Serología
18/09/23
Anticuerpos
Cualquier sustancia que entre al organismo y sea extraño será un Antígeno lo cual el
organismo va a activar los linfocitos B para formar los Anticuerpos. Para que una sustancia
sea llamada Antígeno tiene que tener dos características: Inmunogenecidad y
Especificidad.
Inmunogenecidad es la partícula que genere la activación del sistema inmune con el afán
de proteger. Especificidad es que el Antígeno tenga la capacidad de reaccionar con el
Anticuerpo que se ha producido como respuesta para proteger al organismo.
Son también llamadas Inmunoglobulinas o Gammaglobulinas.
Los anticuerpos son proteínas con forma de Y producidas por los linfocitos B plasmáticos
del sistema inmune cuya función es unirse a moléculas y organismos ajenos al cuerpo que
los producen para evitar que causen daño. La inmunoglobulina G son las más importantes
y están formadas por 4 cadenas de polipéptidos, 2 cadenas pesadas y 2 cadenas ligeras
unidas entre sí mediante puentes de di sulfuro, el corte de una molécula de anticuerpos de
anticuerpos con la enzima papaína genera 2 fragmentos: uno cristalizable llamado Fc y otro
llamado Fab que se encuentra en los sitios de unión Ag – Ac. Existe otros 4 anticuerpos D,
E, M, A, que tienen la misma estructura básica, la Ig M se lo encuentra en forma de
pentágono mientras la Ig A dímeros o trímeros, una molécula de anticuerpo es altamente
específica y reconoce únicamente una parte del antígeno que se une, esta región en
particular de antígeno que se une a un anticuerpo se denomina Epitope o determinante
antigénico, anticuerpo con el antígeno se llama Paratope que se une a un solo determinante
antigénico.
Policlonales: muchos anticuerpos
capaces de unirse al antigénico,
viene de distintas clonas de él y se
unen en distintos sitios.
Producción monoclonales
Cualquier sustancia que no es propia de la especie a la que se le administro, lo vera como
algo extraño en consecuencia producirá anticuerpo, estos monoclonales será específicos
para un solo determinante antigénico. Varios anticuerpos que se unirán a varios
determinantes antigénicos (policlonales).
Métodos inmunológicos
Tienen como el principal objetivo de demostrar la unión Ag-Ac que es una unión específica,
la cual se la demostrara macroscópicamente. Ej. Aglutinación, ELISA (cambio de color),
VDRL (formación de floculo), inmunocromatografia (banda de test).
Estos métodos se dividen en dos:
1.
Métodos de interacción primaria
Que son las más sensibles, tiene una elevada especificidad, costoso.
• Ensayo inmunoabsorcion ligado a enzimas ELISA
• Inmunofluorescencia IFI-IFD
• Radioinmunoensayo RIA-IRMA
• Luminiscencia, quimioluminiscencia CLIA
2. Métodos interacción secundaria
Son muy sensibles, menor especificidad, barato y más equipamiento.
•
•
•
•
Aglutinación
Precipitación
Floculación
Inmunocromatografia (caset).
Tamizaje se hace con estas de interacción secundaria y se confirma con una primaria.
Diagnósticos
Existen dos:
•
•
Serológico: es método directo.
Microbiológico: es método indirecto.
Métodos de interacción secundaria
La reacción de aglutinación se caracteriza porque necesitan de un soporte para que la unión
Ag-Ac se haga macroscópicamente y se la pueda apreciar.
El soporte es una partícula que puede ser hidrofóbica (bentonita, látex, partícula de gelatina)
o hidrofilica (eritrocito de carnero, ave, partícula de carbón) con tal que se adsorba o se
pegue en la superficie la partícula de antígeno. Es más difícil encontrar antígeno que
anticuerpos.
las proteínas del plasma se
denominan aglutininas. Las mismas
son en realidad anticuerpos. Las que
se hallan en las membranas de los
glóbulos rojos se denominan
aglutinógenos.
Sensibilizado se refiere a que ya sea
Ag-Ac se a pegado en el soporte y no
sensibilizado es cuando no se ha
pegado nada en el soporte.
Una de las características es debe ser particulado para que pueda facilitar la aglutinación.
Respetar el medio salino 0,15 M al menos en los soportes de eritrocitos, porque en esto
influye sus potenciales z si por algún motivo inhibe esos potenciales z esos eritrocitos se
aglutinarán y será una falsa Rx positiva, si se aumenta muchos de esos potenciales z la
carga negativa de esos eritrocitos no va a aglutinarse.
Respetar PH, condiciones salinas y la temperatura, especialmente si el soporte son los
eritrocitos (se autoaglutinan).
Condiciones que podrían alterar las reacciones de aglutinación
✓ Tamaño molecular de los anticuerpos
Hay dos mecanismos:
o
o
Etapa primaria: es la que se habla del
punto de vista molecular (que no vemos).
Etapa secundaria: es la que sí se puede
observar.
IgG (chico) Rx débil, fina.
IgM (grande) Rx grosera.
AB (grosera), O (fina)
✓ Tamaño de las partículas antigénicas
✓ La posición y el número de antígenos
✓ Proporción Ag-Ac
la unión tiene que ser 1-1, la Curva de Gaus esta
tiene dos zonas: post zona y pro zona. No tiene que a ver exceso de Ag-Ac.
la reacción se da mejor en la meseta
✓ Temperatura
✓ Agitación mecánica
✓ Tiempo de incubación
✓ Potenciales z
Albumina bovina lo que hace es rellenar
los espacios o lavar también para sacar lo
que cause interferencia.
Clasificación
•
•
Directa o activa: el humano no pusimos antígeno a un soporte cuando esta forma
natural. Ej. Ag febriles (WIDAL: salmonela, Weil Félix: brucella, Huddleson:
rickettsia.
Indirecta o pasiva: ya hay algo intencional del fabricante, se pega sobre el soporte.
Ej. PCR, ASO, FR, RPR, HCG.
Estas se clasifican en pasiva: Directa y Reserva.
▪
▪
Directa: cuando el soporte sensibilizado se le coloca Ag
Reserva: cuando el soporte sensibilizado se le coloca Ac
❖ Inhibición de aglutinación: se caracteriza porque la señal visible de la unión Ag-Ac
es la ausencia de la aglutinación: Rx homogénea +, Rx heterogénea –
Prueba semicuantitativa HCG hormona Ag: rtvo anticuerpo HCG, se mezcla, segundo
rtvo partícula de látex sensibilizado con Ag, se unen y se ve la aglutinación. Prueba
específica HCG (embarazo molar).
Prueba de Coombs es una prueba directa (hemaglutinación), para anemia hemolítica,
eritrocito es el soporte.
Prueba de Coombs indirecta prueba cruzada, si la muestra que se transfunde es
compatible. De la tubuladura se hace la prueba. Rtvo Coombs (anti anti-humanos).
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