MEDIO DE CULTIVO Bacteriología General _ Catálogo 1005 ___________________________________________________ AGAR DE BILIS Y ROJO VIOLETA USO Es un medio selectivo para detección y cuenta de organismos coliformes en agua, leche, productos lácteos y otros materiales de importancia sanitaria según las recomendaciones de la APHA. Como medio preparado (Catálogo 1005-P) para la cuenta total de coliformes en líquidos. PRINCIPIO Las sales biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo de microorganismos Gram positivos. La diferenciación de microorganismos entéricos se basa en su habilidad para fermentar la lactosa, formando colonias incoloras, rosas o rojas por el vire del indicador rojo neutro. Los organismos coliformes al fermentar la lactosa forman colonias rojo púrpura con halo de precipitación de sales biliares. El medio de cultivo se utiliza de acuerdo al procedimiento de Vaciado en Placa o de Cuenta en Superficie. Incubar 24 h a 35ºC. FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA Agar Cloruro de sodio Cristal violeta Extracto de levadura 15.0 5.0 0.002 3.0 Lactosa Mezcla de sales biliares Peptona de gelatina Rojo neutro pH 7.4 ± 0.2 10.0 1.5 7.0 0.03 PREPARACIÓN Rehidratar 41.5 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Enfriar a 45ºC y vaciar en cajas de Petri estériles en las que previamente se habrán depositado las alícuotas correspondientes de las muestras en estudio. (Método de Vaciado en Placa). Mezclar por rotación y dejar solidificar. Agregar aproximadamente 4 ml del mismo medio conservado a 45º C para formar una capa superficial no sembrada. Dejar solidificar e incubar en posición invertida de 18 a 24 horas a 35ºC. El medio se puede esterilizar a 121ºC (15lbs de presión) durante 15 minutos obteniendo los mismos resultados. CONTROL DE ACTIVIDAD MICROORGANISMO Escherichia coli Enterococcus faecalis Staphylococcus aureus Salmonella typhimurium CEPA ATCC 25922 ATCC 29212 ATCC 25923 ATCC 14028 RESULTADO Crecimiento abundante, colonias rojo púrpura con halo de precipitación Crecimiento inhibido o colonias puntiformes rosa Crecimiento inhibido Crecimiento escaso a moderado, colonias incoloras, sin halo de precipitación BIBLIOGRAFIA American Public Health Association; Compendium of the Microbiological Examination of Foods. 2nd Edition 1984. American Public Health Association; Standard Methods for the Examination of Dairy Products. 15th Edition 1985. PRESENTACION No. Cat. 1005 1005-E 1005-A 1005-B Deshidratado 1000 g Deshidratado 500 g Deshidratado 450 g Deshidratado 100 g No. Cat. 1005-P Preparado placa 90x15 mmm individual 1005-PP 1005-PR 1005-SP 1005-PM Preparado paquete con 10 placas Preparado paquete con 20 placas DIBIcont-S Semipreparado frasco con 100 ml Preparado paquete con 20 placas DIBIplatefm 1005-PMC Kit para 100 pruebas con 100 placas DIBIplate-fm y 100 filtros DIBICO S.A. DE C.V. MEXICO, D.F. 3