DGP de enfermedades monogénicas

 DGP de enfermedades monogénicas
1. Presentación. ¿Qué es? El diagnóstico genético preimplantacional (DGP) es un proceso de análisis genético unido a un ciclo de fecundación in vitro. El análisis de los embriones obtenidos mediante técnicas de reproducción asistida se realiza antes de que tenga lugar la implantación embrionaria y comprende: cultivo prolongado de embriones, biopsia embrionaria, el análisis genético de dichas muestras y la transferencia de embriones normales ‐ incluyendo la vitrificación o congelación de embriones normales no transferidos. Las enfermedades monogénicas son patologías genéticas hereditarias causadas por la alteración en la secuencia de ADN de un gen concreto. Estas mutaciones generalmente se transmiten en familias generación tras generación pero también es posible que aparezcan por primera vez en la descendencia de una pareja o en individuo (mutación de novo). 2. Objetivo. ¿Para qué sirve? El DGP de enfermedades monogénicas tiene como objetivo analizar una cohorte de embriones para evitar la transmisión a la descendencia de una enfermedad hereditaria presente en la familia, pareja o individuo. Esto se consigue al analizar y clasificar los embriones en aquellos que no han heredado la mutación o mutaciones en estudio, y por tanto, que no padecerán la enfermedad, y aquellos que si tienen la mutación(es) y son genéticamente anormales. Los embriones genéticamente normales serán los candidatos para ser transferidos al útero materno. 3. Indicaciones. ¿Para quién y por qué? Este tipo de DGP está indicado en parejas con antecedentes personales o familiares de riesgo elevado para enfermedades monogénicas graves como la fibrosis quística, el síndrome de X frágil, atrofia/distrofias musculares, Huntington, etc. 4. Ventajas. ¿Qué ventajas tiene sobre otros tests? La principal ventaja de este tipo de análisis genético es que permite el estudio de varios embriones in vitro para determinar los que son genéticamente normales y por tanto candidatos a transferencia uterina. De esta forma se evita que las parejas con riesgo genético elevado tengan que pasar por decisiones de interrupción del embarazo de gestaciones anormales. 5. Muestras ¿Cómo? El DGP de enfermedades monogénicas tiene dos fases: (a) test genético de validación y (b) análisis genético de embriones. 
El test de validación se realiza previo al inicio del ciclo de reproducción asistida y requiere de muestras de sangre de la pareja, y preferentemente, otros familiares relevantes para el caso. Distinguimos entre (i) test de informatividad, un análisis genético en ADN genómico para los casos de enfermedades más frecuentes como fibrosis quística, atrofia muscular espinal, Huntington, etc y (ii) desarrollo de protocolo de análisis genético en célula única, para los casos de enfermedades mendelianas poco frecuentes. 
Respecto al análisis de embriones, la muestra biológica obtenida mediante biopsia embrionaria se recoge en un microtubo con una solución de lisis o estéril, según protocolo; se procede a su envío en un contenedor frío/congelado. Una vez recibida, la muestra se mantiene a ‐20oC hasta su procesamiento mediante técnicas de genética molecular. 6. Envío. ¿Cómo, cuándo, dónde y quién? Las muestras de sangre o células bucales para los tests genéticos de validación se envían a temperatura ambiente o refrigeradas a 42oC. Las muestras de embriones se transportan congeladas en un contenedor especial frío (‐20oC) y bien protegido para evitar golpes. Se envía inmediatamente después de la biopsia. La dirección de entrega es: España: IGENOMIX, Laboratorio DGP cromosómico, Parc Cientific Universitat de Valencia, C/ Catedrático Agustín Escardino, n99, 46980 Paterna (Valencia). Latam: IGENOMIX Latam 7955 NW 12th St.Suite 415 Miami, Florida 33126 USA www.igenomix.com 7. Procesamiento de muestras y entrega de resultados. ¿Cuándo? Las pruebas de validación para los test de informatividad se realizan en un máximo 7 días hábiles. Los desarrollo de protocolo DGP o célula única requieren de aproximadamente 2 meses antes de iniciar el ciclo de reproducción asistida. Respecto al análisis embrionario, la prueba genética comprende entre 24‐48h para realizar el estudio y entregar resultados.  Metodología  Lisis celular  Amplificación PCR fluorescente multiplex  PCR primera ronda multiplex  PCR segunda ronda nested/heminested; simplex‐multiplex  Procesamiento productos PCR (restricción, minisecuenciación, etc)  Análisis automático mediante electroforesis Capilar (CE) 8. ¿Cómo comenzar? España: contacte con [email protected] Latam: info‐[email protected] 9. FAQ's Para realizar un DGP por enfermedad monogénica ¿es requisito necesario tener identificada la mutación o mutaciones causantes de la patología? Tener identificada la mutación o mutaciones es siempre conveniente. No obstante existen casos de enfermedades en los que si se dispone de un informe clínico preciso y siempre que se trate de un caso familiar (varios miembros de una misma familia están afectados, preferentemente en distintas generaciones) es posible realizar análisis indirectos para ofrecer DGP. Ejemplos de esta estrategia indirecta serían casos familiares de poliquistosis renal familiar autosómica dominante; neurofibromatosis tipo 1 familiar; síndrome de Marfan familiar, etc. Si se trata de un casos de novo ‐sin antecedentes previos en la familia‐ es imprescindible tener identificada la mutación causante de la enfermedad. Una pareja fértil con antecedentes para estas enfermedades genéticas ¿puede realizarse un DGP? Aunque el DGP va ligado a reproducción asistida, la pareja fértil puede recurrir igualmente a este análisis genético para evitar tener descendencia afectada. De esta forma se asegura una gestación de feto sin la enfermedad evitando pasar por decisiones de interrupción del embarazo. Si ya me he realizado un análisis DGP en otro centro ¿debo realizar de nuevo la prueba de validación previa al ciclo DGP? Probablemente sí vamos a tener que repetir la prueba de validación. Esto es así porque los centros utilizamos estrategias de análisis equivalentes pero no necesariamente idénticas. Por ejemplo para cada caso existen múltiples marcadores genéticos que se usan para garantizan una alta fiabilidad de diagnóstico; los marcadores escogidos por un centro u otro pueden ser distintos y la información requerirá de un nuevo test de informatividad. www.igenomix.com