acidos biliares total (tba)

ACIDOS BILIARES TOTAL
(TBA)
ENZIMATICO COLORIMETRICO
A
PARA SU USO
Para la determinación cuantitativa in vitro de Acidos Biliares Total
en suero y plasma. Este producto es adecuado para utilizar en los
instrumentos A.
No. Cat.
BI 3863
R1. Reactivo 1
R2. Reactivo 2
2 x 18 ml
2 x 8 ml
PRINCIPIO DEL ENSAYO(1,2)
En la presencia de Thio-NAD, la enzima 3-α hidroxiesteroide
deshidrogenasa (3-α HSD) convierte los ácidos biliares en 3-keto
esteroides y Thio-NADH. La reacción puede revertirse y 3-α
HSD puede convertir 3-keto esteroides, y Thio-NADH en ácidos
biliares y Thio-NAD. En la presencia de NADH en exceso, los
ciclos de enzimas se presentan en forma eficaz y la tasa de
formación de Thio-NADH se determina mediante la medición
del cambio específico de la absorción a 405 nm.
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca.
Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren
al manejar reactivos de laboratorio.
La solución R1 y R2 contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el
contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,
lavar inmediatamente el área afectada con agua abundante. En
caso de ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente
a un médico.
La azida sódica reacciona con el cobre y plomo de las tuberías, lo
que podría producir azidas explosivas. Cuando se tire este
reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la
formación de estas azidas. Las superficies metálicas que hayan
sido puestas en contacto con la azida sódica deben ser lavadas
con hidróxido sódico al 10%.
Hojas Sanitarias y de Seguridad están disponibles si se desean.
Por favor, desechar todos los materiales Biológicos y Químicos
según las pautas locales.
Los reactivos deben ser utilizados sólo para los
propósitos indicados por personal adecuado cualificado
de laboratorio bajo condiciones apropiadas de
laboratorio.
PREPARACION DE LAS SOLUCIONES
Thio-NAD
Thio-NADH
Acidos Biliares
Ácidos biliares oxidizados
3-α HSD
NAD
R2. Reactivo 2
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando se
almacena a+2 to +8°C. Una vez que se abre, el reactivo estará
estable durante 28 días en el analizador.
NADH
RECOPILACIÓN Y ALMACENAMIENTO DE
MUESTRAS
Suero, plasma con EDTA/heparina de litio. Las muestras de
suero o plasma están estables durante 1 semana a una
temperatura de 4°C, o durante 3 meses a una temperatura de 20°C.
COMPOSICION DEL REACTIVO
Contenido
R1.
R2.
Concentración inicial de soluciones
Reactivo 1
Tampón de Good, pH 4.0
Thio-NAD
Triton-100
Azida sódica
Reactivo 2
Tampón de Good, pH 9.3
NADH
3-α-HSD
Azida sódica
Estabilizadores
R1. Reactivo 1
Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando se
almacena a+2 to +8°C. Una vez que se abre, el reactivo estará
estable durante 28 días en el analizador.
1.0g/l
0.1% (v/v)
0.2%( w/v)
6.0g/l
12KU/l
0.5% (w/v)
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo 1
Reactivo 2
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Multisueros Valorados Humanos Randox Nivel 2
(No. Cat. HN 1530) y Nivel 3 (No. Cat. HE 1532).
Sueros de Calibración Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)
NOTAS SOBRE EL PROCEDIMIENTO
No se debe utilizar este reactivo si ha estado expuesto a
temperaturas superiores a 25 °C durante más de 8 horas, dado
que la exactitud del ensayo se verá afectada.
Los parámetros químicos para los ensayos dedicador a
de Randox viene predefinidos en el disco duro del ordenador del
analizador. Los programas requeridos se deberían bajar al
software del analizador. Tenga en cuenta que los parámetros
químicos predefinidos utilizan unidades del SI . Si se necesitan
unidades alternativas, el usuario puede editarlas. En este caso, se
debería editar el rango técnico de la técnica según las unidades
elegidas.
No se deben realizar pruebas sobre ácidos biliares y lipasa
(N.º cat. Randox LI 3837) simultáneamente en los a
instrumentos.
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a BI 3863
CALIBRACION
Se recomienda 0,9% de NaCl como calibrador cero y el
calibrador de nivel 3 de suero de calibración de Randox para la
calibración. Se recomienda una calibración de 2 puntos todos los
días, con un cambio del lote/la botella del reactivo o según las
indicaciones de los procedimientos del control de calidad.
LINEARIDAD
Este método es lineal hasta una concentración de 188 µmol/l.
Si la concentración sobrepasa este valor, la muestra se debe
diluir 1 + 4 con una solución del 0,9% de NaCI y debe someterse
a ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5.
PRECISION
Este ensayo utiliza un cálculo lineal y un blanco de reactivo.
Compruebe que en la pantalla [Calibration (Calibración)]
[Checks (Comprobaciones) (F10)] estén seleccionados los
siguientes elementos para este ensayo:
Método de muestreo para estándar
• Duplicado
Medida del blanco de reactivo
• Habilitar blanco de reactivo
• Ninguna
Medición del blanco de reactivo en calibración
• Blanco de reactivo (sin muestra)
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda para el control de calidad diario Multisueros
Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Analizar dos niveles de
controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deberán
encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se
encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se
deberán seguir los siguientes pasos:
1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara.
2. Comprobar que todo material está limpio.
3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reacción
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de
los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte
+00 44 28 94422413.
INTERFERENCIA
Se puede realizar un blanco de reactivo mediante el reemplazo
de la muestra o el estándar con agua desionizada doble. Se
analizaron los siguientes analitos hasta los niveles indicados y se
encontró que no interfieren:
Hemoglobina:
Triglicéridos:
Intralípidos:
Bilirrubina Libre:
Bilirrubina conjugada:
21.0 mol/l
500 mg/dl
500 mg/dl
2000 mg/dl
60 mg/dl
60 mg/dl
94.5 mol/l
2000 mol/l
2000 mol/l
2000 mol/l
60 mol/l
60 mol/l
Precisión Dentro del Análisis
Nivel 1
Media (mol/l)
12.2
DE
0.963
CV(%)
7.89
n
20
Nivel 2
25.81
0.868
3.36
20
Nivel 3
43.2
1.36
3.14
20
Precisión Entre Análisis
Nivel 1
Media (mol/l)
13.4
DE
1.07
CV(%)
7.95
n
20
Nivel 2
26.0
1.31
5.03
20
Nivel 3
41.1
1.14
2.77
20
SENSIBILIDAD
El nivel mínimo detectable que se puede distinguir de cero se
determinó en 3.20 µmol/l.
Se calcula como la concentración que está tres desviaciones
estándar por encima de la desviación estándar más baja.
COMPARACIÓN DE MÉTODOS
Se comparó este método (Y) con otro método comercial
disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión
lineal:
Y = 1.06 X + 0.42
y un coeficiente de correlación de r = 0.99
Se analizaron 40 muestras de pacientes abarcando un rango de
3.0 a 144.5 mol/l.
REFERENCIAS
1. Komiyama, Youichi. , Adachi, Tetsuo. , Ito, Yoshimasa.,
Hikano, Kazuyuki. , Sugiura, Mamoru. , Sawaki, Siiunji.
Microassay Of Serum Bile Acids By An Enzymatic
Cycling Method, Chem Pharm Bull (Toyko) 30:
3796 – 3797 (1982).
2. Agape, V., Russo, P., Xaiz, L., Calmi, S. , and Grisler,
R. Evaluation Of Colorimetric Enzymatic Procedure for
Determining The Total Bile Acids In the Blood. Minerva
Dietol Gastroenterol. Jul-Sep: 35 (3): 159 – 164 (1989).
RANGO NORMAL
Suero Humano (ayuno) 2 - 10 µmol/l
Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango
de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geográfica de la población.
CARACTERÍSITCAS ESPECÍFICAS DE
FUNCIONAMIENTO DE LA TÉCNICA
Las siguientes características se observaron al trabajar con un
analizador RX Daytona.
Revisado 13 Oct 10 bm
Rev. 001
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