toma y envío de la muestra a ser analizada en el área de

PROTOCOLO 1
PARA EL MÉDICO DE CONSULTORIO
TOMA Y ENVÍO DE LA MUESTRA A SER
ANALIZADA EN EL ÁREA DE HEMATOLOGÍA
Las muestras destinadas al área de hematología, podrán ser básicamente de
2 tipos:
1. Sangre completa (citratada, con EDTA o con fluoruro de sodio)
2. Sangre coagulada
Pudiendo ser necesario, si el caso y el análisis lo ameritan, el envío de:
3. Frotis de sangre periférica
4. PAAF de ganglio linfático
5. Punción de médula ósea
1. Sangre completa
Muestra destinada a preservar el plasma y elementos figurados en óptimas
condiciones para su análisis.
Se denomina sangre completa a la muestra de sangre venosa obtenida de un
paciente y que se le agrega cualquier tipo de anticoagulante, de tal manera
que se mantengan las características morfológicas de los elementos
figurados y no haya transformación del fibrinógeno a fibrina.
La muestra puede ser tomada de la vena a elección, de acuerdo a las
habilidades del médico. Debiéndose enviar siempre a BioPet la cantidad
mínima de 1,5 cc (tubo pediátrico), siendo 3 cc, la cantidad óptima.
1 Se recomienda que si la cantidad de sangre extraída es inferior a 2 cc,
utilizar siempre los tubos pediátricos para que no haya exceso de
anticoagulante en la muestra.
Con la sangre completa BioPet procede a realizar los siguientes análisis:
- Tubo tapa lila (con EDTA): hemograma, RAE, morfología de sangre
periférica, pudiendo sí ser realizadas algunas pruebas bioquímicas con
plasma, dependiendo del método analítico específico; pero en cuando
a precisión y exactitud, siempre en estos casos se prefiere utilizar
suero sanguíneo.
- Tubo tapa celeste (citratado): Tiempo de protrombina (TP), Tiempo
de tromboplastina parcial activada (TTPa), dosaje de fibrinógeno.
- Tubo tapa gris (fluoruro de sodio + EDTA): glicemia
Correcta toma de la muestra:
1. Elegir el sitio de venopunción. De acuerdo al tamaño del animal y
condiciones de sujeción, para asegurar la continuidad del fluido.
2. Utilizar alcohol para desinfección del área y provocar mayor
visibilidad de la vena elegida. De no revelarse, se pueden dar
golpecitos suaves y secos con el dedo índice (o con el índice y el
medio si el animal es muy grande) sobre el área donde
anatómicamente se debería encontrar la vena.
3. Colocar el torniquete. Considerando un tiempo óptimo de presión de
15 segundos, y no debe ser mantenido por más de 30 segundos,
debido a que la muestra ya no será representativa del paciente sino
de la hemoconcentración causada en el sitio. Si se interrumpe la
continuidad en la salida de sangre se recomienda utilizar otra jeringa
y no seguir intentando la extracción en la misma jeringa que ya tenga
cierto contenido sanguíneo, ya que en este contenido ya habrá
iniciado la hemostasia.
4. Introducir la aguja con el bisel hacia arriba y proceder a la extracción.
5. Destapar el tubo tapa lila, celeste o gris, dependiendo del estudio a
solicitar (proporcionados por BioPet) y verter por las paredes y
lentamente el contenido de la jeringa, previa separación de la aguja.
2 Para impedir la hemólisis, nunca se debe llenar el tubo con la aguja
aún acoplada a la jeringa, ni expulsar el contenido bruscamente.
Este paso debe ser lo más rápido posible, ya que apenas la sangre
toca la jeringa se inicia la hemostasia.
6. Homogenizar el tubo de tal manera que se asegure la debida mezcla
de la sangre con el anticoagulante. Los movimientos deben ser suaves
y aleatorios, combinando la inclinación con la rotación. Si no se
asegura este paso, la muestra queda expuesta a la formación de
coágulos visibles, o microcoágulos, no siendo apta para ingresar a la
fase analítica.
7. Rotular el tubo con el nombre del paciente y la inicial del apellido del
médico o su código si ya lo tuviese.
8. Preservar en refrigeración (no congelación), hasta la llegada del
vehículo de transporte.
Se recomienda que la muestra ya en el tubo tenga el menor movimiento
posible y sólo podrá mantenerse fuera de refrigeración si el transporte la
retirase dentro de las 2 horas posteriores a la extracción y especificando
siempre en la orden médica (en el espacio destinado a observaciones) que
fue mantenida al ambiente.
El mismo procedimiento planteado se debe seguir si se pretende el análisis
de ciertos electrolitos.
Ante cualquier procedimiento de sueroterapia, siempre deberá realizarse
primero la extracción sanguínea para prevenir resultados erróneos.
Se recomienda siempre valorar físicamente la muestra a ser entregada a
BioPet : presencia o no de hemólisis, coágulos, ictericia o plasma lipémico.
2. Sangre coagulada
Muestra destinada a preservar el suero sanguíneo.
3 Se denomina sangre coagulada a la muestra de sangre venosa obtenida de
un paciente y que es tratada de tal manera que se fomente la formación del
coágulo de fibrina y al ser enviada a BioPet se procede a la separación del
suero para su análisis.
Correcta toma de la muestra:
1. Elegir el sitio de venopunción. De acuerdo al tamaño del animal y
condiciones de sujeción, para asegurar la continuidad del fluido.
2. Utilizar alcohol para desinfección del área y provocar mayor
visibilidad de la vena elegida. De no revelarse, se pueden dar
golpecitos suaves y secos con el dedo índice (o con el índice y el
medio si el animal es muy grande) sobre el área donde
anatómicamente se debería encontrar la vena.
3. Colocar el torniquete y proceder a la extracción, obteniendo como
cantidad óptima 5 cc.
4. Destapar el tubo tapa roja, proporcionado por BioPet teniendo en
cuenta que este siempre será de vidrio para asegurar la adecuada
formación del coágulo. (de un buen coágulo depende la obtención de
un suero sanguíneo óptimo para el análisis)
5. Previa separación de la aguja, verter el contenido de la jeringa por las
paredes del tubo, previniendo cualquier movimiento brusco.
6. Rotular el tubo con el nombre del paciente y la inicial del apellido del
médico o su código si ya lo tuviese.
7. Dejar reposar al ambiente el tubo de manera vertical durante 30
minutos o 1 hora aproximadamente, tiempo durante el cual se dará el
proceso de hemostasia. Este lapso de tiempo puede variar de acuerdo
a la bioquímica sanguínea del paciente. Se recomienda valorar
visualmente la formación del coágulo antes del siguiente paso.
8. Refrigerar hasta la llegada del vehículo de BioPet.
Si se requiere enviar a BioPet las dos muestras de un mismo paciente, se
recomienda realizar una sola venopunción por bienestar del animal, siempre
teniendo a mano los dos o más tubos a ser llenados. Vertiendo primero la
sangre en el de tapa lila y luego en el de tapa roja, inhibiendo así al máximo
la hemostasia en el tubo con anticoagulante.
4 Ante cualquier procedimiento de sueroterapia, siempre deberá realizarse
primero la extracción sanguínea para prevenir resultados erróneos.
Se recomienda siempre valorar físicamente la muestra a ser entregada a
BioPet: presencia o no de hemólisis, la correcta formación del coágulo,
suero lipémico o ictérico.
3. Frotis de sangre periférica
Muestra destinada a la valoración morfológica de elementos figurados.
El frotis de sangre periférica puede ser realizado a partir de una punción
con lanceta de cualquier capilar superficial o de la muestra obtenida por
venopunción, pero con el cuidado de que no tenga contacto alguno con
anticoagulante, sino directamente de la jeringa (sin aguja).
Este frotis es recomendado cuando no se requiere de la realización de todo
el hemograma sino únicamente de la valoración cualitativa de la morfología
y sus alteraciones celulares en sangre periférica. Como ejemplo de las
alteraciones más comunes:
- La presencia de Mycoplasma haemofelis o M. haemocanis, los cuales
son desprendidos de la membrana del eritrocito cuando entra en
contacto con las sales del EDTA.
- Determinación de patrones de toxicidad en neutrófilos.
- Corpúsculos de Heinz, Howell – Jolly. Cuerpos de inclusión por
Moquillo.
- Hemoparásitos como Babesia spp.
- Cuerpos morulares como Ehrlichia spp.
- Entre otros.
Teniendo siempre presente que todas estas alteraciones serán valoradas en
el frotis que realiza BioPet en el análisis del hemograma.
5 Siendo sí importante la elaboración del frotis a partir de sangre fresca (sin
anticoagulante) para la determinación de Mycoplasmas eritrocitarios.
Correcta elaboración del frotis hematológico:
1. Tener previamente ya dispuestos sobre la mesada dos portaobjetos
limpios y desengrasados, de preferencia no usados con anterioridad.
Y un portaobjetos extensor.
2. Colocar la cantidad inferior a una gota en un extremo del
portaobjetos, para asegurar que la extensión sea fina.
3. Inmediatamente, el extensor se coloca delante de la gota, y se lo
retrocede de tal manera que el líquido se deslice en todo el borde del
extensor.
4. Con un movimiento firme y continuado se desliza el extensor hacia
adelante provocando un barrido del material.
5. Dejar secar al ambiente de manera horizontal.
6. Proceder de igual manera con el segundo portaobjetos.
7. Colocar el nombre del paciente y las iniciales del médico o su código
en el extremo libre del porta.
8. Colocar en los extremos de uno de los vidrios, en la cara donde se
realizó el barrido dos rollitos de cinta scoth y sobreponer el segundo
vidrio, siempre cara con cara.
9. Envolverlos en papel bond, rotulando igualmente en la parte posterior.
Se deben enviar mínimo dos vidrios a BioPet para su análisis. Siempre
valorar físicamente su frotis, confirmando que sea óptimo para la tinción y
lectura: debe ser una extensión fina y notarse las alas de gallina que
aseguran la formación de la monocapa.
4. PAAF de ganglio linfático
Muestra destinada a la valoración de elementos ganglionares para ser
analizados en conjunto con el hemograma y / o medulograma.
6 La Punción y Aspiración con Aguja Fina es una técnica de muestreo que
permite la obtención de material necesario para realizar un análisis
citológico de cualquier órgano.
En este caso la valoración citológica de un ganglio linfático será necesaria
cuando exista alguna sospecha clínica o mediante algún análisis previo de
laboratorio de patologías sanguíneas. Procediéndose de igual manera para el
muestreo en el caso de linfoadenopatías, neoplasias linfáticas, sospechas de
metástasis.
El ganglio a punzar depende únicamente de la elección del médico y las
sospechas clínicas que él desee despejar. BioPet recomienda que para la
valoración hematológica sea punzado un ganglio poplíteo.
Correcta toma de la muestra:
1. Una vez escogido el ganglio a punzar, desinfectar el área con alcohol
de uso médico.
2. Con una jeringa de 5 cc, aguja 18 o 20G, proceder a realizar las
debidas aspiraciones: se recomienda siempre introducir la aguja en el
centro de la masa ganglionar y realizar las aspiraciones en 3 tiempos
y en 3 direcciones, sin sacar la aguja del ganglio obviamente.
3. Desacoplar la aguja y llenar de aire la jeringa.
4. Volver a acoplar la aguja.
5. Descargar el contenido en portaobjetos debidamente desengrasados y
limpios, de preferencia nuevos.
6. Realizar los frotis por confrontación suave para prevenir la
destrucción sobre todo de los linfocitos.
7. Dejarlos secar al ambiente y en posición horizontal.
8. Rotular con el nombre del paciente y del médico.
9. Una vez secos proceder a empacarlos colocándoles el rollito de cinta
scotch en las esquinas y acomodándolos siempre cara con cara.
10.Envolverlos en papel bond y rotular el exterior del empaque.
Siempre se debe indicar el ganglio que fue punzado y las características
físicas de este, por ejemplo, si estaba inflamado, con alguna masa o
neoformación, turgente o flácido, etc.
7 No escatimar en el número de frotis que se envían a BioPet, siendo la
cantidad mínima 4 vidrios. Y, se recuerda que todo estudio citológico es el
correspondiente a la muestra tomada de un solo sitio. Escogiéndose en
BioPet el vidrio mejor teñido, o varios de ser necesario.
BioPet no se responsabiliza por vidrios preparados a partir de varias
punciones en diferentes sitios de la economía del animal, ya sea por
confusiones involuntarias en el momento de rotularlas en el consultorio o
por actos voluntarios.
El personal que realizará la PAAF deberá ser debidamente capacitado y bajo
responsabilidad del Médico del Consultorio.
De ser necesario BioPet presta el servicio de toma de muestras citológicas,
siempre bajo solicitud previa del Médico responsable, e indicaciones de
éste. Manteniendo el contacto único con el médico tratante de la mascota,
más nunca con el propietario. Este servicio tendrá un valor agregado al
estudio citológico, pudiendo ser aprovechada la oportunidad para capacitar
al personal indicado para que en una futura oportunidad lo puedan realizar
solos.
5. Punción de médula ósea
Muestra destinada para valorar citología de médula ósea.
La muestra puede ser remitida a BioPet de dos maneras:
5.1
Frotis ya elaborado y secado al ambiente.
Se recomienda cuando el médico tiene ya experiencia previa en su
realización, ya que el vidrio debe llegar a BioPet con un contenido
excelente para ser procesado.
Para esto, se debe realizar la punción de médula ósea, siguiendo
todos los procedimientos técnicos adecuados.
Una vez elaborados los vidrios, únicamente por barrido suave,
dejarlos secar al ambiente en posición horizontal. No escatimar en el
8 número de vidrios a elaborar. Se recomienda que por lo menos sean 6
preparados.
Rotular individualmente y empaquetar con la cinta scotch entre porta
y porta y cara con cara, envolver con papel bond y rotular por fuera
del paquete.
Si se desea una interpretación completa, es decir medulograma, y no
solamente la valoración citológica, BioPet debe contar con el
hemograma practicado el mismo día que la punción de médula ósea y
datos clínicos del paciente.
Las muestras deben ser remitidas a BioPet a la brevedad posible, de
preferencia dentro de las 3 horas siguientes a la toma de la muestra
para evitar la maduración de los elementos.
“Sólo debe ser realizada si el operario está bien capacitado en la
práctica, siendo responsabilidad única del Médico del Consultorio la
calidad de la muestra”.
5.2
Muestra completa en tubo tapa lila.
Se recomienda cuando el operario no es muy experto en la realización
de los frotis medulares, y se haya obtenido un volumen superior a los
2cc de muestra. Para esto se recomienda realizar una punción
esternal.
Una vez extraído el contenido, verterlo lentamente y por las paredes
del tubo, previo desacople de la aguja. Homogenizar suavemente para
asegurar la mezcla del EDTA con la muestra.
Rotular y mantener en refrigeración hasta la llegada del vehículo de
BioPet.
Se recuerda que en el mismo día sebe ser tomada la muestra para el
hemograma correspondiente. Y que estas deben ser remitidas a
BioPet a la brevedad posible, de preferencia dentro de las 3 horas
siguientes a la toma de la muestra para evitar la maduración de los
elementos.
9 “La muestra que llega a BioPet en forma de frotis, es más adecuada,
ya que se mantiene mejor la morfología celular”.
BioPet ofrece el servicio de toma de muestra por punción medular,
previa solicitud del Médico del Consultorio, y con el valor agregado al
costo real del análisis de laboratorio y anticipadamente establecido.
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