Descargar Archivo - Instituto Nacional de Salud

Busca conocer el
perfil de resistencia
del
VIH
a
los
antiretrovirales,
para ello se analiza
el material genético
del virus
TOMA DE MUESTRA
Se realiza en tubos que
contienen
un
reactivo
denominado EDTA para
evitar la coagulación de la
sangre y poder separar el
plasma, en el cual se
busca el VIH.
SEPARACIÓN DEL PLASMA Y EXTRACCIÓN DEL
MATERIAL GENETICO (ARN )
Se realiza la separación del plasma del resto de
la sangre mediante centrifugación. De este
plasma se purifica el material genético que es
es un Ácido Ribonucleico (ARN). Este
procedimiento se realiza una cabina de
Bioseguridad .
TRANSCRIPCIÓN REVERSA (RT) Y
REACCIÓN DE LA CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)
Con la ayuda de una enzima
Transcriptasa Reversa se convierte el
ARN en Ácido Desoxirribonucleico
(ADN) para luego realizar la técnica de
Reacción en Cadena de la Polimerasa,
lo cual nos permite tener múltiples
copias de una región especifica del
ADN.
ELECTROFORESIS
Luego,
el
ADN
del
virus
amplificado es colocado en una
gel (matriz), y en un campo
eléctrico, para ser separado según
su tamaño. Esta técnica se le
conoce como electroforesis.
PURIFICACIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE PRODUCTOS
DE PCR
El ADN amplificado es
purificado
y
se
cuantifica.
ÁREA SEGUNDA AMPLIFICACIÓN
SEGUNDO PCR
En los casos que sea
necesario se realizará una
segunda amplificación de
otra región del ADN del
virus.
SECUENCIAMIENTO DE PRODUCTOS DE PCR
(Equipo : Analizador Genético)
Para conocer la secuencia del ADN del
virus se realiza un procedimiento especial
denominado Secuenciamiento Automático,
para ello el ADN amplificado y purificado
se mezcla con unos reactivos y se coloca
en el Analizador Genético.
ANÁLISIS DE SECUENCIAS
DE ADN DEL VIH
La secuencia de ADN del virus obtenido es
ingresado en la base de datos de la
Universidad de Stanford empleando para
ello el Programa HIVdb. Este programa
analiza las secuencias y determina si están
presentes las mutaciones del virus
relacionadas a la resistencia antiretroviral.
INFORME DE RESULTADO
El resultado ingresa
al sistema NETLAB
en la página web del
Instituto Nacional de
Salud
(www.ins.gob.pe),
con la finalidad que
los médicos puedan
acceder “en linea” a
los resultados de los
pacientes y utilizarlo
para decidir cual es
el mejor tratamiento
antiretroviral