Concentraciones de factores de crecimiento en plasma enriquecido

Artículo original
Rev Hematol Mex 2015;16:294-305.
Concentraciones de factores de
crecimiento en plasma enriquecido
con plaquetas, leucocitos o
eritrocitos. Estudio descriptivo de
75 pacientes
Jesús Alcaraz1
Antonio Oliver2
María Sánchez Jusana3
Jerónimo Lajara4
1
Unidad de Hematología, Unión Murciana de Hospitales, Departamento de Hematología de la Facultad
de Medicina de la Universidad Católica San Antonio,
Murcia, España.
2
Unidad de Neuroendocrinología, Hospital Rúber,
Madrid, España.
3
Unidad de Hematología, Unión Murciana de Hospitales, Murcia, España.
4
Videdecano de la Facultad de Medicina de La
Universidad Católica San Antonio, Murcia, España.
RESUMEN
Antecedentes: el uso de los factores de crecimiento plaquetario con
infinidad de aplicaciones clínicas se está abriendo paso con más fuerza,
incluso muchas veces sobrepasando la evidencia científica existente.
Aun así, existe un bajo control en el contenido final del producto obtenido. Los factores de crecimiento, o lo que comúnmente se denomina
plasma rico en plaquetas (PRP), son medicamentos reconocidos por
las distintas agencias estatales, no exento de efectos secundarios, lo
que implica un perfecto conocimiento de las diferentes técnicas de
obtención, así como de la composición final del producto obtenido
para poder realizar un seguimiento o trazabilidad en el paciente.
Objetivo: analizar minuciosamente el contenido en factores de crecimiento de las distintas fracciones celulares de la sangre total centrifugada.
Material y método: estudio descriptivo, tipo serie de casos, que seleccionó una muestra de 75 pacientes de raza caucásica, 40 de género
masculino, con límites de edad de 15 y 65 años, hematológicamente
sanos, siguiendo las normas de inclusión analíticas para Autotransfusión
de la Sociedad Española de Hematología y Hemoterapia en cuanto a
controles bioquímicos, hematológicos y serológicos previos a la obtención de las muestras de sangre total.
Resultados: en el PRP rico en leucocitos se obtuvo una cantidad de factores de crecimiento final entre 7 y 10 veces mayor a las concentraciones
basales del paciente, con una concentración casi 45% mayor para los
factores TGF-b y VEGF; mientras en los plasmas ricos en plaquetas se
observa un predominio casi 45% mayor de factores de crecimiento
tipo PDGF-AB e IGF-1.
Conclusión: hubo predominio de factores de crecimiento tipo VEGF
y TGF-b en el PRP enriquecido con leucocitos, mientras el PRP con
predominio plaquetario-leucodeplecionados tiene mayores concentraciones de factores de crecimiento tipo PDGF-AB e IGF-1.
Palabras clave: plasma rico en leucocitos, plasma rico en plaquetas,
factores de crecimiento, centrifugación, Medicina regenerativa.
294
Recibido: 18 de agosto 2015
Aceptado: 29 de octubre 2015
Correspondencia: Dr. Jesús Alcaraz
Carretera de Águilas
Buzón 252-B
30800 Lorca, Murcia, España
[email protected]
Este artículo debe citarse como
Alcaraz J, Oliver A, Sánchez-Jusana M, Lajara J. Concentraciones de factores de crecimiento en plasma
enriquecido con plaquetas, leucocitos o eritrocitos.
Estudio descriptivo en 75 pacientes. Rev Hematol
Mex 2015;16:294-305.
Alcaraz J y col. Factores de crecimiento en plasma
Growth factor levels in plasma
enriched with platelets, leukocytes or
erythrocytes. Descriptive study of 75
patients
ABSTRACT
Background: The use of platelet growth factors for numerous clinical
applications is emerging more strongly, even sometimes surpassing
the existing scientific evidence. Still, there is under control in the final
content of the product. The application of growth factors, or what is
commonly called: platelet-rich-plasma (PRP) is a drug recognized by
the different state agencies not without side effects; which implies a
perfect knowledge of the different techniques of obtaining and the final
composition of the product to track or trace in the patient.
Objective: To dissect the content in growth factors of different cell fractions of total blood centrifuged.
Material and method: A descriptive, serial of clinical cases study was
done selecting a sample of 75 Caucasian patients, 40 male and 35
female with the rank of age between 15 and 65, haematologically
healthy, following the analytical norms of inclusion for autotransfusion
of the Spanish Society of Hematology and Hemotherapy about biochemical, haematological and serological previous to obtain samples
of total blood.
Results: In the leukocyte-rich PRPs levels of final growth factors between 7-10 times higher than baseline patient was obtained, with a
nearly 45% higher concentration factors type VEGF and TGF-b; while
platelet rich PRPs predominated almost 45% greater growth factors
type PDGF-AB and IGF-1.
Conclusion: There was prevalence of VEGF and TGF-b growth factors in
those enriched leukocyte PRPs, while platelet-PRPs, without leucocytes,
have higher concentrations of growth factors type PDGF-AB and IGF-1.
Key words: platelet rich plasma, leukocyte rich plasma, centrifugation,
growth factors, regenerative Medicine.
ANTECEDENTES
No cabe duda de que en la Medicina regenerativa, el uso de los factores de crecimiento
plaquetario para infinidad de aplicaciones
clínicas se está abriendo paso con más fuerza,
incluso muchas veces sobrepasando la evidencia
científica existente para ello. El bajo control en el
contenido final del producto obtenido, así como
los diferentes procedimientos de elaboración
para una misma aplicación clínica, ponen en
duda la efectividad real propuesta para aquello
en lo que se pretende utilizar; todo esto potenciado por una fuerte campaña propagandística
295
Revista de Hematología
con claros fines lucrativos, donde todo vale para
vender. No debemos olvidar que la aplicación
de los factores de crecimiento o lo que comúnmente se denomina plasma rico en plaquetas
(PRP) es un medicamento reconocido por las
distintas agencias estatales, no exento de efectos
secundarios para el paciente, lo que implica un
perfecto conocimiento de las diferentes técnicas de obtención, así como de la composición
final del producto obtenido para poder realizar
un seguimiento o trazabilidad en el paciente
al momento de vigilar los efectos clínicos y las
posibles reacciones adversas.1,2 Esto permitiría, a
su vez, que otros autores realicen estudios con la
misma técnica utilizada y con una composición
concreta del concentrado producido y validar
de esta manera los potenciales efectos clínicos
en los distintos campos médicos en los que se
pretende utilizar.
El objetivo de este trabajo es analizar minuciosamente el contenido en factores de crecimiento de
las distintas fracciones celulares de la sangre total
centrifugada, para ver si, como dice la bibliografía, se encuentran diferencias en la composición
final, con lo que podría hablarse de la obtención
de un PRP a la carta y posteriormente estudiar
con profundidad sus efectos clínicos en distintos
pacientes, según la fisiopatología del proceso
clínico en que se aplique.
MATERIAL Y MÉTODO
Estudio descriptivo, tipo serie de casos, en el
que se seleccionó una muestra de 75 pacientes
de raza caucásica, 40 de género masculino, con
límites de edad de 15 y 65 años, hematológicamente sanos, siguiendo las normas de inclusión
analíticas para Autotransfusión de la Sociedad
Española de Hematología y Hemoterapia en
cuanto a controles bioquímicos, hematológicos
y serológicos previos a la obtención de las muestras de sangre total. Para la obtención de sangre
se usó un sistema cerrado mediante Vacutainer®
296
Volumen 16, Núm. 4, octubre-diciembre 2015
conectado a un tubo de 3.5 mL con EDTA. Se
utilizó acceso venoso antebraquial con aguja
de 20 G. El procedimiento de obtención del
PRP consistió en una centrifugación única de la
muestra de sangre durante 30 minutos a 3,500
rpm con centrifuga de eje angular de 16 tubos
serie CEMCON 2, según la técnica descrita por
Alcaraz y su grupo en 20152 y micropipeteado
de la fracción proteínica rica en factores de
crecimiento plaquetario-plasmático y celular
mediante técnica abierta en condiciones de
asepsia en campana de flujo laminar horizontal
grado A, a temperatura de 22ºC. La muestra de
pacientes se dividió en tres brazos: 1) plasma
rico en plaquetas, 2) plasma rico en leucocitos
y 3) plasma rico en eritrocitos. En el producto
final obtenido se procedió al conteo celular mediante hemocitómetro tipo Coulter (Beckman),
de plaquetas, leucocitos, granulocitos, monocitos y CD 34+/mm3, así como los siguientes
factores de crecimiento plaquetarios: derivado
de las plaquetas AB (PDGF-AB), transformante b
(TGF- b), tipo insulina 1 (IGF-1) y del endotelio
vascular (VEGF) utilizando equipos específicos
de inmunoenzimoanálisis (ELISA). Las determinaciones se realizaron en situación basal,
previo al tratamiento, de los PRPs obtenidos y
serológicos de los pacientes a las 24 horas de
su administración. La vía de inyección fue variada: intraarticular, endovenosa, intramuscular
o subcutánea. Se hicieron cálculos estadísticos
descriptivos para la interpretación de los datos
analíticos en cada caso.
RESULTADOS
En los Cuadros 1 a 4 y Figuras 1 a 4 se observan
los resultados obtenidos en los 75 pacientes en
cuanto a la determinación de concentraciones
de factores de crecimiento obtenidos con el valor
máximo y mínimo, así como la media parametral
obtenida en situación basal y en el plasma rico
en plaquetas (PRP) rico en leucocitos, plaquetas y eritrocitos, respectivamente, y en sangre a
Alcaraz J y col. Factores de crecimiento en plasma
Cuadro 1. Características reológicas de los pacientes en situación basal (continúa en la siguiente página)
Leucocitos Granulocitos Mononucleares CD 34+
IGF-1
VEGF
Plaquetas
Paciente PDGF-AB TGF-β1
(3,200/mm3
/mm3
/mm3
(10-70 (0.5-19.5 (15-85
(150,000(10-50
pg/mL) pg/mL) pg/mL) pg/mL) 350,000/mm3) 9,000/mm3)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
45
40
43
43
15
35
20
30
91
45
35
12
45
43
15
42
41
44
40
17
37
25
33
99
41
32
11
47
45
19
40
43
48
42
12
33
22
39
99
47
34
15
45
43
15
60
25
55
67
25
24
15
20
60
55
20
15
60
55
55
67
21
53
66
22
23
17
22
68
52
21
13
69
51
57
62
21
52
62
28
22
18
27
67
51
29
14
65
51
55
18
10
17
15
7
12
7
7
16
18
15
4
17
17
18
18
10
17
15
7
12
7
7
16
18
15
4
17
17
18
18
10
17
15
7
12
7
7
16
18
15
4
17
17
18
80
45
80
75
30
40
30
35
75
70
40
25
75
70
70
87
44
88
74
32
43
31
33
77
76
40
23
72
79
75
82
43
81
73
31
42
39
33
76
71
44
22
78
79
71
210,000
210,000
190,000
170,000
180,000
175,000
260,000
176,000
350,000
195,000
205,000
250,000
240,000
300,000
214,907
220,659
215,401
195,793
181,098
191,209
175,397
262,981
169,127
339,129
184,091
200,436
251,465
201,154
330,012
260,123
218,013
219,032
191,913
171,934
187,091
175,708
260,000
174,814
255,060
195,000
260,124
255,098
243,981
317,321
217,877
7,500
6,500
6,230
7,500
8,900
8,900
7,200
7,430
7,430
9,500
8,300
8,500
8,700
7,600
7,500
7,590
6,201
6,013
7,901
8,587
8,401
7,010
7,091
7,178
9,280
8,120
8,401
8,598
7,901
7,689
7,211
6,480
6,219
7,500
8,967
8,941
7,212
7,012
7,432
9,019
8,190
8,122
8,000
7,801
7,546
4,875
3,575
3,738
4,500
5,340
5,340
4,320
4,458
4,086
5,700
4,980
5,100
5,481
4,560
4,500
4,109
3,600
3,490
4,501
5,354
5,176
4,012
4,301
4,912
5,769
4,210
5,300
5,900
4,390
4,211
4,600
3,410
3,800
4,212
5,012
5,900
4,150
4,800
4,120
5,500
4,123
5,450
5,911
4,012
4,560
1,275
1,625
1,246
1,125
1,335
1,956
1,440
1,114
1,337
1,425
1,909
1,890
1,131
1,140
1,500
1,221
1,624
1,276
1,112
1,309
1,966
1,490
1,830
1,900
1,421
1,932
1,890
1,900
1,140
1,500
1,275
1,625
1,219
1,119
1,321
1,780
1,503
1,145
1,903
1,093
1,012
1,701
1,016
1,045
1,501
0.9
0.3
0.4
0.5
0.3
0.2
0.2
0.4
0.7
0.7
0.2
0.1
0.7
0.4
0.2
0.8
0.5
0.8
0.2
0.6
0.6
0.6
0.5
0.9
0.8
0.4
0.2
0.5
0.4
0.5
0.8
0.3
0.7
0.6
0.8
0.6
0.9
0.5
0.6
0.5
0.4
0.5
0.8
0.5
0.3
297
Volumen 16, Núm. 4, octubre-diciembre 2015
Revista de Hematología
Cuadro 1. Características reológicas de los pacientes en situación basal (continuación)
Paciente PDGF-AB TGF-b1
IGF-1
VEGF
Plaquetas
Leucocitos Granulocitos Mononucleares CD 34+
(10-50
(10-70 (0.5-19.5 (15-85
(150,000(3,200/mm3
/mm3
/mm3
pg/mL) pg/mL) pg/mL) pg/mL) 350,000/mm3) 9,000/mm3)
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
Máximo
Mínimo
Media
45
40
43
43
15
20
30
91
45
35
12
45
43
15
45
40
43
43
15
35
20
30
91
45
35
12
45
43
15
15
99
11
32.75
69
27
53
60
20
15
20
60
55
20
15
60
55
55
60
25
55
67
25
24
15
20
60
55
20
15
60
55
55
55
69
13
36.09
18
10
17
15
7
7
7
16
18
15
4
17
17
18
18
10
17
15
7
12
7
7
16
18
15
4
17
17
18
18
18
4
12.14
89
45
89
74
33
30
35
75
70
40
25
75
70
70
80
45
80
75
30
40
30
35
75
70
40
25
75
70
70
70
89
22
53.03
212,066
217,912
190,543
178,913
188,912
260,000
176,000
350,000
195,000
205,000
250,000
240,000
300,000
210,000
210,000
210,000
190,000
170,000
180,000
175,000
260,000
176,000
350,000
195,000
205,000
250,000
240,000
300,000
210,000
210,000
350,000
169,127
259,563
las 24 horas del tratamiento en cada paciente.
No se observó correlación entre la cantidad de
plaquetas concentradas y la cantidad de factores
de crecimiento en cada tipo de PRP enriquecido
obtenido finalmente. En el PRP rico en leucocitos, con media de concentración leucocitaria
de 22,000/mm3 (Figura 5), 80% de los cuales
son mononucleares, con 15% positivos para el
298
7,209
6,109
6,320
7,591
8,011
7,200
7,430
7,430
9,500
8,300
8,500
8,700
7,600
7,500
7,500
6,500
6,230
7,500
8,900
8,900
7,200
7,430
7,430
9,500
8,300
8,500
8,700
7,600
7,500
7,500
9,500
6,013
7,709
4,900
3,123
3,800
4,911
5,901
4,320
4,458
4,086
5,700
4,980
5,100
5,481
4,560
4,500
4,875
3,575
3,738
4,500
5,340
5,340
4,320
4,458
4,086
5,700
4,980
5,100
5,481
4,560
4,500
4,500
5,911
3,123
4,619
1,200
1,601
1,222
1,125
1,333
1,440
1,114
1,337
1,425
1,909
1,890
1,131
1,140
1,500
1,275
1,625
1,246
1,125
1,335
1,956
1,440
1,114
1,337
1,425
1,909
1,890
1,131
1,140
1,500
1,500
1,966
1,012
1,405
0.8
0.4
0.5
0.4
0.5
0.2
0.4
0.7
0.7
0.2
0.1
0.7
0.4
0.2
0.9
0.3
0.4
0.5
0.3
0.2
0.2
0.4
0.7
0.7
0.2
0.1
0.7
0.4
0.2
0.2
0.9
0.1
0.5
marcador CD 34+, se obtuvo una cantidad de
factores de crecimiento final entre 7 y 10 veces
mayor a las concentraciones basales del paciente, con una concentración casi 45% mayor de los
factores TGF-b y VEGF (Cuadro 2 y Figura 2) que
en el PRP rico en plaquetas, mientras estos últimos tuvieron una cantidad media de 1,400,000
plaquetas/mm3 (Figura 6). Si bien se obtuvo
Alcaraz J y col. Factores de crecimiento en plasma
Cuadro 2. Características reológicas del plasma rico en plaquetas rico en leucocitos
Leucocitos Granulocitos Mononucleares CD 34+
VEGF
Plaquetas
Paciente PDGF-AB TGF-β1 IGF-1
(3,200-9,000/
/mm3
/mm3
/mm3
(150,000(10-50 (10-70 (0.5-19.5 (15-85
mm3)
pg/mL) pg/mL) pg/mL) pg/mL) 350,000/mm3)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
Máximo
Mínimo
Media
296
270
190
250
150
160
200
150
253
220
150
190
280
250
245
280
270
250
230
220
130
210
230
240
200
296
130
215.39
450
250
300
150
370
200
480
190
365
110
370
160
390
120
350
105
520
277
470
210
370
160
350
190
420
230
420
199
430
190
459
253
380
153
390
290
490
170
390
100
380
190
290
100
400
103
590
240
490
200
590
290
290
100
407.19 172.82
575
545
590
540
460
530
470
390
590
590
480
320
570
570
590
590
580
570
590
499
580
489
391
570
510
590
320
521.32
500,000
600,000
500,000
400,000
600,000
500,000
400,000
700,000
600,000
700,000
690,000
500,000
710,000
650,000
570,000
620,000
660,000
710,000
630,000
700,000
610,000
730,000
630,000
730,000
670,000
730,000
400,000
604,147
una tasa de concentración final de factores de
crecimiento entre 7 y 10 veces mayor que en
situación basal, como en los plasmas leucocitarios, se observó predominio casi 45% mayor de
factores de crecimiento tipo PDGF-AB e IGF-1
(Cuadro 3 y Figura 3). Las concentraciones de
factores de crecimiento se mantuvieron estables
en la sangre de cada paciente a las 24 horas del
tratamiento entre 7 y 9 veces mayores respecto
a la situación basal en los que se administró PRP
rico en leucocitos (Cuadro 5 y Figura 7) y en
plaquetas (Cuadro 6 y Figura 8). No se observó
mayor concentración de interés en los factores
de crecimiento estudiados en los plasmas en-
21,000
22,000
21,000
20,000
21,000
24,000
21,500
21,500
21,500
24,000
23,000
20,000
22,000
22,000
23,000
21,000
22,600
27,000
20,900
21,530
24,070
26,700
25,000
22,700
23,000
27,000
20,000
22,411
3,150
4,400
3,150
4,000
4,200
6,000
4,515
3,440
4,085
3,600
4,600
4,000
3,300
4,400
4,370
3,100
4,500
3,000
4,900
4,100
6,400
4,400
3,500
4,001
3,670
6,400
3,000
4,038
18,270
16,500
16,800
17,400
14,700
19,200
15,910
12,900
18,705
20,400
17,940
12,000
18,700
16,500
19,550
18,500
16,700
16,500
17,900
14,500
19,900
15,900
12,480
18,400
20,900
20,900
12,000
16,913
240
180
270
210
170
175
170
120
215
200
150
70
200
185
200
240
180
270
210
259
300
350
270
200
290
350
70
203
riquecidos en eritrocitos, con concentraciones
casi similares a las de la situación basal en cada
paciente (Cuadro 4 y Figura 4).
DISCUSIÓN
Como hipotetizaron otros autores, parece demostrarse que el plasma rico en plaquetas (PRP)
concentra mayores factores de crecimiento
tipo PDGF-AB e IGF-1, mientras que en el PRP
enriquecido con leucocitos hay predominio de
mononucleares y de factores de crecimiento tipo
VEGF y TGF-b.1-3 Aunque el tamaño de muestra
es pequeño y aún no se sabe con certeza la
299
Volumen 16, Núm. 4, octubre-diciembre 2015
Revista de Hematología
Cuadro 3. Características reológicas del plasma rico en plaquetas
VEGF
Plaquetas
Paciente PDGF-AB TGF-β1 IGF-1
(150,000(10-50 (10-70 (0.5-19.5 (15-85
pg/mL) pg/mL) pg/mL) pg/mL) 350,000/mm3)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
Máximo
Mínimo
Media
559
400
420
500
490
530
450
400
500
530
450
470
550
550
500
530
500
400
590
550
450
490
490
500
450
480
135
306,8
150
100
170
180
165
170
150
135
220
270
170
150
120
220
230
259
180
190
290
190
190
150
200
290
190
450
120
272,7
550
650
500
590
310
460
420
405
477
410
360
300
330
409
490
553
453
490
470
400
490
300
403
440
400
200
55
127,3
275
145
190
240
260
230
170
190
290
290
280
220
270
270
290
290
280
270
290
199
280
189
291
270
210
505
200
415,45
1,500,000
1,600,000
1,500,000
1,400,000
1,600,000
1,500,000
1,400,000
1,300,000
1,500,000
1,200,000
1,600,000
1,501,000
1,410,000
1,600,000
1,500,000
1,320,000
1,550,000
1,600,000
1,450,000
1,300,000
1,400,000
1,500,000
1,400,000
1,500,000
1,500,000
290,000
190,000
223,602
correlación clínica de la existencia de estas
proteínas en el plasma que nos permita establecer un perfil de aplicación en el tratamiento de
diversas enfermedades, parece vislumbrarse que
el predominio de factores tipo TGF-b y VEGF con
potencia proangiogénica e inmunomoduladora
de la apoptosis más evidente podría ser útil en
el tratamiento de enfermedades de etiopatogenia
isquémica, en las que la neoformación vascular
y la regulación de la supervivencia celular juegan un papel importante en la fisiopatología de
las mismas.4,5 Asimismo, la mayor existencia de
factores de crecimiento tipo IGF-1 y PDGF-AB,
300
Leucocitos
(3,200-9,000/
mm3)
1,000
2,000
1,000
2,000
1,000
2,400
2,150
2,150
1,150
2,400
1,300
2,000
2,200
2,200
1,300
2,100
2,260
1,700
2,090
2,153
1,407
1,670
1,500
1,700
1,300
8,900
3,950
7,638
Granulocitos Mononucleares
/mm3
/mm3
150
400
150
400
420
600
451
344
408
360
460
400
330
440
437
310
450
300
490
410
640
440
350
400
367
4,000
3,100
3,629
100
160
100
174
147
192
159
129
187
204
179
120
187
160
195
185
167
165
170
145
199
159
124
184
209
2,000
1,600
1,768
CD
34+
/mm3
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
20
5
11
con mayor capacidad de inducir la diferenciación y regeneración celular, sería más útil
en el tratamiento de enfermedades cuya base
etiopatogénica sea la degeneración o involución
celular.6,7 Se necesitan estudios más estrictos
en Medicina traslacional para que en un futuro
conozcamos el verdadero funcionamiento fisiológico de estas proteínas y su acción en el ciclo
celular. En la mayoría de los casos la existencia
de unos y otros factores de crecimiento se complementan de manera auto o paracrina, lo que
se traduce en fenómenos de inmunomodulación,
multiplicación y diferenciación celular.
Alcaraz J y col. Factores de crecimiento en plasma
Cuadro 4. Características reológicas del plasma rico en plaquetas rico en eritrocitos
Paciente
PDGF-AB
(10-50
pg/mL)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
Máximo
Mínimo
Media
72
60
62
70
59
73
65
60
80
83
65
67
75
88
70
80
80
70
89
75
65
69
69
90
65
90
59
71.49
TGF-β1
IGF-1
VEGF
(10-70 (0.5-19.5 (15-85
pg/mL) pg/mL) pg/mL)
15
10
17
18
16
17
15
13
22
27
17
15
12
22
23
25
18
19
29
19
19
15
20
29
19
29
10
18.23
55
65
50
59
3
46
42
40
47
41
36
30
33
40
49
55
45
49
47
40
49
30
40
44
40
65
3
39.41
60
Leucocitos Granulocitos Mononucleares
Plaquetas
/mm3
/mm3
(150,000-350,000/ (3,200-9,000/
mm3)
mm3)
27
14
19
24
26
23
17
19
29
29
28
22
27
27
29
29
28
27
29
19
28
18
29
27
21
29
14
24.12
1,500
1,600
1,500
1,400
1,600
1,500
1,400
1,300
1,500
1,200
1,600
1,501
1,410
1,600
1,500
1,320
1,550
1,600
1,450
1,300
1,400
1,500
1,400
1,500
1,500
1,600
1,200
1,461
53
3,500,000
3,780,000
3,100,000
3,900,000
4,000,000
3,900,000
2,900,000
3,100,000
3,000,000
4,000,000
4,100,000
3,800,000
4,000,000
3,600,000
3,500,000
3,400,000
3,300,000
3,800,000
3,700,000
3,900,000
4,000,000
3,600,000
3,700,000
3,500,000
2,320,000
4,100,000
2,320,000
3,548,203
600
521
300
20
IGF-1
172
100
10
TGF-β
215
200
12
PDGF-AB
407
400
36
pg/mL
pg/mL
32
30
0
1
4
1
4
4
6
4
3
4
3
4
4
3
4
4
3
4
3
4
4
6
4
3
4
3
6
1
3
500
50
40
10
20
10
20
10
24
21
21
11
24
13
20
22
22
13
21
22
17
20
21
14
16
15
17
13
24
10
16
VEGF
Figura 1. Concentraciones medias séricas de factores
de crecimiento en los 75 pacientes.
0
PDGF-AB
TGF-β
IGF-1
VEGF
Figura 2. Concentraciones medias de factores de crecimiento en plasma rico en plaquetas rico en leucocitos.
301
Volumen 16, Núm. 4, octubre-diciembre 2015
Revista de Hematología
450
415
400
pg/mL
306
272
15000
250
10000
200
5000
127
150
PDGF-AB
TGF-β
IGF-1
VEGF
Figura 3. Concentraciones medias de factores de
crecimiento en plasma rico en plaquetas.
70
/mm3
pg/mL
50
39
40
30
24
18
20
PDGF-AB
1600000
1400000
1200000
1000000
800000
600000
400000
200000
1500000
400000
50000
0
10
0
Figura 5. Conteo medio leucocitario en los diferentes
plasmas ricos en plaquetas enriquecidos.
71
60
0
de
de
de
n s
ón Ps
ón Ps
ió RP s
ci PR os
ci PR os
c
a
a
P
a
o
i
i
c
c
i
n
r
c
ifi en ar
ifi e a
ifi en ar
nt itos ocit
nt itos uet
nt itos ocit
a
a
a
q
Cu coc eritr
Cu coc pla
Cu coc leuc
u
u
u
le
le
le
50
80
2000
0
100
0
21000
20000
/mm3
350
300
25000
TGF-β
IGF-1
VEGF
Figura 4. Concentraciones medias de factores de crecimiento en plasma rico en plaquetas rico en eritrocitos.
Ps
Ps
Ps
PR rio
PR rio
PR rio
n
n
n
a
a
a
s e et
s e it
s e it
ta aqu
ta itroc
ta coc
e
e
e
u
u pl
u r
u
aq
aq e
aq le
Pl
Pl
Pl
Figura 6. Conteo medio plaquetario en los diferentes
plasmas ricos en plaquetas enriquecidos.
Cuadro 5. Características séricas de los pacientes 24 horas después de la administración de plasma rico en plaquetas rico en
leucocitos (continúa en la siguiente página)
Paciente PDGF-AB TGF-b1 IGF-1
VEGF
Plaquetas
Leucocitos Granulocitos Mononucleares CD 34+
(10-50 (10-70 (0.5-19.5 (15-85 (150,000-350,000/ (3,200-9,000/
/mm3
/mm3
/mm3
pg/mL) pg/mL) pg/mL) pg/mL)
mm3)
mm3)
1
2
3
4
5
6
7
302
200
230
120
200
110
110
160
420
270
320
440
325
340
360
220
130
180
150
100
140
100
530
510
520
500
420
510
430
200,436
251,465
201,154
330,012
260,123
218,013
219,032
8,120
8,401
8,598
7,901
7,689
7,211
6,480
4,210
5,300
5,900
4,390
4,211
4,600
3,410
1,932
1,890
1,900
1,140
1,500
1,275
1,625
0.4
0.2
0.5
0.4
0.5
0.8
0.3
Alcaraz J y col. Factores de crecimiento en plasma
Cuadro 5. Características séricas de los pacientes 24 horas después de la administración de plasma rico en plaquetas rico en
leucocitos (continuación)
Paciente PDGF-AB TGF-b1 IGF-1
VEGF
Plaquetas
Leucocitos Granulocitos Mononucleares CD 34+
(10-50 (10-70 (0.5-19.5 (15-85 (150,000-350,000/ (3,200-9,000/
/mm3
/mm3
/mm3
pg/mL) pg/mL) pg/mL) pg/mL)
mm 3)
mm3)
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
Máximo
Mínimo
Media
110
203
190
110
120
220
210
215
220
220
230
200
190
100
180
190
190
170
230
100
169.74
320
500
420
350
300
400
410
400
409
350
360
450
350
330
270
350
520
430
450
120
272.7
99
250
200
130
170
200
180
170
240
130
250
140
90
150
98
99
210
180
200
55
127.3
350
530
560
440
300
520
550
540
540
530
530
540
445
550
440
340
530
500
505
200
415.45
191,913
171,934
187,091
175,708
260,000
174,814
255,060
195,000
260,124
255,098
243,981
317,321
217,877
212,066
217,912
190,543
178,913
188,912
290,000
190,000
223,602
6,219
7,500
8,967
8,941
7,212
7,012
7,432
9,019
8,190
8,122
8,000
7,801
7,546
7,209
6,109
6,320
7,591
8,011
8,900
3,950
7,638
3,800
4,212
5,012
5,900
4,150
4,800
4,120
5,500
4,123
5,450
5,911
4,012
4,560
4,900
3,123
3,800
4,911
5,901
4,000
3,100
3,629
1,219
1,119
1,321
1,780
1,503
1,145
1,903
1,093
1,012
1,701
1,016
1,045
1,501
1,200
1,601
1,222
1,125
1,333
2,000
1,600
1,768
0.7
0.6
0.8
0.6
0.9
0.5
0.6
0.5
0.4
0.5
0.8
0.5
0.3
0.8
0.4
0.5
0.4
0.5
20
5
11
CONCLUSIÓN
450
415
400
Según los resultados obtenidos, hay predominio
de factores de crecimiento tipo VEGF y TGF-b
en el plasma rico en plaquetas enriquecido con
leucocitos, mientras el plasma rico en plaquetas
con predominio plaquetario leucodeplecionado
tiene mayores concentraciones de factores de
crecimiento tipo PDGF-AB e IGF-1.
350
272
pg/mL
300
250
200
169
127
150
100
50
0
PDGF-AB
TGF-β
IGF-1
VEGF
Figura 7. Concentraciones séricas medias de factores de crecimiento a las 24 horas de tratamiento en
pacientes en los que se administró plasma rico en
pacientes rico en leucocitos.
Agradecimientos
A mi mujer y a mi hijo, por su paciencia y
dedicación, por su estímulo y ánimo, sin los
cuales no hubiera sido posible la ejecución de
este artículo.
303
Volumen 16, Núm. 4, octubre-diciembre 2015
Revista de Hematología
Cuadro 6. Características séricas de los pacientes 24 horas después de la administración de plasma rico en plaquetas
Leucocitos Granulocitos Mononucleares CD 34+
Plaquetas
Paciente PDGF-AB TGF-b1 IGF-1 VEGF
/mm3
/mm3
/mm3
(10-50 (10-70 (0.5-19.5 (15-85 (150,000-350,000/ (3,200-9,000/
mm3)
pg/mL) pg/mL) pg/mL) pg/mL)
mm3)
1
490
2
370
3
380
4
400
5
420
6
480
7
400
8
350
9
400
10
480
11
410
12
420
13
470
14
420
15
450
16
480
17
460
18
350
19
460
20
480
21
410
22
420
23
430
24
400
25
410
Máximo
490
Mínimo
350
Media 423,64
450
110
90
120
130
100
120
110
110
200
22
130
110
100
200
215
220
140
130
245
150
140
110
150
240
150
245
22
130.26
520
620
480
540
280
420
380
370
420
380
320
270
280
380
470
520
420
430
410
350
450
320
370
480
350
620
270
400.33
220
110
150
220
230
200
130
110
240
250
225
190
220
215
230
245
230
220
240
150
240
150
250
230
180
250
110
197
260,000
176,000
350,000
195,000
205,000
250,000
240,000
300,000
210,000
210,000
210,000
190,000
170,000
180,000
175,000
260,000
176,000
350,000
195,000
205,000
250,000
240,000
300,000
210,000
210,000
350,000
170,000
223,703
7,200
7,430
7,430
9,500
8,300
8,500
8,700
7,600
7,500
7,500
6,500
6,230
7,500
8,900
8,900
7,200
7,430
7,430
9,500
8,300
8,500
8,700
7,600
7,500
7,500
9,500
6,230
7,851
400
197
pg/mL
0.2
0.4
0.7
0.7
0.2
0.1
0.7
0.4
0.2
0.9
0.3
0.4
0.5
0.3
0.2
0.2
0.4
0.7
0.7
0.2
0.1
0.7
0.4
0.2
0.2
0,9
0,1
0,5
1.
Beca T, Hernández G, Morante S, Bascones A. Plasma rico
en plaquetas. Revision bibliográfica. Av Periodon Implantol
2007;19:39-52.
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platelet-rich plasma: A new dimension in Regenerative
Medicine. Med Sci Rev 2015;2:111-120.
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Alcaraz J, Oliver A, Sánchez JM. Nuevo método de obtención de plasma rico en factores de crecimiento plaquetario
(PRP). Estudio descriptivo en 15 pacientes y comparación
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et al. Platelet-rich plasma preparation using three devices:
350
300
250
200
130
150
100
50
PDGF-AB
TGF-β
IGF-1
VEGF
Figura 8. Concentraciones séricas medias de factores
de crecimiento en pacientes en los que se administró
plasma rico en plaquetas.
304
1,440
1,114
1,337
1,425
1,909
1,890
1,131
1,140
1,500
1,275
1,625
1,246
1,125
1,335
1,956
1,440
1,114
1,337
1,425
1,909
1,890
1,131
1,140
1,500
1,500
1,956
1,114
1,407
REFERENCIAS
423
400
0
4,320
4,458
4,086
5,700
4,980
5,100
5,481
4,560
4,500
4,875
3,575
3,738
4,500
5,340
5,340
4,320
4,458
4,086
5,700
4,980
5,100
5,481
4,560
4,500
4,500
5,700
3,575
4,694
Alcaraz J y col. Factores de crecimiento en plasma
implications for platelets activation and platelet growth
factors release. Growth Factors 2006;24:165-171.
6.
Weibrich G, Kleiss WKG, Hafner G, Hitzler WE. Growth
factors level in platelets-rich plasma and correlations with
donor age, sex and platelets count. J Craneomaxillofac Surg
2002;30:97-102.
7.
González-Villalva A. Capítulo 6. Sangre. En: Fortoul y
Castell. Histología y Biología celular. México: McGraw-Hill
Interamericana, 2010;147-154.
305