a n s f e r e n c ia s r e q u e r i d a s .
1 1 . D e s c a r t e t o d o e l m a t e r i a l h i d r a t a d o r e s ta n t e s e g ú n e l p r o t o c o l o d e l l a b o r a t o r i o
p a r a e li m i n a c i ó n d e m a te r i a l b i o l ó g i c o p e l i g r o s o .
100
A N E X O
9:
R E SU L T A D O S
H IST Ó R IC O S
D E L
2012
PA R A
C O L IF O R M E S
T O T A L E S Y FE C A L E S E N M U E ST R A S D E A G U A .
A gua C ruda y
A gua de C onsum o
A g u a R e sid u a l
R e sid u a l
C . T o ta le s
C .
C .
C . T o ta le s
F e c a le s
C . T o ta le s
C . F e c a le s
F e c a le s
0
0
0
0
9 .1
9 .3 E + 1 2
2 .1 E + 1 1
0
0
2400000
240000
0
23
930000
240000
0
3 .6
2400000
240000
0
43
1 .1 E + 1 3
43000000
0
25
430000
7300
0
43
4 .6 E + 1 1
46000000000
210000000
150000000
3 .6
0
43
240
21
91
43
43000
21
6300
3 .6
230000000
230000000
43
43
46000000000
4 .6 E + 1 1
460000000
460000000
460000000
460000000
3 .6
43
93
43
23
240000000
15000000
0
1100000000
460000000
23
240000000
46000000
43
1100000000
15000000
430
1100000000
4600
0
2400000000
430000000
43
0
2400000000
93000000
23
0
2 .4 E + 1 1
0
460
0
2 .4 E + 1 1
0
930
73
9 .3 E + 1 1
28000000000
240
9 .1
20000000
1500000
240
7 .3
0
0
9 .1
9 .1
9 .1
3 .6
93
93
23
23
3 .6
0
930
23
240
0
101
7 .3
0
3 .6
0
73
2 2 .4 7 2 7 2 7 3
21
2 8 6 .6 5 9 4 5 9
1 8 .6 8 5
102
8 .9 E + 1 1
3 .1 E + 1 0
A N E X O
10:
ÍN D IC E
D E
N M P
P A R A
D IST IN T A S
C O M B IN A C IO N E S
R E SU L T A D O S P O SIT IV O S C U A N D O SE U S A N 5 T U B O S P O R D IL U C IÓ N .
C o m b in a c ió n d e tu b o s
Ín d ic e N M P
p o sitiv os
C o m b in a c ió n d e tu b o s
Ín d ic e
p o sitiv os
N M P
0 -0 -0
< 2
4 -2 -0
22
0 -0 -1
2
4 -2 -1
26
0 -1 -0
2
4 -3 -0
27
0 -2 -0
4
4 -3 -1
33
1 -0 -0
2
4 -4 -0
34
1 -0 -1
4
5 -0 -0
23
1 -1 -0
4
5 -0 -1
30
1 -1 -1
6
5 -0 -2
40
1 -2 -0
6
5 -1 -0
30
2 -0 -0
4
5 -1 -1
50
2 -0 -1
7
5 -1 -2
60
2 -1 -0
7
5 -2 -0
50
2 -1 -1
9
5 -2 -1
70
2 -2 -0
9
5 -2 -2
90
2 -3 -0
12
5 -3 -0
80
3 -0 -0
8
5 -3 -1
110
3 -0 -1
11
5 -3 -2
140
3 -1 -0
11
5 -3 -3
170
3 -1 -1
14
5 -4 -0
130
3 -2 -0
14
5 -4 -1
170
3 -2 -1
17
5 -4 -2
220
4 -0 -0
13
5 -4 -3
280
4 -0 -1
17
5 -4 -4
350
4 -1 -0
17
5 -5 -0
240
4 -1 -1
21
5 -5 -1
300
4 -1 -2
26
5 -5 -2
500
5 -5 -3
900
5 -5 -4
1 .6 0 0
5 -5 -5
≥ 1 .6 0 0
103
D E
A N E X O
11:
T A B L A
D E
N M P
P A R A
V A R IA S
C O M B IN A C IO N E S
R E SU L T A D O S P O SIT IV O S U T IL IZ A N D O 3 T U B O S P O R D IL U C IÓ N
C o m b in a c ió n d e tu b o s
Ín d ic e N M P
p o sitiv os
C o m b in a c ió n d e tu b o s
Ín d ic e
p o sitiv os
N M P
0 -0 -0
A u se n c ia
2 -0 -0
9 .1
0 -0 -1
3
2 -0 -1
14
0 -0 -2
6
2 -0 -2
20
0 -0 -3
9
2 -0 -3
26
0 -1 -0
3
2 -1 -0
15
0 -1 -1
6 .1
2 -1 -1
20
0 -1 -2
9 .2
2 -1 -2
27
0 -1 -3
12
2 -1 -3
34
0 -2 -0
6 .2
2 -2 -0
21
0 -2 -1
9 .3
2 -2 -1
28
0 -2 -2
12
2 -2 -2
35
0 -2 -3
16
2 -2 -3
42
0 -3 -0
9 .4
2 -3 -0
29
0 -3 -1
13
2 -3 -1
36
0 -3 -2
16
2 -3 -2
44
0 -3 -3
19
2 -3 -3
53
1 -0 -0
3 .6
3 -0 -0
23
1 -0 -1
7 .2
3 -0 -1
39
1 -0 -2
11
3 -0 -2
64
1 -0 -3
15
3 -0 -3
95
1 -1 -0
7 .3
3 -1 -0
43
1 -1 -1
11
3 -1 -1
75
1 -1 -2
15
3 -1 -2
120
1 -1 -3
19
3 -1 -3
160
1 -2 -0
11
3 -2 -0
93
1 -2 -1
15
3 -2 -1
150
1 -2 -2
20
3 -2 -2
210
1 -2 -3
24
3 -2 -3
290
1 -3 -0
16
3 -3 -0
240
1 -3 -1
20
3 -3 -1
460
1 -3 -2
24
3 -3 -2
1100
1 -3 -3
29
3 -3 -3
≥ 1100
104
D E
ANEXO12: RESULTADOSDELRECUENTODEMICROORGANISMOSENELRANGODE300UFC/mL, PARAELMÉTODODENMPUTILIZADOPORELLABORATORIOYELDEREFERENCIA(STANDARMETHODS).
RANGO300ufc
MétodoStandar Methods
MétododelLaboratorio(CICAM)
ColiformesTotales
ColiformesFecales
CajaPetri
ColiformesTotales
ColiformesFecales
CaldoVerde Brillante(35°C)
CaldoVerde Brillante(44°C)
Fecha
CajaPetri
12 Nov.
CaldoLactosa(35°C)
CaldoVerde Brillante(35°C)
CaldoEC(44°C)
5–5–1
5–5–1
5–5–0
300NMP/100ml
300NMP/100ml
240NMP/100ml
5–5–1
5–5–1
5–5–0
300NMP/100ml
300NMP/100ml
240NMP/100ml
5–5–1
5–5–1
5–5–0
300NMP/100ml
300NMP/100ml
240NMP/100ml
5–4–3
5–4–4
5–5–1
280NMP/100ml
350NMP/100ml
300NMP/100ml
5–4–3
5–4–4
5–5–1
280NMP/100ml
350NMP/100ml
300NMP/100ml
5–4–3
5–4–4
5–5–1
280NMP/100ml
350NMP/100ml
300NMP/100ml
5–5–1
5–5–1
5–4–3
300NMP/100ml
300NMP/100ml
280NMP/100ml
5–5–1
5–5–1
5–4–3
300NMP/100ml
300NMP/100ml
280NMP/100ml
5–5–1
5–5–1
5–4–3
300NMP/100ml
300NMP/100ml
280NMP/100ml
105
310
295
305
3–3–0
3–3–1
3–2–3
240NMP/100ml
460NMP/100ml
290NMP/100ml
3–3–0
3–3–1
3–2–3
3–3–0
3–3–0
3–3–0
240NMP/100ml
240NMP/100ml
240NMP/100ml
3–3–0
3–3–0
3–3–0
3–2–3
3–2–3
3–2–3
290NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
3–2–3
3–2–3
3–2–3
240NMP/100ml
460NMP/100ml
290NMP/100ml
240NMP/100ml
240NMP/100ml
240NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
300
300
306
13 Nov.
14 Nov.
19 Nov.
5–5–1
5–4–3
5–5–1
300NMP/100ml
280NMP/100ml
300NMP/100ml
5–5–1
5–4–3
5–5–1
300NMP/100ml
280NMP/100ml
300NMP/100ml
5–5–1
5–4–3
5–5–1
300NMP/100ml
280NMP/100ml
300NMP/100ml
3–2–3
3–2–3
3–2–3
290NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
3–2–3
3–2–3
3–2–3
290NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
5–4–3
5–5–1
5–5–1
280NMP/100ml
300NMP/100ml
300NMP/100ml
5–4–3
5–5–1
5–5–1
280NMP/100ml
300NMP/100ml
300NMP/100ml
5–4–3
5–5–1
5–5–1
280NMP/100ml
300NMP/100ml
300NMP/100ml
3–2–3
3–3–0
3–3–0
290NMP/100ml
240NMP/100ml
240NMP/100ml
3–2–3
3–3–0
3–3–0
290NMP/100ml
240NMP/100ml
240NMP/100ml
5–4–3
5–4–3
5–5–1
280NMP/100ml
280NMP/100ml
300NMP/100ml
5–4–3
5–4–3
5–5–1
280NMP/100ml
280NMP/100ml
300NMP/100ml
5–4–3
5–4–3
5–5–1
280NMP/100ml
280NMP/100ml
300NMP/100ml
3–2–3
3–2–3
3–2–3
290NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
3–2–3
3–2–3
3–2–3
290NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
5–5–1
5–5–1
5–5–1
300NMP/100ml
300NMP/100ml
300NMP/100ml
5–5–1
5–5–1
5–5–1
300NMP/100ml
300NMP/100ml
300NMP/100ml
5–5–1
5–5–1
5–5–1
300NMP/100ml
300NMP/100ml
300NMP/100ml
3–2–3
3–3–0
3–2–3
290NMP/100ml
240NMP/100ml
290NMP/100ml
3–2–3
3–3–0
3–2–3
290NMP/100ml
240NMP/100ml
290NMP/100ml
5–5–1
5–4–3
5–4–4
300NMP/100ml
280NMP/100ml
350NMP/100ml
5–5–1
5–4–3
5–4–4
300NMP/100ml
280NMP/100ml
350NMP/100ml
5–5–1
5–4–3
5–4–4
300NMP/100ml
280NMP/100ml
350NMP/100ml
3–3–0
3–2–3
3–2–3
240NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
3–3–0
3–2–3
3–2–3
240NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
5–4–3
5–4–3
5–5–1
280NMP/100ml
280NMP/100ml
300NMP/100ml
5–4–3
5–4–3
5–5–1
280NMP/100ml
280NMP/100ml
300NMP/100ml
5–4–3
5–4–3
5–5–1
280NMP/100ml
280NMP/100ml
300NMP/100ml
3–2–3
3–2–3
3–2–3
290NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
3–2–3
3–2–3
3–2–3
290NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
5–5–1
5–4–4
5–4–3
300NMP/100ml
350NMP/100ml
280NMP/100ml
5–5–1
5–4–4
5–4–3
300NMP/100ml
350NMP/100ml
280NMP/100ml
5–5–1
5–4–4
5–4–3
300NMP/100ml
350NMP/100ml
280NMP/100ml
3–3–0
3–2–3
3–2–3
240NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
3–3–0
3–2–3
3–2–3
240NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
5–5–1
5–4–4
5–5–1
300NMP/100ml
350NMP/100ml
300NMP/100ml
5–5–1
5–4–4
5–5–1
300NMP/100ml
350NMP/100ml
300NMP/100ml
5–5–1
5–4–4
5–5–1
300NMP/100ml
350NMP/100ml
300NMP/100ml
3–3–0
3–3–0
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240NMP/100ml
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3–3–0
3–3–0
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240NMP/100ml
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5–4–3
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5–4–3
280NMP/100ml
5–4–3
280NMP/100ml
3–2–3
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3–2–3
290NMP/100ml
106
300
290
307
320
300
306
297
300
300
305
290
290
293
290
287
298
300
286
20 Nov.
21 Nov.
5–5–1
5–4–0
300NMP/100ml
280NMP/100ml
5–5–1
5–4–0
300NMP/100ml
280NMP/100ml
5–5–1
5–4–0
300NMP/100ml
280NMP/100ml
3–2–3
3–2–3
290NMP/100ml
290NMP/100ml
3–2–3
3–2–3
290NMP/100ml
290NMP/100ml
5–5–1
5–4–0
5–5–1
300NMP/100ml
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300NMP/100ml
5–5–1
5–4–0
5–5–1
300NMP/100ml
280NMP/100ml
300NMP/100ml
5–5–1
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280NMP/100ml
300NMP/100ml
3–2–3
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290NMP/100ml
290NMP/100ml
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3–2–3
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290NMP/100ml
240NMP/100ml
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300NMP/100ml
300NMP/100ml
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5–5–1
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300NMP/100ml
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5–5–1
5–5–1
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300NMP/100ml
300NMP/100ml
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3–3–0
3–2–3
3–3–0
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290NMP/100ml
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3–3–0
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290NMP/100ml
240NMP/100ml
5–5–1
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350NMP/100ml
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5–5–1
5–4–4
5–4–0
300NMP/100ml
350NMP/100ml
280NMP/100ml
5–5–1
5–4–4
5–4–0
300NMP/100ml
350NMP/100ml
280NMP/100ml
3–1–2
1–1–1
3–1–0
240NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
3–1–2
1–1–1
3–1–0
240NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
5–5–1
5–5–1
5–5–1
300NMP/100ml
300NMP/100ml
300NMP/100ml
5–5–1
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5–5–1
300NMP/100ml
300NMP/100ml
300NMP/100ml
5–5–1
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300NMP/100ml
300NMP/100ml
300NMP/100ml
3–3–0
3–2–3
3–3–0
240NMP/100ml
290NMP/100ml
240NMP/100ml
3–3–0
3–2–3
3–3–0
240NMP/100ml
290NMP/100ml
240NMP/100ml
5–4–0
5–4–0
5–4–0
280NMP/100ml
280NMP/100ml
280NMP/100ml
5–4–0
5–4–0
5–4–0
280NMP/100ml
280NMP/100ml
280NMP/100ml
5–4–0
5–4–0
5–4–0
280NMP/100ml
280NMP/100ml
280NMP/100ml
3–2–3
3–2–3
3–2–3
290NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
3–2–3
3–2–3
3–2–3
290NMP/100ml
290NMP/100ml
290NMP/100ml
5–4–4
5–4–4
3–4–4
350NMP/100ml
350NMP/100ml
350NMP/100ml
5–4–4
5–4–4
3–4–4
350NMP/100ml
350NMP/100ml
350NMP/100ml
5–4–4
5–4–4
3–4–4
350NMP/100ml
350NMP/100ml
350NMP/100ml
3–3–0
3–3–0
3–3–0
240NMP/100ml
240NMP/100ml
240NMP/100ml
3–3–0
3–3–0
3–3–0
240NMP/100ml
240NMP/100ml
240NMP/100ml
107
320
290
294
300
306
302
300
298
298
300
287
297
ANEXO13: RESULTADOSDELRECUENTODEMICROORGANISMOSENELRANGODE100UFC/mL, PARAELMÉTODODENMPUTILIZADOPORELLABORATORIOYELDEREFERENCIA(STANDARMETHODS).
RANGO100ufc
MétodoStandarMethods
MétododelLaboratorio(CICAM)
ColiformesTotales
ColiformesFecales
CajaPetri
ColiformesTotales
ColiformesFecales
CaldoVerdeBrillante(35°C)
CaldoVerdeBrillante(44°C)
13 Nov.
12 Nov.
Fecha
CajaPetri
CaldoLactosa(35°C)
CaldoVerdeBrillante(35°C)
CaldoEC(44°C)
5–3–0
5–2–2
5–2–2
80NMP/100ml
90NMP/100ml
90NMP/100ml
5–3–0
5–2–2
5–2–2
80NMP/100ml
90NMP/100ml
90NMP/100ml
5–3–0
5–2–2
5–2–2
80NMP/100ml
90NMP/100ml
90NMP/100ml
3–2–0
3–2–0
3–2–0
93NMP/100ml
93NMP/100ml
93NMP/100ml
3–2–0
3–2–0
3–2–0
93NMP/100ml
93NMP/100ml
93NMP/100ml
5–2–2
5–4–0
5–4–0
90NMP/100ml
130NMP/100ml
130NMP/10
5–2–2
5–4–0
5–4–0
90NMP/100ml
130NMP/100ml
130NMP/100ml
5–2–2
5–4–0
5–4–0
90NMP/100ml
130NMP/100ml
130NMP/100ml
3–1–2
3–2–0
3–2–0
120NMP/100ml
93NMP/100ml
93NMP/100ml
3–1–2
3–2–0
3–2–0
120NMP/100ml
93NMP/100ml
93NMP/100ml
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
3–0–3
3–2–0
3–1–0
95NMP/100ml
93NMP/100ml
95NMP/100ml
3–0–3
3–2–0
3–1–0
95NMP/100ml
93NMP/100ml
95NMP/100ml
5–3–0
5–4–0
5–2–2
80NMP/100ml
130NMP/100ml
90NMP/100ml
5–3–0
5–4–0
5–2–2
80NMP/100ml
130NMP/100ml
90NMP/100ml
5–3–0
5–4–0
5–2–2
80NMP/100ml
130NMP/100ml
90NMP/100ml
3–1–2
3–2–0
3–2–0
120NMP/100ml
93NMP/100ml
93NMP/100ml
3–1–2
3–2–0
3–2–0
120NMP/100ml
93NMP/100ml
93NMP/100ml
108
105
110
110
100
100
90
14 Nov.
19 Nov.
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
3–2–0
3–1–0
3–1–0
93NMP/100ml
95NMP/100ml
95NMP/100ml
3–2–0
3–1–0
3–1–0
93NMP/100ml
95NMP/100ml
95NMP/100ml
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
3–1–2
3–2–0
3–2–0
120NMP/100ml
93NMP/100ml
93NMP/100ml
3–1–2
3–2–0
3–2–0
120NMP/100ml
93NMP/100ml
93NMP/100ml
5–3–1
5–3–0
5–3–1
110NMP/100ml
80NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–3–0
5–3–1
110NMP/100ml
80NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–3–0
5–3–1
110NMP/100ml
80NMP/100ml
110NMP/100ml
3–1–2
3–1–0
3–1–2
120NMP/100ml
95NMP/100ml
120NMP/100ml
3–1–2
3–1–0
3–1–2
120NMP/100ml
95NMP/100ml
120NMP/100ml
5–3–1
5–3–1
5–4–0
110NMP/100ml
110NMP/100ml
130NMP/100ml
5–3–1
5–3–1
5–4–0
110NMP/100ml
110NMP/100ml
130NMP/100ml
5–3–1
5–3–1
5–4–0
110NMP/100ml
110NMP/100ml
130NMP/100ml
3–2–0
3–2–0
3–1–0
93NMP/100ml
93NMP/100ml
95NMP/100ml
3–2–0
3–2–0
3–1–0
93NMP/100ml
93NMP/100ml
95NMP/100ml
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–4–0
5–3–1
110NMP/100ml
130NMP/100ml
110NMP/100ml
3–1–0
3–1–2
3–1–2
95NMP/100ml
120NMP/100ml
120NMP/100ml
3–1–0
3–1–2
3–1–2
95NMP/100ml
120NMP/100ml
120NMP/100ml
5–3–1
5–2–2
5–3–1
110NMP/100ml
90NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–2–2
5–3–1
110NMP/100ml
90NMP/100ml
110NMP/100ml
5–3–1
5–2–2
5–3–1
110NMP/100ml
90NMP/100ml
110NMP/100ml
3–2–0
3–2–0
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93NMP/100ml
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3–2–0
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93NMP/100ml
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5–3–1
5–3–1
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110NMP/100ml
110NMP/100ml
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5–3–1
5–3–1
5–2–2
110NMP/100ml
110NMP/100ml
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5–3–1
5–3–1
5–2–2
110NMP/100ml
110NMP/100ml
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3–1–2
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120NMP/100ml
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5–3–1
5–3–0
5–2–2
110NMP/100ml
80NMP/100ml
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5–3–0
5–2–2
110NMP/100ml
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3–2–0
3–2–0
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93NMP/100ml
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3–2–0
95NMP/100ml
93NMP/100ml
93NMP/100ml
109
100
111
106
100
107
115
100
117
98
105
100
97
100
110
90
102
95
104
20 Nov.
21 Nov.
5–2–2
5–2–2
5–3–1
90NMP/100ml
90NMP/100ml
110NMP/100ml
5–2–2
5–2–2
5–3–1
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90NMP/100ml
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5–2–2
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5–3–1
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110NMP/100ml
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5–3–1
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110NMP/100ml
5–2–2
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5–3–1
90NMP/100ml
110NMP/100ml
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95NMP/100ml
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120NMP/100ml
95NMP/100ml
95NMP/100ml
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110NMP/100ml
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80NMP/100ml
110NMP/100ml
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110NMP/100ml
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110NMP/100ml
80NMP/100ml
90NMP/100ml
5–3–1
5–3–0
5–2–2
110NMP/100ml
80NMP/100ml
90NMP/100ml
5–3–1
5–3–0
5–2–2
110NMP/100ml
80NMP/100ml
90NMP/100ml
3–1–0
3–2–0
3–2–0
95NMP/100ml
93NMP/100ml
93NMP/100ml
3–1–0
3–2–0
3–2–0
95NMP/100ml
93NMP/100ml
93NMP/100ml
5–2–2
5–2–2
5–2–2
90NMP/100ml
90NMP/100ml
90NMP/100ml
5–2–2
5–2–2
5–2–2
90NMP/100ml
90NMP/100ml
90NMP/100ml
5–2–2
5–2–2
5–2–2
90NMP/100ml
90NMP/100ml
90NMP/100ml
3–1–0
3–1–2
3–1–2
95NMP/100ml
120NMP/100ml
120NMP/100ml
3–1–0
3–1–2
3–1–2
95NMP/100ml
120NMP/100ml
120NMP/100ml
5–3–1
5–3–1
5–4–0
110NMP/100ml
110NMP/100ml
130NMP/100ml
5–3–1
5–3–1
5–4–0
110NMP/100ml
110NMP/100ml
130NMP/100ml
5–3–1
5–3–1
5–4–0
110NMP/100ml
110NMP/100ml
130NMP/100ml
3–1–2
3–1–2
3–1–2
120NMP/100ml
120NMP/100ml
120NMP/100ml
3–1–2
3–1–2
3–1–2
120NMP/100ml
120NMP/100ml
120NMP/100ml
110
100
102
102
99
101
100
105
100
107
100
110
106
ANEXO14: RESULTADOSDELRECUENTODEMICROORGANISMOSENELRANGODE10UFC/mL, PARAELMÉTODODENMPUTILIZADOPORELLABORATORIOYELDEREFERENCIA(STANDARMETHODS).
RANGO10ufc
MétodoStandarMethods
MétododelLaboratorio(CICAM)
ColiformesTotales
ColiformesFecales
CajaPetri
ColiformesTotales
ColiformesFecales
CaldoVerdeBrillante(35°C)
CaldoVerdeBrillante(44°C)
Fecha
CajaPetri
13 Nov.
12 Nov.
CaldoLactosa(35°C)
4–0–0
4–4–0
3–0–0
13NMP/100ml
13NMP/100ml
8NMP/100ml
CaldoVerdeBrillante(35°C)
4–0–0
4–4–0
3–0–0
13NMP/100ml
13NMP/100ml
8NMP/100ml
CaldoEC(44°C)
4–0–0
4–4–0
3–0–0
13NMP/100ml
13NMP/100ml
8NMP/100ml
4–0–0
4–0–0
3–0–1
13NMP/100ml
13NMP/100ml
11NMP/100ml
4–0–0
4–0–0
3–0–1
13NMP/100ml
13NMP/100ml
11NMP/100ml
4–0–0
4–0–0
3–0–1
13NMP/100ml
13NMP/100ml
11NMP/100ml
3–0–1
3–1–0
2–2–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
9NMP/100ml
3–0–1
3–1–0
2–2–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
9NMP/100ml
3–0–1
3–1–0
2–2–0
4–0–0
3–2–0
4–0–0
13NMP/100ml
14NMP/100ml
13NMP/100ml
4–0–0
3–2–0
4–0–0
13NMP/100ml
14NMP/100ml
13NMP/100ml
4–0–0
3–2–0
4–0–0
0–1–2
2–0–0
0-1–2
10
11
10
9.2NMP/100ml
9.1NMP/100ml
9.2NMP/100ml
0–1–2
2–0–0
0-1–2
9.2NMP/100ml
9.1NMP/100ml
9.2NMP/100ml
0–2–2
1–2–0
1–2–0
12NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
0–2–2
1–2–0
1–2–0
12NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
9NMP/100ml
1–1–1
0–2–1
1-2–0
11NMP/100ml
9.3NMP/100ml
11NMP/100ml
1–1–1
0–2–1
1–2–0
11NMP/100ml
9.3NMP/100ml
11NMP/100ml
13NMP/100ml
14NMP/100ml
13NMP/100ml
1–1–1
1–1–1
1-1–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
7.3NMP/100ml
1–1–1
1–1–1
1-1–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
7.3NMP/100ml
111
10
11
11
14 Nov.
19 Nov.
3–0–1
3–0–1
2–2–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
9NMP/100ml
3–0–1
3–0–1
2–2–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
9NMP/100ml
3–0–1
3–0–1
2–2–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
9NMP/100ml
2–0–0
0–2–2
1–2–0
9.1NMP/100ml
12NMP/100ml
11NMP/100ml
2–0–0
0–2–2
1–2–0
9.1NMP/100ml
12NMP/100ml
11NMP/100ml
2–2–0
3–1–0
3–1–0
9NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
2–2–0
3–1–0
3–1–0
9NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
2–2–0
3–1–0
3–1–0
9NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
0–3–1
1–2–0
1–2–0
13NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
0–3–1
1–2–0
1–2–0
13NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
4–0–0
3–1–0
3–1–0
13NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
4–0–0
3–1–0
3–1–0
13NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
4–0–0
3–1–0
3–1–0
13NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
2–2–0
1–1–1
1–1–1
9.1NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
2–2–0
1–1–1
1–1–1
9.1NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
3–0–1
2–2–0
3–1–0
11NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
3–0–1
2–2–0
3–1–0
11NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
3–0–1
2–2–0
3–1–0
11NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
0–3–1
2–2–0
1–2–0
13NMP/100ml
9.1NMP/100ml
11NMP/100ml
0–3–1
2–2–0
1–2–0
13NMP/100ml
9.1NMP/100ml
11NMP/100ml
3–0–0
4–0–0
4–0–0
8NMP/100ml
13NMP/100ml
13NMP/100ml
3–0–0
4–0–0
4–0–0
8NMP/100ml
13NMP/100ml
13NMP/100ml
3–0–0
4–0–0
4–0–0
8NMP/100ml
13NMP/100ml
13NMP/100ml
2–2–0
2–2–0
2–2–0
9.1NMP/100ml
9.1NMP/100ml
9.1NMP/100ml
2–2–0
2–2–0
2–2–0
9.1NMP/100ml
9.1NMP/100ml
9.1NMP/100ml
2–2–0
2–2–0
3–1–0
9NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
2–2–0
2–2–0
3–1–0
9NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
2–2–0
2–2–0
3–1–0
9NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
1–2–0
1–1–1
0–3–1
11NMP/100ml
11NMP/100ml
13NMP/100ml
1–2–0
1–1–1
0–3–1
11NMP/100ml
11NMP/100ml
13NMP/100ml
2–2–0
3–1–0
4–0–0
9NMP/100ml
11NMP/100ml
13NMP/100ml
2–2–0
3–1–0
4–0–0
9NMP/100ml
11NMP/100ml
13NMP/100ml
2–2–0
3–1–0
4–0–0
9NMP/100ml
11NMP/100ml
13NMP/100ml
1–2–0
1–2–0
1–1–1
11NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
1–2–0
1–2–0
1–1–1
11NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
4–0–0
4–0–0
2–2–0
13NMP/100ml
13NMP/100ml
9NMP/100ml
4–0–0
4–0–0
2–2–0
13NMP/100ml
13NMP/100ml
9NMP/100ml
4–0–0
4–0–0
2–2–0
13NMP/100ml
13NMP/100ml
9NMP/100ml
2–2–0
1–1–1
0–3–1
9.1NMP/100ml
11NMP/100ml
13NMP/100ml
2–2–0
1–1–1
0–3–1
9.1NMP/100ml
11NMP/100ml
13NMP/100ml
112
10
11
11
10
10
10
10
11
9
11
10
11
10
10
8
10
9
9
20 Nov.
21 Nov.
3–0–1
3–0–1
2–2–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
9NMP/100ml
3–0–1
3–0–1
2–2–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
9NMP/100ml
3–0–1
3–0–1
2–2–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
9NMP/100ml
2–2–0
1–2–0
2–2–0
9.1NMP/100ml
11NMP/100ml
9.1NMP/100ml
2–2–0
1–2–0
2–2–0
9.1NMP/100ml
11NMP/100ml
9.1NMP/100ml
3–0–0
3–1–0
3–1–0
8NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
3–0–0
3–1–0
3–1–0
8NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
3–0–0
3–1–0
3–1–0
8NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
1–1–0
1–1–0
2–2–0
7.3NMP/100ml
7.3NMP/100ml
9.1NMP/100ml
1–1–0
1–1–0
2–2–0
7.3NMP/100ml
7.3NMP/100ml
9.1NMP/100ml
3–1–0
2–2–0
3–1–0
11NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
3–1–0
2–2–0
3–1–0
11NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
3–1–0
2–2–0
3–1–0
11NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
1–1–1
1–1–1
2–2–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
9.1NMP/100ml
1–1–1
1–1–1
2–2–0
11NMP/100ml
11NMP/100ml
9.1NMP/100ml
2–2–0
2–2–0
2–2–0
9NMP/100ml
9NMP/100ml
9NMP/100ml
2–2–0
2–2–0
2–2–0
9NMP/100ml
9NMP/100ml
9NMP/100ml
2–2–0
2–2–0
2–2–0
9NMP/100ml
9NMP/100ml
9NMP/100ml
2–2–0
1–1–1
0–1–3
9.1NMP/100ml
11NMP/100ml
12NMP/100ml
2–2–0
1–1–1
0–1–3
9.1NMP/100ml
11NMP/100ml
12NMP/100ml
3–1–0
3–0–1
3–0–1
11NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
3–1–0
3–0–1
3–0–1
11NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
3–1–0
3–0–1
3–0–1
11NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
1–1–0
1–2–0
1–1–1
7.3NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
1–1–0
1–2–0
1–1–1
7.3NMP/100ml
11NMP/100ml
11NMP/100ml
3–0–0
2–2–0
3–0–1
8NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
3–0–0
2–2–0
3–0–1
8NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
3–0–0
2–2–0
3–0–1
8NMP/100ml
9NMP/100ml
11NMP/100ml
1–1–0
1–1–0
1–1–0
7.3NMP/100ml
7.3NMP/100ml
7.3NMP/100ml
1–1–0
1–1–0
1–1–0
7.3NMP/100ml
7.3NMP/100ml
7.3NMP/100ml
113
10
10
9
9
10
10
9
10
9
10
10
10
A N E X O
15:
C Á L C U L O S
R E A L IZ A D O S
PA R A
L A
E X A C T IT U D
12
R A N G O S D E 10
, 300, 100 y 10 U F C
L a t t a b u la d a p a r a 5 0 d a t o s c o n u n n i v e l d e c o n f i a n z a d e l 0 ,0 5 e s 1 ,6 7
12
R ango 10
U FC
C o lifo r m es T o ta le s
C o lifo r m es F e c a le s
C o lifo r m es T o ta le s
C o lifo r m es F e c a le s
R ango 300 U F C
114
D E
L O S
R ango 100 U F C
C o lifo r m es T o ta le s
C o lifo r m es F e c a le s
C o lifo r m es T o ta le s
C o lifo r m es F e c a le s
R ango 10 U F C
115
A N E X O
16:
C Á L C U L O S
R E A L IZ A D O S
PA R A
L A
P R E C ISIÓ N
12
R A N G O S D E 10
, 300, 100 Y 10 U FC
12
R ango 10
C o lifo r m es T o ta le s
C o lifo r m es F e c a le s
1 6 ,2 6
1 8 ,2 6
116
D E
L O S
R ango 300 U F C
C o lifo r m es T o ta le s
C o lifo r m es F e c a le s
1 1 ,5 8
1 1 ,1 6
R ango 100 U F C
C o lifo r m es T o ta le s
C o lifo r m es F e c a le s
1 1 ,5 8
1 1 ,1 6
117
R ango 10 U F C
C o lifo r m es T o ta le s
C o lifo r m es F e c a le s
1 9 ,8 6
1 8 ,0 4
118
A N E X O
17: C Á L C U L O S R E A L IZ A D O S P A R A L A IN C E R T ID U M B R E D E L O S
R A N G O S D E 300, 100 Y 10 U F C
C o lifo r m es
C o lifo r m es
T o ta le s
F e c a le s
a n tilo g
U 2
U vr
0 .0 0 4 3
1 .0 0 9
1 .0 1 8
1 .0 1 6
A n tilo g
U 2
U vr
0 .0 0 3 9
1 .0 0 9
1 .0 1 8
1 .0 1 6
1 .0 3 2
U vm
0 .0 0 7 1
1 .0 3 2
U vm
0 .0 0 7 1
U rep
1 6 .6 2
2 7 6 .2
U rep
1 6 .6 5
2 7 7 .2
U rec
1 1 .7 6
1 3 8 .3
U rec
7 .8 3
6 1 .3
4 1 6 .5 5
3 4 0 .5 5
I
4 0 .8 2
I
3 6 .9 1
% I
1 4 .7 7
% I
1 3 .3 0
C o lifo r m es
C o lifo r m es
T o ta le s
F e c a le s
a n tilo g
U 2
a n tilo g
U 2
U vr
0 .0 0 9 5
1 .0 2 2
1 .0 4 4
U vr
0 .0 0 9 3
1 .0 2 1
1 .0 4 3
U vm
0 .0 0 6 7
1 .0 1 5
1 .0 3 1
U vm
0 .0 0 6 7
1 .0 1 5
1 .0 3 1
U rep
1 0 .0 3
1 0 0 .6
U rep
1 0 .0 3
1 0 0 .6
U rec
1 .5 5
2 .4
U rec
1 .1 4
1 .3
1 0 5 .0 7 5
1 0 3 .9 7 4
I
2 0 .5 0
I
2 0 .3 9
% I
2 0 .3 7
% I
2 0 .2 6
119
C o lifo r m es
C o lifo r m es
T o ta le s
F e c a le s
a n tilo g
U 2
a n tilo g
U 2
U vr
0 .0 0 9 6
1 .0 2 2
1 .0 4 5
U vr
0 .0 1
1 .0 2 3
1 .0 4 7
U vm
0 .0 0 9 2
1 .0 2 1
1 .0 4 3
U vm
0 .0 0 8 4
1 .0 1 9
1 .0 3 9
U rep
3 .2 1
1 0 .3
U rep
3 .1 5
9 .9
U rec
0 .2 7
0 .0 7
U rec
0 .1 8
0 .0 3
1 2 .4 5 8
1 2 .0 1 6
I
7 .0 6
I
6 .9 3
% I
6 8 .4 0
% I
6 9 .7 5
120