2.7. Dr. José Santos Salas Valién. Cribado en Castilla y Leon

Cribado en Castilla y León
mediante co-test citología/genotipado HPV
José Santos Salas Valién
Servicio de Anatomía Patológica
Complejo Asistencial Universitario de León
Resumen
Ø -Cribado en Castilla y León.
Ø Programa.
Ø Datos estadísticos.
Ø -Técnica de HPV en CyL.
Ø Utilidad del genotipado.
Ø -Discrepancias Citologias/HPV.
Ø Citología positiva/HPV (-).
Ø HPV Alto riesgo (+)/Citología negativa.
Cribado en Castilla y León
Agradecimientos:
Pedro Angel Redondo Cardeña
Jefe de Servicio
Servicio de Promoción de la Salud y Programas Preventivos
Dirección General de Salud Pública
Consejería de Sanidad
Junta de Castilla y León
Antecedentes Cribado CyL
Ø 1986:Programa de Prevención de Cánceres e Infecciones Ginecológicas.
Población diana 25 a 65 años, y con factores de riesgo fuera de esa edad.
Valladolid.
Ø 1993: El Programa se implanta en toda la Comunidad Autónoma.
Ø 1994:Incorporación del Programa de Castilla y León en la Red Europea de
cribado de Cáncer Cervical.
Ø 2003: Se modifica la población diana: 35 a 65 años , y con factores de
riesgo fuera de esa edad.
Ø 2005: Se modifica la población diana, 30 a 65 años (de 20 a 29 años si
presentan factores de riesgo).
Modificación 2008-2012
Ø 2008: Población diana: 20 a 64 años. Pruebas de cribado: citología
convencional y determinación de VPH (incrementar la sensibilidad).
Ø
20-34 años (Intervalo de 3 años):
•
Ø
Citología cervical convencional intervalo de 3 años
35-64 años (Intérvalo de 5 años):
•
•
Citología cervical convencional.
Determinación de VPH:
Genotipado (CLART® HPV2) 35 genotipos.
HR: 16,18,26,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73,82
LR: 6,11,40,42,43,44,54,61,62,70,71,72,81,83,84,85,89
Distribución plataformas VPH
Revisión Cribado noviembre 2012
Ø 2012: Población diana: 25 a 64 años.
ØMujeres de 25 a 34 años: CCC con intervalo de 3 años
(las dos primeras citologías con un intervalo de 12
meses).
ØMujeres de 35 a 64 años: CCC y detección de VPH por
genotipado, con intervalo de 5 años.
2013
Datos estadísticos
Participación (1989-2015)
(25-64 años)
AREADESALUD
NºDEMUJERES
MJ.PARTICIPANTES
%
ÁVILA
62.321
31.803
51,03%
BURGOS
141.715
83.416
58,86%
LEÓN
126.029
56.510
44,84%
ELBIERZO
54.716
28.344
51,80%
PALENCIA
61.659
36.910
59,86%
SALAMANCA
128.601
57.980
45,09%
SEGOVIA
58.337
29.556
50,66%
SORIA
33.969
17.747
52,24%
VALLADOLID OESTE
101.710
64.446
63,36%
VALLADOLID ESTE
108.510
66.455
61,24%
ZAMORA
67.512
34.604
51,26%
945.079
507.771
53,73%
Participación2015
(25-64años)
AREADESALUD
NºDEMUJERES
MJ.PARTICIPANTES
%
ÁVILA
46.507
4.259
9,16%
BURGOS
109.534
9.093
8,30%
LEÓN
95.284
9.293
9,75%
ELBIERZO
41.264
4.905
11,89%
PALENCIA
47.141
6.203
13,16%
SALAMANCA
100.558
7.370
7,33%
SEGOVIA
44.455
3.538
7,96%
SORIA
25.544
2.514
9,84%
VALLADOLID OESTE
80.606
7.565
9,39%
VALLADOLID ESTE
81.962
7.232
8,82%
ZAMORA
48.761
5.312
10,89%
721.616
67.284
9,32%
Participación por grupos de edad
(25-64 años)
AREADESALUD
25- 29
30- 34
35- 39
40- 44
45- 49
50- 54
55- 59
60- 64
ÁVILA
% 64,88%
68,31%
63,21%
57,55%
59,03%
54,16%
40,88%
25,92%
BURGOS
80 75,17%
77,39%
70,23%
61,82%
61,00%
54,95%
46,59%
34,82%
LEÓN
70 53,79%
57,09%
55,45%
53,17%
54,62%
52,62%
44,52%
31,39%
ELBIERZO
60 58,70%
63,60%
63,81%
62,87%
65,33%
59,43%
50,02%
38,83%
PALENCIA
50 73,53%
76,80%
73,99%
71,98%
69,60%
63,67%
50,23%
30,51%
SALAMANCA
40 55,21%
55,75%
54,52%
51,02%
52,00%
49,16%
42,30%
31,19%
SEGOVIA
30 64,55%
67,79%
60,92%
57,39%
54,55%
51,99%
41,80%
27,39%
SORIA
20 57,75%
65,06%
65,18%
62,67%
60,54%
59,49%
52,72%
33,50%
VALLADOLIDOESTE 10 75,39%
76,86%
70,07%
66,56%
67,83%
65,76%
48,29%
35,25%
VALLADOLIDESTE 0 72,80%
73,80%
67,65%
68,01%
69,08%
66,66%
50,78%
35,79%
25-29
30-34
35-39
40-44
45-49
50-54
ZAMORA
67,27%
72,10%
66,86%
63,58%
61,67%
57,87%
CASTILLAyLEÓN
66,59
68,82
64,21
60,71
60,90
57,22
55-59
44,74%
46,04
60-64
32,73%
32,60
Diagnósticos citológicos:
2011
2012
2013
2014
2015
Total
NºCitologías
85.748
71.901
55.574
62.729
68.316
344.268
Negativas
96,15%
97,46%
98,02%
98,00%
97,53%
97,34%
Positivas
2,63%
2,48%
1,97%
2,00%
2,43%
2,34%
No valorables
1,10%
0,07%
0,01%
0,00%
0,01%
0,32%
Diagnósticos sobre las citologías positivas:
ASC-US
61,30%
65,17%
71,95%
71,14%
66,52%
66,22%
Bajo grado
30,60%
28,58%
22,35%
20,50%
27,26%
26,77%
Alto grado
1,70%
1,92%
1,84%
2,06%
1,16%
1,77%
Alteraciones glandulares
5,30%
4,26%
3,85%
6,30%
5,05%
4,98%
Diagnósticos HPV
2011
2012
2013
2014
2015
TOTAL
Nºdepruebas
56.342
42.869
35.944
44229
50.207
229.591
NOVALORABLES(%)
1988
(3,53%)
1964
(4,58%)
1974
(5,49%)
1265
(2,86%)
1097
(2,18%)
8288
(3,61%)
NEGATIVOS
49287
(81,48%)
36701
(85,61%)
31143
(86,64%)
39780
(89,94%)
45707
(91,04%)
202618
(88,25%)
3789
(6,73%)
876
(1,55%)
2913
(5,17%)
3258
(7,60%)
678
(1,58%)
2580
(6,02%)
2827
(7,87%)
602
(1,67%)
2225
(6,19%)
3184
(7,20%)
629
(1,42%)
2555
(5,78%)
3403
(6,78%)
714
(1,42%)
2689
(5,36%)
16461
(7,17%)
3499
(1,52%)
12962
(5,65%)
TOTALPOSITIVOSAR
Positivo16-18
POSITIVOSARNO16-18
Resultado final cribado
2011
2012
2013
2014
2015
TOTAL
PRUEBASREALIZADAS
85.734
72.133
55.538
62.670
68.210
344.285
RESULTADO NEGATIVO
80.669
(94,09%)
68.265
(94,64%)
51.840
(93,34%)
58.789
(93,81%)
63.607
(93,25%)
323.170
(93,87%)
RESULTADO
NOVALORABLE
2.969
(3,46%)
1.766
(2,45%)
444
(0,80%)
265
(0,42%)
233
(0,34%)
5.677
(1,65%)
NODETERMINANTE
1
(0,00%)
412
(0,57%)
2.530
(4,56%)
2.225
(3,55%)
2.605
(2,82%)
7.773
(2,26%)
RESULTADO
POSITIVO
2.954
(3,45%)
2.231
(3,09%)
1.092
(1,97%)
1.839
(2,93%)
2.024
(2,97%)
10.140
(2,95%)
Resultado final cribado (Positivos)
2011
2.954
(3,45%)
2012
2.231
(3,09%)
2013
1.092
(1,97%)
2014
1.839
(2,93%)
2015
2.024
(2,97%)
TOTAL
10.140
(2,95%)
21
159
127
136
77
520
%cribado
0,02%
0,22%
0,23%
0,22%
0,11%
0,15%
%positivas
0,71%
7,12%
11,63%
7,40%
3,80%
5,13%
29
119
160
170
65
543
%cribado
0,03%
0,16%
0,29%
0,27%
0,10%
0,16%
%positivas
0,98%
5,33%
14,65%
9,24%
3,21%
5,36%
41
36
13
13
3
106
%cribado
0,04%
0,04%
0,02%
0,02%
0,00%
0,03%
%positivas
1,38%
1,61%
1,19%
0,71%
0,15%
1,05%
RESULTADO POSITIVO
BAJOGRADO
ALTOGRADO
CARCINOMA
Prevalencia de genotipos (2009-11)
‰
14
12
10
ALTORIESGO
BAJORIESGO
8
6
4
2
0
16 53 31 51 52 61 58 66 68 70 62 35 84 59 81 33 18 82 6 45 83 56 54 72 42 39 71 44 11 85 73 26 40 89 43
Prevalencia de genotipos (2012-15)
‰
ALTORIESGO
BAJORIESGO
Cambio en genotipos (2009-2015)
‰
14
12
10
2009-2011
2012-2015
8
6
4
2
0
16 53 31 51 52 61 58 66 68 70 62 35 84 59 81 33 18 82
6
45 83 56 54 72 42 39 71 44 11 85 73 26 40 89 43
Técnica de HPV
Técnica usada cribado CyL
• Hibridación de ácidos nucleicos:
– Southern Blot, Hibridación in situ, etc.
• Hibridación + amplificación de señal
– Hc2, Cervista.
• Amplificación de ácidos nucleicos:
– CLART HPV 2®, Cobas 4800, Inno-Lipa,
Linear Array, Aptima, etc.
CLART HPV 2® (Genómica)
• AmplificaciónporPCR450pbdeL1.
• Detecciónpormicroarraydebajadensidad
(ClinicalArrayTechnology®),enfondopocillo
placamicrotiter(CLART-Strip.CS®)
Hibridación con
sondas
especificas
inmovilizadas
en zonas
concretas y
conocidas
Unión del
conjugado con la
biotina de los
productos
amplificados
Productos
amplificados
marcados con
biotina
Incubación con
estreptavidinaperoxidasa
La actividad
peroxidasa provoca
producto insoluble que
precipita
CLART® HPV2, (Controles)
•
ControldePCR:(Sehaproducido lareacción)
• Unpardeprimers queamplificanunplásmidomodificado.
• Evitalosresultadosconfalsosnegativos.
•
Controlgenómico :(Existe muestra)
• AmplificaciónDNAdelpaciente.
• Parejadecebadores,queamplificanunfragmentode892pb delgenhumanoCFTR.
• Informaciónsobrelapresenciarealdemuestra.
•
Múltiples Puntos enelarray:(Tipo por triplicado)
• Lospuntosseencuentrantriplementerepresentados.
• Diferentessondasenelmismopuntoevitaninexpecificidades propiasdeladiversidad
genética,quepodíangenerarfalsosnegativos.
• Lospuntostantogenéricoscomoespecíficos,determinaránlasespeciesdevirus.
CLART®HPV2
Muestra
Extracción y
Purificación
DNA Extracción
y Purificación
Manual
/Automática
Amplificación
3 horas
Visualización
(2 horas)
CLART®HPV2
SOFTWAREDEANÁLISISDEIMÁGENES
APLICACIONESBIOINFORMÁTICAS
-Procesamiento fácil yrápido dela
imagen delarray.
-Análisis delaimagen.
-Informe deresultados finales.
-Softwareespecífico.
GESTIÓNDEDATOS
-Almacenamientodedatos(hard
disk).
-Volcadoresultadosvíatelematica,
previavalidación.
CLART®HPV2
¿Quénospuedeaportarelgenotipado
delVPHenelcribado?
HumanPapillomaVirus (HPV)inpatients withcervical pathologycompared
withgeneral population. Astudyof6375cytologysamples in3years
250
200
150
100
50
0
16
53
31
52
51
58
66
35
70
59
PATOLOGIA
18
33
68
39
56
45
85
26
73
CRIBADO
Cuesta A, Salas JS, González MA, Castro P, Rubio A, Ribas T.
24TH European Congress of Pathology. 8-12 September 2012. Prague.
HumanPapillomaVirus (HPV)inpatients withcervical pathologycompared
withgeneral population. Astudyof6375cytologysamples in3years
140
120
100
80
60
40
20
0
61
62
81
72
6
83
82
PATOLOGIA
84
54
71
11
44
42
40
CRIBADO
Cuesta A, Salas JS, González MA, Castro P, Rubio A, Ribas T.
24TH European Congress of Pathology. 8-12 September 2012. Prague.
TipificacióndeHPVenpacientesconlesiónglandulary
escamosasimultaneasdecérvixuterino(14casos)
VPH 31
VPH 16
A Cuesta, JS Salas, P Castro, A Rubio, B Castañón, T Ribas
XXVI Congreso Nacional de la SEAP-IAP. Cádiz 22-24/05/2013
Un virus, Una lesión
QuintWycols.JPathol2012;227:62-71
Discrepancias Citología / HPV
Citología (+) HPV (-)
Citología (+) HPV (-)
• 70 citologías durante 2014. Citología (+) HPV (-)
• Reevaluación (1 Citotécnico + 2 patólogos):
– Negativas: 34
– ASCUS: 15
– SIL: 15
• Solo en 7 seguimiento con HPV:
–HPV (+): 4
–HPV (-): 3
De La Fuente Escobar JP. Reunión Anual SEC.2016.
Citología (+) HPV (-)
De La Fuente Escobar JP. Reunión Anual SEC.2016.
Citología (+) HPV (-)
• Revisar diagnósticos que emitimos (% ASCUS)
Geisinger. et al. Am J Pathol 2007; 128:1010-101414
• Influencia del diagnostico citológico según status de
HPV
– Cuidado en las citologías de seguimiento
postconización.
– Cribado con citología en HPV (+)
Moriarty A. et al. Arch Pathol Lab Med—Vol 138, September 2014
Discrepancias Citología / HPV
HPV (+) Citología (-)
Citología (-) HPV (+)
• Citología (-)
• HPV (+)
– HPV 16/18
– HPV AR no 16/18
• Colposcopia
– No concluyente
Seriación+p16+Ki67
Thumbnail
Legrado endocervix
P-16
Ki 67
Seguimiento 273 pacientes
HPV 16/18 y cito (-)
• Seguimientode273pacientesremitidasalHospitaldeLeón:
– HPV16y/o18
– CitologíaNegativaenelprogramadecribadodelaJuntadeCastillay
León.
• Serealizaelseguimientodeestaspacientes:
– Colposcopia, citología,biopsiaydetecciónytipificacióndeHPV
(CLART® HPV2),segúnloshallazgosencontrados.
Plataforma VPH-León: 273 con seguimiento
XXVII Congreso Nacional de la SEAP-IAP. 20-23 Mayo-2015
Lesiones por tipo HPV
El 22,7% de las pacientes tuvieron CIN2+
Plataforma VPH-León: 273 con seguimiento
XXVII Congreso Nacional de la SEAP-IAP. 20-23 Mayo-2015
¿Qué pasa con los alto riesgo no 16-18?
• 2014-2015
• HPValtoriesgono16/18
• 43casos
– Sinlesión:32(74,4%)
– Bajogrado:4(9,3%)
– Altogrado:7(16,3%)
HPV no 16/18 por lesión
HPV