ESTUDIO DE LOS MECANISMOS DE INVASIÓN, METÁSTASIS Y ANGIOGÉNESIS INDUCIDOS POR LA LÍNEA CELULAR TUMORAL MDA-MB-231 EN UN MODELO MURINO INMUNODEPRIMIDO Se dispone de ratones comunes (mus musculus) de la familia Muridae, debido a que son mamíferos con un sistema inmune más o menos similar al humano, lo que permite ensayos de alta significancia. Se vislumbra imposible el reemplazo (replacement) del modelo animal en favor de uno in vitro dada la complejidad de los mecanismos que posibilitan la vida fisiológica y la que se induce paralela o patológica tumoral. De manera que se precisan 62 ratones (31 por grupo). Dicha cantidad (reduction) se explica en un tamaño del efecto esperado en torno a 0.5 (diferencias entre grupos control y experimental observables pero no drásticas), en un nivel de significancia fijado en 0.05 (margen de error del 5%) y en un poder estadístico (probabilidad de aceptar la hipótesis alternativa cuando sea verdadera) de 0.80 para asegurarse de detectar efectos materiales reales. 𝑍𝛼⁄ + 𝑍𝛽 2 1.96 + 0.84 2 𝑛=( 2 ) =( ) = 31.36 ≈ 31 𝐸𝑆 0.5 El procedimiento experimental consiste en el xenoinjerto de células tumorales humanas en ratones para evaluar la invasión, metástasis y angiogénesis mediante técnicas de análisis de fluorescencia, inmunohistoquímica e histología post-mortem. Con arreglo a lo escrito en el Real Decreto 53/2013, de 1 de febrero, se propone un método de eutanasia por sobredosis de anestésico y previa sedación de los animales. Tal fórmula ha sido seleccionada de entre la muerte por dióxido de carbono, la dislocación cervical, la conmoción cerebral, o la decapitación por razones bioéticas (refinement). El procedimiento propuesto puede clasificarse como de severidad moderada. Pese a que los sujetos de experimentación no recuperan del todo la consciencia si se siguen los protocolos anestésicos adecuados, es posible que experimenten dolor o malestar moderado durante la fase de experimentación. Íñigo Vergara,
