PRÁCTICO N° 8

PRÁCTICO N° 8
CONTROL DE CALIDAD DE AGUA
OBJETIVOS
 Incorporar
conocimientos generales sobre los posibles contaminantes
en agua.
 Conocer los parámetros microbiológicos que debe reunir el agua ya sea
para consumo humano o para algún uso específico (agrícola, riego,
recreacional etc.).
 Conocer
la metodología analítica disponible para realizar el control de
calidad de aguas para consumo humano.
 Adquirir
habilidades y/o destrezas para evaluar la calidad sanitaria de
muestras de agua mediante la búsqueda de microorganismos mesófilos
totales.
 Valorar
la responsabilidad, interacción, cooperación y respeto para
fomentar una eficiente labor grupal.
Instructivo para la toma de
muestras de agua
Análisis microbiológicos
recipientes estériles
Análisis químicos
recipientes limpios
Si es de grifo situado en una
cañería de agua corriente
 Limpiar la boca del grifo
 Dejar correr el agua por 2 o
3 minutos
 Esterilizar el grifo
 Dejar correr el agua
 Tomar la muestra
Si es de un grifo situado en una cañería
de un pozo semisurgente.
Grifos que estén conectados
directamente a las cañerías
ascendentes del pozo
Pozo de uso continuo: correr el agua
por 30 minutos
Pozo fuera de servicio: dejar correr el
agua por 5 horas.
Se procede a la toma de muestra
como en el punto anterior
• Llenado de
frascos hasta 2-3
cm antes de la
tapa para agitar
Evaluación de la calidad microbiológica del agua
 Recuento de microorganismos mesófilos
totales
 Presencia-Ausencia de Pseudomonas
aeruginosa
 Recuento de organismos Coliformes totales y
fecales o termotolerantes
 Presencia-ausencia de Escherichia coli
Evaluación de la calidad microbiológica del agua
Recuento de microorganismos mesófilos totales
Medio PCA (Agar para conteo en placa)
Método de inmersión o embebido
Incubación a 28-30°C por 48 horas
Evaluación de la calidad microbiológica del agua
Presencia-Ausencia de Pseudomonas aeruginosa
Siembra por estriado en dos medios de cultivo diferenciales
Incubación a 37°C por 24 hs
Fluoresceína +
Piocianina +
Medio King B: observación de
fluorecencia bajo luz UV
Medio King A
Evaluación de la calidad microbiológica del agua
Recuento de organismos Coliformes
Método del Número más Probable (NMP)
Medio liquido Mc Conkey
Coliformes totales: incubación a 35-37ºC por 48 hs
Coliformes fecales o termotolerantes: incubación a 44-45ºC
por 48 hs
Positivo: producción de
gas y viraje de color
acidificación del medio.
Negativo: sin viraje
de color y sin
producción de gas.
Evaluación de la calidad microbiológica del agua
Presencia-ausencia de Escherichia coli
Medio sólido EMB-Levine
Incubación a 44-45ºC por 48 hs
Colonias presuntivas de E.
coli de color negro con
brillo verde metalizado
Método para la determinación de
microorganismos mesófilos y coliformes
Mesófilos y Coliformes
totales
Muestra de agua
1 ml
10 ml
1 ml
9 ml H2O
destilada
1 ml
10
-1
Recuento de
mesófilos totales
Concentración doble
1 ml
Organismos coliformes totales
Incubar a 37 °C por 48 hs
LECTURA
Método para la determinación de
microorganismos mesófilos y coliformes
Coliformes fecales o termotolerantes
se repican mediante la técnica del
NMP en medio líquido Mac Conkey
Incubar 44-45ºC por 48 hs
Tubos positivos para
coliformes totales
Lectura
Método para la determinación de
microorganismos mesófilos y coliformes
Escherichia coli
Se siembra por estriado en medio
sólido EMB-Levine
Incubar 44-45ºC por 48 hs
colonias presuntivas
de E. coli
Tubos positivos para
coliformes fecales o
termotolerantes
Confirmación mediante
métodos bioquímicos.
Normas de calidad de agua para consumo humano, uso
recreacional y efluentes
Valores limites permitidos
Mesófilos
totales
(UFC/mL)
Coliformes
totales
(Bacterias/100
mL)
Coliformes
fecales
(Bacterias/100
mL)
Pseudomonas
aeruginosa
(Ausencia/100
mL)
E. coli
(Ausencia/100
mL)
Agua potable
(CAA)
500
<3
NE
Ausente
Ausente
Agua envasada
(CAA)
500
<3
NE
Ausente
Ausente
Recreacional
(EPA)
NE
NE
NE
126
126
Efluentes
(SRH)
NE
< 5000
<1000
NE
NE
NE: no especifica. CAA: Código Alimentario Argentino. U.S. EPA: Agencia de Protección Ambiental
de los EEUU. SRH: Subsecretaría de Recursos hídricos.
Normas calidad de agua para riego según la
OMS (Organización Mundial de la Salud)
Valores limites permitidos /100 mL
Categoría A: riesgo para consumidores y
trabajadores (cultivos hortícolas, campos de
deportes y parques públicos)
Categoría B: riesgo para
(cereales, forrajeras, árboles
Coliformes fecales
E. coli
<100
Ausente
<1000
Ausente
<1000
<1
trabajadores
Categoría C: sin riesgo para consumidores ni
trabajadores (forestaciones)
Actividades
1. Siembra de microorganismos mesófilos totales
-Trabajando en condiciones de asepsia, realizar la siembra de
muestras de agua de distinta procedencia (agua para consumo
humano, bebedero de animales y tambo).
2. Interpretación de resultados
- Realizar el recuento de coliformes fecales y comparar con
normas de referencia.
- Observar colonias de E. coli creciendo sobre medio EMB-Levine.