FOSFATO SÓDICO DE DEXAMETASONA

DEXAMETASONA,
FOSFATO SÓDICO DE
O
H
CH3
HO
OH
O
ONa
P
H
CH3
F
ONa
O
H
CH3
H
O
C22H28FNa2O8P
PM: 516,4
2392-39-4
Definición - Fosfato Sódico de Dexametasona
es Sal disódica de (11,16) 9-fluoro11,17-dihidroxi-21-(fosfonooxi)-16-metilpregna1,4-dieno-3,20-diona. Debe contener no menos de
97,0 por ciento y no más de 102,0 por ciento de
C22H28FNa2O8P, calculado sobre la sustancia libre
de agua y alcohol y debe cumplir con las siguientes
especificaciones.
Caracteres generales - Polvo cristalino blanco
o algo amarillo. Inodoro o posee un débil olor a
alcohol. Excesivamente higroscópico. Fácilmente
soluble en agua; poco soluble en alcohol; muy poco
soluble en dioxano; insoluble en cloroformo y éter.
Presenta polimorfismo.
Sustancias de referencia Dexametasona SR-FA.
Fosfato de Dexametasona SR-FA.
Fosfato Sódico de Dexametasona SR-FA. Fosfato
Sódico de Prednisolona SR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases inactínicos de cierre perfecto.
ENSAYOS
Identificación
A - Aplicar la siguiente técnica cromatográfica.
Fase estacionaria - Emplear una placa para
cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía) recubierta con gel de sílice para cromatografía con indicador de fluorescencia, de 0,25 mm de
espesor.
Fase móvil - Butanol, agua y ácido acético glacial (60:20:20).
Solución estándar A - Pesar exactamente alrededor de 20 mg de Fosfato Sódico de Dexametasona SR-FA, transferir a un matraz aforado de 20 ml,
disolver y completar a volumen con metanol.
Solución estándar B - Disolver 10 mg de Fosfato Sódico de Prednisolona SR-FA en la Solución
estándar A y diluir a 10 ml con la misma solución.
Solución muestra - Pesar exactamente alrededor
de 10 mg de Fosfato Sódico de Dexametasona y
transferir a un matraz aforado de 10 ml, disolver y
completar a volumen con metanol y mezclar.
Revelador - Agregar cuidadosamente y enfriando, 20 ml ácido sulfúrico a 60 ml de alcohol. Dejar
enfriar y diluir a 100 ml con el mismo solvente
[NOTA: preparar en el momento de su uso].
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la
placa 5 µl de la Solución muestra y 5 µl de las Soluciones estándar A y B. Dejar secar las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el
frente del solvente haya recorrido aproximadamente
tres cuartas partes de la longitud de la placa. Secar
la placa al aire y examinar bajo luz ultravioleta a
254 nm: la mancha principal en el cromatograma
obtenido a partir de la Solución muestra debe ser
similar en tamaño, intensidad y valor de Rf a la
obtenida con la Solución estándar A. Pulverizar
sobre la placa con Revelador y calentar a 120 °C
durante 10 minutos o hasta que las manchas aparezcan. Dejar enfriar y examinar bajo luz natural y
bajo luz ultravioleta a 366 nm: la mancha principal
en el cromatograma obtenido a partir de la Solución
muestra se debe corresponder en tamaño, valor de
Rf, color a la luz natural y fluorescencia a la luz
ultravioleta que la mancha principal obtenida con la
Solución estándar A. El ensayo solo es válido si en
el cromatograma obtenido con la Solución estándar
B se observan dos manchas, las cuales pueden no
estar completamente separadas.
B - El residuo de ignición debe responder a los
ensayos para Fosfato <410> y para Sodio <410>.
Determinación de la rotación óptica <170>
Rotación específica: Entre + 74° y + 82°, calculada sobre la sustancia libre de agua y alcohol.
Solución muestra: 10 mg por ml, en agua.
Determinación del pH <250>
Entre 7,5 y 10,5, determinado sobre una solución 1 en 100.
Determinación de agua <120>
Titulación volumétrica directa. La suma de los
porcentajes del contenido de agua y del contenido
de alcohol, determinado según se indica en Determinación de alcohol, no debe ser mayor de 16,0 %.
Determinación de alcohol <130>
Proceder según se indica para Método II; excepto que se debe emplear una columna con fase estacionaria constituida por un copolímero de 4-vinilpiridina y estireno-divinilbenceno y las siguientes
modificaciones.
Solución del estándar interno - Transferir
1,0 ml de alcohol isopropílico a un matraz aforado
de 100 ml, completar a volumen con agua y mezclar.
Solución estándar - Preparar una solución
1 en 50 de alcohol en agua. Determinar la densidad
relativa a 25 °C (ver 160. Determinación de la
densidad relativa) y obtener el porcentaje de
C2H5OH por referencia a la Tabla alcoholimétrica
en Tablas.
Preparación estándar - Transferir 4,0 ml de Solución estándar y 5,0 ml de Solución del estándar
interno a un matraz aforado de 10 ml. Completar a
volumen con agua y mezclar. Inyectar 2 µl de esta
solución en el cromatógrafo de gases.
Preparación muestra - Pesar exactamente alrededor de 500 mg de Fosfato Sódico de Dexametasona, transferir a un matraz aforado de 10 ml, agregar 5,0 ml de Solución estándar interno y mezclar
hasta disolver. Completar a volumen con agua y
mezclar. Inyectar 2 µl de esta solución en el cromatógrafo de gases.
Cálculos - Calcular el porcentaje de alcohol en
la porción de Fosfato Sódico de Dexametasona en
ensayo por la fórmula siguiente:
4(S/P)(RM/RE)
en la cual S es el porcentaje de alcohol en la Solución estándar, P es el peso en g de Fosfato Sódico
de Dexametasona empleado en la Preparación
muestra y RM y RE son las respuestas del pico de
alcohol, relativas al estándar interno, en la Preparación muestra y la Preparación estándar, respectivamente. El contenido de C2H5OH no debe ser
mayor de 8,0 %.
Fosfato inorgánico
Solución estándar de fosfato Disolver
143,3 mg de fosfato monobásico de potasio seco en
agua y diluir a 1 litro. Esta solución contiene el
equivalente a 0,10 mg de fosfato en cada ml.
Reactivo para fosfato A - Disolver 5 g de molibdato de amonio en ácido sulfúrico 1 N para obtener 100 ml.
Reactivo para fosfato B - Disolver 350 mg de
sulfato p-metilaminofenol en 50 ml de agua, agregar 20 g de bisulfito de sodio, mezclar hasta disolver y diluir con agua a 100 ml.
Solución muestra - Pesar exactamente alrededor
de 50 mg de Fosfato Sódico de Dexametasona,
transferir a un matraz aforado de 25 ml y disolver
en una mezcla de 10 ml de agua y 5 ml de ácido
sulfúrico 2 N, calentando si fuera necesario. Agregar 1 ml de Reactivo para fosfato A y 1 ml de Reactivo para fosfato B, completar a volumen con agua,
mezclar y dejar reposar a temperatura ambiente
durante 30 minutos.
Solución estándar - En forma similar y en sucesión inmediata, preparar una Solución estándar
empleando 5,0 ml de Solución estándar de fosfato
en lugar de 50 mg de Fosfato Sódico de Dexametasona.
Procedimiento - Determinar concomitantemente las absorbancias de ambas soluciones, en celdas
de 1 cm a 730 nm, con un espectrofotómetro, empleando agua como blanco. La absorbancia de la
Solución muestra no debe ser mayor que la de la
Solución estándar. No debe contener más de 1,0 %
de fosfato.
Dexametasona libre
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de
25 cm × 4,5 mm con fase estacionaria constituida
por grupos fenilo químicamente unidos a partículas
porosas de sílice de 5 µm de diámetro. El caudal
debe ser aproximadamente 1,2 ml por minuto.
Solución de trietilamina - Preparar una solución
que contenga 7,5 ml de trietilamina en 1 litro de
agua. Ajustar a pH 5,4 con ácido fosfórico.
Fase móvil - Solución de trietilamina y metanol
(74:26). Filtrar y desgasificar. Hacer los ajustes
necesarios (ver Aptitud del sistema en 100. Cromatografía).
Solución estándar - Disolver una cantidad exactamente pesada de Fosfato de Dexametasona SR-FA en Fase móvil para obtener una solución
de aproximadamente 0,5 mg por ml. Preparar una
segunda solución disolviendo una cantidad exactamente pesada de Dexametasona SR-FA en una
mezcla de metanol y agua (1:1) para obtener una
solución de aproximadamente 50 µg por ml. Transferir 10,0 ml de la primera solución y 1,0 ml de la
segunda solución a un matraz aforado de 100 ml.
Completar a volumen con Fase móvil y mezclar.
Solución muestra - Pesar exactamente alrededor
de 50 mg de Fosfato Sódico de Dexametasona,
transferir a un matraz aforado de 100 ml y disolver
con Fase móvil. Completar a volumen con Fase
móvil y mezclar. Diluir 5,0 ml de esta solución con
Fase móvil a 50,0 ml.
Solución de aptitud del sistema - Preparar una
solución en Fase móvil de aproximadamente 0,05 y
0,02 mg por ml de Fosfato de Dexametasona
SR-FA y de Dexametasona SR-FA, respectivamente.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) Cromatografiar la Solución de aptitud del sistema y
registrar las respuestas de los picos según se indica
en Procedimiento: la eficiencia de la columna determinada para el pico principal no debe ser menor
de 900 platos teóricos; el factor de asimetría para el
pico principal no debe ser mayor de 1,6; la resolución R entre los picos de fosfato de dexametasona y
dexametasona no debe ser menor de 1,8; la desviación estándar relativa para inyecciones repetidas no
debe ser mayor de 1,0 %.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
20 µl) de la Solución estándar y la Solución muestra, registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos de dexametasona. Calcular la
cantidad de dexametasona (C22H29FO5) en la porción de Fosfato Sódico de Dexametasona en ensayo. No debe contener más de 1,0 %.
Pureza cromatográfica
Sistema cromatográfico, Solución reguladora,
de acetato, Solución A, Solución B y Fase móvil
proceder según se indica en Valoración, excepto
que el cromatógrafo se debe programar del siguiente modo:
Tiempo Solución A
(minutos)
(%)
0-3,5
90
Solución B
(%)
10
3,5-23,5
9060
1040
23,5-34,5
605
4095
34,5-59,5
5
95
59,5-60
590
9510
Etapa
VALORACIÓN
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de
25 cm × 4,6 mm con fase estacionaria constituida
por octilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 3 a 10 µm de diámetro. Mantener la temperatura de la columna a aproximadamente 40 °C. El caudal debe ser aproximadamente
1,0 ml por minuto. El cromatógrafo se debe programar del siguiente modo:
Tiempo Solución A
(minutos)
(%)
0-3,5
90
Solución B
(%)
10
3,5-24
9060
1040
24-35
605
4095
35-60
5
95
60-60,1
590
9510
60,1-65
90
10
Isocrática
Gradiente
lineal
Gradiente
lineal
Isocrática
Gradiente
lineal
Solución muestra - Pesar exactamente alrededor
de 25 mg de Fosfato Sódico de Dexametasona,
transferir a un matraz aforado de 25 ml, disolver en
Solución A, completar a volumen con el mismo
solvente y mezclar.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) Cromatografiar la Solución muestra y registrar las
respuestas de los picos según se indica en Procedimiento: la resolución R entre el pico principal y el
de la impureza más cercana no debe ser menor de
1,8; la desviación estándar relativa para inyecciones
repetidas no debe ser mayor de 4,0 %.
Procedimiento - Inyectar en el cromatógrafo
aproximadamente 15 µl de la Solución muestra,
registrar el cromatograma y medir las respuestas de
todos los picos. Calcular el porcentaje de cada
impureza individual en la porción de Fosfato Sódico de Dexametasona en ensayo, en relación a la
suma de las respuestas de todos los picos. No debe
contener más de 1,0 % de cualquier impureza individual y no más de 2,0 % de impurezas totales.
Impurezas orgánicas volátiles <520>
Método II.
Etapa
Isocrática
Gradiente
lineal
Gradiente
lineal
Isocrática
Gradiente
lineal
Isocrática
Solución reguladora de acetato - Disolver 7 g
de acetato de amonio en 1 litro de agua, ajustar a
pH 4,00  0,05 y mezclar.
Solución A - Metanol, agua y Solución reguladora de acetato (7:7:6). Filtrar y desgasificar.
Solución B - Metanol y Solución reguladora de
acetato (7:3). Filtrar y desgasificar.
Fase móvil - Emplear mezclas de Solución A y
Solución B según se indica en Sistema cromatográfico. Hacer los ajustes necesarios (ver Aptitud del
sistema en 100. Cromatografía).
Preparación estándar - Disolver una cantidad
exactamente pesada de Fosfato de Dexametasona SR-FA en Solución A para obtener una solución
de aproximadamente 0,92 mg por ml.
Preparación muestra - Disolver una cantidad
exactamente pesada de Fosfato Sódico de Dexametasona en Solución A y mezclar para obtener una
solución de aproximadamente 1,0 mg por ml.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) Cromatografiar la Preparación muestra y registrar
las respuestas de los picos según se indica en Procedimiento: la resolución R entre el pico de fosfato
de dexametasona y el de la impureza más cercana
no debe ser menor de 1,0. Cromatografiar la Preparación estándar y registrar las respuestas de los
picos según se indica en Procedimiento: la desviación estándar relativa para inyecciones repetidas no
debe ser mayor de 2,0 %.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
15 µl) de la Preparación estándar y la Preparación
muestra, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de los picos principales. Calcular la
cantidad de C22H28FNa2O8P en la porción de Fosfato Sódico de Dexametasona en ensayo.