Endo Agar LES

Endo Agar LES
DM522. Enumeración de coliformes en agua por
membrana de filtración usando un prodecimiento de
filtración de membrana en dos pasos.
Contenido: Ver etiqueta del envase.
Composición*
Concentración del
medio:
Peptona
14.9g/litro
Extracto de levadura
1.2g/litro
Lactosa
9.4g/litro
Dipotasio fosfato
3.3g/litro
Sulfito de sodio
1.6g/litro
Cloruro de sodio
3.7g/litro
Potasio di-hidrógeno fosfato
1.0g/litro
Desoxicolato de sodio
0.1g/litro
Lauril sulfato de sodio
0.05g/litro
Agar A
10.0g/litro
pH final: 7.2 ± 0.2
Almacenamiento y caducidad
Todos los contenedores deben ser almacenados bien
cerrados en un lugar seco a 25°C o por debajo hasta la
fecha de caducidad mostrada en la etiqueta del envase.
Algunos medios pueden requerir almacenamiento a 28°C, referirse a la etiqueta del envase.
Precauciones
Exclusivamente para uso diagnóstico in vitro. Respetar
las precauciones de seguridad y utilizar técnicas
asépticas. Debe ser utilizado solo por personal de
laboratorio cualificado y con experiencia. Antes del
desecho, esterilizar todo el material biológico. Referirse a
la hoja de seguridad del producto (disponible si se
requiere o a través de la página web de MAST).
LA SOLUCIÓN DE FUSCINA BÁSICA ES UN
CARCINÓGENO POTENCIAL Y DEBE TENERSE
CUIDADO PARA EVITAR LA INHALACIÓN DE LA
POTENCIAL TINTURA O CONTAMINACIÓN DE LA PIEL.
Materiales requeridos pero no proporcionados
Accesorios y productos para análisis microbiológico y
equipos como por ejemplo: lazos, suplementos selectivos
MAST, hisopos, palillos aplicadores, incineradores e
incubadores, etc.... así como reagentes bioquímicos y
aditivos como sangre).
Procedimiento
1. Referirse a la etiqueta del envase para cantidades y
volúmenes requeridos. Preparar MAST Endo Agar
LES (DM522) suspendiendo el polvo en agua
destilada o desionizada. Para los sobres del envase,
disolver el contenido entero del sobre en el volumen
mostrado en la etiqueta.
2. Añadir 20ml por litro de una solución de fascina
básica al 4% w/v (DM135S), en 50:50 de metanol o
etanol: agua desionizada.
3. Calentar, agitando frecuentemente y llevar a
ebullición hasta que este completamente disuelto.
NO PONER EN AUTOCLAVE.
4. Enfriar a 50°C y mezclar bien. Verter en las placas de
cultivo (15-20ml en cada placa) y dejar que se
establezcan.
5. Las placas de cultivo preparadas, deben ser usadas
inmediatamente o almacenadas en bolsas de plástico
a 2-8°C hasta un máximo de una semana antes de
su uso.
Procedimiento de filtración de membrana en dos pasos
1. Invertir el Endo Agar LES preparado en la placa de
cultivo y colocar un filtro almohadillado de membrana
estéril en la tapa y pipetear aproximadamente 2ml de
Caldo de cultivo de Lauril sulfato en la almohadilla.
Cualquier exceso de líquido debe ser quitado.
2. Aplicar el filtro de membrana hacia arriba en la
almohadilla.
3. Incubar a 35°C durante 1-1.5 horas en una atmósfera
húmeda.
4. Transferir el filtro de la membrana con la parte
superior hacia arriba en la superficie del agar.
5. Incubar las placas invertidas a 35°C durante 24
horas.
Interpretación de resultados
Después de la incubación, todos los microorganismos
con un capa brillante de color oro metálico deben ser
considerados presuntos coliformes.
Control de calidad
Comprobar si hay signos de deterioro. Se recomienda
que el control de calidad se lleve a cabo con al menos un
microorganismo para demostrar una reacción esperada.
No usar el producto si el resultado con el microorganismo
de control es incorrecto.
La lista de abajo ilustra el comportamiento de una
variedad de cepas de control que pueden ser fácilmente
obtenidas por el usuario final.
Microorganismos
Escherichia coli
ATCC 25922
Salmonella typhimurium
ATCC 14028
Staphylococcus aureus
ATCC 25923
Resultado
Crecimiento, capa brillante
de color oro metálico
Crecimiento, sin color
Inhibición
Referencias
Bibliografía disponible si se requiere.
IFU183 MM 11/07 V1
MAST es una marca registrada.
ATCC es una marca registrada de la Colección
Americana de Tipos de Cultivos., Manassas, Virginia, USA
*La formulación puede cambiar para seguir los criterios de actuación