INSTITUTO NACIONAL DE PESCA DIRECCIÓN GENERAL ADJUNTA DE INVESTIGACIÓN EN ACUACULTURA TRABAJO PARA CONCURSO “PREMIO NACIONAL DE ADMINISTRACIÓN PÚBLICA 2012” TITULO DEL TRABAJO: “Proceso de adaptación, validación, transferencia y adopción de la tecnología, para la producción de huevo de trucha arco iris (Oncorhynchus mykiss) fuera de estación mediante la manipulación de fotoperiodo” INTEGRANTES: DRA. GENOVEVA INGLE DE LA MORA BIOL. MARILÚ MONTERO RODRÍGUEZ BIÓL. ALMA SALAS SANDOVAL TEC. ISMAEL MORA CERVANTES FECHA AGOSTO 2012 INDICE Página 1.-Introducción.…………………………………………………………………………………………….3 2.- Objetivo general……………………………………………………………………………………….5 2.1.- Objetivos específicos……………………………………………………………………………….5 3.- Marco teórico…………………………………………………………………………………….......6 4.- Proceso de Adaptación Tecnológica…………………………………………………………….....8 5.- Resultados del proceso de adaptación tecnológica……………………………………….…….10 5.1.- Efecto de fotoperiodo en maduración hembras……………………………………………..…10 5.2.- Fecundidad relativa……………………………………………………………………………....11 5.3.- Tamaño de huevo………………………………………………………………………………....11 5.4.- Número de espermatozoides/ml………………………………………………………………...12 5.5.- Mortalidad huevo verde a huevo a oculado…………………………………………………….12 5.6.- Mortalidad huevo oculado a cría…………………………………………………………………12 5.7.- Etapa de replicación Centro Acuícola el Zarco…………………………………………………13 5.8.- Proceso de validación externa en unidad trutícola “Tatakany”…………………………….…13 5.9.- Resultados de validación externa……………………………………………………………....16 5.10.- Situación actual en “Tatakany”………………………………………………………………...17 6.- Transferencia tecnológica…………………………………………………………………………..17 6.1.- Centro Acuícola “Guachochi”, Chihuahua………………………………………………………17 6.2.- Granja “La trucha mágica de Santa Catarina”, Hidalgo……………………………………….19 6.3.- Centro Acuícola “Pucuato”, Michoacán…………………………………………………………19 6.4.- Granja “Truchas los Cedros”, Municipio de Oaxaca…………………………………………...20 6.5.- Granja “Agua de los fresnos”…………………………………………………………………....21 7.- Conclusiones…………………………………………………………………………………………22 8.- Bibliografía……………………………………………………………………………………………23 9.- Exposición de motivos………………………………………………………………………………26 10.- Especificar que el trabajo no corresponde ni es parte de alguna tesis para obtener algún grado académico o de instructivos y/o manuales……………………………………………………26 11.- Síntesis………………………………………………………………………………………………27 2 1.- INTRODUCCIÓN A partir de la década de los noventa, el dominio de la biotecnología del cultivo de trucha arco iris (Oncorhynchus mykiss,) consolidó a la truticultura como actividad de importancia económica, alcanzado una producción nacional en el 2010 de 6,919 toneladas ofertadas por 10 estados (Chihuahua, Estado de México, Guerrero, Hidalgo, Michoacán, Morelos, Puebla, Tlaxcala, Veracruz y Zacatecas). Con el propósito de estimular el desarrollo del cultivo de la trucha arco iris, el Gobierno Federal construyó un total de siete Centros Acuícolas a lo largo de cuatro décadas enfocados en la producción de huevo y crías, ubicados en cinco entidades federativas: Guachochi y Madera, Chihuahua; Pucuato, Michoacán; Apulco, Puebla; Matzinga Veracruz, y el Zarco, Estado de México. A estos centros se añade uno más de producción: Calimaya, creado por el gobierno del Estado de México a partir de los años ochenta, logrando así contar con una capacidad instalada que superó los 12 millones de huevos. Como resultado de la consolidación de la producción nacional de trucha arco iris, fue necesario tener continuidad en el abasto de huevo. Sin embargo los salmónidos son especies sincrónicas, es decir que en condiciones naturales solo se reproducen una vez al año y en México el periodo reproductivo se realiza en otoño e invierno, lo que provoca que la oferta nacional de huevo y cría este restringida a unos cuantos meses y por lo tanto exista desabasto el resto del año. Para contrarrestar esta problemática, la iniciativa privada, algunas agrupaciones del sector social y posteriormente el gobierno federal recurrieron a la importación de huevo oculado en los meses que no había producción nacional. A consecuencia de lo anterior, se introdujo el virus Necrosis Pancreática Infecciosa (IPN) que aunado a las contingencias ambientales, el decremento del abastecimiento de agua y atraso en la incorporación de innovaciones tecnológicas, provocaron que la producción de huevo nacional se colapsara. Actualmente se abastece cerca del 75% de la demanda nacional vía importación. Situación sumamente riesgosa desde el punto de vista sanitario y de inestabilidad de la oferta. La aplicación de la técnica de fotoperiodo artificial representa una excelente opción para promover el desarrollo sustentable de la truticultura en México, ya que permite enfrentar la creciente necesidad de abasto de huevo de trucha arco iris fuera de estación y proteger el patrimonio sanitario del país, contribuir directamente en el bienestar del sector dedicado a la engorda y venta de esta especie, promover el desarrollo regional a través de generar la oportunidad para la creación de nuevas empresas, incrementar la eficiencia productiva, remplazar importaciones por producción nacional, mejorar el aprovechamiento del agua, así como optimizar la infraestructura acuícola, además de disponer en forma oportuna de un producto de calidad. 3 El método de fotoperiodo se sustenta en el efecto que provocan los cambios en la duración de la luz en la iniciación y modulación del desarrollo reproductivo en salmónidos (Hoover, 1937, Hazard y Eddy, 1951). Esta metodología fue desarrollada y analizada por primera vez en Escocia, sin embargo en el caso de México no se había logrado adaptar a las condiciones geográficas, ni demostrado la factibilidad técnica y económica de su aplicación. En este trabajo se describen y presentan los resultados del proceso de adaptación, validación, transferencia tecnológica y adopción de la metodología para eliminar la estacionalidad del desove de trucha arco iris, mediante la aplicación pulsos de luz artificial por periodos definidos en diferentes épocas del año y que posibilitan el adelantar o atrasar el desove. Por las características del documento se describen de manera general los casos que se han atendido en granjas trutícolas de distintos estados de la República Mexicana. El Plan Nacional de Desarrollo 2007-2012 señala en uno de sus 5 ejes rectores: “Economía competitiva y generadora de empleos” su objetivo de potenciar la productividad y competitividad de la economía mexicana considera la estrategia dirigida a profundizar y facilitar los procesos de investigación científica, adopción e innovación tecnológica para incrementar la productividad de la economía nacional, a fin de dar impulso al desarrollo tecnológico que México requiere. 4 2.- OBJETIVOS GENERALES 1. Adaptar, validar y transferir la tecnología para la producción de huevo de trucha arco iris fuera de estación, mediante la inducción de madurez gonadal por manipulación de fotoperiodo, con el fin de minimizar las importaciones masivas de ovas y lograr el máximo aprovechamiento de la infraestructura nacional además de asegurar la sostenibilidad del proceso. 2. Proporcionar asesoramiento estratégico y el soporte técnico para el establecimiento de módulos de fotoperiodo en distintas granjas de producción de trucha arcoíris, para modificar la época de desove utilizando energías renovables que aseguren su sustentabilidad 2.1.- OBJETIVOS ESPECIFICOS Etapa de adaptación Determinar el efecto sobre la maduración en reproductores de trucha arco iris de un régimen de fotoperiodo de día largo (18L:6O) durante 3 meses seguido de un cambio abrupto a día corto (18O:6L) hasta el desove. Comparar el avance del desove con respecto a un lote sometido a fotoperiodo natural. Determinar el efecto del fotoperiodo en la fecundidad relativa. Valorar el efecto del fotoperiodo en la cantidad de espermatozoides producidos Comparar la calidad de huevo y esperma con los obtenidos en el lote sometido a fotoperiodo natural (referencia). Evaluar el efecto del fotoperiodo en la calidad de la progenie. Etapa de validación Evaluar la replicabilidad de los resultados en diferentes condiciones ambientales Capacitar a los productores en el manejo de equipo y técnicas. Etapa de transferencia y adopción Realizar el acompañamiento técnico para realizar los cambios y adaptaciones pertinentes propiciando con esto la apropiación del proceso por parte del usuario. 5 3.- MARCO TEÓRICO Una alternativa viable y ampliamente probada para producir ovas todo el año, es la aplicación de la técnica del fotoperiodo artificial para la modificación del tiempo de maduración de los salmónidos, el cual esta caracterizado por ser un evento anual, que se inicia con el crecimiento gonadal en la primavera y concluye con el desove en el otoño o principio de invierno. Está plenamente establecido que la duración del día o el incremento en esta, proporciona el estímulo inicial para la recrudescencia gonadal (Hoover, 1937; Corson, 1955; Hazard y Eddy 1951; Allison, 1951; Henderson, 1963; Whitehead et al., 1978; Bromage et al., 1982a). Todas las estrategias que utilizan el fotoperiodo como señalización para manipular la maduración, pretenden adelantar o atrasar el desove previsto para el grupo, aplicando fotoperiodos artificiales para modificar la fisiología reproductiva de machos y hembras, aumentando o disminuyendo las horas luz. Esta técnica se basa en el principio de que después del solsticio de invierno, las horas luz del día aumentan con respecto a las horas de oscuridad, el proceso se invierte en el equinoccio de verano donde las horas luz del día empiezan acortarse. La maduración en trucha arcoiris se inicia y subsecuentemente es modulada, por señales producidas por el cambio estacional del ciclo de longitud de luz del día (Whitehead et al., 1978; Bromage et al., 1982a, b). Ha sido ampliamente demostrado que el desove puede ser adelantado o atrasado respectivamente, comprimiendo o extendiendo los cambios anuales de la duración del día, alargando o acortando estos periodos de tiempo en un año. La recrudescencia del ovario y la vitelogenesis temprana es estimulada por la longitud o el incremento de la duración del día, mientras que la sincronización de los últimos estados de maduración de la gónada y ovulación es dependiente de un decremento o acortamiento del fotoperiodo (Henderson 1963; Girin y Devauchelle 1978; MacQuarrie et al., 1978,1979; Whitehead y Bromage 1980; Bromage et al., 1984; Elliott et al., 1984) Algunos de los primeros trabajos de manejo con fotoperiodos, son los realizados en trucha café (Salvelinus fontinalis) por Hoover y Hubbard (1937), demostrando que los ciclos estacionales de luz comprimidos dentro de periodos de tiempo corto influían en el adelanto en los desoves de 3 a 4 meses antes que los mantenidos en condiciones naturales. Asimismo, se demostró modificación en la temporada de desove en trucha arcoiris por efecto del fotoperiodo (Whitehead et al., 1978, 1983; Bromage et al., 1982, 1993a,b; Bromage, 1995; Bromage y Duston, 1986; Bon et al., 1999), observándose además, un retraso si los regímenes de fotoperiodo se extienden a mas de un año con respecto a la temporada de desove natural (MacQuarrie et al., 1978, 1979; Bromage y Duston 1986; Bromage et al., 1993a,b). Por otro lado, se han realizado trabajos con regímenes de fotoperiodo constantes en trucha arcoiris (Whitehead y Bromage, 1980; Bromage et al., 1984), sometiéndolas a periodos 6 luz/oscuridad (L/O) 18:6 de enero a mayo, seguidas por una repentina reducción en los meses restantes a (L/O) 6:18, resultando desoves de 3 a 4 meses antes que el grupo control (Bromage et al., 1984; Duston y Bromage, 1987, 1988). También se conoce, que al modificarse el fotoperiodo se producen claras diferencias en los patrones de secreción de las hormonas hipotalámicas, gonadotrópicas y sexuales que median la reproducción de los teleósteos (Billard et al., 1978; Whitehead et al., 1978; Bromage et al., 1982a; Elliott et al., 1984). También está ampliamente documentado que a nivel hormonal existe un claro indicador de la respuesta fisiológica de los organismos, este es la cuantificación de la melatonina en plasma, observándose una relación directamente proporcional de la concentración de esta y los periodos de oscuridad (Alvarino et al., 1993; Futter et al., 1999). El sistema neuroendocrino involucra un conjunto de hormonas del hipotálamo, la hipófisis y las gónadas. El hipotálamo ejerce sobre la hipófisis un papel regulador, estimulador mediante la hormona liberadora de gonadotropina, GN-RH e inhibidor por la dopamina. La hipófisis produce gonadotropina, GTH, que es la hormona más relevante en la maduración de los ovocitos, y está presente en las formas de GTH-I y GTH-II. La GTH-I actúa en el ovario sobre las células tecales y granulosas de los folículos para la síntesis del esteroide 17 estradiol, que a su vez actúa sobre el hígado para iniciar y mantener la síntesis de vitelogenina en el ovocito. La GTH-II interviene en la captura de la vitelogenina sanguínea para incorporarla al ovocito. El 17 estradiol actúa también liberando la producción de gonadotrofina, interviene en los procesos de maduración gonadal, y estimula el desarrollo de los caracteres sexuales secundarios del pez. En la fase final de la maduración de los ovocitos se incrementa el nivel de GTH-I lo que estimula a las células tecales a producir la 17 20 dihidroxiprogesterona que interviene en la haploidización previa a la ovulación. En el caso de los machos, la GTH-I actúa sobre las células de Leydig iniciando la producción de 11 keto testosterona, hormona que inicia la maduración testicular vía espermatogénesis. Esta hormona está también relacionada con la manifestación de los caracteres sexuales secundarios de los machos y su producción máxima coincide con la etapa de espermiación. Los niveles plasmáticos más altos de la GTH-I se alcanzan también durante la espermiación, lo que estimula la producción de la 17 20 dihidroxiprogesterona para el control del transporte de sodio y potasio, este último requerido para mantener la inmovilidad de los espermatozoides. 7 4.- PROCESO DE ADAPTACION TECNOLÓGICA El Instituto Nacional de Pesca inició en el 2006 con recursos del proyecto SAGARPACONACYT No. 12386 en el Centro Acuícola el Zarco, Estado de México, la adaptación tecnológica para la producción de huevo de trucha arco iris fuera de estación, que consistió en la manipulación de la reproducción, aplicando pulsos de luz artificial (fotoperiodo artificial) por periodos definidos en diferentes épocas del año. Para la realización de este proyecto se adecuó en el Centro Acuícola un área de 83.7 m2. “sala de fotoperiodo”. En esta sala, se colocaron seis tanques circulares de 2 m de diámetro, 70 cm de altura y 2 m3 de capacidad. Cada tanque dispuso de una entrada y salida de agua independiente y de un foco de luz blanca de 38w, suspendido en el centro del tanque a una altura de 141 cm de la superficie del agua. Para la aplicación del diseño experimental se colocaron lonas blancas que independizaron los tanques. El abastecimiento de agua se derivo por gravedad de dos manantiales internos que aportaron en promedio 25 L/min. La energía que abasteció ésta sala se generó a través de la instalación y uso de equipo fotovoltaico con capacidad suficiente para auto generar la energía para la operación de la unidad (Fig.1). Fig.1.- Unidad de fotoperiodo, Centro Acuícola Zarco. 8 Durante el proceso se manejaron 79 reproductores de trucha arco iris: 60 hembras y 19 machos, con edades entre los dos y tres años. Todos los organismos fueron marcados con un microchip en la base de la aleta dorsal, para su identificación individual y posibilitar el seguimiento de su descendencia (figura 2). Fig.2.- Marcado de reproductores con microchip. El efecto de la manipulación del fotoperiodo en la maduración de reproductores de trucha arco iris y en la calidad de huevo y esperma fue evaluado de la siguiente manera: se aplicó un diseño de bloques completos al azar de 3x3, manejando tres tratamientos y tres bloques. El arreglo experimental consistió en definir como unidad experimental el tanque, agrupados en tres bloques y en donde cada bloque está representado una sola vez en todos los tratamientos. Los bloques se homogeneizaron de acuerdo al peso de los animales. Los tratamientos consistieron en: “fotoperiodo avanzado”, los animales se sometieron a 18 horas de luz y 6 horas de oscuridad 18L:6O (día largo) iniciando en el mes de enero y finalizando en el mes de marzo, seguido de cambio abrupto a un fotoperiodo de días cortos de 6 horas de luz y 18 horas de oscuridad 6L:18O hasta el desove. El siguiente tratamiento “fotoperiodo no avanzado” consistió en aplicar fotoperiodo de 18L:6O (día largo) por 5 meses, desde enero hasta junio seguido de un cambio abrupto a un fotoperiodo de días cortos de 6L:18O hasta el desove. En el tercer tratamiento llamado “fotoperiodo natural”, los organismos se mantuvieron bajo un ciclo anual de fotoperiodo natural. También se verificó su efecto en la calidad de los gametos. Siguiendo la metodología presentada en el diagrama número 1. 9 Diagrama 1.- Evaluación de calidad de los gametos 5.- RESULTADOS DEL PROCESO DE ADAPTACIÓN TECNOLÓGICA 5.1.- Efecto de fotoperiodo en maduración hembras Los reproductores expuestos a fotoperiodo avanzado (18L:6O) mostraron diferencia estadísticamente significativa en los días de ovulación con respecto a los otros dos tratamientos experimentales (tabla 1). Tabla 1.- Media y desviación estándar de días de desove en los grupos sometidos a fotoperiodo. Media de Número de Desviación Fotoperiodo días de tanques estándar desove AvanzadoA 3 191 1.8 No avanzadoB B Natural 3 257 5.6 3 296 26.5 Entre los tratamientos que no comparten mismas letras presentan la diferencia estadísticamente significativa (Tukey HSD, p<0.05) 10 Para efectos de comparación se determinó una fecha arbitraria (1 de enero) a partir de la cual se inició el conteo de número de días trascurridos hasta el desove. Se observó que el grupo sometido a fotoperiodo avanzado adelantó el periodo de desove 105 días con respecto al grupo sometido a fotoperiodo natural. Entre los otros dos tratamientos de fotoperiodos pese a que se presentó diferencia entre los días de ovulación ésta no fue significativa (p>0.05). 5.2.- Fecundidad relativa Para obtener el valor de la fecundidad relativa se dividió la fecundidad total entre el peso individual de las hembras. La mayor fecundidad relativa lo presentó el tratamiento de fotoperiodo avanzado, los valores de fecundidad relativa fueron muy similares entre los tratamientos natural y no avanzado no se detectó diferencia significativa (p>0.05) entre los grupos experimentales (tabla 2). Tabla 2.- Media y desviación estándar en fecundidad relativa en tres grupos de tratamiento de fotoperiodo Fotoperiodo Número Media de fecundidad Desviación de relativa estándar tanques (óvulos/kg) Avanzado 3 1701.5 274.6 Natural 3 1329.7 204.8 No Avanzado 3 1327.1 46.7 5.3.- Tamaño de huevo Los valores de diámetro de huevo post-hidratado se muestran en la tabla 3, los registros más altos los obtuvo el tratamiento perteneciente a fotoperiodo natural y los registros menores pertenecieron al tratamiento de fotoperiodo avanzado. El resultado del análisis de varianza para diámetro de huevo se muestran en la tabla 3 se detectó diferencia estadísticamente significativa (p<0.05) entre los tratamientos. Es importante enfatizar que algunos reportes indican que el diámetro del óvulo puede influir en la sobrevivencia en sus siguientes etapas de desarrollo. Tabla 3.- Valores de diámetro de óvulo post-hidratado en los tres tratamientos Tratamiento Número de Diámetro de huevo Desviación tanques (mm) estándar A Avanzado 3 5.1 0.04 Natural AB 3 5.7 0.28 No AvanzadoB 3 5.5 0.19 Entre los tratamientos que no comparten mismas letras presentan la diferencia estadísticamente significativa (Tukey HSD, p<0.05) 5.4.- Número de espermatozoides/ml El número de espermatozoides/ml de los tres tratamientos fueron registrados en un intervalo entre 0.48 y 19.8 x 107 espermatozoides/ml. No se detectó diferencia estadísticamente significativa entre los tratamientos (p <0.05) (tabla 4). 11 Tabla 4.-. Análisis de varianza para número de espermatozoides/ml de los tres tratamientos experimentales. Fotoperiodo Menor 95% Mayor 95% Media Número de espermatozoides/ml x107 AvanzadoA 0.48 5.85 5.87 Natural A 0.6 19.8 6.05 No Avanzado A 0.73 8.58 5.91 Entre los tratamientos que no comparten mismas letras presentan diferencia estadísticamente significativa (Tukey HSD, p<0.05) 5.5.- Mortalidad huevo verde a huevo a oculado La comparación de medias del porcentaje de mortalidad de huevo verde hasta su oculación se muestran en la tabla 5, no se detectó diferencia significativa (p <0.05) entre los tratamientos. Tabla 5. Porcentaje de mortalidad de hueve verde a huevo oculado entre tratamientos. Fotoperiodo Número de Media Desviación. Menor Mayor tanques Mortalidad Estándar 95% 95% % Avanzado 3 28.4 4.9 13.9 42.9 Natural 3 27.0 5.9 2.5 31.5 No Avanzado 3 29.4 5.1 17.9 46.9 5.6.- Mortalidad huevo oculado a cría La comparación de medias del porcentaje de mortalidad de huevo oculado a cría, mostró el mayor porcentaje de mortalidad en el tratamiento expuesto a fotoperiodo natural tabla 6, no obstante esta diferencia no fue estadísticamente significativa. Tabla 6.- Porcentaje de Mortalidad de hueve oculado a cría entre tratamientos. Fotoperiodo Avanzado Natural No Avanzado Número de tanques 3 3 3 Media Mortalidad % 24,0 29,5 19,2 Desviación. Estándar Menor 95% Mayor 95% 9,9 10,9 8,9 2,6 2,9 7,4 50,7 56,2 45,9 5.7.- Etapa de replicación Centro Acuícola el Zarco Se repitió el mismo procedimiento con similares condiciones experimentales pero diferente lote de reproductores. Durante el proceso se realizó la capacitación a los técnicos del Centro Acuícola el Zarco del manejo de la unidad de fotoperiodo. Como consecuencia éste centro se convirtió en el primer usuario de la técnica. Resultado de las etapas de adaptación y replicación interna se logró entregar al Centro Acuícola 1, 003, 656 huevos para su manejo y posterior 12 comercialización, además de contar con la primera unidad demostrativa. También se elaboró y proporciono un manual de procedimientos para su uso interno. Actualmente los productos del manejo de la unidad de fotoperiodo forman parte de sus metas de producción. En el 2012 se concluyó la etapa de experimentación de una nueva sala para manipular el fotoperiodo. Esta sala, no requiere estructura de oscurecimiento para su funcionamiento, en este momento se esta iniciando la etapa de replicación con los técnicos del Centro Acuícola. 5.8.-Proceso de validación externa en unidad trutícola “Tatakany” La siguiente etapa del proceso consistió en evaluar la replicabilidad de los resultados conseguidos en el Centro Acuícola el Zarco bajo condiciones ambientales diferentes. Para esta etapa se seleccionó la granja Unidad trutícola “Tatakany” municipio de Jilotzingo, Estado de México (fig. 3). En esta unidad se practicaba la engorda de trucha arco iris como principal actividad y la reproducción en forma incipiente por lo que cuenta con instalaciones rústicas para el manejo de huevo y cría de trucha arco iris. Fig. 3.- Unidad truticola, Tatakany. 13 La unidad de fotoperiodo se adaptó en un estanque de 10.6 m de largo, 2.16 m de ancho, y .90 m de profundidad. Para manipular la luz se colocó en el estanque una estructura de madera cubierta con una lona y un plástico negro. La luz fue proporcionada al estanque por medio de tres lámparas de 42 Watts, ubicadas a lo largo de todo el estanque (fig. 4). Fig. 4.- Estructura de oscurecimiento y sistema de iluminación Tatakany. El fotoperiodo estuvo regulado por medio de sistemas automáticos de interrupción programado de encendido y apagado de lámparas, en el lugar se utilizaron dos fuentes alternativas de energía, la fotovoltaica y la hídrica, ésta última se generó por el caudal de agua que abastece a la granja para mover una turbina y generar la electricidad utilizando una minihidráulica (fig. 5). El abastecimiento de agua se obtuvo de un manantial que proporcionó un flujo promedio de 17 L/seg. El agua fue conducida por gravedad por medio de un canal de abastecimiento a cielo abierto hasta un sedimentador y posteriormente canalizada por una tubería de 5 pulgadas de diámetro hasta su llegada a la estación minihidráulica. 14 Fig. 5.- Minihidráulica y celdas fotovoltaicas colocadas en la unidad trutícola “Tatakany” El lote experimental que se colocó dentro de la unidad de fotoperiodo estuvo constituido por 48 reproductores con un peso promedio de 2.5 kg (27 hembras y 21 machos), se marcaron por medio de un microchip para poder llevar su registro individualizado (fig. 6). Fig. 6.- Lote de organismos En la unidad de fotoperiodo se aplicó un protocolo de iluminación de 18 horas de luz y 6 horas de oscuridad (18L:6O) día largo por dos meses, desde el 20 de Enero de 2010;seguido de un cambio abrupto a un fotoperiodo de días cortos de 6 horas de luz y 18 horas de oscuridad (6L:18O) hasta el desove dicho cambio se realizó el 20 de Marzo de 2010. Esta información se contrastó con la 15 obtenida al desovar los organismos en su periodo natural. En esta ocasión solo se valoró fecundidad absoluta, relativa, diámetro de huevo y número de espermatozoides, debido a las limitaciones de espacio en la sala de incubación, los productos obtenidos en la unidad trutícola “Tatakany” por la aplicación de la técnica de fotoperiodo se aprecian en la fig. 7. Fig. 7.- Productos obtenidos 5.9.- Resultados de validación externa Los reproductores expuestos a fotoperiodo adelantado (18L:6O) mostraron diferencia estadísticamente significativa en los días de ovulación con respecto a los reproductores expuestos a fotoperiodo natural (tabla 7). Tabla 7.- Media y desviación estándar de días de desove de los grupos sometidos a fotoperiodo. Media de Número de Desviación Fotoperiodo días de tanques estándar desove Con carpa de 1 181 13.8 oscurecimiento A Naturalb 1 300 36.5 Entre los tratamientos que no comparten mismas letras presentan la diferencia estadísticamente significativa (Tukey HSD, p<0.05) No se detectó diferencia estadísticamente significativa (p<0.05), en lo que respecta a la fecundidad relativa por hembra (tabla 8), pero es importante acotar que este valor fue mayor en esta unidad que en el Centro Acuícola el Zarco. Los lotes de reproductores proceden de diferente origen y la cantidad de óvulos que produce una hembra es una característica heredable, por lo que si el objetivo es vender crías, será importante seguir monitoreando este lote. 16 Tabla 8.- Media y desviación estándar en fecundidad relativa en los dos tratamiento de fotoperiodo Fotoperiodo No. de Media de fecundidad Desviación tanques relativa estándar (ovulos/kg) Con carpa de 1 2,444 174.6 A oscurecimiento Natural 1 2,398 104.8 Los resultados del análisis de varianza para diámetro de huevo se muestran en la tabla 9, no se detectó diferencia estadísticamente significativa (p<0.05) entre los tratamientos. Tabla 9.- Valores de diámetro de óvulo post-hidratado en los tres tratamientos Tratamiento No. de Diámetro de Desviación tanques huevo (mm) estándar Con carpa de 3 5.1 0.04 oscurecimiento A Natural B 3 5.7 0.28 Entre los tratamientos que no comparten mismas letras presentan la diferencia estadísticamente significativa (Tukey HSD, p<0.05) 5.10.- Situación actual en “Tatakany” Como resultado de la aplicación de la técnica, se obtuvieron aproximadamente 55 000 crías fuera de estación para su comercialización en el primer ciclo de producción, lo anterior puede incrementarse ya que los reproductores con ésta técnica pueden desovar dos veces al año. El manejo de la unidad de fotoperiodo ya se realiza con éxito por el productor, además está abastece de cría a nivel regional y así mismo se autoabastece para los procesos de engorda que lleva a cabo en su granja. Actualmente se encuentra preparando su infraestructura y adquiriendo equipos para dedicarse solo a la reproducción, también recibe la asesoría por parte del INAPESCA para incrementar sus lotes de reproductores y cuidar la calidad genética. Con la información generada en las etapas de adaptación, replicamiento y validación tecnológica se preparó la integración del paquete tecnológico que incluye mapeo de procedimientos, características de la infraestructura, características y montajes de equipos, materiales, proveedores, actividades de transferencia tecnológica y actividades de capacitación requerida. Cada unidad cuenta con un manual de procedimiento para su apoyo. 6.- TRANSFERENCIA TECNOLÓGICA 6.1.- Centro Acuícola “Guachochi”, Chihuahua La sala de fotoperiodo comprende un área de 48 m2 (6 ancho x 8 largo) construida con blocs, techada con una estructura de madera cubierta con lámina galvanizada. En la sala se ubican 4 tinas circulares de fibra de vidrio de 1.80 m de diámetro y 0.90 m de altura. A cada tina se le colocó un foco de 30 Watts a una altura de 0.70 m. Los focos están controlados por relojes electrónicos con temporizadores independientes. La energía para el manejo de la sala se 17 generó a través de la instalación y uso de equipo fotovoltaico con capacidad suficiente para auto generar la energía y poner en operación la sala. (Fig. 8). El agua que abastece al Centro Acuícola proviene de dos manantiales que nacen dentro de sus instalaciones, sin embargo, su utilización requiere del bombeo continuo a un tanque elevado. Desafortunadamente las contingencias ambientales han impedido concluir con el suficiente número de animales para generar conclusiones, no obstante el avance y retraso de la maduración de las truchas sobrevivientes justifican continuar con su valoración. Fig.8.- Sala de fotoperiodo Centro Acuícola Guachochi, Chihuahua. En la tabla 10 se resumen los resultados obtenidos en las unidades trutícolas que han incorporado la técnica de fotoperiodo en su ciclo productivo. Tabla 10.-.- Evaluación del proceso de fotoperiodo Centro Acuícola El Zarco Estado de México AVANCE DE LA MADURACIÓN CON RESPECTO AL FOTOPERIODO NATURAL Adelanto de 3 meses Unidad Truticola Tatakany Estado de México Adelanto de 3 meses Centro Acuícola Guachochi Chihuahua Adelanto de 2 meses (presencia de contingencias ambientales) UNIDAD TRUTICOLA UBICACIÓN 18 6.2.- Granja “La trucha mágica de Santa Catarina”, Hidalgo. Se implementó una sala de fotoperiodo en la Unidad Trutícola Santa Catarina Municipio Acaxochitlán, Edo de Hidalgo. Esta Unidad proveerá de huevo y cría al estado, en donde hasta ahora no operan granjas dedicadas a la reproducción. La unidad de fotoperiodo cuenta con una superficie de 110 m2, en donde se colocaron seis tanques circulares de 2 m de diámetro, 70 cm de altura y 2 m3 de capacidad. Cada tanque cuenta una entrada y salida de agua independiente y un foco de luz blanca de 38 w, suspendido en el centro del tanque a una altura de 150 cm de la superficie del agua. El abastecimiento de agua se derivo por gravedad de un manantial externo que aportaron en promedio 30 L/seg. La unidad cuenta con energía eléctrica pero se abastecerá de la energía generada por el manejo de una minihidráulica. Se encuentran habilitadas dos tinas con 30 reproductores en este caso se ajustará el desove cuando la temperatura se encuentre en condiciones óptimas (fig. 9). Fig. 9.- Unidad de Fotoperiodo y sala de incubación Santa Catarina, Municipio de Acaxotitlán, Hidalgo. 6.3.- Centro Acuícola “Pucuato”, Michoacán Este centro lo están operando en corresponsabilidad el INAPESCA y la asociación trutícola “Ecotruchas”. Esta última instalará con recursos del Programa de apoyo a la inversión en equipamiento e infraestructura “Componente de recursos genéticos subsistema acuático la sala de fotoperiodo. Esta sala constará de tres tanques de cemento de 6m de diámetro. Debido a que la temperatura del agua se encuentra fuera del rango óptimo para la reproducción se incluirá en la sala el manejo de un sistema de recirculación, que permitirá bajar la temperatura 19 al rango óptimo de reproducción (menor de 130C). Ya se cuenta con infraestructura para realizar la incubación y el alevinaje (fig.10). Fig. 10.- Centro Acuícola Pucuato 6.4.- Granja “Truchas los Cedros”, Municipio de Oaxaca Actualmente en colaboración con el INAPESCA, se está realizando la primera etapa de la transferencia tecnológica de la técnica para modificar la época de maduración de trucha arcoiris con recursos federales del “Proyecto Trópico Húmedo”. Para habilitar la unidad de fotoperiodo se ocupará un estanque circular de concreto de 21 m3 al que se le colocará una estructura de oscurecimiento. También se contará con una sala de incubación y alevinaje en la cual se instalarán 6 canaletas de fibra de vidrio y 2 incubadoras verticales tipo californianas. El agua para el abastecimiento de la sala de incubación se derivará de un rio que pasa colindante a la unidad de producción, previamente sedimentada (Fig.11). Los reproductores serán adquiridos en el Estado de Puebla. UNIDAD DE FOTOPERIODO 20 Fig. 11.- Granja “Trucha los cedros 6.5.- Granja “Agua de los fresnos” Esta granja se benefició con recursos del Programa de apoyo a la inversión en equipamiento e infraestructura “Componente de Recursos Genéticos Subsistema Acuático” y se encuentra concluyendo la unidad de fotoperiodo que consiste en colocar una estructura de oscurecimiento a dos estanques tipo raceways y su sala de incubación y alevinaje. En esta unidad de producción, ya se maneja la reproducción en la temporada natural de desove, hasta ahora su producción es en su mayoría para autoconsumo. El agua para fotoperiodo se derivará de un río que se encuentra paralelo a su granja. Concluida esta etapa el INAPESCA proporcionará el acompañamiento técnico (fig. 12). Fig. 12.- Granja “Agua de los fresnos” 21 En la tabla 11 se muestra el grado de avance de la transferencia de tecnología de fotoperiodo en los diferentes estados de la república. Tabla11 - Unidades trutícolas donde se lleva a cabo la aplicación de fotoperiodo. UNIDAD TRUTICOLA UBICACIÓN Centro Acuícola El Zarco Unidad Truticola Tatakany Estado de México Estado de México Trucha Mágica de Santa Catarina Hidalgo Centro Acuícola Guachochi Chihuahua Truchas Los Cedros Oaxaca Agua de Los Fresnos Estado de México Centro Acuícola Pucuato Michoacán ESTATUS DE APLICACIÓN DE TECNOLOGÍA TIPO DE ASESORIA En operación En operación (solo asesoría espaciada) Habilitada (reproductores y toques de luz aplicados) Habilitada Infraestructura en construcción Infraestructura en construcción Infraestructura en construcción En preparación de lotes de remplazo Acompañamiento técnico. Problemas con la infraestructura Acompañamiento Técnico Acompañamiento Técnico Acompañamiento Técnico 7.- CONCLUSIONES Con base en los objetivos planteados y en los resultados obtenidos, se concluyó lo siguiente: Aplicar el fotoperiodo de días largos seguido del fotoperiodo de días cortos avanza la maduración de machos y hembras de trucha arco iris. La fecundidad relativa no es afectada por la aplicación de la técnica para la manipulación del fotoperiodo. Existió una disminución del diámetro de óvulo por efecto del fotoperiodo avanzado con respecto al fotoperiodo natural. No obstante, los diámetros de huevo se encontraron en el intervalo aceptable para su comercialización. El número de espermatozoides evaluados no se vieron afectados por la aplicación de fotoperiodo. 22 Los organismos bajo el tratamiento adelantado presentaron una concentración de espermatozoides más baja que la de los organismos del tratamiento no adelantado y natural. El valor de pH aumenta conforme el tiempo de maduración es más largo. Aunque el diámetro de huevo se vio afectado por la aplicación de fotoperiodo avanzado, esto no afectó el porcentaje de eclosión. El uso de tecnologías limpias representa alternativas viables que permiten un manejo sustentable de los recursos. La transferencia tecnológica es proceso 100% adoptable siempre y cuando la granja tenga las condiciones necesarias, en caso de no contar con ello se requiere el acompañamiento para su replicación. 8.- BIBLIOGRAFIA 1. Allison, L.N. 1951. Delays of spawning of eastern brook trout by means of artificially prolonged light intervals. Progr. Fish Cult. 111-116 2. Alvarino, J., Randall, C.F., Bromage, N. 1993. Pattern of melatonin secretion in the rainbow trout exposed to light pulses of different duration and intensity. Actas IV. Congr. Nac. Acuicult., 1991-1996. 3. Billard, R., Breton, B., Fostier, A., Jalabert, B and Weil, C. 1978. Endocrine control of the teleost reproductive cycle and its relation to external factors: salmonid and cyprinid models. In: P.J. Gaillard and H.H. Boer (Editors), comparative Endocrinology. Elsevier North Hollnd Biomedical Press. Amsterdam. 37-48 pp. 4. Bon, E., Breton, B., Govoroun, M.S., Le Menn, F. 1999. 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Este trabajo surge de la necesidad del sector truticola por mantener una producción constante de huevo y cría de trucha arco iris, ya que la producción interna en México es insuficiente y debido a que la reproducción de la trucha arcoíris es estacional se origina una dependencia en la importación de huevo del extranjero. Debido a esto y tomando en cuenta que en nuestro país se cuenta con regiones en las cuales existen las condiciones climáticas favorables como lo es la temperatura para llevar a cabo la reproducción de dicha especie, se planteó este proyecto, el cual mediante la manipulación de la luz se induce a la maduración de la trucha arcoíris en épocas del año en donde existe un mayor desabasto de dicho producto y de esta manera se aprovechan las condiciones climáticas que nuestro país ofrece. La aplicación de esta biotecnología nos ha dado resultados favorables a lo largo de todo este proceso, lo que representa alternativas de solución a las demandas del sector trutícola, permite la obtención de huevo en dos ciclos al año, el aprovechamiento del recurso hídrico así como la optimización de la infraestructura de las unidades de producción acuícola. Así mismo se ha incorporado el uso de energías limpias como lo es las fotoceldas y minihidrahúlica para generar la energía necesaria para llevar a cabo estos procesos lo que ha permitido no solo obtener una producción fuera de la época natural de desove si no también crear conciencia en el uso de estas tecnologías y por lo tanto obtener un desarrollo sustentable de la trucha arcoíris. 10.- Especificar que el trabajo no corresponde ni es parte de alguna tesis para obtener algún grado académico o de instructivos y/o manuales. El presente trabajo forma parte de un proyecto que se le ha dado continuidad a lo largo de varios años, actualmente se encuentra en la etapa de trasferencia tecnológica y en algunas unidades de producción en la etapa de adopción de esta tecnología. Cabe resaltar que este trabajo no corresponde ni es parte de ninguna tesis para obtener algún grado académico o de instructivos y/o manuales. 26 11.- SINTESIS La reproducción de la trucha arco iris se lleva a cabo únicamente en los meses de octubre a febrero, lo que ocasiona problemas de desabasto en los meses restantes del año, debido a esta situación el sector trutícola ha manifestado la necesidad de incorporar tecnologías que propicien una continuidad en el abasto de huevo y cría. Como parte de estas demandas, el Instituto Nacional de Pesca a través de la Dirección General Adjunta de Investigación en Acuacultura puso en marcha un proyecto de investigación para la modificación de la época de desove de trucha arcoíris a través de la aplicación de la técnica de fotoperiodo, al cual se le ha dando continuidad hasta la fecha. Así mismo con dicho proyecto se ha planteado la incorporación de tecnologías limpias como lo es el aprovechamiento de la energía solar e hídrica, para generar la energía necesaria y así obtener un desarrollo sustentable en la producción de trucha arcoíris. El presente trabajo muestra los logros obtenidos a lo largo de todo este proceso y la manera en la cual se han planteado alternativas de solución a dicha problemática, ha sido conformada por varias etapas, las cuales involucran la adaptación de la tecnología, validación, transferencia tecnológica y adopción. Estos procesos se han llevado a cabo en diferentes Unidades de Producción, ubicadas en distintos estados de la República Mexicana, como son Estado de México, Hidalgo, Michoacán, Oaxaca y Chihuahua. La primera etapa de adaptación se llevo a cabo en el Centro Acuícola El Zarco, Estado de México obteniendo resultados exitosos debido a que se logró el adelanto de la época de desove, por lo que posteriormente se decidió validar esta biotecnología. En una primera etapa se llevo a cabo en este mismo Centro Acuícola y posteriormente en la Unidad Truticola Tatakany, Estado de México. Cabe destacar que esta validación se llevo a cabo en condiciones de producción, obteniendo resultados positivos. En una segunda etapa se llevo a cabo la transferencia de tecnología en esta misma Unidad Truticola así como en las granjas de los estados de Oaxaca, Chihuahua y Michoacán, dichas granjas se encuentran en diferentes estatus de aplicación de dicha tecnología. La tercera etapa que comprende la adopción de la tecnología se lleva a cabo actualmente en la unidad trutícola Tatakany, Estado de México, en la cual el productor realiza la implementación y manejo de la unidad de fotoperiodo con la profesionalización que le fue brindada por parte del INAPESCA. El desarrollo de este trabajo ha permitido poner al alcance de los productores un aprovechamiento sustentable de los recursos naturales y al mismo tiempo alternativas que permiten satisfacer las demandas de este sector, generando con esto un aumento en la producción de trucha lo que permitirá mayor competencia en el mercado e impulsar el desarrollo del sector truticola. 27