Endo Agar Base DM135. Un medio selectivo para la identificación de fermentación de la lactosa en microorganismos entéricos. Contenido: Ver etiqueta del envase. Formulación* Concentración del medio: Peptona 12.4g/litro Lactosa 10.0g/litro Fosfato di-potasio 3.15g/litro Sulfito de sodio 2.0g/litro Agar 17.6g/litro pH final: 7.4 0.2 Almacenamiento y caducidad Todos los contenedores de medios de cultivo deshidratados deben permanecer herméticamente cerrados y almacenados en un lugar seco a 10 a 25°C hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del envase. Precauciones Exclusivamente para uso diagnóstico in vitro. Respetar las precauciones de seguridad y utilizar técnicas asépticas. Debe ser utilizado solo por personal de laboratorio cualificado y con experiencia. Antes del desecho, esterilizar todo el material biológico. Referirse a la hoja de seguridad del producto (disponible si se requiere o a través de la página web de MAST). LA FUCHSIN BASICA ES UN CARCINOGENO POTENCIAL Y SE DEBE TENER CUIDADO PARA EVITAR LA INHALACION DEL TINTE DE POLVO O CONTAMINAR LA PIEL. Materiales requeridos pero no proporcionados Accesorios y productos para análisis microbiológico y equipos como por ejemplo: lazos, suplementos selectivos MAST, hisopos, palillos aplicadores, incineradores e incubadores, etc.... así como reagentes bioquímicos y aditivos como sangre). 5. El medio preparado es sensible a la luz y oscurece de rosa pálido a rojo al exponerse a la luz. Las placas preparadas deben ser usadas inmediatamente o almacenadas en bolsas de plástico, en la oscuridad, a 2 a 8C hasta un máximo de una semana antes de su uso. Las placas con un color rojo profundo deben ser desechadas. 6. Inocular las placas mediante rayado en superficie de muestras de agua/ productos lácteos, rayando hacia fuera para buscar colonias simples. 7. Incubar las placas aerobicamente durante 24 horas a 35 a 37C. Interpretación de resultados Después de la incubación, registrar el crecimiento de microorganismos. Las características típicas a notar incluyen: tamaño de la colonia, morfología y pigmentación. Las bacterias lactosa fermentantes darán un colonias con núcleo y color rojo profundo normalmente con un halo metálico y a menudo con color rodeando el medio como resultado de la producción de aldehído. Ocasionalmente las colonias rosa de coliformes atípicos se ven. Los microorganismos no fermentadores de la lactosa aparecerán como colonias brillantes sin color. Control de calidad Comprobar si hay signos de deterioro. Se recomienda que el control de calidad se lleve a cabo con al menos un microorganismo que demuestre una reacción esperada. No usar el producto si la reacción con el microorganismo de control es incorrecta. La lista de abajo ilustra una variedad de actuaciones de las cepas de control de uso rutinario, que el usuario final puede obtener facilmente. Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922 Salmonella typhimurium ATCC 14028 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Resultado Crecimiento Halo metálico Crecimiento, Sin color Inhibición Referencias Bibliografía disponible si se requiere. Procedimiento 1. Referirse a la etiqueta del envase para volúmenes y cantidades requeridas. Preparar MAST Endo Agar Base (DM135) suspendiendo los polvos en agua destilada o desionizada. Para los envases de sobre, disolver el contenido entero del sobre en el volumen mostrado en la etiqueta. 2. Añadir 10ml por litro de solución al 4% w/v de fuchsin básico, en 50:50 de metanol o etanol : agua desionizada. 3. Autoclave a 121C (15 p.s.i.) durante 15 minutos. 4. Mezclar uniformemente, verter en las placas de cultivo (15 a 20ml por cada placa) y dejar solidificar. IFU322 ES 06/16 V3 MAST es una marca registrada ATCC es una marca registrada de la American Type Culture Collection, Manassas, Virginia, USA *La formulación puede cambiar para seguir los criterios de actuación