Comparación de procedimientos de oxidación de materia orgánica para la determinación de fósforo en material vegetal Martínez, Gloria C. - Píccoli, Analía B. - Ortiz, María L. - Schroeder, María A. Departamento Física-Química - Facultad de Cs. Agrarias - UNNE. Sargento Cabral 2131 - (3400) Corrientes - Argentina. Tel./Fax: +54 (03783) 427131 E-mail: gloriam@ agr.unne.eduar - [email protected] ANTECEDENTES El fósforo es uno de los elementos esenciales para la nutrición de las diferentes especies vegetales. Forma parte de los ácidos nucleicos y fosfolípidos, participa en el almacenamiento y la transformación de la energía, es esencial para algunos procesos tales como la fotosíntesis, síntesis de hidratos de carbono y es indispensable para el cumplimiento de algunas funciones como la división celular y la formación de semillas. La concentración de este elemento en plantas enteras o en órganos indicadores puede verificarse mediante métodos químicos apropiados, que proporcionarán información necesaria sobre la concentración del mismo en la planta y que al compararse con valores de referencia sirven para determinar excesos o carencias. Para realizar el análisis químico, las muestras de tejidos vegetales previamente acondicionadas, son sometidas a procesos de descomposición y/o destrucción de la materia orgánica, también llamados de digestión que permiten destruir los componentes orgánicos y liberar los elementos minerales. Los dos procedimientos más utilizados para llevar a cabo los procesos antes mencionados son la digestión seca (acenización) y la húmeda (digestión ácida). La elección de uno u otro procedimiento, es quizá, lo que más controversia ha generado, dadas las ventajas y desventajas de cada uno de ellos. Si bien ambos métodos están basados en la oxidación de la materia orgánica a través del uso de calor y/o ácidos, algunos analistas previenen sobre posibles pérdidas de algunos elementos, entre los que se encontraría el fósforo, al someter a las muestras a temperaturas altas como las que se utilizan en la acenización. Fue objetivo de este trabajo establecer el procedimiento de destrucción de la materia orgánica que permita la máxima recuperación de fósforo en una muestra vegetal. MATERIALES Y METODOS Se trabajó con una muestra foliar de pimiento (Capsicum anum L.) proveniente de un cultivo bajo cobertura plástica situado en la localidad de Santa Ana (Provincia de Corrientes). La muestra fue desecada en estufa a 60 - 70 oC hasta peso constante, luego molida en molinillo tipo Willey de malla 20. Para la oxidación de la materia orgánica se utilizaron los siguientes procedimientos: Acenización Seca: se pesó 0,5 g de muestra, se colocó en una cápsula de porcelana y se llevó a un horno mufla a 500o C durante 3 horas, hasta la desaparición de puntos carbonosos. La ceniza, luego de enfriada, se disolvió con HCl 6M y se llevó a ebullición por aproximadamente 10 minutos. Cumplido este tiempo se retiró de la plancha caliente, se filtró y se llevó a volumen (50 mL) con agua destilada. Digestión Húmeda: se pesó 0,5 g de muestra la cual se colocó en un tubo de digestión, se le agregó HNO3 concentrado, dejando reposar durante una noche. Al día siguiente se colocaron los tubos en un bloque de digestión y se calentaron a 150° C durante una hora, luego se le adicionó HClO4 y se elevó la temperatura a 210° C por espacio de dos horas. Finalizada la digestión se retiraron los tubos del bloque y una vez enfriado el extracto ácido se llevó a volumen con agua destilada. En ambos casos se utilizó un diseño de Bloques Completos al azar con veinte repeticiones. Con los extractos obtenidos se realizó la determinación de fósforo por espectrometría de absorción molecular (Método Murphy-Riley). Los datos fueron analizados estadísticamente mediante ANOVA y test de Tukey. DISCUSION DE RESULTADOS Al comparar los resultados obtenidos con los valores estándares establecidos por Mills y Benton Jones (1996) se puede observar que las concentraciones de P se encuentran dentro de rangos suficientes para plantas maduras en producción con abundantes frutos. Sin embargo al aplicar ANOVA y Test de Tukey, (Tabla 1), se desprende que existen diferencias significativas entre procedimientos; lo que permite confirmar lo expresado por diferentes autores que establecen que la metodología más adecuada para oxidar la materia orgánica cuando se quiere determinar fósforo es la digestión húmeda, ya que en ésta la temperatura no supera los 340 °C, a partir de la cual pequeñas cantidades del elemento antes mencionado se pierden por volatilización. Tabla 1: Concentración foliar de P, expresado en g . Kg-1, promedio de veinte repeticiones para los dos procedimientos empleados. Tratamiento Acenización Digestión Húmeda P g . Kg-1 2.70 a 3.46 b Letras distintas en columnas difieren significativamente, á 0.05. CONCLUSION El procedimiento de digestión más adecuado para una mayor recuperación de P en esta muestra vegetal es la digestión húmeda (nitroperclórica). BIBLIOGRAFIA Alcántar González, G.; Sánchez García, P. 2000. "Actualización en Nutrición de Cultivos". IRENAT. Colegio de postgraduados. México. Campbell, C.R.; Owen Plank, C. 1998. "Preparation of plant tissue for laboratory analysis". In: Handbook of reference methods for plant analysis. Ed.: Yash P. Kalra. Chapman, Homer D.; Pratt, P.F. 1973. "Métodos de análisis para suelos, plantas y aguas." Ed.: Trillas, S.A. pág. 45-50. Etchevers, J. D. 1999. Técnicas de diagnóstico del sistema de producción y del estado nutrimental de los cultivos. Conferencia. (comisión V). 14° Congreso latinoamericano de la ciencia del suelo. Pucón Chile. CD. Comisión V N°4. López Ritas, Julio; López Mélida, J. 1990. " El diagnóstico de suelos y plantas (métodos de campo y laboratorio)." Ed.: Mundi-Prensa. Mills, Harry A.; Benton Jones, J. Jr. 1991. "Plant analysis handbook II." Ed.: MicroMacro Publishing, Inc. Ministry Of Agriculture, Fishieries And Food. 1981. Técnicas de análisis de suelos, vegetales y piensos. Ed. Academia. León. España. 60 p.