8/25/2014 Indicadores de patógenos M.Cs. Mercedes Iriarte P. CASA – UMSS Contenido • • • • Tipos de microorganismos Microorganismos Patógenos Reservorio y patogenicidad Microorganismos emergentes y reemergentes • INDICADORES DE PATOGENOS 1 8/25/2014 Tamaño, en orden ascendente: virus, bacterias, protozoarios, micro algas, hongos, helmintos Microorganismos factor común: su pequeño tamaño Bacterias son el grupo mas diverso Protozoarios Virus en huésped Hongos Micro algas Tamaño de los microorganismos • • • • • Poliovirus 25 nanómetros (nm) Bacterias 0,5 – 1 – 2 micrómetros (µm) Giardia 10 micrómetros (µm) Huevo de Taenia solium 30 a 45 micrómetros (µm) Taenia solium 1.8 metros (m) Tamaño de los microorganismos 2 8/25/2014 Reservorio de microorganismos Humano Género de microorganismo causante Enfermedad Cólera Vibrio Encefalitis Enterovirus Entamoebiasis Entamoeba Gastroenteritis Astrovirus, Calicivirus, Coronavirus, Rotavirus Hepatitis Animal Medioambiental Calicivirus, Hepatovirus Meningitis Enterovirus Campylobacteriosis Campylobacter Cryptosporidiosis Cryptosporidium Giardiasis Giardia Leptospirosis Leptospira Encefalitis Naegleria Colera Vibrio Legionelosis Legionella 3 8/25/2014 Virus • Consisten de un ácido nucleico (RNA o DNA) (información genética) rodeado de una capa de proteina o cápside. Sobreviven por periodos largos en el medio ambiente (no necesitan alimento para sobrevivir) • Virus que infectan a bacterias - bacteriofagos. Colifagos – virus que infectan a bacterias intestinales o coliformes. Utilizados como indicadores de contaminación Bacterias Organismos procariotas poseen membrana y pared celular. Bacterias entéricas – crecen en el tracto intestinal. Bacterias patógenas entéricas – generalmente no sobreviven por periodos prolongados de tiempo en el agua 4 8/25/2014 Algas o cyanobacterias • Algas verde azules o cyanobacterias Organismos procariotas que no contienen un núcleo organizado. Se presentan en forma unicelular, colonias o filamentos. Son responsables para la floración algal en lagos y otros ambientes acuáticos. Algunas especies producen toxinas (matan animales domésticos o causan enfermedad en humanos) Protozoos y Helmintos • Protozoos parásitos que viven en el tracto intestinal son capaces de producir quistes/ooquistes resistentes al medioambiente (pared celular resistente – resistencia a la desinfección) • Helmintos (gusanos) son multicelulares parásitos del humano. Tienen un hospedero intermediario y final (humano) 5 8/25/2014 Huevos de helmintos Observados al microscopio óptico Ascaris Huevos de Ascaris tal como se observa al microscopio. Se presentan en el ambiente Los gusanos (estadío en el huésped), puede salir por la nariz o la boca 6 8/25/2014 Síntomas de las helmintiasis, Incidencias en Bolivia (datos antiguos, no uniformes e incompletos)* - Ascariasis (5 a 83% y 15 a 96% - Valles y trópico) • Malnutrición, reducción del apetito, menor tolerancia a la actividad física. • Complicaciones abdominales: obstrucción intestinal y de vesícula biliar, apendicitis, perforación intestinal, absceso hepático, y otros. - Trichuriasis (66% a 87% incidencia – Valles y Trópico) • • Colitis crónica con mucus y sangre - anemias Diarreas y disentería - Teniasis y Neurocisticercosis (2% en valles) • • Bulimia, anorexia, dolor abdominal, diarrea o constipación, irritabilidad, cambio de carácter, urticarias entre otros. Neurocisticercosis: se manifiesta por epilepsia secundaria Los síntomas son reversibles con tratamiento oportuno. *(Ministerio de salud y deportes 2006) Impacto de las parasitosis Costo de las hospitalizaciones, tratamientos ambulatorios, ausencia al trabajo, malnutrición, retardo en el crecimiento, capacidad física e intelectual comprometida. 7 8/25/2014 Que son las enfermedades infecciosas emergentes? Enfermedades infecciosas con incidencia en humanos que incrementó en las últimas 2 décadas. Estas enfermedades incluyen: Nuevas infecciones resultantes de cambios o evolución de organismos existentes. Dispersión de infecciones conocidas a regiones o áreas geográficas nuevas o poblaciones. Infecciones no reconocidas previamente aparecen en áreas en proceso de transformación ecológica Infecciones antiguas reemergen como resultado de resistencia antimicrobianas o en mal manejo de las medidas de salud pública. Patógenos emergentes y reemergentes Según (Gonzales, 2008) Las causas de la emergencia de enfermedades infecciosas están dadas por: Cambios ecológicos: agricultura, represas, cambios en ecosistemas acuáticos, deforestación, reforestación, inundaciones, sequías, cambios climáticos. Comportamiento humano: eventos sociales, crecimiento y migración de la población, guerras, hacinamiento, conflictos civiles, conducta sexual. Ej. Introducción y diseminación de VIH, brotes de dengue Viajes y comercio internacional: viajes aéreos, transportación de personas y mercancías. Ej. Malaria, diseminación de vectores, roedores transmisores de hantavirus, cólera, diseminación de Vibrio cholerae O139. Desarrollo tecnológico e industrial: globalización de suministros de alimentos, transporte de tejidos y órganos, amplio uso de antibióticos, drogas inmunosupresoras. Ej. Síndrome urémico hemolítico causado por Escherichia coli O157:H7, hepatitis asociada a transfusiones, enfermedades oportunistas en pacientes inmunodeprimidos. Cambios y adaptaciones microbianas: evolución microbiana como respuesta de selección en el ambiente. Ej. Resistencia antimicrobiana, células viables pero no cultivables. Crisis en las medidas de salud pública: programas de prevención reducida o crítica, saneamiento y medidas inadecuadas en el control de vectores. Ej. Reemergencia de tuberculosis en E. U., cólera en campamentos de refugiados en África, reemergencia de difteria en Rusia. 8 8/25/2014 Ejemplo de patógenos emergentes Bacterias • Legionella • Varias cepas de E. coli patogénicas – O157H7, O111, etc. • Vibrio cholerae, vulnificus, … • Clostridium difficile • MRSA Ejemplo de patógenos emergentes Viruses • Norovirus • Coronavirus (SARS, MERS,…) • Hepatitis E 9 8/25/2014 Ejemplo de patógenos emergentes Protozoarios • • • • Naegleria fowlerii Toxoplasma gondii Cyclospora Microsporidia Ejemplo de patógenos emergentes Algas • Algas toxigénicas de múltiples especies • Rango es expandido debido a la polución y cambio climático 10 8/25/2014 Ejemplo de patógenos emergentes Hongos Menos comprendido especialmente con respecto a los agentes transmitidos por el agua, pero varios están en el horizonte. • Cryptococcus Una cantidad han sido encontrados en el sistema de agua y son moderadamente resistente a la desinfección. o Aspergillus fumigatus Bacterias emergentes en aguas de Cochabamba… con resistencia a la desinfección* • Enterobacter aerogenes y Enterobacter cloacae, mayor resistencia a desinfección, Klebsiella ozaenae y Aeromona hydrophila, Mayor resistencia que el control positivo Pseudomonas aeruginosa. • Sobrevivencia a todas las concentraciones de cloro y tiempos de contacto a los que fueron expuestas… incremento de los tiempos de contacto con el cloro? • … continuar los estudios * Trabajo en proceso de publicación 11 8/25/2014 *Microorganismos resistentes a antibióticos en aguas -Cochabamba • Especies de Enterococos (E. faecalis, E. faecium, E. durans y E. dispar) • Resistentes a toda una clase de antibióticos denominados fluoroquinolonas y a la Tetraciclina • Riesgo de transmisión de genes de resistencia a microorganismos patógenos – en el ambiente e intrahospitalaria * CASA-UMSS Congreso XXXII Congreso Interamericano de Ingeniería Sanitaria y Ambiental AIDIS 2010 Organismos de reservorio animal que afectan al humano 12 8/25/2014 a Enfermedades infecciosas de notificación nacional 13 8/25/2014 Indicadores microbiológicos 14 8/25/2014 Rol de los indicadores en la microbiología de aguas Indicador de la eficiencia de tratamiento Una medida de, qué tan bien, un proceso o conjunto de procesos se están realizando en la eliminación de patógenos potenciales. Indicador de riesgo a la salud humana Una medida de la calidad higiénica del agua Breve reseña histórica El agua como un vector de enfermedades • Tifoidea fue conocida en N. América desde sus inicios • El cólera emergió en la centuria del 19 • A mediados de la centuria del 19 se reconoció la conexión entre agua y salud • Mientras que el agua como un vector de enfermedad era reconocida mucho antes a la teoría del germen. 15 8/25/2014 Origen de la preocupación por el agua y la salud Saneamiento temprano en Berlín Teoría temprana del germen como indicadores • Primero se usó conteo total en placa, pero muchos lugares usaban diferentes combinaciones de tiempo/temperaturas. • Investigadores propusieron luego el uso de Bacillus coli como índice de la contaminación en aguas de superficie. 16 8/25/2014 Como se llegó a los coliformes totales • Horrocks (1901) da crédito al uso del término "coliformes" para el ensayo definido operacionalmente. • Incluso el y otros reconocieron que no todos los coliformes son de origen residual humano, • Coliforme total se convirtió en el término favorito. Que ha cambiado • • • Desde la década de 1950 muchos han enumerado directamente virus, bacterias, protozoos en las aguas, pero utilizando métodos clásicos. En general, un patógeno ----→ un método, muy tedioso. Una vez medido (o encontrado) y que? Las cosas han cambiado • • Rápida cuantificación de amplio espectro de patógenos por métodos similares (qPCR, secuenciación) La disponibilidad de cada vez mayor número de relaciones dosisrespuesta de patógenos específicos 17 8/25/2014 Una visión para el futuro Enferme dades Análisis genómico (qPCR, secuenciaci ón Batería de patógenos Modelos de dosis respuesta Evaluación de la viabilidad Riesgo Pero nosotros nunca podríamos “eliminar” los indicadores Las evaluaciones rápidas en comunidades aisladas, rurales, y en las situaciones de emergencia Muestras de “triage” (clasificar, elegir) para mayores estudios El trabajo continuo necesario en métodos simples y de bajo costo 18 8/25/2014 PROPIEDADES DE UN INDICADOR IDEAL DE CONTAMINACIÓN FECAL 1. Ser aplicable a todos los tipos de agua. 2. Su densidad debe estar relacionada con el grado de contaminación fecal. 3. El tiempo de supervivencia en el agua debe ser superior al de los patógenos entéricos. 4. Debe desaparecer rápidamente del agua, por procesos de autodepuración natural o por procesos artificiales. 5. Ser detectados en ensayos de rutina y que provean resultados confiables. 6. No debe ser peligroso para el hombre y otros animales. GRUPO COLIFORME GÉNEROS Escherichia Klebsiella FUENTE HECES (humanos y animales) HECES, AMBIENTE Enterobacter HECES, AMBIENTE Citrobacter AMBIENTE Serratia AMBIENTE 19 8/25/2014 Limitaciones de los coliformes fecales y E. coli • Algunos coliformes termotolerantes emanan de fuentes no humanas. Aunque esto puede no ser tan malo ya que ahora sabemos que los patógenos pueden provenir de fuentes animales. • Coliformes termotolerantes pueden decaer en el medio ambiente (y durante el tratamiento) más rápidamente que patógenos no bacteriano (virus, protozoarios) (falso negativo) • Emisión de organismos viables no cultivables • Algunas E. coli, ej, O157:H7 no son enumerados en algunos metodos de E. coli (falso negativo) • Realmente no hay un buen sentido de las tasas de falsos positivos y negativos Limitaciones como indicadores de la eficiencia de tratamiento • Los coliformes son mas sensibles a desinfectantes que algunas bacterias entéricas , muchos viruses y también protozoarios. • Por lo tanto si tenemos “x” log de remoción de indicadores en una secuencia de tratamiento, es probable que tengamos menos de “x” log de remoción de patógenos clave 20 8/25/2014 Indicadores bacterianos • Bacterias entéricas del tracto gastrointestinal (humano y animales de sangre caliente) y patógenas se encuentran en el agua – Detección y recuento en laboratorio es laborioso, lento y costoso – Coliformes más rápido, sencillo y menos costoso. • Otras bacterias como indicadores alternativos: Clostridium, Pseudomonas, Enterococus Indicadores alternativos • En muchos países en desarrollo, los principales riesgos a la salud son las helmintiasis • Helmintos – indicadores de todos los organismos sedimentables de mayor tamaño (quistes de Giardia, amebas) • Quistes de protozoarios y huevos de helmintos se eliminarán en la misma proporción. 21 8/25/2014 Parásitos: Protozoarios y Helmintos • Protozoarios: - Quiste: relativamente resistente a la inactivación por sistemas de tratamiento convencionales. De mayor importancia: Giardia sp. y Cryptosporidium sp. • Huevos de helmintos: Capacidad de permanecer en el suelo por largo tiempo. El estudio de los HH ha hecho necesaria la selección de un parasito indicador a nivel de laboratorio: Ascaris lumbricoides Buen indicador del comportamiento de los HH por sus ventajas: a. Persiste en el medio ambiente por muchos meses, pero no se multiplica. b. Se puede identificar fácilmente. c. El Índice de parasitismo a nivel mundial es muy alto Normativa e indicadores • Los valores de CF (≤ 1000/100ml)y HH (1/L) por debajo de los valores máximos permisibles no garantizan la ausencia de otros patógenos Giardia, Cryptosporidium, E. coli O157, Clostridium perfringes, virus entéricos y otros 22 8/25/2014 Norma boliviana – Aguas de consumo • NB 512 • Valor máximo aceptable - Coliformes totales 0 UFC/100 ml - Coliformes 0 UFC/100 ml termtolerantes - E. coli 0 UFC/100 ml - Bacterias 500 UFC/1 ml heterotróficas o aerobias mesófilas - Pseudomonas 0 UFC/100 ml aeruginosa - otros Normas bolivianas Ley y reglamento del Medio Ambiente. Ley No 1333 (varios capítulos) Protección y conservación del medio ambiente y recursos naturales regulando acciones del hombre en la naturaleza – desarrollo sostenible – mejorar la calidad de vida de la población. • NB 1333 (reglamento en contaminación hídrica) Límites permisibles para descargas líquidas: Coliformes temotolerantes: (NMP/100ml) : 1000 NMP/100 ml de muestra 23 8/25/2014 Consideraciones respecto al riesgo de patógenos en el agua residual *la viabilidad en el suelo puede ser de años Microorganismos Parásitos Protozoarios Dosis infectiva Resistencia a desinfección Viabilidad en el agua Inmunidad 1. Giardia Baja (1 a10) Si 1a3 meses 2. Cryptosporidium Baja (1 a10) Si 1 a 3 meses limitada Relacionado a un amplio rango de síntomas, especialmente severos y crónicos en pacientes débiles y capaz de causar la muerte. Si Meses* Malnutrición, reducción del apetito, menor tolerancia a la actividad física. Complicaciones abdominales: obstrucción intestinal y de vesícula biliar, apendicitis, perforación intestinal, absceso hepático, y otros. limitada Helmintos 1. Ascaris, Trichuris, Tenias Mínima (1) limitada Afecciones Severos desordenes gastrointestinales y episodios de malnutrición Bacterias (E. coli, Salmonella, V. choleraea) Alta No Horas o días Si Alteraciones gastrointestinales y otras. Virus (colifagos) Baja - ? No Días o meses-? Si Hepatitis, diarreas, otras “Indicadores” en casos particulares • En casos de epidemias, enfermedades puntuales, situaciones particulares, los indicadores clásicos no son de utilidad. • Deberá recurrirse a la identificación del microorganismo causante de los síntomas o enfermedad. • Ejs: cólera, peste bubónica, ébola 24 8/25/2014 Guinea, Nigeria, Liberia, Congo OMS: 1220 muertes hasta agosto 2014 mas de 2400 infectados en África occidental Ebola (VHF-fiebre hemorrágica viral) VHF causadas por virus de cinco familias distintas: Arenaviridae, Bunyaviridae, Filoviridae, Flaviviridae y Paramyxoviridae. Cada una de estas familias comparten una serie de características: Son todos los virus de ARN, y están cubiertos o envueltos en una capa (lípidos) graso. Su supervivencia depende de un huésped animal o insecto, llamado el reservorio natural. Los virus están geográficamente restringidos a las zonas donde viven sus especies huésped. Los seres humanos no son el reservorio natural de alguno de estos virus. Los humanos se infectan cuando entran en contacto con los huéspedes infectados. Después de la transmisión accidental los seres humanos pueden transmitir el virus a otros. Los casos humanos o brotes de fiebres hemorrágicas causadas por estos virus ocurren esporádicamente e irregularmente. La ocurrencia de brotes no son fáciles de prever. Con algunas notables excepciones, no existe una cura o tratamiento farmacológico establecido para las VHF. 25 8/25/2014 Cuestionamientos a cerca del ebola • • • • • ¿Que es el Ébola? Es la causa de una enfermedad de la fiebre hemorrágica viral. Los síntomas incluyen: fiebre, dolor de cabeza, dolores articulares y musculares, debilidad, diarrea, vómitos, dolor de estómago, falta de apetito, y sangrado anormal. Los síntomas pueden aparecer entre 2 y 21 días después de la exposición a ebola virus aunque 8-10 días es más común. ¿Cómo se transmite el Ébola? Por contacto directo con la sangre o los fluidos corporales de una persona infectada o sintomática, de la exposición a objetos (como agujas) que han sido contaminados con secreciones infectadas. ¿Puede Ébola transmitirse por el aire? No. Ebola no es una enfermedad respiratoria como la gripe, por lo que no se transmite a través del aire. ¿Se puede adquirir Ébola de los alimentos o el agua contaminada? No. Ebola no es una enfermedad transmitida por alimentos. No es una enfermedad transmitida por el agua……? Animales infectados, silvestres, monos, murciélagos… ¿Puedo obtener Ébola de una persona que está infectada pero no tener ningún síntoma? Las personas que son no sintomáticos, no son contagiosas. Para que el virus se transmita, una persona tendría que tener contacto directo con un individuo que está experimentando síntomas. Factor cultural y antropológico es importante para prevenir y tratar a enfermos • En 2003 se convirtió en un fuerte problema social (resistencia en las medidas de prevención, asesinatos de profesores de colegio…) • En 2014 resistencia al aislamiento de pacientes, saqueo de hospitales, pacientes a la fuga 26 8/25/2014 Tratamiento • • • • No existe cura hasta el momento Sueros e hidratación A nivel de vacunas en el futuro Dos voluntarios americanos infectados con ébola han sido dados de alta. GRACIAS 27