Pruebasinmunoinflainfe

PRUEBAS INMUNOLOGICAS DIAGNOSTICAS PARA
ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y NO INFECCIOSAS.
CITOCINAS.
Son polipéptidos o proteínas segregados por células no endocrinas (endotelio, fibroblastos,
leucocitos) que aparecen en la inflamación y en la respuesta inmune. Actúan como
mediadores sobre células diana con receptores apropiados de membranas y proceden de
genes específicos. Comprenden las interleucinas, interferones, factores de necrosis tumoral
y factores estimulantes de colonias.
DEFENSINAS.
Son péptidos que actúan como antibacterianos endógenos. Están producidos por los
macrófagos y neutrófilos y constituyen moléculas de defensa contra las infecciones.
INTERLEUCINAS
Son polipéptidos, del grupo de las citocinas, que afectan las funciones de tipos específicos
de células. Se conocen actualmente 10 diferentes:
IL.1 Procede de muchas células nucleadas (epitelios, linfocitos, etc.) en respuesta a varios
estímulos y actúa células T y B.
IL.2 procede de los linfocitos T (CD4), actúa como facilitador de la respuesta inmune y
desciende en una serie de inmunodeficiencias.
IL.3. Multihemopoyetina.
IL.4. producidas por células T, B y células cebadas; afecta las células hematopoyeticas y
linfoideas. Relación entre niveles elevados de IL 4 sérico y la resistencia a desarrollar un
desorden autoinmune.
IL.5. Producida por células T y actúa sobre células B.
IL.6. procede de los monocitos, células T y titulares, influye en la determinación de células
B y T y hepatocitos, y en la secreción de inmunoglobulinas.
IL.7. Se origina de Medula ósea y estimula el crecimiento de células B activadas.
IL.8. Deriva de los monolitos, activa las células T y neutrófilos, y regula la inflamación.
IL.9. Deriva de las células T, estimula su crecimiento y el de las células cebadas.
IL.10. Poco conocida.
INTERFERONES.
Estas citocinas son polipéptidos producidos por linfocitos B y T, y por los macrófagos, y se
distinguen los alfa y gamma. Los beta proceden de los fibroblastos, células epiteliales y
macrófagos. Actividad antivirica, reguladoras del crecimiento, diferenciación y desarrollo
de las células inmunitarias. Los interferones acido- débiles se han observado en LES y
SIDA. El INF-alfa se disminuye en plasma en la artritis reumatoide. La presencia de INFalfa predice el desarrollo de SIDA en enfermos VIH-Positivos.
COMPLEMENTO.
Componente normal del suero de la sangre que interviene en las reacciones antígenoanticuerpo provocando lisis células y las lesiones típicas en las enfermedades autoinmunes.
Comprende 9 fracciones de las 4 son las mas conocidas ( C1, C2, C3 y C4 ) y 3 inhibidores.
Clínicamente suele bastar determinar el contenido global del complemento en suero. Puede
utilizarse el método de “hemólisis al 50%” (CH50) que oscilan entre 150 y 250 U/I (SI) y
en la técnica de Mayer entre 32 y 54 U/mL de suero. En la microtécnica de Lachmann, las
cifras están entre 400 y 700 U/L.
Fracciones más importantes: C´3=80-140 mg /mL. y C´4 = 20-50 mg /mL.
Existe un inhibidor del C´1 activado (esterasa), de concentración normal entre 12-23
mg/100ml, deficiente en la angioedema hereditario.
Complemento
Aumento:
1. Procesos inflamatorios, con motivo de infecciones agudas, como neumonía, fiebre
reumática, endocarditis bacteriana subaguda y artritis reumatoide.
2. Infartos de miocardio o de pulmón. Sigue um curso paralelo a VCG y proteína C
reactiva.
3. Mucovicidosis, auemento de C´3 y C´5.
4. Aumenta en la ictericia obstructiva.
Disminuye:
En procesos ligados a nefritis, artritis o vasculitis.
1. Glomerulonefritis aguda, de manera característica se mantiene el C3 normal y su
adherencia inmunológica persiste normal. Las formas crónicas de nefropatías
muestran un aumento del complemento. Solamente una parte de los casos de
nefrosis lipoidea, en la neuropatía lúpica y síndrome nefrótico desciende también el
complemento.
2. LES en especial con participación renal, el complemento total está marcadamente
bajo, en especial C1, C2 y C4. las variaciones del complemento sirven de índice
para la actividad del proceso. También descenso de C´3 y C´4 en conectivitis mixta.
3. Crioglobulinemia mixta (IgG-IgM), que aparece en casos de púrpura
crioglobulinémica, síndrome de Sjogren, artritis reumatoide o periartritis nodosa. En
la endocarditis subaguda con lesiones renales. En la anemia hemolítica por
anticuerpos fríos.
4. Deficiencias genéticas del complemento: edema angioneurotico hereditario,
agammaglobulinemia congénita.
5. Vasculitis hipocomplementémica de Mac Duffie, con artritis y urticaria.
6. Enfermedad de los criadores de palomas, desciende notablemente C´3.
7. Shock circulatorio, muy frecuentemente.
8. Enfermedad ateroembólica con afección renal por el embolismo colesterólico, con
eosinofilia, y a veces, trombocitopenia.
9. Infecciones por Neisseria, déficit de C´5 y C´8. En las piógenas descenso de C´3.
10. Mieloma Múltiple.
FACTORES ANTIGAMMAGLOBULINA (Factor Reumatoide)
Descritos por primera vez en artritis reumatoide pero no son exclusivos de ésta. Son
diferentes tipos de anticuerpos que pueden presentarse de forma aislada o coincidente
en un enfermo.
Se trata de macroglobulinas del tipo IgM, que actúan como anticuerpos frente a las IgG
propias, pero alteradas en el sentido de adquirir carácter antigénico.
1. Prueba de Waaler- Rose ( SSCAT), aglutinación de hematíes de carnero por el
suero del enfermo. Titulo igual o mayor a 1/16.
2. Reacción de Heller- Svartz- Scholssmann. Esecencialmente parecida a la anterior,
pero más especifica por retirar previamente las heteroaglutininas naturales del suero
problema. Más sensible: 70% de positividad en AR, frente al 60%
aproximadamente, con la técnica de Waaler- Rose.
3. Prueba de látex de Suiger y Platz. Se emplea globulina gamma del propio paciente,
que queda adherida a las partículas de látex en suspensión. Es positiva a titulo
superior a 1/20. Sensibilidad ante poliartriticos: 71%.
4. Reacción de inhibición de Ziff. Sirve para demostrar la ausencia del factor inhibidor
de la aglutinación en el suero de los poliartriticos y otros pacientes portadores de los
factores reumatoides. En estos casos su sensibilidad es superior a 90%.
La positividad de las reacciones antes mencionadas orientan a:
1. Diagnostico diferencial, ante un cuadro reumático entre poliartritis crónica genuina
(AR) y otros procesos parecidos: resultan negativas aquellas pruebas en la fiebre
reumática, espondiloartritis anquilopoyética, síndromes de Still-Chauffard, de Reiter
y de Sjorgen, poliartritis psoriasica, acompañan el lupus diseminado, periarteris
nodosa y esclerodermia.
2. Entre hepatopatias , 40% de cirróticos dan positividad en pruebas.
3. Endocarditis bacteriana subaguda determina resultados positivos en el 50% de casos
frente a las endocarditis no bacterianas.
4. Positividad en sarcoide de Boeck, macroglobulinemias, lúes, silicosis, neoplasisas,
y tuberculosis pulmonar, viriasis, lepra, etc.
ANTICUERPOS ANTINUCLEARES
La aparición en el plasma de anticuerpos antinucleares durante el curso de determinados
procesos. Pueden detectarse indirectamente por métodos citológicos (fenómeno LE,
loose-body test) o mediante técnicas propiamente serológicas.
Existen varios tipos de anticuerpos antinucleares: unos reaccionan frente a
nuecleoproteínas, por ejemplo, mientras que otros lo hacen específicamente sólo frente
al DNA, éstos último,al parecer exclusivos de LES. Pero sólo losnativos, es decir, frente
al antigeno con doble hélice, son específicos, mientras que los desnaturalizados no lo
son.
Los anti-ADN suelen dar resultado comprendidos entre 0 y 25 U/ml. Valores superiores
son patológicos y característicos del Lupus (LES):
Técnicas:
1. Células LE. Observación microscópica de polinucelares, en sangre periférica o
medular, que engloba inclusiones esféricas de origen nuclear o que rodean, a
manera de roseta, masas extracelulares de la misma naturaleza. Los cuerpos
hematoxilinicos tienen parecida significancia de anticuerpos IgG antinucleares.
2. Loose-body test” de Van Sobren. Resulta positiva esta prueba cuando los
corpúsculos nucleares aparecen sueltos, dispersos por todo el campo microscópico,
resulta negativo si todo el material nuclear se aglomera en una única maraña
nucleoproteica. Sería de una sensibilidad y especificidad parecidas a las de la
demostración de células LE y recomendable como técnica de rutina para casuística.
3. Prueba de consumo de gammaglobulina y inmunofluorescencia. Pruebas directas ,
sensibles pero menos especificas, y, generalmente, no están al alcance de los
laboratorios clínicos.
Valoración clínica.
Se observan células de LE en casos de poliartritis crónica, hepatitis crónica,
escloroderma progresiva y reacciones medicamentosas. El fenómeno LE será positivo
en el 95% de casos de lupus visceral, con tal de reiterar su examen en distintos
momentos, si la primera observación es negativa. De ahí su valor diagnostico
diferencial.
ANA tipo difuso,homogéneo: corresponde a anticuerpos antinucleoproteinas y
predominan en el lupus, artritis reumatoide y arteritis. El tipo moteado o reticular indica
anticuerpos anti-Sm y anti-RNP (ribonucleoptoteina) aparecen en la conectivitis mixta,
la esclerodermia y el LES. El tipo periférico o en anillo los producen anticuerpos antiDNA y es casi especifico del LES. El nucleolar se debe a anticuerpos anmti-RNA
nucleolares y se observa en escleroderma y miositis.
SEROLOGIA DE LA SIFILS.
REACCION DE WASSERMANN
Existen 2 grupos de enfermos con reacciones de Wassermann y complementarios
falsamente positivas:
1. Seudopositividad aguda y pasajera. Ocurre en ciertas infecciones víricasmononucleosis infecciosa, sarampión, hepatitis epidémica y otras- o bacterianas,
como en la endocarditis lenta y aun en tuberculosis pulmonar o neumonía. Falcón y
Heggli han descrito “ infiltrados Waselman-positivos” en el pulmón, de origen
virico, con prolongada lesión de aquellas falsas positividades y frecuente
normalidad de la reacción de Meinicke: así, en el 25% de casos de ornitosis.
2. Tipo crónico de reacciones inespecíficas, es decir, con reiterada falas positividad,
más allá de seis meses. En estos casos, el problema diagnostico puede ser difícil,
pues aparte de la lepra no se acompañan de sintomatología especifica.
Gran número de ellas son formas latentes o procesos autoinmunes como: LES,
anemias hemolíticas, anemia perniciosa, púrpura trombopénica, miastenia síndrome
se Sjorgen, tiroiditis de Hashimoto y sensibilizaciones medicamentosas.
Una positividad en esta prueba puede ser signo precoz de una enfermedad
autoinmunitaria subclinica.
PRUEBAS TREPONEMICAS Y REAGINICAS
Nuevas técnicas más especificas y sencillas que las de Wassermann.
1 TPI. Prueba de inmovilización del Treponema (Test de Nelson). Es la más
especifica y segura, ya que traduce directamente la existencia de anticuerpos frente
al treponema. Consiste en la comprobación microscópica y sobre fondo oscuro del
efecto inmovilizador que sobre una suspensión de Treponema pallidum tiene el
suero del enfermo luético. Los resultados se expresan en tanto por ciento o según
títulos de dilución. Negativo: 0-20%, dudosa = 21-50%, positiva 51%-100% de
inmovilización. Se puede practicar también con LCR.
2 Otras pruebas treponémicas. Uso de espiroquetas vivas o muertas.
Las técnicas de inmunofluorescencia (FTA 200= fluorescent treponemal
antibody absortion) permiten visualizar, como halos fluorescentes la zona de
encuentro del antígeno-los treponemas de un cultivo-anticuerpo.
Fijación de complemento RPCF ( reiter protein complement fixation) , uso de
treponemas de cultivos.
TPI ( treponema pallidum inmune adherence) las espiroquetas muertas se
adhieren a glóbulos rojos, si está presente el anticuerpo específico en el suero.
3. Pruebas reagénicas o cardiolipidicas. En realidad se tratan de reacciones
inmunológicas indirectas, por lo tanto no rigurosamente especificas:
Antigeno, cardiolipina del extracto de corazón de buey, con el que se une la
regina correspondiente, uno de los anticuerpos presentes en el suero de los
sifiliticos.
Se incluye dos tipos de pruebas: las de fijación de complemento (Kolmer) y las de
floculación (Kline, Meinicke, USR- unheated serum regin-, Hinton) una de estas
últimas más popularizada y universal por sencillez como un método de “screening”
con fines epidemiológicos, es la VDRL (veneral disease research laboratory).
En esta técnica se prepara la suspensión de cardiolipina en el mismo momento de
practicar la reacción, que puede realizarse en un portaobjetos con el suero problema:
si es positivo aparecen grumos de floculación observables a simple vista o al
microscopio. La RPR ( repit plasma reagin), es una variante parecida.
ANTICUERPOS ANTIERITROCITARIOS
Explican de manera inmunológica cuadros de anemias o complicaciones hemolíticas.
Destacan por su mayor frecuencia e interés clínico los anticuerpos calientes
incompletos, las crioaglutininas o anticuerpos fríos completos y las hemólisis frías de
Donath-Landsteiner.
Tipos:
A. Autoanticuerpos calientes antieritrocitarios. Actúan a 37°C y por su carácter de
incompletos no provocan, por sí solo, aglutinación de los hematíes. Son
responsables de un grupo de anemia hemolíticas adquiridas idiomáticas, llamadas
tipo Louttit, pero también aparecen, como complicación, e una serie de
enfermedades, especialmente en la leucemia linfática crónica y en el LES.
B. Crioaglutininas. Su presencia en el suero da lugar a la aglutinación de los hematíes
propios, a bajas temperaturas (0-5° C ), con lo que la VSG se acelera notablemente
a estas temperaturas, a diferencia de lo que suicede con las crioglubulinas, que dan
una VSG muy acelerada a 37° C y escasa o nula a 0 ° C. Son autoanticuerpos IgM.
Puede haber crioaglutininas en dilusion 1/16 en individuos sanos; más de 1/32
puede aparecer en las siguientes enfermedades:
a) neumonía atípica, infecciones por Legionella pneunophila, influenza y
mononucleosis infecciosa.
b) Anemia hemolítica adquirida y congénita, células falciformes.
c) Cirrosis hepática y hepatitis.
d) AR
e) Linfomas malignos
C. Hemolisisnas. De Donath-Landsteiner. Son autoanticuerpos antieritrocitarios que
actúan en dos fases (lisis por frío – calor): se fijan a los hematíes en frío y provocan la
hemólisis a los 37 ° C. son responsables de la hemoglobinuria paroxística nocturna .
1. Autoaglutinación.
2. Prueba de Coombs (antiglobulina IgA e IgG).
Directa: demostración de autoanticuerpos en anemias hemolíticas adquiridas y en la
eritroblastosis fetal. Indirecta: demuestra la presencia en suero de anticuerpos
incompletos. En la inmunización maternofetal por factor Rh puede poner de manifiesto
anticuerpos en el suero de la madre antes del nacimiento del niño.
ANTICUERPOS ANTICELULA ENDOTELIAL (AACE)
Son un grupo heterogéneo de autoanticuerpos, adquiridos de forma espontánea,
caracterizados por dirigirse contra membranas de células endoteliales. Presencia en
LES, dermatomiositis, AR y vasculitis diversas. Otras enfermedades con afección
vascular, esclerosis múltiple, púrpura trombocitopénica, síndrome hemolítico urémico y
rechazo de injertos.
PRUEBAS SEROLÓGICAS
PYOGENES
EN
INFECCIONES
POR
STREPTOCCOCUS
ANTIESTREPTOLISISNA O (ASL o ASO), cuyo titulo se expresa en unidades
Todd. Cifra normal= 102 – 250 U Todd/ml. Elevación significa infección
estreptocócica sobrepasada o actual y concretamente debida a Stretococos beta
hemoliticos del grupo serológico A. Amigdalitis y escarlatina, sepsis puerperal,
erisipela, etc. Pero tiene especial interés en los procesos estreptocócicos que parecen
como segunda enfermedad: fiebre reumática y glomerulonefritis aguda. No es
específica de F Reumática, pero apoya su diagnóstico cuando la historia y los signos
clínicos lo sugieren. Sin embrago, un titulo superior a 500 U solo suele registrarse en la
F. R concede un valor diagnostico a esta prueba, en tales casos. Un valor diferencial
cobra el titulo de ASL endocarditis dudosas, porque es normal en las bacterianas
subagudas (endocarditis lenta). También en la artritis atípica: poliartritis crónica
primaria (AR) determina títulos bajos, normales, de antiestreptolisina.
No sirve como índice de actividad reumática ni para pronóstico, pudiendo
observarse normalización de la VSG y de la proteína C reactiva en enfermos con titulo
todavía alto de antiestreptolisina, curados ya de su brote reumático.
En las nefritis agudas de etiología dudosa puede servir también para el diagnostico de
ASL: normal en la nefritis lúpica, sepsis lenta y, naturalmente en la tuberculosa,
estafilococica o vírica. Se encuentra normal en el síndrome nefrótico ni en la
glomerulonefritis crónica. Aumentos inespecíficas en hepatopatías y LES.
PRUEBA DE ANTI- DNA asa B (Determinación de Anti- Desoxirribonucleasa B)
Se considera la mejor prueba individual para la detección serológica de infección
Estreptocócica. Un incremento del título de 2 o más incrementos entre las muestras de
las fases aguda y convalescente se considera significativo. Es de gran utilidad para la
confirmación de una infección Estreptocócica reciente cuando se sospecha de Fiebre
Reumática o Glomerulonefritis aguda.
ANTIGENO AUSTRALIA O DE SUPERFICIE Y OTROS EN LA HEPATITIS Y
SUS ANTICUERPOS.
El término hepatitis vírica se emplea para referirse a las infecciones causadas por virus
fundamentalmente hepatotropos -virus de la hepatitis A (VHA), B (VHB), C (VHC), D
(VHD) y E (VHE)-, aunque otros virus como el citomegalovirus, el virus del herpes
simple o el virus de la mononucleosis pueden causar lesión hepática.
Desde el punto de vista etiológico puede detectarse en suero la presencia de marcadores
virales de infección activa o actual que, para cada tipo de virus, son:





VIRUS A:
anti VHA-IgM indica infección actual,
anti VHA-IgG: infección pasada (proporciona inmunidad permanente)
VIRUS B:
El VHB está formado por un núcleo central de DNA rodeado de una nucleocápside o
core, todo ello envuelto por una cubierta externa. El core se replica en el núcleo de las
células del hígado, liberándose en el curso de su síntesis un fragmento viral con
capacidad antigénica (HBe Ag) que determinará la aparición de un anticuerpo (anti
HBe). El core posee también capacidad antigénica (HBc Ag), no detectable en suero,
pero sí en hígado, produciéndose también su correspondiente anticuerpo (anti HBc),
detectable en suero y que puede ser de tipo IgM (infección reciente o actual) y de tipo
IgG (infección pasada con inmunidad). La cubierta externa del virus posee también
capacidad antigénica, conociéndose como antígeno Australia o de superficie (HBs Ag),
que puede ser detectado en suero al igual que su anticuerpo (anti HBs).
En resumen, los patrones serológicos más frecuentes son:
infección activa, (en cualquiera de los siguientes supuestos):
o HBs Ag (+) con anti HBc-IgM (+)
o HBs Ag (+) con HBe Ag (+)
o HBs Ag (+) con anti HBe (+) y DNA viral (+)
infección pasada (inmunidad):
o anti HBc-IgG (+) con anti HBs (+) y el resto de marcadores negativos
inmunidad por vacunación:
o sólo anti HBs (+)
VIRUS D:
El VHD es un virus defectivo que requiere del VHB para su replicación y expresión
clínica. El VHD puede adquirirse simultáneamente al VHB (coinfección), dando lugar a
una hepatitis aguda bifásica con un reascenso de las transaminasas, o puede infectar a
un portador crónico de VHB (sobreinfección). La eliminación del VHB impide la
infección delta y determina la curación de ambas infecciones.


Los principales marcadores serológicos del VHD son:
fase aguda: anti HD-IgM con marcadores de VHB
fase crónica: anti HD-IgG con marcadores de VHB
VIRUS C:
En la infección por VHC la presencia de anticuerpos en suero (anti VHC) no aporta una
información concluyente sobre la existencia de una infección activa, por lo que es
necesaria la determinación de viremia mediante la técnica de Reacción en Cadena de
Polimerasa (PCR de VHC) para asegurarse la existencia de la replicación viral.
VIRUS E:
La infección por el VHE es muy infrecuente en nuestro medio. En mujeres embarazadas
puede inducir fallo hepático fulminante. Se confirma la infección activa por la presencia
en suero de anta VHE.
ANTICUERPOS ANTIFOSFOLIPIDOS
Los anticuerpos antifosfolípidos (AAP) son un grupo de autoanticuerpos con afinidades
variables por complejos de proteínas y fosfolípidos. Los anticuerpos anticardiolipina
(ACAs) son detectados usualmente por técnicas de ELISA, mientras que el
anticoagulante lúdico (AL) es medido como una actividad que prolonga las reacciones
de la coagulación dependientes de fosfolípidos. Se han descrito en enfermedades
autoinmunes, infecciosas, asociados a drogas, en neoplasias y en individuos sanos y se
han asociado con fenómenos trombóticos venosos y arteriales, abortos a repetición y
trombocitopenia, constituyendo lo que se denomina "síndrome antifosfolípido" (SAF).
El AL es un grupo heterogéneo de inmunoglobulinas de tipo IgG o IgM, que se
presenta en forma aislada o en combinación. Los ACAs son inmunoglobulinas de tipo
IgG, IgM o IgA, y el más frecuente es el tipo IgG; también pueden presentarse aislados
o en combinación. Al igual que el AL, los ACAs pueden manifestarse en diferentes
situaciones clínicas.
La ß2-GPI es también un cofactor esencial para la expresión del AL en algunos
pacientes, hasta el punto que niveles menores de 50 mg/mL de ß2-GPI pueden dar lugar
a resultados falso negativos. Los resultados de algunos trabajos indican que la expresión
del AL requiere de la presencia de fosfolípidos aniónicos y protrombina humana y que
estos anticuerpos están dirigidos a un complejo formado por ambos. Basados en estos y
otros hechos experimentales, los AAF se han clasificado como AL que reconocen al
complejo protrombina (humana)-fosfolípidos, inhibiendo así las reacciones de la
coagulación dependiente de fosfolípidos25 y ACAs dirigidos hacia la ß2-GPI
inmovilizada en una superficie de fosfolípidos aniónicos. También se han identificado
otras subpoblaciones de anticuerpos con afinidad por el complejo fosfolípido proteína C
(PC) activada con o sin proteína S (PS) presente y no se descarta la posibilidad de la
existencia de anticuerpos con afinidad por complejos de fosfolípidos y otras proteínas
aún no identificadas.
ANTICUERPOS ANTICITOPLASMICOS DE NEUTROFILOS (ANCA)
Desde 1982 se ha reconocido la existencia de anticuerpos específicos para las proteínas
de los gránulos citoplasmáticos de los neutrófilos y los lisosomas de los monocitos que
están asociados a diversos tipo de vasculitis de vasos pequeños, principalmente,
granulomatosis Wegener, poliangeitis microscópica y síndrome de Churg-Strauss.
Los anticuerpos anticitoplasmáticos de neutrófilos (ANCA) pueden ser detectados por
inmunofluorescencia indirecta, produciéndose dos patrones principales de tinción:
ANCA citoplásmico y ANCA perinuclear.
Usando estudios de inmunoquímica específícos en pacientes con vasculitis, se demostró
la presencia de dos anticuerpos específicos para dos antígenos mayores:
antimieloperoxidasa (MPO-ANCA) y antiproteinasa 3 (PR3-ANCA).
También se ha podido determinar que el 90% de los ANCA citoplasmáticos
corresponde a PR3-ANCA y el 90% de los ANCA perinucleares son MPO-ANCA(16).
Aproximadamente, el 70% de pacientes con el síndrome de Churg-Strauss son ANCA
positivo, generalmente, del patrón ANCA perinuclear (MPO-ANCA).
Debe mencionarse que, recientemente, Merkel(17) encontró que los ANCA perinucleares
pueden ser positivos debido a la presencia de anticuerpos antinucleares, por lo que
recomendó la combinación de pruebas de inmunofluorescencia con las de ELISA para
una mayor especificidad de los ANCA con las vasculitis de vasos pequeños
ANTICUERPOS ANTICENTROMERO (ACA)
Los anticuerpos anticentrómero (ACA) son marcadores inmunológicos que aparecen en
ciertas enfermedades del colágeno (sobre todo en el Síndrome de CREST) así como en
diversas patologías
Los anticuerpos anticentrómero (ACA) se dirigen fundamentalmente contra tres tipos
de proteinas: CenpA (17 KDa), CenpB (60 KDa) y CenpC (140 KDa). Con menos
frecuencia los sueros con ACA se unen a otras proteínas centroméricas (CenpD, CenpE
y CenpF). El principal antígeno es la proteína CenpB en la que hay al menos 5 epítopos
conocidos. Estas proteínas se asocian con la secuencia centromérica del DNA. Los
ACA han sido clásicamente considerados como específicos de Esclerosis Sistémica
concretamente en su presentación como Síndrome de CREST (calcinosis, fenómeno de
Raynaud, esofagitis, esclerodactilia y telangiectasia) en los cuales se estima que son
positivos en un 50% de los casos. Con menos frecuencia se asocian con fenómeno de
Raynaud primario o secundario y otras enfermedades autoinmunes.
ANTICUERPOS ANTIISLOTES PANCREATICOS
Los anticuerpos antiislotes pancreáticos (ICA) fueron descubiertos en 1974 y están
asociados con la DM1. Se ha encontrado también que los sujetos con DM2 son ICA
positivos más comúnmente que los controles normales. De los 4 anticuerpos (ICA,
AAI, AGAD, AIA2) encontrados en la DM1 clásica en niños, solamente los ICA y los
AGAD son frecuentes en la DM2; los anticuerpos antiinsulina (AAI) y antitirosina
fosfatasa (AIA2) son menos frecuentes. Sucesivamente, en las poblaciones de
diabéticos tipo 2 estudiadas alrededor del mundo en las cuales se han determinado los
ICA y AGAD, a los sujetos con resultados positivos para estos anticuerpos se les ha
considerado con LADA, diabetes tipo 2 ICA +, diabetes tipo 1,5 o diabetes tipo 1 de
lenta progresión
CEA (ANTIGENO CARCINOEMBRIONARIO)
El antígeno carcinoembrionario (CEA, por sus siglas en inglés) es normalmente
producido durante el desarrollo fetal, su producción termina antes del nacimiento y en
adultos sanos no se encuentran valores elevados, pero puede elevarse en personas que
tienen cáncer o algunos trastornos benignos. El antígeno carcinoembrionario se utiliza
primordialmente para controlar el cáncer colorectal, sobre todo cuando la enfermedad
se ha hecho metástasis. También se utiliza los niveles elevados de este marcador
tumoral para controlar otros tumores, los cuales incluyen melanoma; linfoma y cánceres
del pecho, pulmón, páncreas, estómago, cuello del útero, vejiga, riñón, tiroides, hígado
y ovario.
También se pueden presentar niveles elevados de antígeno carcinoembrionario en
pacientes con trastornos no cancerosos, que incluyen la enfermedad inflamatoria del
intestino, pancreatitis y la enfermedad del hígado. El uso del tabaco también puede
contribuir a niveles de antígeno carcinoembrionario más altos de los normales.
TPA (ANTIGENO POLIPEPTIDICO HISTICO)
El antígeno polipeptídico hístico (TPA), se localiza en la membrana de células
tumorales, tejidos fetales y placenta. El TPA es un marcador poco útil en el diagnóstico
del cáncer de pulmón, a pesar de encontrarse positividades incluso en estadios iniciales.
En estadios avanzados escapan al diagnóstico un 30 % y hay falsos negativos en
presencia de metástasis. La sensibilidad se acerca al 100 % cuando existen metástasis
en hígado y hueso. Parece pues, relacionarse con la masa tumoral. Este marcador se
correlaciona con el pronóstico y es útil en la monitorización del tratamiento. El TPA se
ha encontrado elevado en otros tumores, como el de mama, ovario, vejiga y colon; y en
algunas enfermedades benignas e inflamatorias.
ANTICUERPOS ANTI - RANA
Los anticuerpos Anti – RANA se descubrieron en pacientes con Síndrome de Sjögren
asociado a Artritis Reumatoide, se detecta en 70 – 90% de los pacientes con Artritis
Reumatoide, entre otras conetivopatías y enfermedades reumáticas, e incluso en
personas sanas. El antígeno RANA aparece exclusivamente en células infectadas por el
virus de Epstein Barr. Es un antígeno muy soluble e idéntico al EBNA (“Epstein Barr
nuclear antigen”) aunque la elevación de los anticuerpos anti – RANA no siempre es
paralela al aumento de los anti –EBNA. Probablemente se unen a epítopos diferentes
del mismo polipéptido. Actualmente se acepta que estos anticuerpos no son específicos
de Artritis Reumatoide, no detectándose en fases precoses de la enfermedad
PRUEBAS FEBRILES
REACCIÓN DE WIDAL
Para detectar casos sospechosos de fiebre Tifoidea o Paratifoidea, encontrando en el suero
del paciente un aumento del título de Anticuerpos Anti- Salmonella.
A) Esta reacción presenta 4 pruebas diferentes en las que se utilizan los antigenos:
Antígeno “O” de S. Typhi, Antígeno “H” de S. Typhi, Antígeno “H” de S.
Paratyphi A, Antígeno “H” de S. Paratyphi B.
B) Esta indicado para detectar anticuerpos anti- salmonella en pacientes en los que
clínicamente se sospecha fiebre tifoidea. Los anticuerpos aparecen en la segunda
semana de la enfermedad y alcanzan su máximo a la tercera semana.
C) Interpretación clínica:
a. Se definen valores normales de 1:50 hasta 1:320.
b. Para llegar al diagnóstico serológico con esta prueba, es necesario un
aumento del cuadruple o mayor del título.
c. Los anticuerpos frente a los antígenos O y H pueden elevarse en suero
posterior a la vacuna contra la fiebre tifoidea o por infección por otros
bacilos Gram (-).
REACCIÓN DE HUDDLESON
Se estudia en el suero del paciente Anticuerpos Anti- Brucella. Se utilizan suspensiones
bacterianas de Brucella abortus. El antígeno detecta anticuerpos contra Ag A y M de las 3
especies de Brucella (abortus, suis y mellitensis). Los anticuerpos usualmente se detectab
en la segunda semana de la enfermedad. La evidencia de Brucelosis reciente solo se puede
aceptar cuando el título presenta un aumento de cuatro veces o más durante los primeros 2
meses de la enfermedad. Al agregar 2- Mercaptoetanol a la prueba de aglutinación inactiva
los anticuerpos IgM y permite la detección de Anticuerpos IgG contra Brucella.
REACCIÓN DE WEIL FELIX
Se usan suspensiones bacterianas de cepas de Proteus OX 19, OX 2 y OX K. Esta prueba es
utilizada para detectar anticuerpos Anti- Rickettsias en pacientes que clínicamente se
sospecha Rickettsiosis. Los anticuerpos se pueden detectar durante la segunda semana
después de iniciar la enfermedad. Un aumento del cuadruple de aglutinina OX 19 es
evidencia presuntiva de Tifo epidémico, murino o Fiebre manchada.
PRUEBAS INMUNOLÓGICAS SÉRICAS ÚTILES EN EL DIAGNÓSTICO DE
LAS ENFERMEDADES INFLAMATORIAS
PROTEÍNA C REACTIVA
Es una Beta gama globulina producida por el hígado que tiene la capacidad de aumentar la
fagocitosis y activar el complemento por la vía clásica. Es un reactante de fase aguda
altamente sensible. El método inmunológico para su determinación es la aglutinación de
partículas de látex recubiertas con anticuerpos Anti- proteína C reactiva, si el suero del
paciente contiene proteína C reactiva se provocará aglutinación de las partículas. Se usa
como un indicador general de una respuesta inflamatoria aguda. Es importante en la
valoración de la actividad de la enfermedad y de la respuesta al tratamiento. Se utiliza para
registrar la actividad en pacientes con fiebre reumática y artritis reumatoide. En la fiebre
reumática se eleva durante la actividad aguda y se normaliza con la terapeutica apropiada.
En el 70% de pacientes con artritis reumatoide activa se presentan elevaciones.