COPEG PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACION DEL FILTRO MILLIPORE PARA FILTRACION DE MEDIOS 1.0 OBJETIVO: Describir los procedimientos necesarios para la preparación del Filtro Millipore para Filtración de Medios. 2.0 ALCANCE: El alcance de este procedimiento incluye la especificación de los materiales a utilizar, además de las indicaciones para la preparación del Filtro Millipore utilizado en la Filtración de Medios. 3.0 PROCEDIMIENTO: Paso 3.1 Código: Descripción Responsable Materiales: a- Sistema de filtro Millipore b- Membrana millipore de 0.22 µm c- Campana de vidrio d- Gasa e- Cinta adhesiva de autoclave f- Soporte de metal con pinzas g- Papel de esterilización h- Pinzas de contención (2) i- Mangueras de plástico para filtro j- Algodón k- Bolsas para autoclave l- Botellas de vidrio de 500 ó 1000 ml m- Tapas para botellas n- Papel manila o- Gabinete de bioseguridad Personal de la Sección de Cultivo Celular 3.2 Confeccionar con gasa y algodón un tapón del tamaño de la boca de la campana para sellarla. Personal de la Sección de Cultivo Celular 3.3 Colocar en las salidas del filtro las mangueras de plásticos y sellar el extremo que va conectado a la olla con papel y cinta adhesiva de autoclave; en el otro extremo colocar la campana de vidrio con su tapón de algodón. Forre la campana con una bolsa de esterilización y séllela con cinta adhesiva de autoclave. PO-LAD -12 Revisión: 01 Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo Personal de la Sección de Cultivo Celular Página 1 de 3 Documento vigente de INTERNET Propiedad de COPEG, cualquier versión impresa es una copia no controlada COPEG PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACION DEL FILTRO MILLIPORE PARA FILTRACION DE MEDIOS Paso 3.4 3.5 Descripción Responsable Ajustar las pinzas de contención, con cinta adhesiva de Personal de la Sección de autoclave, a las mangueras de entrada y de salida. Cultivo Celular Colocar hacia arriba la parte uniforme de la rejilla del Personal de la Sección de filtro y luego, la parte lisa laminilla de metal. Tomar Cultivo Celular con una pinza la membrana millipore y colocarla sobre la laminilla. 3.6 Colocar la parte superior del filtro tratando que los orificios coincidan con los de la base. Esto se hace para evitar que se rompa la membrana si se mueve la tapa. Personal de la Sección de Cultivo Celular 3.7 Una vez puesta la tapa, coloque los tornillos y ajústelos con la llave, teniendo el cuidado de no apretar demasiado porque puede romper la membrana. Personal de la Sección de Cultivo Celular 3.8 Acomode las mangueras sobre y alrededor del filtro de manera que no queden colgando fuera del sistema de filtro. Envuelva la llave o herramientas en papel manila y séllela con cinta adhesiva para que entre al autoclave junto con el filtro. Personal de la Sección de Cultivo Celular 3.10 Envuelva el soporte de metal con papel manila y cinta adhesiva de autoclave. 3.11 Esterilice durante 15 minutos, a 121°C y a 15 presión. Personal de la Sección de Cultivo Celular Personal de la Sección de Cultivo Celular 3.12 Una vez estéril, coloque el filtro en el Gabinete de bioseguridad y espere a que esté totalmente frío para poder utilizarlo. 3.9 lbs. de Personal de la Sección de Cultivo Celular Personal de la Sección de Cultivo Celular 4.0 DOCUMENTOS DE REFERENCIA Código: PO-LAD -12 Revisión: 01 Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo Página 2 de 3 Documento vigente de INTERNET Propiedad de COPEG, cualquier versión impresa es una copia no controlada COPEG PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACION DEL FILTRO MILLIPORE PARA FILTRACION DE MEDIOS 5.0 HISTORIAL DE MODIFICACIONES FECHA 11/06/07 Código: PO-LAD -12 MODIFICACIONES En el paso 3.1, se agregaron materiales del 3.1k al 3.1o. Para los pasos 3.4 y 3.5, se corrigió la redacción. Se cambió la palabra pinza por llave en el paso 3.7. Se amplió el paso 3.9 y se modificó el tiempo de esterilización a 15 minutos en el paso 3.11. Revisión: 01 Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo Página 3 de 3 Documento vigente de INTERNET Propiedad de COPEG, cualquier versión impresa es una copia no controlada