REDVET. Revista Electrónica de Veterinaria E-ISSN: 1695-7504 [email protected] Veterinaria Organización España Cuenca Condoy, Mercy; Avellaneda Cevallos, Juan Diluyentes utilizados en inseminación artificial porcina REDVET. Revista Electrónica de Veterinaria, vol. 18, núm. 9, septiembre, 2017, pp. 1-11 Veterinaria Organización Málaga, España Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=63653009012 Cómo citar el artículo Número completo Más información del artículo Página de la revista en redalyc.org Sistema de Información Científica Red de Revistas Científicas de América Latina, el Caribe, España y Portugal Proyecto académico sin fines de lucro, desarrollado bajo la iniciativa de acceso abierto REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2017 Volumen 18 Nº 9 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.html REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN 1695-7504 Diluyentes utilizados en inseminación artificial porcina Diluentes used in swine artificial insemination Cuenca Condoy, Mercy; Doctora en Medicina Veterinaria y Zootecnia, Magister en Producción Animal, Docente de la Universidad Católica de Cuenca, Carrera de Medicina Veterinaria, Cuenca - Ecuador. Avellaneda Cevallos, Juan; Doctor en Ciencias, Docente de la Universidad Técnica Estatal de Quevedo. Contacto: [email protected],[email protected] RESUMEN El objetivo es proporcionar información detallada de las características que deben cumplir los diluyentes de corta y larga duración utilizados para la conservación del semen porcino, para ello he revisado y sintetizado algunas de las investigaciones más actuales, donde se reportan diferentes técnicas y procesos que deben cumplir los diluyentes, para permitir la conservación del material seminal del cerdo por mayor tiempo, sin causar daño en su estructura y sin disminuir su capacidad fecundante; la mayoría de los investigadores coinciden, en que, un diluyente debe garantizar la preservación de los espermatozoides sin ninguna complicación, optimizando los resultados de fertilidad, prolificidad y calidad genética en la industria porcina a nivel mundial. Palabras claves: Diluyente, fertilidad, inseminación, semen porcino. ABSTRACT The objective is to provide detailed information on the characteristics that the short and long term diluents used for the preservation of boar semen have to meet, for this I have reviewed and synthesized some of the most recent researches, where different techniques and processes that the diluents have to meet to allow the preservation of pig seminal material for longer time, without causing damage to its structure and without decreasing its fertilizing capacity are reported. Most researchers agree that a diluent should ensure the preservation of sperm without any complications, optimizing the results of fertility, prolificacy and genetic quality in the swine industry worldwide. Key Words: Boar semen diluents, artificial insemination, sperm pigs, fertility Diluyentes Utilizados en Inseminación Artificial Porcina http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917/091726.pdf 1 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2017 Volumen 18 Nº 9 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.html 1. INTRODUCCIÓN Gracias a los trabajos realizados por Chris Polge, la técnica de inseminación artificial fue reintroducida en el sector porcino, Rivera (2012), que se desarrollo ampliamente a nivel comercial por la década de los años ochenta, cuando se estandarizan los protocolos de inseminación, Gadea (2003). Así la técnica comprende un conjunto de pasos necesarios para obtener (colectar), preparar (analizar, expandir, dosificar y conservar), introducir y depositar el material seminal del verraco y sus gametos, por vía instrumental (catéter), en el momento más oportuno (ovulación de la cerda) y en la zona idónea de la vía genital de la cerda (parte anterior del cérvix uterino), con el propósito de conseguir la fecundación de los óvulos (Calderon 2014). La dilución y conservación del semen porcino en refrigeración es una práctica que brinda a la industria porcina la posibilidad de aprovechar al máximo la capacidad reproductiva del verraco, para ello los diluyentes en donde se conserva el material seminal, deben proporcionar los nutrientes necesarios para el mantenimiento metabólico de la célula espermática (glucosa), la protección frente al shock térmico por frío (BSA), controlar el pH del medio (bicarbonato, TRIS, HEPES), la presión osmótica (NaCl, KCl) y los antibioticos para la inhibición del desarrollo microbiano (Rugeles et al, 2013). (Aleman,Alfaro y Hurtado, 2007) Actualmente la literatura reporta que un 99 \% de las inseminaciones realizadas en cerdas, utilizan semen conservado de forma ideal a temperatura de 15 a 20ºC por uno a cinco días. Cuando se conserva al semen en temperaturas por debajo de 14ºC se presentan alteraciones de la membrana del espermatozoide repercutiendo en el poder fecundante del mismo. Por otra parte temperaturas por encima de los 20ºC disminuyen enormemente la vida útil del semen. Es por eso que, hoy en día los diluyentes comerciales utilizados en la industria porcina, se siguen modificando con el propósito de obtener semen con alta capacidad fecundante en procesos de inseminación artificial (IA). Características como volumen total, concentración y motilidad son indicadores utilizados para valorar la calidad del semen y su respuesta a la manipulación, particularmente la motilidad debido a su asociación con el número total de lechones nacidos (Rugeles et al 2013). La selección correcta de diluyentes con excelente calidad, junto con un manejo adecuado del semen, permiten utilizar dosis viables en la inseminación artificial que se lleva a cabo en las diferentes granjas porcinas, y que se verán reflejadas en el número de lechones nacidos, por lo tanto tomando en consideración lo antes mencionado, me he planteado como objetivo primordial revisar algunas investigaciones publicadas en los últimos años con el fin de destacar la importancia económica y productiva que tiene una buena elección y utilización de diluyentes cuando se requiere conservar Diluyentes Utilizados en Inseminación Artificial Porcina http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917/091726.pdf 2 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2017 Volumen 18 Nº 9 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.html semen porcino de forma ideal, que garantice el mayor número de óvulos fecundados. 2. REVISIÓN DE LITERATURA 2.1. Diluyente Un diluyente se considera aquella solución acuosa que permite aumentar el volumen del eyaculado preservando las características funcionales de los espermatozoides manteniendo un nivel de fertilidad adecuado (Valencia 2006). El semen del verraco puede ser preservado in Vitro en forma líquida o congelada, el uso de semen congelado continúa siendo muy limitado con respecto al uso de semen fresco diluido, debido principalmente a su baja fertilidad, como consecuencia de su sensibilidad al frío (Ochoa et al, 2008). El descubrimiento de las propiedades crioprotectoras del glicerol marco un significativo avance en la criopreservación de semen en las diferentes especies domésticas. Pero también se describió una peculiar sensibilidad del semen porcino al enfriamiento y las subsecuentes investigaciones solo han hecho mejoras relativamente pequeñas a las técnicas establecidas a principios de los años 50 (Juarez 2009). El uso del semen congelado en la actualidad está limitado a casos muy específicos o bien asociado a la introducción de un nuevo material genético de alto valor para inseminar animales puros en granjas de selección o simplemente se asocia a labores de investigación (Gadea 2005). Para poder conservar los espermatozoides durante periodos prolongados es necesario que se reduzca la actividad metabólica de las células espermáticas mediante la dilución en un medio adecuado y reducción de la temperatura, Gadea (2003); para lograr este propósito se realizan diversas investigaciones en la fabricación de diluyentes sean estos de corta o larga duración, que permitan conservar el semen por algún tiempo sin afectar sus características sobre todo la fertilidad. También es necesario tomar en cuenta los datos en cuanto a temperatura de conservación se refiere, pues cuando se reduce la temperatura los movimientos de aquellos fosfolípidos que componen la membrana se ven reducidos y se producen separaciones de faces lipídicas, que a su vez repercuten en alteraciones irreversibles de las proteínas presentes en la membrana, por lo tanto su funcionalidad y la viabilidad celular se ve comprometida. La literatura reporta que actualmente en el mundo 99 \% de las inseminaciones realizadas emplean un método de conservación, en donde el semen permanece de 1-5 días a temperatura de 15 a 20ºC, conservándose de forma ideal. Variaciones de 1 a 2ºC pueden afectar la calidad del semen ya Diluyentes Utilizados en Inseminación Artificial Porcina http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917/091726.pdf 3 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2017 Volumen 18 Nº 9 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.html que es particularmente sensible a los cambios térmicos, por lo que se hace necesario conservarlo a 17ºC y evitar fluctuaciones de temperatura. La conservación del semen refrigerado depende principalmente del diluyente, ya que contribuye a preservar las características funcionales de las células espermáticas manteniendo el nivel de fertilidad del eyaculado. El semen refrigerado se puede conservar entre 15 y 18ºC. Estas temperaturas son las más utilizadas tanto en los centros de inseminación artificial como en las explotaciones porcinas. Además el uso de BTS (diluyente ampliamente conocido en Europa y actualmente en Venezuela) permite mantener viable el material espermático a 17ºC durante unos 5 días, con un porcentaje de preñez en muchos casos superior al 80 \% (Aleman,Alfaro y Hurtado, 2007). 2.2. Características y funciones de los diluyentes Se puede mencionar que la característica principal de los diluyentes es mantener viable la célula espermática lo mejor posible por un tiempo determinado. En base a su composición genérica los diluyentes deben cumplir las siguientes funciones: 1) Proporcionar la energía para el metabolismo de los espermatozoides 2) Neutralizar residuos metabólicos 3) Mantener el equilibrio osmótico 4) Estabilizar las membranas de los espermatozoides 2.3. Componentes de los diluyentes La importancia de conocer la composición de los diluyentes porcinos radica en que esta se encuentra relacionada con la fertilidad, ya que la misma reduce a medida que aumenta la conservación del liquido seminal, ademas de estar influenciada por la calidad del semen y el numero de espermatozoides (Hernandez 2009). Los componentes básicos que deben estar presentes a la hora de elaborar un diluyente con el objeto de que cumpla con los requerimientos anteriormente descritos son: Glucosa, para proporcionar energía, y por su valor energético es la mas utilizada, aunque también se puede emplear galactosa, fructosa, ribosa o trehalosa sin que los resultados hayan superado a la glucosa. Un estudio realizado por Diaz (2006), muestra que la glucosa es el monosacárido utilizado preferentemente por los espermatozoides de cerdo. Diluyentes Utilizados en Inseminación Artificial Porcina http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917/091726.pdf 4 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2017 Volumen 18 Nº 9 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.html TES, HEPES, MOPS, TRIS, utilizados como tamponadores, aunque los mas usados actualmente son HEPES y MOPS, pues tienen la capacidad de regular el PH seminal en un rango más amplio evitando así, la reducción del metabolismo energético de los espermatozoides y su motilidad mejorando de esta manera su capacidad para fertilizar y no son dependientes de la temperatura. Por otra parte existen otros como bicarbonato y el citrato sódico que poseen capacidad tampón limitada. Sales de iones inorgánicos, como el cloruro sódico y potásico, empleadas como reguladoras de la presión osmótica, pues es conocido que una caída de la misma por debajo de los 200 mOsm representa una reducción significativa de la motilidad espermática. Antibióticos, entre ellos los aminoglicósidos principalmente gentamicina, neomicina, y la kanamicina en concentraciones próximas a los 200 mg/L. También se está aplicando una nueva generación de antibióticos (ceftiofur, apramycina, etc.), sin que existan aún resultados concluyentes sobre su uso. Debemos tener presente que la UE, Directiva 90/429/CEE regula el uso de combinaciones entre antibióticos eficaces contra leptospira y micoplasma, con una concentración que debe tener al menos un efecto equivalente a las concentraciones mínimas de 500 UI de Estreptomicina/ml, 500 UI de penicilina/ml, 150 mg de lincomicina/ml, 300 mg de espectinomicina/ml (Admin 2014). Tabla 1: Composición de algunos diluyentes utilizados actualmente en inseminación artificial porcina. Ingredientes Sustrato energético Glucosa(anhidra), g/l Glucosa(monohidrato), g/l Sistema tampón Citrato sódico (2), g/l Bicarbonato sódico, g/l EDTA (disodio), g/l Cloruro de potasio, g/l Ácido cítrico, g/l Tris buffer (base), g/l HEPES, g/l Estabilización de la membrana Cisteína, g/l BSA (fracción V) BTS Kiev Modena Zorlesco Androhe p 37,00 - 66,00 - 27,50 - 11,70 - 26,00 6,00 1,25 1,25 0,75 - 3,75 1,25 3,70 - 6,90 1,00 2,35 2,90 5,65 - 11,70 1,80 2,10 3,80 6,50 - 8,00 1,20 2,40 - - - - 0,10 - 2,50 Diluyentes Utilizados en Inseminación Artificial Porcina http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917/091726.pdf 5 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2017 Volumen 18 Nº 9 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.html Antibióticos (3) Neomicina sulfato, g/l 1,00 Penicilina G (Na), g/l 0,60 0,60 0,60 Dihidrostreptomicina, g/l 1,00 1,00 1,00 Se puede observar la composición de los diluyentes. 0,60 1,00 2.4. Tipos de Diluyentes A nivel práctico de acuerdo a las condiciones de producción, los diluyentes se clasifican en dos grandes grupos, los que tienen como objetivo la conservación del semen a corto plazo (1-3 días) o aquellos que tienen como objetivo la conservación del semen por más de 4 días considerados como diluyentes a largo plazo (Gadea 2003). A nivel de mercado los diluyentes se clasifican por su composición, pudiendo ser de corto, mediano o largo plazo de conservación, Admin (2014); las fuentes de energía y los electrolitos que se añaden a ellos son muy generales, por ello lo que marca la diferencia al momento de obtener un diluyente, son los sistemas tampón y los compuestos que se añaden para estabilizar las membranas de células espermáticas. 2.4.1. Diluyentes de corto plazo Se utilizan principalmente en lugares donde la distribución de las dosis seminales es a corta distancia, conservan el semen a 15-20ºc (15), entre las principales ventajas que presentan estos diluyentes consta: La utilización de una concentración espermática baja, que permite realizar más inseminaciones con una sola recolección. El bajo costo en reproductivos similares Baja tasa de motilidad espermática su preparación, obteniéndose resultados Aunque un estudio realizado por Rueda (2009), en donde, compararon la motilidad de espermatozoides conservados en dos tipos de diluyentes en distintos tiempos de conservación (24, 48,72 horas) demuestra que no existen diferencias significativas para la motilidad de espermatozoides, pero si para la resistencia espermática post-descongelación, llegando a determinar que uno de los principales problemas de los diluyentes es la baja resistencia espermática que presentan luego de la descongelación, otros autornes, mencionan que, la principal desventaja es la corta duración de viabilidad espermática, por otra parte para Torres et al (2014), una de las principales desventajas es la disminución en los parámetros de calidad seminal, puesto que se ve afectada la integridad del ADN. Diluyentes Utilizados en Inseminación Artificial Porcina http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917/091726.pdf 6 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2017 Volumen 18 Nº 9 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.html Entre los diluyentes de semen porcino a corto plazo más utilizados e investigados constan el DICIP, D16 y el BTS. Del tipo de la fórmula BTS pero con variantes, se utilizan generalmente para conservaciones no superiores a 48-72 horas con semen refrigerado (Le Coz 2007). El BTS, conocido también como fórmula base o diluyente de referencia, fue diseñado por el Dr. Pursel en Estados Unidos, Le Coz (2007), permite mantener viable el material espermático a 17ºC durante unos 5 días, con un porcentaje de preñez superior al 80\%, demostrando de esta manera que la temperatura de conservación del semen influye ampliamente en cuanto al nivel de fertilidad se refiere. Aleman,Alfaro y Hurtado, (2007) El BTS quizás es el diluyente mas usado en la actualidad a nivel mundial. Este medio se caracteriza por añadir una pequeña cantidad de potasio, que permite mantener la actividad de la bomba sodio/potasio y evita la reducción de K intracelular que estaría asociada con la disminución de motilidad espermática (Rueda 2011). El citrato de sodio-yema de huevo, considerado como diluyentes de primera generación, fue diseñado originalmente para la conservación de semen bovino, y luego se empleó para la conservación de semen porcino por un periodo de 24 horas manteniendo una tasa de motilidad espermática del 61\% (Conejo et al, 1996). Yema de huevo-glucosa, este diluyente fue utilizado en Bélgica y Checoslovaquia, se determinó que causa hinchazón de acromosomas, y deterioro en la motilidad y sobre-vivencia espermática. Leche de descremada y en polvo, también fue utilizada como conservador de semen porcino, pudiendo utilizar leche fresca entera la misma que tiene una sustancia espermicida, la lactenina, debiendo hervir la leche a 95ªC por 10 minutos para poder inactivarla (Conejo et al, 1996). 2.4.2. Diluyentes de largo plazo Tienen una duración de 4 días o más, se utilizan en zonas donde el lugar de producción seminal y el lugar donde va a ser utilizado el semen es distante, Rueda (2009); además son muy complejos, permitiendo conservaciones de 5 a 6 días requiriendo ciertas exigencias en cuanto a la fracción que se va a recoger, tipo de dilución con agua destilada, control elevado de contaminación bacteriana utilizando un antimicrobiano no espermicida, y con una refrigeración entre 15-17ºc (Le Coz 2007). Este tipo de diluyentes han sido ampliamente estudiados con el fin de poder ampliar el tiempo de conservación sin disminuir la calidad espermática, por ello Torres (2014) realizaron un estudio con el objetivo de poder jerarquizar la capacidad para conservación de dosis refrigeradas durante 4 días de tres diluyentes comerciales (de larga o media duración) de semen porcino Diluyentes Utilizados en Inseminación Artificial Porcina http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917/091726.pdf 7 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2017 Volumen 18 Nº 9 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.html (Androstar Plus®, MRA® y MIII®), analizando: viabilidad, funcionalidad de membrana, integridad acrosomal y movilidad, ellos determinaron que no existen diferencias significativas, entre estos diluyentes siendo similar su capacidad de conservación durante un periodo de 4 días. Entre las principales ventajas que nos ofrecen estos diluyentes constan la posibilidad de transportar el semen a largas distancias, ahorro de importaciones y reducción de costos por concepto de sementales, alimento e instalaciones, Rueda et al (2009); ademas permiten realizar pruebas diagnósticas del semen antes de ser utilizadas, para comprobar la presencia de virus, calidad del semen, y por ultimo brindan una mejor distribución de las muestras seminales, . Por otra parte el mismo autor menciona que una de las desventajas que presentan estos diluyentes es la utilización de altas concentraciones de esperma para compensar la pérdida de viabilidad de los espermatozoides por envejecimiento. Tabla 2: Diluyentes de corta y larga duración, en la conservación del semen porcino. Diluyentes agrupados de acuerdo al tiempo de conservación del semen porcino Corta duración (1-3 días) Beltsville Lliquid (BL-1) Beltsville Thawing Solution (BTS) Illinois Variable Temperature (IVT) Kiev Larga duración (más de 4 días) Acromax ® Androhep ® Modena MULBERRY III ® Reading X-Cell ® Zorlesco ZORPVA Se puede observar la agrupación de los diluyentes, la misma fue dada de acuerdo al periodo de duración para la conservación del semen. Para la conservación de semen porcino, se realizaron adaptaciones en los diluyentes de semen bovino, que son a base de yema de huevo con fosfato o citrato y leche, entre ellos cabe destacar al Illinois Variable Temperature (IVT) diluyente de semen bovino que en la década de los 60 fue adaptándose como diluyente para semen porcino, con la adición de un agente quelante (EDTA) que permite bloquear la acción del calcio mejorando los procesos de capacitación y reacción cromosómica, y con ella toma el nombre de Kiev el mismo que a su vez ha sido modificado y recibido otras denominaciones como (EDTA, Merck I, Plisko, Guelph), el Kiev ha permitido una amplia difusión de la IA porcina y se sigue utilizando con gran éxito actualmente (Gadea 2003). Diluyentes Utilizados en Inseminación Artificial Porcina http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917/091726.pdf 8 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2017 Volumen 18 Nº 9 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.html Así mismo en la década de los 70 se realizan varios ensayos para poner a punto diluyentes de semen porcino en refrigeración y congelación, entre ellos el que más destaco fue el ensayo realizado por Pursel y Johnson con el medio BTS (Betsville Thawing Solution), el mismo que fue diseñado como medio de descongelación para luego adaptarlo como diluyente para refrigeración. Entre los diluyentes mas conocidos a largo plazo constan: El Kiev y BTS, son los diluyentes de conservación del semen refrigerado más utilizados a nivel mundial, tienen en común que están diseñados para mantener la capacidad fertilizante de los espermatozoides durante varios días (Hernandez 2009). La conservación del semen refrigerado depende principalmente del diluyente, ya que contribuye a preservar las características funcionales de las células espermáticas manteniendo el nivel de fertilidad del eyaculado. El semen refrigerado se puede conservar a temperaturas entre 15 y 18ºC, siendo estas las más utilizadas tanto en los Centros de inseminación artificial como en las explotaciones porcinas. Además el uso de BTS (diluyente ampliamente conocido en Europa y actualmente en Venezuela) permite mantener viable el material espermático a 17ºC durante unos 5 días, con un porcentaje de preñez en muchos casos superior al 80 \% (Aleman,Alfaro y Hurtado, 2007). El Zorlesco, fue uno de los primeros diluyentes considerados como de larga duración, entre su composición tiene la adición de TRIS como regulador del pH, albumina sérica bovina y cisteína, su utilización en campo no dio buenos resultados. El Modena, creado por Moretti en 1981, incrementándole el nivel de glucosa y eliminando la BSA (Albumina Serica Bovina) del medio Zorlesco, tampoco dio buenos resultados. EL MR-A, desarrollado en España por Santiago Rillo y Eulogio Alias, considerado como diluyente de larga duración, el mismo ha dado buenos resultados cualitativos (Rueda 2011). Los medios ZORVPA y Reading, entre su composición tienen alcohol de polivinilo que les permite mejorar el porcentaje de acromosomas intactos pero no superan los resultados obtenidos de otros diluyentes por lo tanto su uso no se ha extendido (Gadea 2003). En los últimos años han aparecido nuevos diluyentes (A-cromax, X-Cell, Androhep Plus, Vital, SpermAid, Mulberry III, entre otros), los mismos que están considerados como diluyentes de larga duración. Los diluyentes empleados en los procesos de congelación del semen porcino se basan en utilizar yema de huevo y glicerol como agentes crioprotectores, elevada concentración de azucares y la adición de un agente detergente. Diluyentes Utilizados en Inseminación Artificial Porcina http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917/091726.pdf 9 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2017 Volumen 18 Nº 9 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090917.html 3. CONCLUSIONES Según los estudios realizados por algunos autores en cuanto a la capacidad de fertilización de los diluyentes de corta y larga duración de semen porcino, se puede concluir que no existen diferencias significativas en cuanto a fertilidad y prolificidad entre los 3-4 primeros días de conservación del semen, presentando cierto grado de ventaja los diluyentes de larga duración puesto que permiten conservar el semen del verraco hasta 7 días o más, conservando un gran porcentaje de fertilidad. Por otra parte es necesario considerar el tipo de uso que se le va a dar al semen, puesto que si no es necesario conservar el semen por más de 4 días (granjas porcinas de fácil acceso y manejo), la elección más racional debe orientarse a utilizar diluyentes de corta duración ya que son de bajo costo y ofrecen resultados similares a los diluyentes de larga duración. Así mismo cuando se requiere conservar el semen porcino por más de 4 días (granjas porcinas de difícil acceso, evaluaciones sanitarias del semen, etc.), se debería utilizar diluyentes de larga duración aumentando la concentración de las dosis con la finalidad de compensar las pérdidas por envejecimiento de los espermatozoides. Por ultimo no se debe olvidar que la elección del diluyente se realiza para optimizar los resultados de fertilidad y prolificidad de las explotaciones porcinas, ya que una buena elección del mismo, repercute en el rendimiento económico de las granjas, para el futuro se cree que existirá un incremento tanto en el uso como en la investigación de nuevos diluyentes por parte de los centros y personal inmerso en la realización de Inseminación Artificial debido a las grandes ventajas que estos ofrecen. 4. BIBLIOGRAFÍA ADMIN. Caracateristicas del diluyente de semen porcino. [Online].; 2014. 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