Placas de Petri PALCAM Listeria Agar Selectivo Producto detección de L. monocytogenes en alimentos y muestras ambientales, así como Placas de Petri conteniendo PALCAM Listeria lo recomienda OADC para la detección del Agar Selectivo. ARAVANLABS le suministra organismo en los alimentos. Asimismo, se el pack de placas ya preparadas empacadas puede utilizar para el aislamiento de L. en triple bolsa totalmente selladas. Cada monocytogenes placa está individualmente protegida con clínicas. parafilm. Este embalaje prolonga la vida de La base de agar sangre Columbia suministra las placas, evitando la deshidratación y los nutrientes y cofactores necesarios para contaminación. el crecimiento selectividad Uso en a de el partir de Listeria. medio muestras Se logra mediante la presencia de cloruro de litio, sulfato de polimixina B, acriflavina-HCI y ceftazidima, PALCAM Listeria Agar Selectivo es un medio que suprime el crecimiento de la mayoría de selectivo el los organismos diferentes de las especies de Listeria Listeria presentes en alimentos y muestras de aislamiento y diferenciación la detección para de monocytogenes y otras especies de Listeria clínicas. a partir de alimentos y muestras clínicas. PALCAM se basa en la hidrólisis de esculina diferenciación en el medio y la fermentación del manitol. Todas las Fundamento especies de Listeria hidrolizan la esculina, PALCAM Listeria Agar Selectivo se basa en la fórmula de van Netten et al, quienes desarrollaron La este medio selectivo y diferencial para su uso en el aislamiento y recuento de las especies de Listeria a partir como lo demuestra el oscurecimiento del medio. El esculetina producto de la hidrólisis, la (=6,7-dihidroxicumarina), reacciona con iones férricos hasta producir un complejo de marrón a negro. de muestras alimentarias. APHA y AFNOR recomiendan utilizar el medio PALCAM para detectar alimentos, Listeria y la monocytogenes International en Dairy Federation lo recomienda como medio en placa adicional para la detección de las especies de Listeria en la leche y los productos lácteos. Health Canada también recomienda el medio PALCAM Mail: [email protected] Cel.: (+598) 92 746 190 www.aravanlabs.com.uy para la 1 Preparación efectuar la lectura después de 18 – 24 h y 42 – 48 h. Se suspendieron 35,9 g de PALCAM Listeria Base en 500mL de agua purificada. Se dejó Interpretación de resultados reposar 5 minutos. Se calentó con agitación frecuente y llevó a ebullición para disolución Las colonias de Listeria son de color verde total. grisáceo con un halo negro. La confirmación Se distribuyó en recipientes adecuados y esterilizó en autoclave durante de 15 minutos a 121°C. Se mantuvo en baño mediante subcultivo en medios apropiados e de agua y dejó alcanzar los 50ºC. Se identificación bioquímica/serológica. la presencia de Listeria se realiza disolvió el liofilizado del suplemento PALCAM agregando 1mL de agua destilada y se agregó al PALCAM base. Se agitó y distribuyó en placas de Petri estériles en condiciones asépticas. El proceso fue controlado por monitoreo ambiental. Cada placa de Petri fue sellada con parafilm previamente esterilizado. los medios aprobados utilizados para el aislamiento para la detección selectiva y diferencial de Listeria monocytogenes y otras especies de Listeria. Listeria monocytogenes y otras especies de Listeria aspecto. Por tanto, todos los aislados deben identificarse con los procedimientos bioquímicos y/o serológicos a nivel especie. La incubación de este medio en una atmósfera aerobia enriquecida con dióxido de carbono o en una atmósfera microaerobia puede causar un cambio de Almacenamiento color de rojo a amarillo o naranja en el de Petri conteniendo PALCAM Listeria Selectivo a 2-8ºC. indicador de pH rojo fenol, lo que se asemeja a una fermentación de manitol falsa positiva. Por tanto, se prefiere una atmósfera aerobia. Procedimiento método de crecen y presentan colonias del mismo Agar Selectivo, medio color rojo adecuado placas selectivo En este medio, todas las especies de Listeria Placas de Petri conteniendo PALCAM Listeria Aplicar PALCAM Listeria Agar Selectivo es uno de a partir de muestras alimentarias y clínicas. Características del producto Almacenar Limitaciones Determinadas seleccionado para aislamiento, recuento, búsqueda o control ambiental. Incubar el medio en atmósfera aerobia durante 42 – 48 h a 35 – 37 °C y Mail: [email protected] Cel.: (+598) 92 746 190 www.aravanlabs.com.uy cepas de Listeria pueden crecer lentamente en este medio. Por tanto, las placas nuevamente inoculadas si se deben incubarse produce resultado negativo después de 18 – 24 h. 2 La Listeria puede cantidades muy estar presente pequeñas en en Referencias ciertas muestras que se encuentran por debajo del Van Netten, P., I. Perales, A. Van de nivel de detección de este medio. En estos Moosalijk, G. D. W. Curtis, and D. A. A. casos, Mossel. 1989. Liquid and solid selective tal vez sea necesario el enriquecimiento previo. differential media for the detection and enumeration of L. monocytogenes and other Precauciones Listeria spp. Int. J. of Food Microbiol. 8:299317. -Solamente para uso diagnóstico in vitro. L’association Uso profesional exclusivo. (AFNOR). 1993. - No utilizar el producto si existen signos de Detection of contaminación o deterioro, Routine Method, V 08-055. AFNOR, Paris. así française de Food Listeria normalisation Microbiology- monocytogenes- como tampoco si ha expirado su fecha de International Dairy Federation. 1990. Milk vencimiento. and milk products - Detection of Listeria - Utilizar ropa protectora cuando se manipula el producto. - Considerar las monocytogenes. IDF International muestras como Provisional Standard no. 143. International Dairy Federation, Brussels. potencialmente infecciosas y manipularlas Ryser, E.T., and apropiadamente siguiendo las normas de Listeria. In: Downes, F.P., and K. Ito. bioseguridad establecidas por el laboratorio. Compendium - Las características del producto pueden microbiological examination of foods. 4th alterarse si no se conserva apropiadamente. edition. American Public Health Association - Descartar el producto que no ha sido (APHA). Washington, D.C. USA. utilizado y los desechos del mismo según Farber, J. M., D. W. Warburton, and T. reglamentaciones vigentes. Babiuk. of 1994. monocytogenes Indicaciones al consumidor producto hasta su fecha de vencimiento. Conservar Donnelly. methods Isolation from all 2001. for of the Listeria food and environmental samples. Health Protection Branch Utilizar el C.W. Ottawa, MFHPB-30. Polyscience Publications, Quebec. Bacteriological Analytical Manual. American el producto indicaciones del rótulo. según las Organization of Analytical Chemists., 8th ed., revision A, 1998. AOAC International, Gaithersburg, MD, USA. Mail: [email protected] Cel.: (+598) 92 746 190 www.aravanlabs.com.uy 3