UTILIDAD FUNDAMENTO DEL TEST

UTILIDAD
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Método UV para la determinación de Sacarosa y
D-Glucosa en alimentos, bebidas y otros
materiales. 250 determinaciones.
FUNDAMENTO DEL TEST
El ensayo se basa en las siguientes reacciones
enzimáticas:
Se
determinan
los
valores
de
Absorbancia510nm frente al blanco, antes y
después de la adición de la enzima βfructosidasa.
∆A = Absorbancia Glucosalibre
∆B = Absorbancia Sacarosa + Glucosalibre
Determinación de la D-Glucosa
Glucosa Oxidasa
D-Glucosa + O2 + H2O
D-Gluconato + H2O2
2 H2O2 + Ácido p-Hidroxibezoico + 4-aminoantipirina
Peroxidasa
Quinoneimina Marcada + 4 H2O
FT: 30.K-SUCGL
Por tanto, la D-Glucosa libre de la muestra se
determina por conversión a un compuesto
marcado de Quinoneimina (color rojo), que da
valores de absorbancia a 510nm.
También está implicada la siguiente reacción de
inversión enzimática:
β -fructosidasa
Sacarosa + H2O
D-Glucosa + D-Fructosa
El contenido de Sacarosa se determina a partir de
la diferencia entre las concentraciones de DGlucosa antes y después de la inversión
enzimática.
Inmunología y Genética Aplicada, SA
C/ Hermanos García Noblejas 39
28037. MADRID
Concentración (g/L) = (∆A/0.2) x F x 1/1000
x 1000/1000 x Dilución = ∆A x F x 0.005 x
Dilución
Determinación de la Sacarosa
Concentración (g/L) = (∆B-∆A/0.2) x F x
1/1000 x 1000/1000 x 342/180 X Dilución =
(∆B-∆A) x F x 0.0095 x Dilución
Donde:
∆A y ∆B = absorbancias a 510nm para la DGlucosa libre (∆A); o para la D-Glucosa libre
más la D-Glucosa procedente de la Sacarosa
(∆B)
F = factor de conversión de valores de
absorbancia a µg por 100 µg de D-Glucosa
1/1000 = conversión de microgramos a
miligramos
1000/1000 = conversión de mg/mL a g/L
342/180 = conversión de µg de D-Glucosa (tal
y como se mide) a µg de Sacarosa
Dilución = dilución de la solución de muestra
original
Tel.: 91-3680501
Fax: 91-4087598
www.ingenasa.es
Última revisión: 17/07/15
PRECISIÓN
DETECCIÓN
Y
LÍMITE
DE
El error estándar del ensayo es inferior al 5%.
El Límite de Detección es de 100 mg/L.
EJEMPLOS DE APLICACIÓN
FT: 30.K-SUCGL
Cerveza, zumos de frutas, refrescos, café, leche,
mermelada, miel, alimentos dietéticos, pan,
productos de panadería, caramelos, chocolate,
postres, dulces, helados, frutas y vegetales,
condimentos, tabaco, cosméticos, productos
farmacéuticos, papel y otros materiales (ej.
cultivos biológicos, muestras, etc.)
Conservación
PRODUCTO DISTRIBUIDO POR INGENASA
IT-73840
IT-73780
9191.INGE
Componentes del Kit
Nombre
Contenido
Vial 1
Tampón a pH 4.6
20 mL
Vial 2
β-fructosidasa (invertasa). Más
acida de sodio como
conservante
5 mL
Vial 3
Tampón de reactivo GOPOD.
Tampón a pH 7.4, ácido phidroxibenzoico y acida de sodio
50 mL
Vial 4
Enzimas de reactivo GOPOD.
Glucosa oxidasa + peroxidasa +
4-aminoantipirina
-
Vial 5
Solución estándar de D-Glucosa
(1 mg/mL), en ácido benzoico al
0,2%
5 mL
Vial 6
Muestra de harina control. El
contenido de Sacarosa y DGlucosa se muestra en la
etiqueta
-
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