Antígeno de Huddleson - Laboratorios Britania

B1865447
Antígeno de Huddleson
USO
Antígeno usado para la detección de anticuerpos anti-Brucella
(Brucella abortus) mediante la prueba de aglutinación rápida en
placa.
FUNDAMENTO
El antígeno de Huddleson está preparado según normas OPS y
OMS.
Consiste en una suspensión de Brucella abortus (estable y de baja
virulencia, en fase lisa) en solución fisiológica fenolada (ClNa 0.85
% y fenol 0.5 %) cuya concentración final es de 11 % y pH: 6.4-7.0,
a la que se le añade una mezcla de Violeta de Genciana y Verde
Brillante (6 ml/ l de suspensión celular) para obtener una coloración final de antígeno que facilite la visualización de la reacción.
Como regla general, las aglutinaciones rápidas y de grumos gruesos corresponden a Brucelosis agudas, mientras que las que aglutinan más tardíamente con gránulos finos, corresponden a pacientes vacunados o enfermos crónicos.
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN
Código B1865447: útil para 150 determinaciones.
Componentes:
- Antígeno de Huddleson: envase x 5 ml.
- Gotero dispensador.
- Suero control positivo: envase x 0.5 ml.
INSTRUCCIONES
Producto listo para usar.
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
Antígeno de Huddleson: suspensión color celeste azulada.
- Agitar el frasco del Antígeno de Huddleson para homogeneizar
la suspensión y depositar 1 gota del mismo sobre cada gota del
suero.
Importante: colocar el frasco gotero en posición vertical, así se libera 0.03 ml de suspensión por gota.
- Homogeneizar comenzando por la mezcla que contiene el menor
volumen de suero (0.005 ml) hacia el de mayor volumen. Mezclar
rápidamente (15-20 veces) para evitar la desecación.
- Efectuar la lectura inicial dentro de los 2 minutos de realizada la
mezcla y la lectura final antes de los 8 minutos.
Importante: utilizar la luz durante la lectura. Se recomienda encender la luz previamente y apagar luego de mezclar.
No efectuar la lectura luego de 8 minutos de realizada la mezcla.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Resultado positivo: se observa aglutinación entre el suero en estudio y el Antígeno de Huddleson.
Resultado negativo: ausencia de aglutinación.
Positividad: - 100% de aglutinación: - 75 % aglutinación: - 50 % aglutinación: - 25 % aglutinación 4+
3+
2+
1+
Dudoso: ±1
Negativo: no existe aglutinación.
La concentración celular del antígeno es alta y se ajusta para que
tenga una sensibilidad comparable a la del antígeno de tubo (aglutinación lenta).
Títulos significativos son los mayores a 1/80 (equivalente a
1/100 para la prueba rápida)
SI AGLUTINA
SUERO SIN DILUIR
SUERO DILUIDO AL 1/10
0.08
1/25
1/250
0.04
1/50
1/500
0.02
1/100
1/1000
PROCEDIMIENTO
Metodología:
0.01
1/200
1/2000
0.005
1/400
1/4000
- Mediante el uso de pipetas, colocar en la placa los siguientes
volúmenes de suero libre de hemólisis: 0.08, 0.04, 0.02, 0.01 y
0.005 ml.
Nota: de obtener aglutinación positiva hasta el título 1/400 se debe
repetir nuevamente diluyendo el suero al 1/10 con solución fisiológica.
ALMACENAMIENTO
Conservar a 2-8 ºC.
No congelar el Antígeno.
HOJA 1 DE 2
Antígeno de Huddleson
CONTROL DE CALIDAD
El antígeno de huddleson se controla de acuerdo a normas internacionales.
Características técnicas
- Volumen celular: 10 -12%.
- pH: 6,4 - 7.0.
- Sensibilidad frente a sueros patrones de referencia: sueros positivos de población infectada y sueros negativos de población sana:
satisfactorio.
- Control de pureza: satisfactorio.
- Coloración de gram: satisfactoria.
- Control de esterilidad: satisfactorio.
LIMITACIONES
- Si el suero del paciente no se analiza el mismo día de recolección
tiene que ser conservado a 2 – 8 ºC hasta 48 horas o congelarse
a -20 ºC o temperaturas más bajas si se va a analizar con mayor
tiempo.
- Descartar los sueros hemolizados, ya que la Hemoglobina libre
forma un precipitado con el fenol del reactivo.
- Fenómeno de zona: cambio de aglutinación -/+/- o +/-/+/- que
puede ser atribuida a una fase particular del germen que contiene
una sustancia polisacarídica o glucoproteica que inhibe la aglutinación y desaparece al calentar la suspensión durante 1 hora a
100 ºC; otros explican este fenómeno por la existencia de anticuerpos bloqueadores incompletos en Ig γ (G y A) del enfermo y se
debe calentar el suero 30 minutos a 56º C.
- Respetar el tiempo de lectura que se indicó anteriormente.
- Posibilidad de aglutinación cruzada con tularemia, Vibrio, TBC y
Salmonella paratyphi.
- Reacciones falso positivas por aplicación de la vacuna anti-brucelósica en pacientes.
- Luego de mezclar la muestra del paciente con el antígeno, enjuagar la varilla o mezclador de alambre grueso con solución salina
fenicada para eliminar restos de antígeno y secar a temperatura
antes de volver a usar.
rior de vidrio (para evitar que la mezcla se evapore con demasiada
rapidez) o placa de vidrio dividida en cuadrados de 3 cm de lado.
- Pipetas graduadas, micropipetas.
- Varilla o mezclador de alambre grueso doblado para extender la
mezcla entre el Antígeno de Huddleson y la muestra del paciente.
PRECAUCIONES
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. Uso profesional exclusivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o dañado.
- No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterioro, así como tampoco si ha expirado su fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
No pipetear con la boca. No inhalar ni ingerir aerosoles.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y manipularlas apropiadamente siguiendo las normas de bioseguridad
establecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conserva apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del
mismo según reglamentaciones vigentes.
REFERENCIAS
- Huddleson I/F y Abell J. Inf. Dis 1928.
- Ramaciotti Felix. Brucelosis Ed. Asandi 1958.
- Boletín del Comité de Expertos en Brucelosis WHO nº 67. 1953.
- Castañeda M de Ruiz. Brucelosis. La prensa Médica. Méx,1954.
- Foz A y Garriga S. Rev. Mas 1954.
- G. Alton y Lois M. Jones. Las técnicas de laboratorio en Brucelosis. OMS.1969.
- Notas técnicas del Centro Panamericano de Zoonosis.1971.
INDICACIONES AL CONSUMIDOR
Utilizar el producto hasta su fecha de vencimiento.
Conservar el producto según las indicaciones del rótulo.
07/2012 - REV .03 - 31610
MATERIALES NECESARIOS NO PROVISTOS
- Caja con fondo negro o iluminación eléctrica lateral y tapa supe-
SÍMBOLOS UTILIZADOS
DIAGNÓSTICO
IN VITRO
CÓDIGO Nº
ELABORADOR
LABORATORIOS BRITANIA S.A.
LOS PATOS 2175 (C1283ABI)
CABA - ARGENTINA
TEL/FAX 54 11 4306 0041
ESTÉRIL
Nº DE
DETERMINACIÓNES
LOTE Nº
FECHA DE
VENCIMIENTO
LÍMITE DE
TEMPERATURA
INSTRUCCIONES
DE USO
HOJA 2 DE 2