VALIDEZ DEL DIAGNóSTICO CITOLóGICO ASC

N. C0019
VALIDEZ DEL DIAGNÓSTICO CITOLÓGICO ASC-US EN
LA DETECCIÓN DE HPV
Lucas Valero 1, Eva Sebastiá 1, Francisca García 1, Mireia Estruch 1, Mª Carmen San Juan 2, Carmen Illueca 1
Departamentos de Patología 1, Microbiología 2 y Ginecología
Instituto Valenciano de Oncología, Valencia, España
ANTECEDENTES Y OBJETIVO
MÉTODO
Teniendo en cuenta que la realización del test de determinación y/o tipificación
de HPV, forma parte del protocolo frente a un diagnostico citológico de ASCUS, trataremos en este estudio de confirmar a partir de una muestra
poblacional significativa, la idoneidad, así, como la efectividad de dicho test.
Para ello hemos valorado diversos parámetros citológicos que hacen
referencia a anomalías epiteliales comunes, en todos los casos incluidos en el
muestreo.
Los parámetros que hemos establecido a fin de llegar a una conclusión
valorable, son los siguientes: hipercromatismo, morfología de la membrana
nuclear, distribución de la cromatina, relación núcleo-citoplasma, presencia de
binucleación y/o multinucleación, rasgos coilocíticos, paraqueratosis atípica
(disqueratosis), paraqueratosis típica y cantidad de celularidad atípica.
Este estudio trata de correlacionar unificando criterios entre citotécnicos,
patólogos y personal del servicio de microbiología,
el grado en que aparecen los distintos parámetros con la positividad o
negatividad del test del HPV, y en caso de ser positivo con la presencia de un
HPV de bajo riesgo o de intermedio-alto riesgo. Nos centraremos
especialmente en aquellos casos en los que el análisis resulta positivo para
HPV de intermedio-alto riesgo, con la intención de valorar la importancia de
continuar en una línea común frente a un diagnóstico considerado hasta cierto
punto subjetivo y con amplio margen interpretativo.
El estudio se realiza sobre 100 casos, de los que disponemos en el
servicio de Anatomía Patológica del Instituto Valenciano de
Oncología, que cumplen criterios de ASCUS y que han sido valorados
por al menos dos profesionales.
Los diagnósticos citológicos han sido definidos usando la
nomenclatura Bethesda.
RESULTADOS
Correlación entre los parámetros morfológicos estudiados y la positividad
para HPV de intermedio /alto riesgo:
-Relación N/C desviada: aparece en el 75.4% de los casos positivos .
-Distribución cromatínica: se distribuye irregularmente en un 55.7% de los
casos positivos y en el resto de forma homogénea.
-Binucleación y/o multinucleación: es abundante en tan solo un 1.6% de los
casos positivos, estando presente en el 75.4%.
-Rasgos coilocíticos: cuando son evidentes aparecen solo en un 19.8% de
los casos positivos.
-Membrana nuclear: en un 64% de los casos positivos la membrana es
irregular.
-Paraqueratosis atípica: cuando ésta es abundante o marcada el resultado
es siempre positivo, aunque solo esta presente en un 5% de los casos.
-Celularidad atípica: aparece en mayor o menor grado en todos los casos
positivos.
BINUCLEACIÓN Y MULTINUCLEACIÓN
Análisis del HPV
Se realiza detección del DNA del VPH y genotipado, a partir de la
suspensión celular restante de las citologías en medio líquido (Cytyc
ThinPrep Pap Test PreservCyt), mediante el método de captura de
híbridos (Hybrid Capture 2 de DIGENE) que consiste en hibridar las
muestras que contienen el ADN diana con un cóctel de sondas de
ARN específico del VPH: sondas “L” que permiten detectar los tipos
de bajo riesgo ((6,11,42,43,44) y sondas “H” que permiten detectar
los tipos de alto riesgo (16,18,31,33,35,39,45,51,52,58,59,68).
Los híbridos de ADN-ARN resultantes se fijan en la superficie de los
pocillos de una Microplaca de captura, recubiertos con anticuerpos
específicos para los híbridos de ADN-ARN que reaccionan con
anticuerpos conjugados con fosfatasa alcalina (Reactivo 1), y se
detectan mediante un sustrato quimioluminiscente (Reactivo 2).
ANOMALIAS EPITELIALES
HPV
MEDIO/ALTO
RIESGO +
HPV
MEDIO/ALTO
RIESGO -
Hipercromatismo marcado
19,7%
5,1%
Relación N/C desviada
75,4%
46,2%
Distribución cromatínica
anómala
55,7%
25,6%
Bi/multinucleación
75,4%
48,7%
Rasgos coilocíticos aparentes
31,6%
28,2%
Rasgos coilocíticos evidentes
19,8%
0%
Membrana nuclear irregular
64%
28,2%
Paraqueratosis atípica
28%
7,7%
Paraqueratosis Típica
41%
41%
Celularidad atípica abundante
19,7%
2,6%
EDAD
ALTO
RIESGO
BAJO
RIESGO
AMBOS
TOTAL
POSITIVOS
<35
50,8%
20%
74%
50,8%
>35
49,2%
80%
26%
49,2%
ALTERACIONES CROMATÍNICAS
Y DE LA MEMBRANA NUCLEAR
PARAQUERATOSIS ATÍPICA
COILOCITOS
APARENTES
COILOCITOS
EVIDENTES
CONCLUSIONES
De los casos catalogados como ASC-US obtenemos un 71% de casos positivos para HPV; de estos, el 61% fueron agrupados como
intermedio/alto riesgo. Estos resultados confirman la idoneidad de la realización del test del HPV en los casos con diagnóstico de ASC-US así
como la importancia de tener en cuenta ciertos parámetros morfológicos para obtener un alto índice de efectividad.
declaración de conflicto de intereses