metodo para estimular el crecimiento de plantas usando gaba.

k
OFICINA ESPAÑOLA DE
PATENTES Y MARCAS
19
k
2 173 952
kInt. Cl. : A01N 33/08
11 Número de publicación:
7
51
ESPAÑA
k
A01N 37/44
TRADUCCION DE PATENTE EUROPEA
12
kNúmero de solicitud europea: 95911852.2
kFecha de presentación: 21.02.1995
kNúmero de publicación de la solicitud: 0 746 203
kFecha de publicación de la solicitud: 11.12.1996
T3
86
86
87
87
k
54 Tı́tulo: Método para estimular el crecimiento de plantas usando GABA.
k
73 Titular/es:
k
72 Inventor/es: Kinnersley, Alan M.
k
74 Agente: Elzaburu Márquez, Alberto
30 Prioridad: 23.02.1994 US 200218
Emerald BioAgriculture Corporation
Suite B, 3125 Sovereign Drive
Lansing, MI 48911, US
45 Fecha de la publicación de la mención BOPI:
01.11.2002
45 Fecha de la publicación del folleto de patente:
ES 2 173 952 T3
01.11.2002
Aviso:
k
k
k
En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicación en el Boletı́n europeo de patentes,
de la mención de concesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina
Europea de Patentes a la patente concedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar
motivada; sólo se considerará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de
oposición (art. 99.1 del Convenio sobre concesión de Patentes Europeas).
Venta de fascı́culos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, 1 – 28036 Madrid
ES 2 173 952 T3
DESCRIPCION
Método para estimular el crecimiento de plantas usando GABA.
5
10
Campo de la invención
La presente invención se refiere a métodos para estimular el crecimiento de las plantas tratando las
plantas con compuestos orgánicos. En particular, la presente invención se refiere a aquellos métodos que
dependen de la aplicación de compuestos orgánicos incluyendo GABA al follaje de la planta, tallos y/o
raı́ces.
Antecedentes de la invención
15
20
25
Es bien conocido que los ácidos orgánicos son útiles para estimular el crecimiento de las plantas. Se
ha teorizado que mucha de la acción de los fertilizantes orgánicos, tales como el estiércol, se debe a la
presencia de ácidos orgánicos. Estos ácidos orgánicos incluyen aquellos tales como los ácidos del ciclo del
ácido cı́trico o aminoácidos.
GABA (ácido γ-aminobutı́rico), ácido 4-aminobutı́rico, es un aminoácido no proteico ubı́cuo que se
encuentra en plantas, bacterias y animales. Aunque la presencia de GABA en las plantas se descubrió
hace más de cuarenta años, su función permanece desconocida. Como ha sido señalado por Satya, Naryan
y Nair (Review Article No. 51, Phytochemistry 29:367-375, 1990), la única función conocida del GABA
es como neurotransmisor inhibitorio en el sistema nervioso animal. Comentando las posibles funciones
del GABA en las plantas, Chung y otros, (Plant Physiology 99:659-664, 1992) han concluido que “un
compuesto de tal abundancia y ubicuidad debe cumplir un papel fisiológico significativo”. Santos y otros
(J. Plant Physiol.,142:74-80 (1993)) describen una influencia negativa del GABA en la formación de callo
embriogénico y la sı́ntesis de poliamina en maı́z. Ası́, aunque se ha sugerido un importante papel para el
GABA, la naturaleza de este papel ha permanecido como un misterio.
30
Sumario de la invención
35
Según la presente invención, se ha descubierto ahora que el GABA actúa como un promotor del crecimiento vegetal y tiene otras ventajas cuando se aplica para cultivar plantas. La presente invención en
general proporciona un proceso para aumentar el crecimiento y productividad vegetales que comprende
el tratamiento de raı́ces, tallos y/o follaje de la planta con ácido γ-aminobutı́rico (GABA).
40
45
En una realización preferida de la presente invención, la planta se trata además con una fuente
de carbono fácilmente metabolizada junto con el ácido γ-aminobutı́rico (GABA). Las fuentes de carbono fácilmente metabolizadas preferidas se seleccionan del grupo que consiste en ácidos orgánicos,
aminoácidos, carbohidratos sencillos y mezclas de ácidos orgánicos, aminoácidos y carbohidratos sencillos. Los ácidos orgánicos preferidos se seleccionan del grupo que consiste en ácido cı́trico, ácido málico,
ácido succı́nico y ácido fumárico; el aminoácido es preferiblemente ácido glutámico; y los carbohidratos
sencillos se seleccionan preferiblemente del grupo que consiste en sacarosa y glucosa. Además se prefiere
que el ácido succı́nico se seleccione del grupo que consiste en ácido succı́nico sintético y ácido succı́nico
obtenido por fermentación. Se prefiere una mezcla de ácido succı́nico sintético y GABA antes que una
mezcla de ácido succı́nico obtenido por fermentación y ácido GABA porque, generalmente cuesta menos
y funciona mejor.
55
En otra realización preferida del proceso de la presente invención, las raı́ces, tallos y follaje de la
planta se tratan con una disolución que contiene GABA en el intervalo de aproximadamente 2,5 % a
aproximadamente 50 % y ácido succı́nico en el intervalo de aproximadamente 97,5 % a aproximadamente
50 % con un medio portador apropiado. También se prefiere que la planta sea tratada con una disolución
que contiene ácido γ-aminobutı́rico en el intervalo de aproximadamente 1 ppm a aproximadamente 5.000
ppm en un medio portador apropiado. Además, en una realización de la invención, la planta se cultiva
hidropónicamente.
60
La presente invención también proporciona un proceso para aumentar el crecimiento y productividad
vegetales que comprende tratar las raı́ces de la planta con GABA. Además, la presente invención también
proporciona un proceso para aumentar la proporción de formación de raı́z en una planta que comprende
tratar las raı́ces, tallos y/o follaje de la planta con GABA.
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2
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Descripción detallada de la invención
5
En la práctica de la presente invención, una disolución de GABA, con o sin otras fuentes de carbono,
se aplica directamente a las raı́ces, tallos y/o follaje de la planta. La aplicación de GABA a la planta
estimula el crecimiento y la productividad de tal forma que se pueden apreciar un aumento de los rendimientos en plantas de cosecha comercialmente importantes. Además, la aplicación de GABA aumenta
la proporción de formación de raı́z, permitiendo ası́ a las plantas utilizar mejor los nutrientes disponibles
en el suelo.
15
Sin que la teorı́a lo confirme, se cree que el GABA hace que las plantas crezcan si las plantas están
en condiciones de crecer. La presencia de compuestos de carbono fácilmente metabolizables, tales como
ácidos orgánicos del ciclo del ácido cı́trico, aminoácidos y/o carbohidratos sencillos, sitúa a las plantas
en condiciones de crecer. Ası́, aunque el GABA actúa sin la presencia de aquellas fuentes de carbono
fácilmente metabolizables, la presencia de tales fuentes tiene un efecto sinérgico sobre la capacidad del
GABA para aumentar el crecimiento vegetal.
20
Por ejemplo, el GABA aplicado con ácido succı́nico actúa mejor que la aplicación de ácido succı́nico
o GABA solos. También se ha notado que el GABA actúa mejor en una mezcla con ácido succı́nico puro
que en una mezcla con ácido succı́nico obtenido por fermentación, como se describe en la Patente de
EE.UU. 5.143.833 para Datta y 5.168.055 para Datta y otros.
10
Las disoluciones preparadas según la presente invención se pueden aplicar de manera ventajosa a las
plantas por cualquiera de varios medios. Ası́, las disoluciones pueden aplicarse mediante un pulverizador
a las raı́ces, suelo y/o follaje, por ejemplo.
25
30
35
Se ha encontrado que la aplicación de GABA a las raı́ces de las plantas, tallos y/o follaje es efectiva a
concentraciones entre aproximadamente 1 ppm y aproximadamente 5.000 ppm cuando se mezcla con un
portador adecuado. Portadores adecuados incluyen agua destilada y del grifo y disoluciones fertilizantes.
Tales disoluciones como las preparadas según la presente invención son, por lo tanto, relativamente no
peligrosas para el medio ambiente. Los componentes orgánicos añadidos a la disolución de GABA son
fuentes apropiadas de alimento para las bacterias del suelo y ası́ se destruirán fácilmente si no se depositan
en las plantas.
Para facilitar una mejor comprensión de la invención, los siguientes ejemplos ilustran principalmente
ciertos detalles más especı́ficos de la misma.
Ejemplo 1
40
45
Se hicieron germinar semillas de trigo de invierno en lana de roca en contenedores de plástico GA7
(Magenta, Chicago, Illinois). En cada GA7 se colocó un cubo de lana de roca de 16 cm2 con 9 semillas de
trigo y 50 ml de agua del grifo o de una disolución de agua del grifo que contenı́a 500 ppm de GABA. Hubo
4 réplicas de GA7 por cada tratamiento. Los contenedores de GA7 se mantuvieron bajo luz continua y
cuando las disoluciones habı́an sido utilizadas por las plantas cultivadas se reemplazaban con 50 ml de
agua o disolución de GABA. Después de 2 semanas las plantas en crecimiento se recolectaron y secaron
en un horno. Se juntaron las 9 plantas de cada GA7 y se determinaron sus pesos en seco, los resultados
se muestran más abajo en la Tabla 1.
TABLA 1
50
55
60
Tratamiento
Peso en seco de las plantas/mg GA7
Peso en seco medio +/- SD
Control con agua
253, 229, 320, 252
263 +/- 39
GABA 500 ppm
319, 345, 361, 362
347 +/- 20
Los resultados muestran que 500 ppm de GABA aumentaron el peso en seco de las semillas de trigo
en 32 % de media. Un test t de Student mostró que las diferencias eran significativas con una confianza
del 99 %.
3
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Ejemplo 2
5
10
La capacidad del GABA para estimular el crecimiento vegetal cuando se aplica como un tratamiento
foliar se demostró con trigo de invierno. Las plantas se cultivaron a partir de semilla en tiestos de 10
cm con vermiculita y regados con agua desionizada. Las condiciones de crecimiento se diseñaron para
asegurar que las plantas fueran incapaces de obtener suficientes nutrientes para el crecimiento a través de
las raı́ces. Después de 2 semanas las plantas de control de crecimiento (4 tiestos con 4 plantas/tiesto) se
rociaron con agua desionizada. Otros 4 tiestos de plantas se rociaron con fertilizante foliar (Solu-Spray
20-20-20 @ 0,11 kg/área, Leffingwell Chemical Company). Un tercer grupo de plantas se roció con la
disolución fertilizante que contenı́a 250 ppm de GABA. Las plantas se recolectaron 9 dı́as después de
realizar los tratamientos foliares, se determinó el peso combinado de las cuatro plantas de cada tiesto.
Los resultados en la Tabla 2 más abajo muestran el peso en fresco medio +/- la desviación tı́pica de los
4 tiestos de cada tratamiento:
TABLA 2
15
Tratamiento
Peso en fresco medio (g) +/- SD
% Cambio respeto al Control
Control
2,26 +/- 0,85
0
Fertilizante
2,80 +/- 0,32
24
Fertilizante + GABA
4,70 +/- 0,38
108
20
25
30
Los resultados muestran que las plantas a las que se ha dado una aplicación foliar del fertilizante
tienen, de media, un peso en fresco 24 % mayor que las plantas que no recibı́an nutrientes adicionales.
Sin embargo las plantas a las que se dio ambos, el fertilizante y el GABA tenı́an más de dos veces el peso
en fresco de las plantas de control.
Ejemplo 3
35
40
Rábanos de Daikon retoñando (Park Seeds, Greensboro, N. C.) se cultivaron en germinadores (Park
Seeds). Los plantones se hicieron germinar en bandejas de plástico de 25,4 cm x 50,8 cm en toallas de
papel húmedas y se trasladaron a germinadores (200 plantones/germinador) cuando tenı́an dos dı́as. Los
germinadores contenı́an agua del grifo o GABA, 94,5 % de ácido succı́nico de calidad de fermentación
(FSA) y mezclas de GABA y FSA. Después de 5 dı́as, se midieron las longitudes de las raı́ces de los
plantones. Cada uno de los resultados de los tratamientos mostrados abajo en la Tabla 3 consistieron en
dos réplicas de germinadores que contenı́an cada uno 100 vástagos de rábano:
TABLA 3
Tratamiento
45
Longitud media de la raı́z / mm
Control
6,7
50 ppm FSA
14,0
50 ppm GABA
13,4
25 ppm FSA + 25 ppm GABA
14,5
40 ppm FSA + 10 ppm GABA
14,6
50
55
60
Los resultados muestran que tanto FSA como GABA solos hacı́an más que doble la longitud de las
raı́ces de los plantones. La mayor estimulación del crecimiento de la raı́z fue con mezclas de GABA y
FSA, el tratamiento más efectivo fue con mezclas que contenı́an más del 50 % de ácido succı́nico.
4
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Ejemplo 4
5
Se cultivo lenteja de agua (Lemma minor L.) siguiendo el procedimiento general descrito en la Patente
de EE.UU. No. 4.813.997 (Kinnersley y otros) excepto que el medio de cultivo fue fertilizante Solu-Spray
20-20-20 disuelto en agua del grifo en 1 g/l y el pH se ajustó a 5,5. Cantidades equimolares de GABA,
ácido succı́nico sintético (SA) (Sigma Chemical) y mezclas de GABA y ácido succı́nico, se añadieron a
la disolución fertilizante. Los efectos de las diferentes mezclas en el crecimiento de la lenteja de agua se
determinaron después de un perı́odo de crecimiento de 21 dı́as. Cada dato de la Tabla 4 de más abajo
muestra el peso en seco medio +/- SD de 9 cultivos réplica para cada tratamiento.
10
TABLA 4
Tratamientos
15
20
25
30
35
40
Peso en seco medio +/- SD
% Cambio respecto al Control
Control
10,2 +/- 4,7
0
GABA 5 mM
18,6 +/- 3,6
82
GABA 10 mM
21,8 +/- 5,2
114
GABA 15 mM
24,8 +/- 5,2
143
SA 5 mM
17,6 +/- 3,5
72
SA 10 mM
26,1 +/- 4,9
155
SA 15 mM
23,0 +/- 2,8
125
GABA 7,5 mM + SA 7,5 mM
29,2 +/- 3,3
186
GABA 5,0 mM + SA 10 mM
31,1 +/- 3,0
205
Los resultados anteriores muestran que tanto GABA como SA solos estimularon el crecimiento de las
plantas. Sin embargo, las mezclas de GABA y SA fueron más efectivas que cualquier ácido solo y los
resultados indican que las mezclas de los dos ácidos dan un aumento del crecimiento mayor que cualquier
ácido solo, independientemente de cuánto ácido se añada al medio. Los resultados de los tratamientos
que contienen GABA 15,0 mM (milimolar), SA 15,0 mM y GABA 5,0 mM + SA 10,0 mM se analizaron
estadı́sticamente usando un test t de Student. Este mostró que la mezcla era significativamente (t > 95 %)
más activa en aumentar el crecimiento que cualquier ácido sólo. Como los tres tratamientos contenı́an el
mismo número de moléculas (15 mM) esto demuestra una respuesta sinérgica entre GABA y SA.
45
Ejemplo 5
50
Se cultivó lenteja de agua según el Ejemplo 4 y el crecimiento de la lenteja de agua se controló
contando el número de hojas (frondas) producido en cada cultivo después de 1, 3, 4 y 7 dı́as. El dı́a 1, en
cada uno de los 3 cultivos réplica se plantó una única planta de 3 frondas. Se contó el número de frondas
producidas en los dı́as siguientes y los resultados se muestran en la Tabla 5.
55
60
5
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TABLA 5
SAa
(ppm)
5
SISAb
Dı́a
GABA
(ppm)
FSAc
Dı́a
1
3
4
7
1
3
4
7
-
-
9
24
32
64
9
25
28
62
1000
-
9
30
44
112
9
30
39
109
750
250
9
50
66
171
9
38
47
132
500
500
9
39
53
128
9
32
65
114
250
750
9
33
46
120
9
31
43
110
-
1000
9
34
46
112
9
30
41
97
10
15
20
25
30
a.
SA = ácido succı́nico
b.
SISA = ácido succı́nico sintético (Sigma)
c.
FSA = ácido succı́nico obtenido por fermentación (Michigan Biotehcnology Institute)
Los resultados muestran que la mayor estimulación del crecimiento vegetal se encontró cuando la
cantidad de ácido succı́nico en las mezclas de ácido succı́nico: GABA era mayor que 50 %. Los resultados
también muestran que las mezclas de ácido succı́nico sintético y GABA eran más activas en aumentar el
crecimiento vegetal que las mezclas comparables de ácido succı́nico obtenido por fermentación.
Ejemplo 6
35
40
45
Se cultivó lenteja de agua como en el Ejemplo 4 y se trató con ácido succı́nico sintético (Sigma) solo
y en combinación con GABA, cada uno en las cantidades que se muestran en la columna etiquetada
“Tratamiento” en las Tablas 6a y 6b. En la Tabla 6a, la columna 2 muestra el peso en seco de la lenteja
de agua recolectada después de 19 dı́as y la columna 3 muestra el cambio de peso o diferencia en mg
comparada con el control. La columna 4 muestra la relación del peso de ácido succı́nico dividido por el
cambio de peso de la columna 3.
La Tabla 6b es similar a la Tabla 6a, excepto que en la Tabla 6b el control es 950 ppm de SA; la
columna 3 muestra el cambio de peso o diferencia de la lenteja de agua por cada fila comparada con la fila
1 (SA solo) y la columna 4 muestra la relación del peso de GABA dividido por la columna 3, el cambio
de peso.
TABLA 6a
50
Tratamiento
(peso de SA)
Peso en seco -mg de
lenteja de agua
Cambio de peso-mg
comparado con el
control
Peso de SA/cambio
de peso
55
Control
10,2
-
-
1000 ppm SA
(40 mg)
20,3
10,1
3,96
950 ppm SA
(38 mg)
19,8
9,6
3,96
60
6
ES 2 173 952 T3
TABLA 6b
5
Tratamiento
(peso de SA)
Peso en seco -mg de
lenteja de agua
Cambio de peso
comparado con 950
ppm SA solo
Peso de GABA/peso
en seco de lenteja de
agua
950 ppm SA
(38 mg)
19,8
-
-
950 ppm SA +
2 mg GABA
25,0
5,2
0,38
950 mg SA +
1 mg GABA
24,1
4,3
0,23
10
15
20
25
30
35
Basándose en los resultados mostrados en las Tablas 6a y 6b, el GABA es diez veces más bioactivo
que el ácido succı́nico sintético y el GABA no estimula el crecimiento actuando como fuente de carbono.
Esto es, cuando se emplea ácido succı́nico sintético solo, se requieren 3,96 mg de ácido succı́nico sintético
para causar 1,0 mg de cambio de peso, mientras que entre 0,23 mg y 0,38 mg de GABA en una disolución
de ácido succı́nico sintético causa 1,0 mg de cambio de peso comparado con el ácido succı́nico solo.
Ası́, la presente invención proporciona un método para aumentar el crecimiento y la productividad
vegetales tratando las raı́ces, tallos y/o follaje de la planta con una cantidad efectiva de GABA. Además,
la presente invención proporciona un proceso para aumentar la proporción de formación de raı́z en una
planta.
Habiendo descrito ası́ varias realizaciones preferidas de la invención y varios de sus beneficios y ventajas, se entenderá por aquellos expertos que la descripción precedente tiene meramente el propósito
de ilustrar se pueden hacer numerosas sustituciones, reagrupamientos y modificaciones en la invención
sin salir del alcance y espı́ritu de las reivindicaciones adjuntas. Por ejemplo, los procesos descritos aquı́
pueden realizarse con la aplicación de sólidos, ası́ como lı́quidos, para el crecimiento de las plantas; entendiéndose que tales sólidos son eventualmente disueltos en agua y absorbidos por las plantas.
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REIVINDICACIONES
1. Un proceso para aumentar el crecimiento de una planta que comprende tratar la planta con ácido
γ-aminobutı́rico.
5
10
15
2. El proceso de la reivindicación 1, en el que la planta además se trata con una fuente de carbono
fácilmente metabolizada junto con el ácido γ-aminobutı́rico.
3. El proceso de la reivindicación 2, en el que la fuente de carbono fácilmente metabolizada se selecciona del grupo que consiste en ácidos orgánicos, aminoácidos, carbohidratos sencillos y mezclas de
ácidos orgánicos, aminoácidos y carbohidratos sencillos.
4. El proceso de la reivindicación 3, en el que los ácidos orgánicos se seleccionan del grupo que consiste
en ácido cı́trico, ácido málico, ácido succı́nico y ácido fumárico, los aminoácidos son ácido glutámico y
los carbohidratos sencillos se seleccionan del grupo que consiste en sacarosa y glucosa.
5. El proceso de la reivindicación 1, que además comprende tratar la planta con ácido succı́nico.
20
6. El proceso de la reivindicación 1, que además comprende tratar la planta con ácido succı́nico seleccionado del grupo que consiste en ácido succı́nico sintético y ácido succı́nico obtenido por fermentación.
7. El proceso de la reivindicación 1, que además comprende tratar a la planta con ácido succı́nico
sintético.
25
30
8. El proceso de la reivindicación 6, en el que la planta se trata con una disolución que tiene ácido
γ-aminobutı́rico en el intervalo de aproximadamente 2,5 % a aproximadamente 50 % y ácido succı́nico en
el intervalo de aproximadamente 97,5 % a aproximadamente 50 % con un medio portador adecuado.
9. El proceso de la reivindicación 1, en el que la planta se trata con una disolución que tiene ácido
γ-aminobutı́rico en el intervalo de aproximadamente 1 ppm a aproximadamente 500 ppm en un medio
portador adecuado.
10. El proceso de la reivindicación 1, en el que la planta se cultiva hidropónicamente.
35
11. El proceso de la reivindicación 1, en el que dicho tratamiento comprende tratar el follaje de la
planta con ácido γ-aminobutı́rico.
12. El proceso de la reivindicación 11, que además comprende tratar la planta con una fuente de
carbono fácilmente metabolizada junto con el ácido γ-aminobutı́rico.
40
45
50
55
13. El proceso de la reivindicación 12, en el que la fuente de carbono fácilmente metabolizada se
selecciona del grupo que consiste en ácidos orgánicos, aminoácidos, carbohidratos simples y mezclas de
ácidos orgánicos, aminoácidos y carbohidratos sencillos.
14. El proceso de la reivindicación 13, en el que los ácidos orgánicos se seleccionan del grupo que consiste en ácido cı́trico, ácido málico, ácido succı́nico y ácido fumárico, los aminoácidos son ácido glutámico
y los carbohidratos sencillos se seleccionan del grupo que consiste en sacarosa y glucosa.
15. El proceso de la reivindicación 11, que además comprende tratar a la planta con ácido succı́nico
seleccionado del grupo que consiste en ácido succı́nico sintético y ácido succı́nico obtenido por fermentación.
16. El proceso de la reivindicación 15, en el que la planta se trata con una disolución que tiene ácido
γ-aminobutı́rico en el intervalo de aproximadamente 2,5 % a aproximadamente 50 % y ácido succı́nico en
el intervalo de aproximadamente 97,5 % a aproximadamente 50 % con un medio portador adecuado.
17. El proceso de la reivindicación 11, en el que la planta se trata con una disolución que tiene ácido
γ-aminobutı́rico en el intervalo de aproximadamente 1 ppm a aproximadamente 5.000 ppm en un medio
portador adecuado.
60
18. El proceso de la reivindicación 11, en el que la planta se cultiva hidropónicamente.
19. Un proceso para aumentar la proporción de formación de raı́z en una planta, comprendiendo
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dicho proceso tratar la planta con ácido γ-aminobutı́rico.
20. El proceso de la reivindicación 19, en el que la planta además se trata con una fuente de carbono
fácilmente metabolizada junto con el ácido γ-aminobutı́rico.
5
21. El proceso de la reivindicación 20, en el que la fuente de carbono fácilmente metabolizada se
selecciona del grupo que consiste en ácidos orgánicos, aminoácidos, carbohidratos sencillos y mezclas de
ácidos orgánicos, aminoácidos y carbohidratos sencillos.
10
15
20
22. El proceso de la reivindicación 21, en el que los ácidos orgánicos se seleccionan del grupo que consiste en ácido cı́trico, ácido málico, ácido succı́nico y ácido fumárico, los aminoácidos son ácido glutámico
y los carbohidratos sencillos se seleccionan del grupo que consiste en sacarosa y glucosa.
23. El proceso de la reivindicación 19, que además comprende tratar a la planta con ácido succı́nico
seleccionado del grupo que consiste en ácido succı́nico sintético y ácido succı́nico obtenido por fermentación.
24. El proceso de la reivindicación 23, en el que la planta se trata con una disolución que tiene ácido
γ-aminobutı́rico en el intervalo de aproximadamente 2,5 % a aproximadamente 50 % y ácido succı́nico en
el intervalo de aproximadamente 97,5 % a aproximadamente 50 % con un medio portador adecuado.
25. El proceso de la reivindicación 19, en el que la planta se trata con una disolución que tiene ácido
γ-aminobutı́rico en el intervalo de aproximadamente 1 ppm a 5.000 ppm en un medio portador adecuado.
25
26. El proceso de la reivindicación 19, en el que la planta se cultiva hidropónicamente.
27. Un proceso para aumentar la proporción de crecimiento de una semilla y plántula, que comprende
aplicar ácido γ-aminobutı́rico en un portador adecuado a una semilla bajo condiciones de germinación.
30
35
40
45
50
55
60
NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art. 167.2 del Convenio de Patentes Europeas (CPE)
y a la Disposición Transitoria del RD 2424/1986, de 10 de octubre, relativo a la
aplicación del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a
España y solicitadas antes del 7-10-1992, no producirán ningún efecto en España en
la medida en que confieran protección a productos quı́micos y farmacéuticos como
tales.
Esta información no prejuzga que la patente esté o no incluı́da en la mencionada
reserva.
9