Acta Microscopica Vol 16 No1-2,(Supp.2)2007 168 Cusco-Peru September 2007 CONSERVACION EVOLUTIVA DE LA REACCION A LA TINCION EN LAS CELULAS SANGUINEAS DE INVERTEBRADOS A VERTEBRADOS POR MICROSCOPIA DE LUZ. Cruz García Luis Fernando1, Pérez Torres Armando2, Lanz Mendoza Humberto3, Zenteno Galindo Edgar.4 y Sierra Castillo Claudia.1,5 Laboratorio de Biología Celular, Facultad de Ciencias Biológicas UAEM1. Lab. de Inmunología Comparada de Piel y Mucosas, Depto. de Biología Celular Facultad de Medicina, UNAM2, Centro de Investigación sobre Enfermedades Infecciosas, Instituto Nacional de Salud pulica3, Depto. de Bioquímica, Fac. de Medicina, UNAM4. Lab. de Bioingeniería Acuícola5 Centro de Investigaciones Biológicas. UAEM. Av. Universidad 1001 Col. Chamilpa. Tel. Fax 01777 3297047 Ext. 3532. [email protected]; [email protected]. INTRODUCCION. La sangre es un tejido conjuntivo cuya matriz es liquida, esta compuesto por eritrocitos, leucocitos y plaquetas. Los eritrocitos representan alrededor del 43 al 45 % del volumen sanguíneo, son los transportadores del oxígeno a los tejidos (1). En el humano los leucocitos según su forma y presencia o ausencia de gránulos citoplasmáticos se pueden clasificar en: agranulares como los linfocitos y monocitos; y los granulares que comprenden a los neutrófilos, eosinófilos y basófilos. Los leucocitos desempeñan un papel importante en el mecanismo de inmunidad innata y adaptativa en la que participan los componentes celulares y humorales, que se activan ante la presencia de un antígeno en el organismo (2). La identificación de los grupos celulares se puede realizar con diferentes métodos de laboratorio como la de frotis de sangre periférica que son contrastadas con colorantes de tipo Romanowsky permitiendo la identificación de estas células. Estudios realizados en algunos vertebrados, han revelado diferencias morfológicas y de reacción a al tinción como el caso de los heterófilos. (3). En invertebrados en el tejido sanguíneo o hemolinfa se encuentran en circulación los hemocitos considerados análogos a los leucocitos de vertebrados; en los hemocitos se han encontrado diferencias morfológicas; sin embargo, estas características las han reportado con la técnica de células en suspensión y recientemente hemos clasificado a estas células por tinción de Wright con la técnica de frotis. JUSTIFICACIÓN. Los hemocitos y los leucocitos participan en el mecanismo de defensa por lo que cada grupo celular presenta una característica particular que se conservan durante la evolución. Por lo que es importante determinar las características de los grupos celulares para determinar la analogía que existe entre los hemocitos y los leucocitos. OBJETIVO GENERAL: Establecer las características morfológicas y la comparación de los grupos celulares de la sangre de organismos vertebrados e invertebrados por citoquímica. MATERIALES Y METODOS. En los vertebrados la sangre es obtenida de una vena de cada uno de los organismos; en el caso de los invertebrados la hemolinfa es obtenida de la zona pericárdica, en ambos casos se toma la muestra de sangre con una jeringa, se coloca una gota de muestra en un portaobjetos y se realiza el frotis que se contrasta con la tinción de Wright tipo Romanosky. Las observaciones morfométricas, de reacción a la tinción y toma de imágenes se realiza por microscopia de luz con un microscopio Nikon 50i. RESULTADOS: Cada uno de los grupos de vertebrado e invertebrados presentan características particulares en cada uno de sus respectivos grupos celulares de la sangre por la tinción de Wright. En los invertebrados se han encontrado hemocitos granulares y agranulares que se clasificaron de acuerdo a la reacción de tinción en: neutrocitos, eosinocitos, basofilocitos que son granulocitos y los agranulocitos comprenden a los nucleocitos pequeños y grandes se encontraron tres subgrupos los eosinocitos y basofilocitos con gránulos pequeños y nucleocito grande de núcleo azul (Figura 1). En los vertebrados los eritrocitos de los mamíferos son pequeños , redondos y anucleados que miden 7 µm; sin embargo los otros grupos de vertebrados poseen eritrocitos elípticos nucleados, en los peces de agua dulce miden 11x9 µm y en los de agua salada miden 18x12 µm en los anfibios 22x15 µm en los reptiles 21x14 µm, en aves 11x6 µm; en el caso de los leucocitos los neutrófilos se presentan en los mamíferos y los anfibios mientras que en el resto de los vertebrados estas células son sustituidas por los heterófilos que son células que presentan gránulos alargados con reacción a la tinción acida que cumplen las unciones de los neutrófilos sin embrago se han encontrado heterófilos en el armadillo lo que sugiere que pueden presentarse estas células aun en los mamíferos, los eosinófilos son células que se presentan en todos los vertebrados conservando la característica de gránulos redondos con reacción a la tinción acida y su núcleo generalmente bilobulados; los basófilos presentan gránulos redondos con reacción básica a la tinción los monocitos y linfocitos son de formas variadas pero se mantienen evolutivamente los patrones de coloración en base a la reacción de tinción. En la figura 2 se muestran los eritrocitos de los vertebrados y en la figura 3 están los heterófilo y los neutrófilos que son lo grupos en lo que se aprecia mas las diferencias morfológicas entre los diferentes grupos de vertebrados. G E CONCLUSIONES: ¾ Sin duda la diversidad celular del tejido sanguíneo en cuanto a la morfología surge de las necesidades los organismos al adaptarse al medio que los rodea y a las estrategias que emplea para su sobrevivencia. ¾ Es importante explicar desde un punto de vista ecológico y evolutivo las características observadas en estos organismos, que permitirá el desarrollo de estudios posteriores con la finalidad de inferir una historia evolutiva a través del establecimiento de las relaciones genealógicas de las células de la sangre. ¾ Existen características análogas entre los hemocitos de invertebrados y leucocitos de vertebrados en cuanto a la reacción de tinción. ¾ En los vertebrados existen diferencias en las características de cada uno de los grupos celulares de la sangre sin embargo se mantiene en patrón de reacción a la tinción. ¾ Para los hemocitos de invertebrados se propone una nueva nomenclatura en base a la reacción de tinción. LITERATURA. [1] Hall, G. (2000). Tratado de Fisiología Médica, McGraw-Hill Interamericana [2] Estrada, F. E. y Uribe, A. M. (1998). Atlas de Histología de los Vertebrados. Editorial UNAM, (2002) 48. [3] Aguilar, M. M. y Bello B. C. (1996) Manual General de Técnicas Histológicas e Histoquímicas. Editorial las Prensas de la Ciencia, 130.