HLA-DR en Monocitos y Macrófagos

HLA-DR en Monocitos y Macrófagos
Nombre: Nicolás Opazo Ríos
Docentes : Marcelo Castillo.
Juan Luis Castillo.
Tecnología Médica.
Universidad de Concepción.
Genes
Genes del
del MHC
MHC Humano
Humano
class II
DP
2
class I
DQ
2
1
DP
1
B C
DR
2
B
C
A
2
1
3
DQ
1
1
2
3
DR
A
9
Enfermedad Injerto vs. Huesped
Procesamiento antigénico de moléculas MHC-II
1 . Los antígenos exógenos son endocitados y procesados por el sistema
endosomal- lisosomal.
2 .En el reticulo endoplásmico, las moléculas MHC-II se asocian con la
cadena invariante li.
3 -Esta molécula impide la unión de pépticos a la MHC-II y la guía, a través
del complejo Golgi, hasta un compartimiento de naturaleza ácida
denominado MHC de clase II ( MHC), en donde ocurre la degradación
parcial de la cadena li.
4. En la hendidura del MHC, permanece un fragmento de molécula li,
denominado CLIP, hasta que con la colaboración de la proteína HLA-DM,
sea intercambiado por el péptido derivados del antígeno exógeno..
- Así se genera una molécula de MHC clase II estable que será
expresada en la superficie de la APC.
• Procesamiento antigénico de moléculas MHC-II
Ltheper
CD4
endocitosis
1
MHC-II
degradación
HLA-DM
4
antígenos
MHC-II
3
MHC-II
CLIP
MHC
2
li
MHC-II
Proteina li
Golgi
Reticulo endoplásmico
% de HLA-DR en monocitos
Rango
(%)
Interpretación neonatos (**)
56 – 100 Normal
41 – 56
Inmunodepresión. Cuadro infeccioso
moderado a severo. Presencia de síndrome
distrés respiratorio.
25 – 55
Inmunodepresión severa. Presencia de
inflamación sistémica, sepsis.
Menor a
24
Inmunodepresión severa, sepsis, compromiso
vital severo de alto riesgo.
ESTUDIO DE EXPRESION DE HLA-DR EN MONOCITOS
METODOLOGIA
: CITOMETRIA DE FLUJO
EQUIPO
: CITOMETRO DE FLUJO FACSCalibur ( BD)
Juan Luis Castillo, Laboratorio De Citometria de Flujo, Hospital del Trabajador.
Sepsis, shock séptico y síndrome de disfunción
multiorgánica.
Sepsis: se define como la respuesta inflamatoria sistémica frente a la infección.
Shock séptico: cuadro de sepsis severa con hipotensión arterial que no
responde a reanimación adecuada con líquidos, recurriendo al uso de drogas
vasopresoras.
Síndrome de disfunción multiorgánica: disfunción que imposibilita
mantener la homeostasis sin intervención terapéutica. A nivel ,fisiológico se
define como la insuficiencia orgánica múltiple.
Fisiopatología de la sepsis
Probablemente la causa de una sepsis pueda ser una
bacteriemia.
El LPS entra en contacto con el monocito a nivel sanguíneo
o con el macrófago a nivel tisular produciendo la activación
celular.
Esta interacción es mediada por el receptor especifico de
membrana (CD14) presente en células inmunocompetentes,
Este se activa y induce la activación de mediadores
intracelulares como las proteinkinasas que inician los
procesos de transcripción génica para el TNF alfa, el cual es
sintetizado y posteriormente secretado a nivel citoplasmático
en una forma madura.
Adhesión de leucocitos al
endotelio
Monocito
TNF
IL-1
Neutrófilo
Adhesion
IL-6, IL-8
Tumour necrosis factor (TNF)
Citokinas: IL-6, IL-8, IL-10
Radicales libres de oxígeno
Platelet activating factor
Proteasas
Inflamación
Prostaglandinas
Coagulación
Leukotrienes
↓ fibrinolisis
Bradikinina
Trombosis
microvascular
Tissue factor
Daño endotelial
Endotelio
Macrofagos
IL: interleukina
Sitio de inflamación
Mediadores chemotácticos (e.j. selectinas)
atraen leucocitos al sitio de inflamación
ENDOTELIO
CAMBIOS EN INFLAMACION
→ procoagulante
Expresión de moléculas de adhesión
Producción de mediadores inflamatorios
Producción de compuestos vasoactivos
Anticoagulante
3.6a
El TNF alfa y la IL-1 determinan la fisiopatología del estado séptico a
través de sus efectos sobre la Tº ( inducción de fiebre, posiblemente
hipotermina), la resistencia y la permeabilidad vascular, la función
cardiaca la médula ósea ( producción de leucocitos.)
Todo lo mencionado sustenta la idea que los mediadores esenciales de
la sepsis mostrando variados efectos serian las citoquinas y no la
endotoxina.
Muchos de los efectos de las citoquinas son mediados a nivel tisular por
el óxido nítrico, prostaglandinas, eicosanoides, PAF por mencionar
algunos.
Estimulo
Ej. Acetilcolina o shear stress)
ecNOS
Vasodilatacion/
regulacion del
flujo sanguíneo
Oxido
nitrico
NO: Efecto vascular en función normal
NO: efecto vascular en sepsis
Estímulo
Ej:. Acetilcolina o shear stress)
ecNOS
iNOS
Sobre-expresión
de iNOS
Vaso dilatación/
regulación del
flujo sanguíneo
Oxido
nítrico
Sepsis
Excesiva vaso dilatación
hipotensión refractaria
Estímulo
(ej. LPS, IL-1, TNF, PAF)
SHOCK
SEPTICO
ecNOS: endothelial constitutive nitric oxide synthase, iNOS: inducible nitric oxide synthase
LPS: lipopolysaccharide, IL: interleukina, PAF: platelet activating factor, TNF: tumour necrosis factor
• Juntamente
con la presencia de todos estos eventos
hay producción de sustancias antiinflamatorias.
•Además algunas citoquinas liberadas como la IL-4,
IL-6 e IL-10.
•Así se disminuyen la síntesis de TNF alfa e IL-1 en
PMN como respuesta a la endotoxina.
• Es necesario acotar que esta última ( IL-10) mediaría
el secuestro intracelular del HLA-DR en monocitos
durante el shock séptico.
Falla del sistema inmune en la sepsis
• Los
pacientes sépticos muestran cuadros
consistentes de inmunosupresión.
• Primero comienza una fase inflamatoria que al momento
se revierte con la producción de péptidos antiinflamatorios
el cual produce una cambio dirigido a una estado
inmunosupresivo.
• Con la administración de INF gamma, mejora la
sobrevivencia de estos pacientes.
Mecanismos de inmunosupresión en la sepsis
Las citoquinas dirigen la diferenciación de las células T en Th1 o
Th2
Célula T-CD4+ virgen
Activación por Ag
rIL-2
IL-12/IFNγγ
Macrófagos
Dendríticas
NK
Célula Th1
IL-2
IL-4
Mastocitos
Eosinófilos
CD4+NK1.1
Células T
Célula Th2
• Los monocitos de los pacientes con quemaduras y con traumatismos
tienen niveles reducidos de citoquinas TH1 y un aumento en los niveles
TH2, la cual mejora la sobrevivencia de pacientes con sepsis.
• Otros estudios indican que la IL-10 regulan este proceso que podría
ser indicativo de muerte.
• La anergia es un estado en donde no hay respuesta frente al
antígeno, las células T son anérgicas cuando fallan su proliferación
y producción de citoquinas en respuesta a antígenos específicos.
• Estudios en peritonitis demuestran aumento del patrón TH2 sobre
el TH1, lo que concuerda con el estado de anergia.
• Estudios recientes demuestran que tanto linfocitos
como células epiteliales gastrointestinales mueren por
apoptosis durante sepsis.
• Un mecanismo potencial responsable de esta
apoptosis puede ser el stress- injuria inducido por la
liberación de glucocorticoides.
•La apoptosis celular induce anergia o citoquinas
antiinflamatorias que empeoran la respuesta frente a
patógenos, mientras que la necrosis celular produce
estimulación inmune y aumenta las defensas
microbianas.
B) Antígenos presentados en células APC no profesionales.
MHC II
péptido
TcR
Célula T CD4+
B7
CD28
APC NO
PROFESIONAL
• La perdida de los linfocitos B,
TCD4 y células dendríticas
disminuye la producción de
anticuerpos, activación de
macrófagos y la presentación de
antígenos respectivamente.
ANERGIA
inmunoparálisis
Depresión
Disfunción monocitaria
mediada por opioides en
pacientes con depresión
mayor.
A.castilla, M.L Subira, M.L Civeira
Centro d einvestigaciones Biomedicas. Depto,. De medicina
interna r inmunologia.
Clinica Universitaria.
Universidad d e Navarra. Pamplona. 1992
Fundamento: los pacientes con depresión presentan una
inmunodepresión y se ha propuesto que en ellos, péptidos opiáceos
endógenos pueden ser los mediadores entre la disfunción del sistema
nervioso central y las alteraciones de la inmunidad.
Se estudió la función y los marcadores de superficie de
monocitos en 15 pacientes con depresión mayor
unipolar.
Resultados: la mayoría de los pacientes (86 %),
presentó una disfunción en la expresión de filamentos
intermedios de vimentina del citoesqueleto y de las
moléculas de membrana, CRI y antígenos HLA-DR.
Conclusión: los pacientes con depresión mayor
unipolar presentan un alto tono opioide que tiene
consecuencias en la función del sistema inmune.
Published ahead of print on March 17, 2004, doi:10.1164/rccm.200309-1329OC
This Article American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine Vol 169. pp. 1144-1151, (2004)
© 2004 American Thoracic Society
Monocyte Human Leukocyte Antigen–DR Transcriptional
Downregulation by Cortisol during Septic Shock
HLA-DR
cortisol
monocito
antiinflamatorio
Downregulation
HLA-DR HLA-DR
HLA-DR
CTAII
núcleo
monocito
Rol de la interleukina 10en el secuestro intracelular del HLA-DR en
monocitos durante Shock séptico.2002
American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine Vol 169. pp. 11441151, (2004)
© 2004 American Thoracic Society
Monocyte Human Leukocyte Antigen–DR Transcriptional Downregulation
by Cortisol during Septic Shock
The American Journal of Gastroenterology
Online Early
doi:10.1111/j.1572-0241.2006.00495.xVolume 0 Issue 0 A Strong
Association Between Down-Regulation of HLA-DR Expression and the
Late Mortality in Patients with Severe Acute Pancreatitis.