UNIVERSIDAD NACIONAL
AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES
ZARAGOZA
INFORME
CARRERA DE BIOLOGÍA
Laboratorio de Investigación Formativa III
Sección: Biología Molecular de la Célula
Práctica 3
Cuantificación de azúcares totales por el método de DuBois
FOLIO CÓNDOR ZARAGOZA:20240206
Grupo: 2302
Equipo: 5
Integrantes:
B
●
eltrán Juárez Brenda Odeth
● Resendiz Fonseca Daniela
● Torres Flores Aurora
Introducción.
os carbohidratos son sustancias químicas orgánicas de amplia distribución en la
L
naturaleza. En las plantas son producidosporelprocesodelafotosíntesiseincluyenala
celulosa como ejemplo de un carbohidrato estructural y al almidón como carbohidrato de
almacén.Enlascélulasanimalesloscarbohidratos-enformadeglucosaoensupolímero
dealmacén,elglucógeno–sirvencomofuenteimportantedeenergíaparalasactividades
vitalesdelamayoríadelasespeciesvivientesquehabitanelplaneta(Bermudez,Valmore.
2007).
La glucosa es el principal monosacárido en la naturaleza que proporciona energía a las
células de una amplia gama de organismos, que va desde los más simples como la
levadurahastalosmáscomplejoscomoelserhumano.Estohacequeeltransportedeeste
azúcaralinteriorcelularconstituyaunprocesoesencialparaelmetabolismoenergéticoyen
consecuencia,paralosprocesosquemantienenlavida.Eltransportedelaglucosaatravés
de la membrana celular se lleva a cabo por dos familias de proteínas de membrana: los
transportadores de glucosa acoplados a sodio (SGL T) y las proteínas facilitadoras del
transporte de glucosa (GLUT), (Catrejon V. 2007).
Existe una variedad de métodos colorimétricos los cualesutilizanreactivosdistintoscomo
antrona, fenol, orcinol o resorcinol. El método colorimétrico para la determinación de la
concentración de carbohidratos más ampliamente utilizado es el desarrollado por DuBois
debido a la facilidad del procedimiento, sensibilidad, rapidez de los resultados y por ser
apropiado para cuantificar diferentes azúcares como monosacáridos, oligosacáridos y
polisacáridos carbohidratos (Lopez, X. 2017).
ElmétododeDuBoisetal.demostrósersimple,estableyreproducible,lograndoacortarel
tiempo necesario para la determinación de carbohidratos comparado con otros métodos
colorimétricos. Por ejemplo, la cuantificación con antrona es limitada puesto que este
reactivo es inestable; debido a su degradación y el consecuente oscurecimiento de la
soluciónquealterasulecturacolorimétrica,ademásdeposeerunamenorcapacidadenel
análisisdepolisacáridosconformadospormezclasdeazúcares.Porotraparte,elmétodo
establecido por Monsigny, utilizando resorcinol
yácidosulfúrico,proponeprocedimientosmáscomplejosydelargaduración,presentando
sensibilidades menores en la lectura de las absorbancias de soluciones acuosas de
carbohidratos (Lopez, X. 2017).
Objetivo.
eterminar la concentración de azúcares presentes en diferentes muestras de glucosa,
D
mediante el método DuBois.
Método.
Sepreparóunasoluciónblancocon200μldeaguadestilada,yseleagregaron500μlde
●
fenol, se agitó y posteriormente se agregó 1 ml de ácido sulfúrico concentrado.
● Se preparó una muestra patrónde8tubosdeensayecon 6mgdeglucosay15mlde
agua destilada.
●Seprepararon2muestrasproblema:Alaprimeraseleagregaron90μldeglucosa,110μl
deaguadestilada,500μldefenoly1mldeácidosulfúrico,alasegundamuestraproblema
se le agrego 110 μl de glucosa, 90 μl de agua destilada y 500 μl de fenol.
● Posteriormente se agitaron y se le agregó 1 ml de ácido sulfúrico, se volvió a agitar
suavemente y se dejó reposar 30 minutos.
● Se llevaron las muestras problema pasado los 30 minutos al espectrofotómetro para
analizar su lectura a 490 nm.
Resultados
Se preparó la solución patrón en diferentes concentraciones yabsorbanciaconocidapara
r ealizar la curva patrón
Seagregó1mldeácidosulfúricoconcentradoaunadelasmuestrasproblemaencampana
e extracción deslizando el ácido por las paredes del tubo
d
Se obtuvo la concentración y absorbancia para realizar la curva patrón. con los datos :
lucosa 6 μl / 15 mL de H2SO4 siendo esta la gráfica
g
TUBO
CONCENTRACIÓN
OBSERVANCIA
1
0.008
0.073
2
0.016
0.148
3
0.024
0.179
4
0.032
0.189
5
0.040
0.199
6
0.048
0.349
7
0.056
0.753
8
0.064
0.790
Tabla1 Tubos de Curva Patrón
Gráfica 1. Curva Patrón
espués se realizó una cuantificación de resultados con los demás equipos con sus
D
respectivos resultados siendo estos inconclusos en algunos equipos
Análisis de resultados.
nlacuantificacióndelaunióndelaglucosaconelfenolconnuestrasmuestrasproblema
E
por medio del espectrofotómetro obtuvimos como resultado de la muestra 1 un total de
0.572 y de la muestra 2 un total de 0.171
Conclusiones.
a cuantificación de azúcares totales se determinó por el método de Dubois utilizando
L
glucosacomoestándarendóndepodemosobservarlosresultadosenlatabla1observando
así que la absorbancia aumenta en respuesta a la concentración de las muestras problema.
Bibliografía
● BERMUDEZ, Valmore et al. Biología molecular de los transportadores de glucosa:
clasificación, estructura y distribución. AVFT [online]. 2007, vol.26, n.2, pp.76-86. ISSN
0798-0264.
Castrejón V, Carbó R, Martínez M. Mecanismos moleculares que intervienen en el
●
transporte de la glucosa . Rev Educ Bioquímica. 2007;26(2):49-57.
● López-Legarda, Xiomara, Taramuel-Gallardo, Andony, Arboleda-Echavarría, Carolina,
Segura-Sánchez, Freimar, & Restrepo-Betancur, Luis Fernando. (2017). Comparación de
métodos que utilizan ácido sulfúrico para la determinación de azúcares totales. Revista
Cubana de Química, 29(2), 180-198. Recuperado en 29 de agosto de 2023, de
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2224-54212017000200
002&lng=es&tlng=es.
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