Trabajo Practico N 11 - Facultad de Odontología

TRABAJO PRÁCTICO Nº 11
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO DIRECTO.
En la práctica odontológica las lesiones bucales piógenas se tratan con antibióticos,
generalmente administrados
en forma empírica, cuando lo ideal es realizar el
diagnóstico microbiológico. Siempre que sea posible hacer una correcta toma de
material, el posterior aislamiento del agente etiológico y si es necesario un antibiograma
para conocer la sensibilidad del patógeno a los antibióticos. De esta forma se
solucionarían dos problemas importantes de la práctica clínica que son: la persistencia en
forma crónica de las lesiones por no hallar el / los agente / s etiológico/s y el aumento de
las resistencias bacterianas adquiridas.
Pasos para arribar al diagnóstico etiológico de una lesión purulenta:
En el consultorio
a) Historia clínica médico-odontológica completa:
b) Planilla de pedido de investigación microbiológica con el diagnóstico presuntivo.
c) Toma de material:
Los pasos a seguir para la toma de material a partir de procesos cerrados (sin fístulas)
son:
¾ Realizar buche con agua destilada estéril para disminuir por arrastre la carga
microbiana bucal.(Si la toma es de un proceso intraoral)
¾ Realizar antisepsia de la zona del proceso purulento con gasa embebida en
povidona yodo.
¾ Dejar actuar el antiséptico durante un minuto y retirar por arrastre con gasa estéril
embebida en agua destilada estéril para no distorsionar el resultado.
¾ En la zona más reblandecida del proceso realizar la toma de material por punción
aspirativa para la obtención del material purulento.
¾ Colocar la muestra en un tubo conteniendo medio de transporte y realizar al
menos dos extendidos en portaobjetos estériles.
¾ Conservar la muestra a temperatura ambiente y remitirla al laboratorio dentro de las
2 hs.
Los pasos a seguir para la toma de material a partir de procesos abiertos (con fístula):
¾ Realizar buche con agua destilada estéril para disminuir por arrastre la carga
microbiana bucal.(Si la toma es de un proceso intraoral)
¾ Realizar antisepsia del campo operatorio con gasa embebida en povidona yodo.
¾ Dejar actuar el antiséptico durante un minuto y retirar por arrastre con gasa
embebida en agua destilada estéril para no distorsionar el resultado.
¾ Con jeringa y aguja aspirar el material purulento introduciéndola en la fístula jeringa.
¾ No tomar nunca muestras de los bordes de la fístula.
¾ Colocar la muestra en un tubo conteniendo medio de transporte y realizar al menos
dos extendidos en portaobjetos estériles.
¾ Conservar la muestra a temperatura ambiente y remitirla al laboratorio dentro de las
2 hs.
Condiciones y cuidados a tener en cuenta:
Momento oportuno: la toma de material se realiza antes de medicar al paciente con
antibiótico, si ya está tomando antibiótico conviene suspender la medicación si el caso
clínico lo permite.
Sitio adecuado: corresponde a la zona más reblandecida del proceso purulento.
Instrumental y materiales: se utilizarán siempre elementos estériles: jeringa
descartable, agujas gruesas, tubos de ensayo, tapones de goma, portaobjetos, frascos
pequeños, gasas, portaobjetos, medios de transporte.
Cantidad necesaria: La cantidad mínima de muestra necesaria para el procesamiento en
el laboratorio es de 0.5 a 1 ml.
Transporte: Enviar al laboratorio el tubo con el material de toma en medio de transporte
cerrado con tapón de goma estéril.
Remisión: La remisión de la muestra deberá cumplir con las normas de bioseguridad
nacionales, que incluyen envase hermético, dentro de otro mayor tamaño rodeado de un
material absorbente y un tercer envase rotulado (Triple envoltorio).
La muestra debe ser remitida inmediatamente al laboratorio para su procesamiento, de
no ser posible se deberá refrigerar por no más de 24 hs. Siempre acompañarla del
protocolo de pedido microbiológico, un resumen de la historia clínica y el diagnóstico
presuntivo.
En el laboratorio: (Cuadro N° 1)
Se realizan:
• Examen microscópico directo: coloración de Gram.
• Cultivos:
o Caldo nutritivo, para mantener la cepa
o Agar sin sangre, para realizar “reacción de catalasa”
o Agar sangre, para diferenciar los distintos tipos de hemólisis
(αhemólisis o hemólisis parcial,β hemólisis o hemólisis total, δ
hemólisis o anhemolítico)
• Reacciones bioquímicas, para tipificación de género y especie (glucosa,
coagulasa, manitol, gelatina, etc.)
• Antibiograma en caso de ser necesario.
Desarrollo del Trabajo Práctico Nº 11: Diagnóstico microbiológico I: Marcha
diagnóstica de una lesión purulenta para cocos piógenos y actinomicosis.
1) Simular que un alumno tiene una lesión que tiende a fistulizar al exterior, realizar
los pasos para la toma de material para un diagnóstico microbiológico:
-
Antisepsia de la zona con gasa embebida en povidona yodo al 10%.
Lavado con gasa embebida en agua destilada estéril.
Simular la punción y recolección de material purulento con jeringa. Pasar el
material a un tubo con medio de trasporte estéril.
Extendidos
Condiciones de envío
2) A partir de una muestra de una colección purulenta desarrollar los pasos de las
marchas diagnósticas para Cocos Piógenos (Cuadro Nº 2) o para Actinomicosis
(Cuadro Nº 3).
MATERIAL PURULENTO
EXAMEN MICROSCOPICO DIRECTO
GRAM
POSITIVO
COCOS
Streptococcus
Staphylococcus
NEGATIVO
BACILOS NO
ESPORULADOS
Actinomyces
Cuadro N° 1
COCOS
Neisserias
BACILOS
Enterobacterias o
Anaerobios
Estrictos
Cuadro Nº2: Resumen de marcha diagnóstica para Cocos Piógenos
Toma de material (pus)
Examen macroscópico (en busca de granos)
Examen microscópico (Cocos Gram +)
Sembrar en distintos medios de cultivo por duplicado
Caldo nutritivo
Agar sin sangre
Agar Sangre (Hemólisis α, β, δ)
Incubar a 37º C durante 24 a 48 horas en aerobiosis y anaerobiosis
Aislamiento/s en agar sin sangre y prueba de Catalasa de c/u de los mismos
(+) Staphycoccus y Micrococcus
(-) Streptococcus
Prueba fermentación de Glucosa
(-) Micrococcus
(+) Staphycoccus
( -) Coagulasa (+)
(-) Manitol (+)
(-) Gelatina (+)
(-) St epidermidis
(+) St aureus
Cuadro Nº 3: Resumen de marcha diagnóstica para Actinomicosis
Toma de material (pus)
Examen macroscópico (Buscar Granos)
Examen microscópico (bacilos o filamentos Gram + y no AAR)
Sembrar en distintos medios de cultivo
Agar blando
glucosado
Fluído
tioglicolato
Caldo BHI
Agar BHI con
suero
Cerrar en condiciones
de anaerobiosis
Incubar a 37º C durante 24 a 48 horas. Reincubar de 10 a 15 días
Examen microscopico (bacilos o filamentos Gram +)
Para la tipificación de género y especie se requieren varias pruebas bioquímicas o reacciones de
inmunofluorescencia. Pero esto no es necesario para indicar el tratamiento al paciente
PREGUNTAS:
1. En qué porcentaje debería utilizar la povidona iodo para realizar la antisepsia de la
piel?
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2. En caso de que su proceso fuera intraoral en que porcentaje debería usar la
povidona iodo?
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3. Porque debe realizar extendidos en el momento de efectuar la toma?
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4. Que utilidades le brinda la coloración de Gram?
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