programa de seguridad para trabajos con adn recombinante

PROGRAMA DE SEGURIDAD PARA TRABAJOS CON ADN RECOMBINANTE
FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES - SERVICIO DE HIGIENE Y SEGURIDAD
1.0
Introducción
Toda investigación que involucre ADN recombinante que se realice dentro de los laboratorios de
la FCEN debe cumplir estas directivas.
Este documento es una guía para asistir a la Institución, al Subcomité de Bioseguridad (SCBS),
Comité de Seguridad (CS), al Servicio de Higiene y Seguridad y al Investigador Responsable para
determinar las acciones que deben implementarse.
El propósito de estas directivas es especificar las prácticas para la construcción y manipulación de
 Moléculas de ADN recombinante
 Organismos y virus conteniendo ADN recombinante
Definiendo ADN recombinante como:
 Las moléculas que se construyen fuera de las células vivientes juntando segmentos de ADN
sintético o natural y que pueden replicarse en una célula viviente.
 Las moléculas que resultan de la replicación de las arriba descriptas.
2.0
Responsabilidades
2.1
Decano de la Facultad
El Decano de la Facultad, por recomendación del Secretario a cargo del área de Higiene y
Seguridad, fija el Programa de Seguridad para el manejo de ADN Recombinante.
2.2
Servicio de Higiene y Seguridad.
El Servicio de Higiene y Seguridad (SHyS) es el responsable de coordinar el Programa de
Seguridad para el manejo de ADN Recombinante en la Facultad.
El SHyS es responsable de revisar que las investigaciones con ADN recombinante realizadas en la
Facultad, estén de acuerdo con las directivas de bioseguridad de la FCEN y autoriza la realización
de aquellos proyectos de investigación que según la clasificación del NIH (Instituto Nacional de
Salud de EEUU) así lo requieran. Cuando se considere necesario, hará intervenir al SCBS para su
revisión y asesoramiento.
Estas revisiones deben incluir:
 Una evaluación independiente de los niveles de contención requeridos por las directivas de
la FCEN para la investigación propuesta.
 Evaluación de las instalaciones, procedimientos, prácticas y entrenamiento y pericia del
personal involucrado en la investigación con ADN recombinante.
 Notificación al Investigador Responsable de los resultados de la revisión.
 Revisión de los planes de emergencia para cubrir salpicaduras accidentales y
contaminación personal resultante de la investigación con ADN recombinante.
 Establecimiento de subcomités o Comités ad hoc cuando sea necesario para llevar a cabo
las tareas mencionadas anteriormente.
 Realización de interconsultas nacionales o internacionales cuando así se requiera.
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El SHyS es responsable de
 Realizar inspecciones periódicas para asegurar que los estándares de laboratorio sean
seguidos rigurosamente (Nota: los laboratorios son periódicamente inspeccionados como parte
del Programa de Seguridad).
 Reportar al SCBS, a Medicina Laboral y al Comité de Seguridad cualquier problema
significativo, violaciones a las directivas de la Facultad y enfermedades o accidentes
significativos relacionados a la investigación.
 Controlar que existan planes de emergencia en caso de salpicaduras accidentales y
contaminaciones personales y accidentes en el laboratorio de investigación, involucrando
investigaciones con ADN recombinante.
 Aconsejar y advertir sobre las medidas de Seguridad que deben implementarse en el
laboratorio.
 Proveer asistencia técnica a los Investigadores Responsables
2.3
Subcomité de Bioseguridad
El Subcomité de Bioseguridad (SCBS) es el órgano asesor encargado de establecer y reglamentar
las normas y políticas de trabajo seguras para la investigación con ADN recombinante en la
FCEN. El mismo está constituido por un representante del SHyS y al menos 3 miembros de la
comunidad de la FCEN con experiencia en el trabajo con ADN recombinante y agentes biológicos
de naturaleza diversa.
2.4 Investigador Responsable
El Investigador Responsable es responsable del cumplimiento de las directivas de la Facultad y de
la conducta del personal que trabaja con ADN recombinante. Como parte de esta responsabilidad,
el Investigador Responsable debe:
 Hacer una evaluación inicial del nivel requerido de contención de acuerdo con las
directivas normativas de la Facultad, para el desarrollo de las técnicas de ADN
recombinante.
 Seleccionar las prácticas microbiológica y las técnicas de laboratorio apropiadas a ser
usadas por el investigador y el personal afectado a dichas tareas .
 Suministrar el protocolo de investigación inicial y los cambios subsecuentes (por ejemplo,
cambios en la fuente de ADN o sistema vector-huésped), al SHyS para su revisión y
aprobación.
 Hacer conocer, a todo el plantel del laboratorio, los protocolos que describen el bioriesgo
potencial y las precauciones que deben tomarse.
 Instruir y entrenar al plantel del laboratorio en las prácticas y técnicas requeridas para
asegurar la seguridad y los procedimientos para tratar los accidentes.
 Supervisar el desempeño del personal del laboratorio para asegurar que se empleen las
técnicas y prácticas seguras requeridas.
 Informar cualquier problema significativo en la implementación de prácticas y
procedimientos al SHyS.
 Realizar las correcciones necesarias en condiciones o prácticas que puedan resultar en la
liberación de ADN recombinante.
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 Asegurar un mantenimiento eficaz de las medidas físicas de contención, filtros, gabinete de
seguridad biológica y proveer de calidad y en cantidad suficiente de elementos de
protección personal si así se requiere.
 Velar por el mantenimiento de las instalaciones de uso común de la FCEN
 Asegurar la identidad de los agentes biológicos que se manipulan, pureza y características
genotípicas y fenotípicas.
 Cumplir con todos los requerimientos de la reglamentación al iniciar investigaciones
que requieran aprobación del SCBS.
 Reportar cualquier problema significante, violaciones a la reglamentación vigente, o
cualquier enfermedad o accidente significante relacionado con la investigación, al SHyS, al
SCBS u otra autoridad competente, dentro de los 30 días.
 Dar a conocer dentro de su grupo de trabajo directivas del SCBS o de la FCEN..
 Estar adecuadamente entrenado en buenas técnicas microbiológicas.
 Cumplir con los procedimientos de transporte para material biológico
3.0
Aprobación de los Procedimientos
Estas políticas se aplican a todas las investigaciones con ADN recombinante. Todo trabajo que se
realice con ADN recombinante está incluido en una de las 6 categorías A, B, C, D, E y F que se
listan a continuación, (Guía del NIH sección III: Experiments covered by the NIH Guidelines).
Las siguientes categorías de experimentos que no están permitidos en la FCEN:
 Categoría A: Experimentos donde se realice la transferencia deliberada de una cualidad
de resistencia a drogas a un microorganismo patógeno, si la adquisición de la misma
puede comprometer el uso de la droga para controlar enfermedades en humanos,
medicina veterinaria o agricultura.
 Categoría B: Experimentos que involucran la clonación y/o expresión de moléculas
tóxicas o toxinas. Por ejemplo la biosíntesis de toxinas de botulismo, tétanos, difteria,
neurotoxinas
 Categoría C: Experimentos que involucran la transferencia deliberada de ADN
recombinante o ADN o ARN de ADN recombinante en uno o mas participantes
receptores humanos (terapia génica).
3.1
Documento de registro
Los Investigadores Responsables que deseen usar moléculas de ADN recombinante deben
notificarlo al SCBS presentando el formulario en el SHyS para la información y el registro.
El Investigador Responsable deberá completar el Formulario de Inscripción para Trabajar con
ADN Recombinante de acuerdo a la naturaleza de las investigaciones según:
Categoría D: Requieren aprobación del SHyS antes de realizarlos.
Categoría E: Requieren notificación al comienzo de la actividad.
Categoría F: Deben presentar el formulario al SHyS.
Experimentos de categoría D:
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Categoría D1: Experimentos que involucran la transferencia de material genético de agentes
de Riesgo 2 como sistema vector-huésped que requieren instalaciones de nivel de seguridad
BL2.
Nota: El uso de agentes de Riesgo 3 y Riesgo 4 no están permitidos en la FCEN.
Categoría D2: Experimentos en los que ADN de agentes de Riesgo 2 es clonado en un sistema
vector-huésped formado por procariotas no patogénicos o eucariotas menores, estos requieren
instalaciones de nivel de seguridad BL2.
Nota: El uso de agentes de Riesgo 3 y Riesgo 4 no están permitidos en la FCEN.
Categoría D3: Experimentos que involucran el uso de ADN o ARN de virus infecciosos o
defectivos en presencia de un virus auxiliar en sistemas de cultivos celulares.
Se debe tener especial cuidado para la evaluación de los niveles de contención de los
experimentos que puedan aumentar la patogenicidad (por ejemplo, la inserción de un encogen
anfitrión) o puedan extender la gama de huéspedes (por ejemplo, la introducción de
nuevos elementos de control) de vectores virales en condiciones que permitan una
infección productiva. En tales casos, se debe aumentar la contención física por lo menos
un nivel.
Categoría D4: Experimentos que involucran animales completos en los que el genoma del
animal ha sido alterado por introducción estable de ADN recombinante o ADN derivado, en la
línea germinal (animales transgénicos) y experimentos que involucran microorganismos
modificados por ADN recombinante probados en animales completos. Para estos últimos, con
excepción de los virus que son sólo de transmisión vertical, los experimentos no se pueden
efectuar en BL1-N, requieren un mínimo de contención BL2-N.
Categoría D5: Experimentos que involucran plantas completas en los que las plantas han sido
modificadas por ingeniería genética por métodos de ADN recombinante, si esas plantas son
usadas para otros propósitos experimentales (como respuesta al stress). Para propagar dichas
plantas o para usar esas plantas en conjunto con microorganismos o insectos que contienen
ADN recombinante, se deben realizar en condiciones de contención adecuadas ( BL2-P)
Categoría D6: Experimentos que involucran más de 10 litros de cultivo.
Categoría D7: Experimentos que involucran virus influenza. Los experimentos con virus
influenza generados por métodos recombinantes, se deben realizar en áreas de contención
correspondientes al nivel necesario para el virus de mayor porcentaje de segmentos.
Experimentos de categoría E:
Son aquellos no clasificados en las categorías A, B, C, D o F y que se realizan con niveles de
bioseguridad 1.
Categoría E1: experimentos que involucran la formación de moléculas de ADN
recombinante que no tengan mas de las 2/3 parte de cualquier virus eucariota
Categoría E2: experimentos que involucran plantas completas
Categoría E3: experimentos que involucran roedores transgénicos
Experimentos de categoría F:
Los trabajos con las siguientes moléculas de ADN recombinantes están exentas solicitar un
permiso pero deben presentar el formulario correspondiente al SHyS.
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Categoría F1: Aquellas que no están en organismos o virus.
Categoría F2: ADN no-recombinante, que consiste completamente de segmentos de ADN de
una fuente única de ADN no-cromosómica o viral
Categoría F3: ADN no-recombinante, derivado de un huésped procariótido o virus cuando
es propagado sólo en el huésped original, o cuando es transferido a otro huésped por medios
naturales
Categoría F4: ADN de un huésped eucariótido incluyendo sus cloroplastos, mitocondria o
plásmidos (pero exceptuando virus) cuando se propagan sólo en ese huésped
Categoría F5: ADN de diferentes especies que intercambian ADN por procesos fisiológicos
conocidos,
Categoría F6: ADN que no presentan un riesgo para la salud o el medio ambiente.
3.2
Entrenamiento
Los Investigadores Responsables deben presentar la planilla correspondiente a capacitaciones,
donde figure el entrenamiento de los investigadores asociados a la misma.
3.3
Cambios en la investigación aprobada
Los Investigadores Responsables que deseen modificar los procedimientos (experimentos) con
ADN recombinante, regulados por las directivas de la Facultad, son responsables de notificarlo al
SHyS, presentando un nuevo formulario de registro. Las modificaciones deben ser
aprobadas antes de implementar nuevos procedimientos, según corresponda.
4.0
Inspecciones del laboratorio
Los laboratorios en que se realicen investigaciones con ADN recombinante requieren aprobaciones
específicas según el nivel de riesgo implícito, que están reguladas por las directivas de la Facultad.
El SHyS inspecciona y audita por lo menos en forma anual, los laboratorios que trabajen con nivel
de bioseguridad 2 (NB2) .
5.0
Niveles de bioseguridad 3 y 4
Los experimentos que requieren nivel de bioseguridad 3 y 4 (NB3 y 4) se deben realizar en otro
ámbito, fuera de la FCEN.
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