c Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Practica N° 01 NORMAS DE SEGURIDAD, TRABAJO Y MATERIAL DE LABORATORIO Dentro de las competencias establecidas en el desarrollo de la asignatura, se tiene las del tipo procedimental o sicomotriz, en donde el estudiante debe aplicar y dominar técnicas y procedimientos, así como comprobar diversos fenómenos biológicos que se desprenden de los conocimientos que se imparten en las clases teóricas. El laboratorio constituye un ambiente adecuado para el desarrollo de las prácticas e investigación a través de la aplicación de técnicas basadas en la observación en primera instancia y luego la experimentación, dichos procedimientos importantes del método científico se realizan en el laboratorio, el que conduce a la utilización de materiales, equipos y aparatos específicos. Para el desarrollo de las prácticas se debe considerar algunas normas de seguridad que deben ser tomadas en cuenta con mucha seriedad y responsabilidad. Dentro de las competencias establecidas en el desarrollo de la asignatura, se tiene las del tipo procedimental o psicomotriz, en donde el estudiante debe aplicar y dominar técnicas y procedimientos, así como comprobar diversos fenómenos biológicos que se desprenden de los conocimientos que se imparten en las clases teóricas. El laboratorio constituye un ambiente adecuado para el desarrollo de las prácticas e investigación a través de la aplicación de técnicas basadas en la observación en primera instancia y luego la experimentación, dichos procedimientos importantes del método científico se realizan en el laboratorio, el que conduce a la utilización de materiales, equipos y aparatos específicos. Para el desarrollo de las prácticas se debe considerar algunas normas de seguridad que deben ser tomadas en cuenta con mucha seriedad y responsabilidad. NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO Utilizar un mandil para evitar posibles salpicaduras de productos químicos así mismo es aconsejable no vestir prendas cortas. No manipular productos inflamables (éter, benceno, etc.) cerca de mecheros encendidos. Al calentar una solución en un tubo de ensayo, debe hacerse bajo el nivel del líquido y constantemente agitando. No debe apuntarse con el tubo al compañero o a sí mismo, pues puede proyectarse. Manipular con mucho cuidado los productos químicos ya que pueden ser peligrosos por sus propiedades tóxicas, corrosivas, inflamables o explosivas. Algunas de estas sustancias se reflejan en el etiquetado de los productos químicos mediante un símbolo o pictograma, de manera que capte la atención de la persona que va a utilizar la sustancia. c Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Para recoger recipientes calientes como vasos ó tubos de ensayo, utilizar pinzas, en caso contrario podemos utilizar un paño del laboratorio. Despojarse de todos los accesorios personales que puedan iniciar accidentes mecánicos, químicos o por fuego, como son: anillos, pulseras, collares y gorros. COM PORTAM IENTO EN EL LABORATORIO Se ingresa sin producir ruido, sin distraer a las personas que se encuentran trabajando en el laboratorio. Colocar en los cajones de su mesa o mesón de trabajo: las mochilas, carteras, bolsos u otro objeto innecesario. En la mesa de trabajo solo de haber su guía de prácticas, el material requerido y equipo de trabajo. No se permite la ingesta de alimentos o bebidas en el laboratorio, los alimentos y las bebidas se pueden contaminar en el laboratorio con productos químicos. Mantener limpia y ordenada el área de trabajo, limpiar inmediatamente todos los productos químicos derramados, así como el material biológico que no sea utilizado. El desorden en la zona de trabajo equivale a riesgo. En el laboratorio no se debe propiciar el desorden o inconductas como: correr, jugar o gritar. No se harán procedimientos que no hayan sido autorizados por el profesor. No utilizar equipos o aparatos sin conocer su funcionamiento. En caso de duda, consultar con el profesor. El material y los aparatos utilizados se deben dejar siempre limpios y en perfecto estado de uso. TRABAJO EN EL LABORATORIO Cada equipo de trabajo es responsable del material que se le asigne, además del equipo especial (por ejemplo, microscopios, material de laboratorio) en caso de pérdida o daño, deberá responder de ello. Antes de empezar con el procedimiento experimental o utilizar algún aparato revisar todo el material. Antes de empezar con el procedimiento experimental o utilizar algún aparato revisar todo el material que se encuentre en perfecto estado, de no ser así, comunicárselo al profesor. Al finalizar cada práctica el material utilizado debe dejarse perfectamente limpio y ordenado, así como la mesa de trabajo. c Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 El lavado del material deberá ser lo más simple y fácil posible, a veces solo con agua. Usar un cepillo y detergente cuando sea necesario. El material lavado se deja escurrir en un lugar adecuado. Aclarar con el profesor las dudas que se tenga en referencia a un procedimiento. Mantenerlo informado de cualquier hecho anormal que suceda. MATERIAL DE LABORATORIO Antes de utilizar el material de laboratorio es necesario conocer sus características y uso, permitiendo así resultados confiables y evitar el daño o gasto innecesario del mismo. En la mayoría de procedimientos se indica el tamaño y el tipo de material para trabajar. El material tiene un uso correcto, con ello se obtiene reacciones químicas, preparan soluciones, hacen análisis, mediciones, etc. Algunos de los instrumentos más utilizados en los laboratorios, son elaborados de vidrio resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dióxido de silicio, bajo álcali, óxido bórico y vestigios de otros óxidos, lo que condiciona su escaso coeficiente de dilatación, teniendo una gran aplicación en la fabricación de materiales de laboratorio, uno de los más conocidos es el vidrio PIREX, así como los elaborados de distintos metales pesados como platino, mercurio, aluminio, cobre que les otorgan características como buenos conductores del calor o porque al ambiente son muy manejables sin alterar su composición. OBJETIVOS o Comentar y discutir sobre la seguridad en el laboratorio. o Comentar y discutir sobre el comportamiento y trabajo en el laboratorio o Identificar con destreza el material de laboratorio MATERIALES o o Guía de prácticas Material de laboratorio PROCEDIMIENTO Primero: Los alumnos se distribuirán en equipos de trabajo a fin de realizar el comentario y discutir sobre la seguridad, comportamiento y trabajo en el laboratorio Segundo: Una vez concluido el comentario cada equipo de trabajo nombrará a un representante, encargado de exponer las conclusiones referidas a la seguridad, comportamiento y trabajo en el laboratorio Tercero: Con ayuda de la guía de prácticas cada equipo de trabajo procederá a la identificación de los materiales de laboratorio de uso más frecuente en el Laboratorio de Biología Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. . Tubos de ensayo: Es un cilindro con fondo cerrado y un extremo abierto y de borde romo, de longitud y diámetros variables. Puede ser de vidrio corriente ó de plástico. El tubo de ensayo sirve para calentar líquidos, realizar mezclas (reactivos) preparar cultivos de microorganismos. Probeta: Es un cilindro graduado y aforado, su volumen varia, su base es plana y ancha (proporcionando el apoyo y la estabilidad requerida). La probeta se utiliza para medir líquidos mayores a 1 mL. Durante la medición se considera el menisco del líquido que se mide (menisco cóncavo ó convexo). Beaker: Llamado también vaso de precipitado, es uno de los utensilios de mayor uso, es un vaso de borde romo y con una escotadura; puede ser graduado (mL). Generalmente es de vidrio especial (resistente al calor: lleva una marca). Se utiliza para transvasar líquidos, preparar soluciones, calentar y hervir líquidos. Placas Petri: Llamadas también Cajas Petri, este utensilio consta de dos cajas o tapas en forma de discos, de diferentes diámetros (mm), y se usa para el cultivo de microorganismos, para seleccionar especímenes. Mechero: Es un frasco que puede ser de vidrio y lleva en el cuello un tapón atravesado por una mecha de algodón, además tiene una tapa para apagar el fuego. El combustible del mechero puede ser alcohol o ron de quemar. 2023 Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. Mortero: Pueden ser de porcelana o de madera. Es un recipiente con su superficie interna esmerilada sobre la que se desplaza un mango con la superficie de frote esmerilado. Se emplea para triturar muestras como por ejemplo órganos y vegetales. Embudo: Es un cuerpo cónico que se prolonga en un tubo de vidrio delgado llamado vástago que termina en una punta cortada en diagonal (bisel) se emplea para filtrar utilizando papel filtro o algodón que se coloca en el interior del cono. Gotero: Es un tubo delgado de vidrio o de plástico con un extremo agudo abierto y en el otro extremo se puede colocar una goma hueca para succionar el líquido al interior del gotero. El gotero se utiliza para trasvasar líquidos en pequeñas cantidades (gotas). Luna de Reloj: Es un disco cóncavo transparente similar a la luna de reloj cuyo tamaño variado se expresa en mm. En ella se separarán trozos de organismos, se colocan muestras y fragmentos pequeños de organismos y se llevan a la observación con el estereoscopio, también se le emplea para tapar los vasos. Matraz Erlenmeyer: es un recipiente cónico graduado, se utiliza para medir, calentar o guardar líquidos. 2023 Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. Pipeta: Es un cuerpo cilíndrico delgado y hueco con un extremo agudo y el otro abierto a través del cual se succiona el líquido a medir. Su cara externa lleva una escala graduada en mL o cc. Se utiliza para medir pequeñas cantidades de líquidos. La precisión de la pipeta está determinada por el menor volumen que mide. Lámina portaobjetos: Es una lámina delgada de vidrio especial con bordes pulidos, se usa para realizar preparaciones de muestras de órganos, frotis de líquidos (por ejemplo, sangre), que después se observa al microscopio, también hay portaobjetos excavados. Laminillas cubreobjetos: Con estas laminillas muy delgadas se cubren las preparaciones que se depositan sobre la lámina portaobjetos para luego ser observadas en el microscopio. Su forma generalmente es cuadrada, en algunos casos son circulares. Malla de Asbesto: Es una malla metálica con centro de asbesto, en ella se colocan los recipientes de vidrio que se van a calentar. 2023 Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. Pizeta ó Frasco lavador: Es una botella con un tubo delgado curvado que sale del cuello de ella, sirve para lavar con agua destilada las preparaciones y el material de vidrio. Gradillas: Son soportes de madera o de alambre galvanizado de diferentes tamaños, en ellas se colocan los tubos de ensayo durante el trabajo. Trípode: Es un aro sostenido por tres ejes verticales, sobre el trípode se coloca el recipiente en observación (matraces, vasos) o para ponerlos al fuego. Escobillas para limpieza: Son cepillos para el lavado de los tubos de ensayo y frascos, tiene diferentes tamaños. 2023 Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Cuarto: Tomar una pipeta por la parte superior con los dedos pulgares y anular, al tiempo que el dedo índice debe situarse sobre el orificio superior de la pipeta, absorber agua hasta enrasar a cero, el dedo índice permitirá cerrar la caída de líquido. Tener en cuenta el menisco durante la medición. CONCLUSIONES _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ CUESTIONARIO 1. Defina: Bioseguridad 2. ¿Cuáles son las recomendaciones en caso de un accidente por salpicadura de un ácido en la piel? Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 3. ¿Cuáles son las recomendaciones en caso de un accidente por ingestión deuna sustancia tóxica? 4. En la medición de líquidos en recipientes cilíndricos ¿Qué es el menisco? 2023 Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Práctica N° 02 y 03 IDENTIFICACIÓN DE SALES MINERALES Y CARBOHIDRATOS Además del agua y los gases atmosféricos, existen otros compuestos minerales, como las sales inorgánicas. En función de su solubilidad en agua se distinguen dos tipos de sustancias salinas solubles e insolubles en agua. Cuando se observa un organismo vivo, surge inevitablemente una serie de interrogantes acerca del modo en que se ha podido estructurar este organismo para realizar todas sus funciones vitales. Desde el punto de vista químico los seres vivos están constituidos por una variedad de moléculas que proceden del medio ambiente de donde son tomados, luego mediante el metabolismo son transformados e incorporados al ser vivo. La diversidad de los seres vivos se debe a la variabilidad de su composición química, la cantidad de cada clase de estas moléculas varía de un órgano a otro y de un individuo a otro, y cada uno de estos cuerpos cumple una función específica. Estos cuerpos se agrupan en: Inorgánicos como las sales inorgánicas (fosfatos, carbonatos de Na+, K+, Ca++ y Mg++) y Orgánicos como los carbohidratos. Todos los componentes químicos de la materia viva se pueden identificar a través de pruebas químicas específicas que usan reactivos específicos y luego se explican mediante ecuaciones químicas. OBJETIVOS Identificar la presencia de sales minerales en diferentes muestras biológicas Identificar la presencia de carbohidratos en diferentes muestras biológicas MATERIALES De laboratorio (PRESENCIAL) Tubos de ensayo Beaker Pipetas Embudos Pinzas Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Gradillas Mortero Mechero Papel filtro Encendedor o Fósforos Soluciones y Reactivos Agua de Cal Agua Destilada Nitrato de Plata Solución de NaCl Reactivo de Benedict Solución de Glucosa Solución de Almidón Biológico Hojas de vegetales, fruto (manzana o pera), Semillas de trigo cocido, papa I. PROCEDIMIENTO (PRESENCIAL) Primero: Para la identificación de cuerpos inorgánicos utilizando agua de cal (Ca(OH)2): a) En un tubo de ensayo colocar 10 mL de agua de cal. b) Con una pipeta burbujear durante 1 minuto con el aire de los pulmones. c) Observar sus resultados. Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Resultados: El agua de cal reacciona con el anhídrido carbónico exhalado de los pulmones, formándose un precipitado de color blanco lechoso que corresponde al carbonato de calcio. La reacción química obtenida es: Ca (OH)2 + CO2→ CaCO3 + H2O Segundo: Para la identificación de cloruros realizando la prueba control: a) En un tubo de ensayo colocar 2 mL de NaCl b) c) Mezclar con una ó dos gotas de solución AgNO3. Observar sus resultados Resultados: Se forma un precipitado blanco lechoso (AgCl) que después se torna negro o gris y se le encuentra en el fondo del tubo de ensayo, lo que demuestra la presencia de cloro en la solución. La reacción química obtenida es: NaCl+AgNO3→ AgCl + NaNO3 Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Tercero: Para la identificación de cloruros en una muestra biológica vegetal a) Con la ayuda de un mechero carbonizar una hoja pequeña de una planta b) Las cenizas se trituran en un mortero con 5mL de agua destilada c) Filtrar la muestra d) Al filtrado recogido en un tubo de ensayo (que sea transparente) agregar 1 o 2gotas de solución de AgNO3 e) Observar y anotar los resultados. Resultados: Resultados: Se observa un precipitado presencia de cloro en el filtrado de la hoja vegetal lo que demuestra la Cuarto: Para la identificación de glucosa realizando la prueba control: a) En un tubo de ensayo colocar 4 mL de solución de glucosa al 30% b) Mezclar con 5 gotas de reactivo de Benedict c) Con la ayuda del mechero calentar el tubo de ensayo durante 1 ó 2 minutos. Observar sus resultados Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Resultados: Se observa la aparición de una coloración verde, amarilla que cambia a naranja o de ésta a rojo ladrillo, esto indica la presencia de glucosa en la solución. El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ión cúprico otorgado por el sulfato de cobre presente en el reactivo de Benedict, es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehido (CHO) presente en los azucares reductores como la glucosa a ion cuproso, este nuevo ion se observa como un precipitado verde, amarillo, naranja ó rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O). Quinto: Para la identificación de glucosa utilizando una muestra biológica (fruto) a) Con la ayuda de un mortero triturar un pedazo de fruta agregando unos 10 mL de agua destilada b) Mezclar bien y filtrar en un tubo de ensayo c) Colectar 4 mL de filtrado de la fruta en un tubo de ensayo y mezclar con 5 gotas de reactivo de Benedict. d) Con la ayuda del mechero calentar el tubo de ensayo durante 1 ó 2 minutos. e) Observar y anotar los resultados Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. Resultados: Se observa la aparición de una coloración presencia de azúcares reductores como la glucosa en el filtrado de la 2023 lo que indica la . Sexto: Para la identificación de almidón realizando la prueba control: a) En un tubo de ensayo colocar 2 mL de solución de almidón b) Mezclar la solución con 2 gotas de Lugol. c) Observar sus resultados Resultados: Se observa la aparición de una coloración azul violeta, lo que indica la presencia de almidón en la solución. La coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la amilosa del almidón. No es por tanto, una verdadera reacción química, sino que se forma un compuesto de inclusión, apareciendo la coloración azul violeta. Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Séptimo: Para la identificación de almidón utilizando una muestra biológica vegetal a) Con la ayuda de un mortero triturar unos 10 gramos de trigo cocido y/o papa con 5 mL de agua destilada. b) Dejar macerar, luego decantar en un tubo de ensayo 2 mL del macerado. c) Mezclar con 2 gotas de solución de Lugol. d) Observar y anotar los resultados. Resultados: Se observa una coloración lo que indica la presencia de almidón en la parte líquida del triturado de trigo. II. PROCEDIMIENTO (NO PRESENCIAL) 1. Realizar búsquedas en la red de pruebas similares o complementarias, discutir su utilidad rápida en el laboratorio o en el campo 2. Discutir la disponibilidad de reactivos y equipos para la realización de las pruebas de identificación. CONCLUSIONES _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 CUESTIONARIO 1. ¿Cuáles son los síntomas de deficiencia en fosforo y magnesio en las plantas? 2. ¿Qué funciones biológicas cumple las sales de carbonato y oxalato de calcio en los organismos y su relación con la adaptación a ambientes xerófilos? 3. ¿Cuál es el fundamento químico y como interviene la estructura química de la glucosa y los componentes del reactivo de Benedict en la identificación de azucares reductores? 4. ¿Cuál es el fundamento químico y como interviene la estructura química del almidón y los componentes de la solución de Lugol en la identificación de polisacáridos? Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 5. 2023 ¿Qué papel desempeña el Sodio y el Potasio en las membranas celulares? Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Práctica N° 04 IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS Constituyen una variedad de moléculas orgánicas bastante heterogénea, tanto desde el punto de vista estructural como por la diversidad de funciones que desempeñan. Los lípidos son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por C, H, O, siendo este último en menor porcentaje. Además pueden contener también fósforo, nitrógeno y azufre. Son insolubles en agua y son solubles en solventes orgánicos, como éter, cloroformo, benceno, etc. Son moléculas altamente energéticas, se presentan al estado sólido (sebos); semisólidos (mantecas) y líquido (aceites) a la temperatura ambiente. En las plantas los lípidos son almacenados generalmente como glóbulos de aceite , son muy abundantes en las semillas que en los otros órganos de las plantas, en los animales se les encuentra depositados mayormente en el tejido adiposo y se transportan como formas solubles (fosfolípidos) ó como emulsiones (colesterol). OBJETIVOS Determinar la solubilidad e importancia de los lípidos en los procesos biológicos MATERIALES De laboratorio Tubos de ensayo Beaker Pipetas Soluciones y Reactivos Agua Destilada Solución de Sudan III Gasolina Xilol, Alcohol, Benceno y Acetona Biológico Aceite comestible Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 PROCEDIMIENTO Primero: Para la determinación de la solubilidad de los lípidos: a) Agregar a 3 tubos de ensayo 2 mL de aceite b) Rotular cada tubo con los números 1, 2, 3, 4, 5 y 6. c) Al tubo 1 añadir 2 mL de xilol y agitar. d) Al tubo 2 añadir 2 mL de gasolina y agitar. e) Al tubo 3 añadir 2 mL de benceno y agitar f) Al tubo 4 añadir 2 mL de acetona y agitar g) Al tubo 5 añadir 2 mL de alcohol 70% y agitar h) Al tubo 6 añadir 2 mL de agua corriente y agitar i) Observar y anotar los resultados. Resultados: El aceite tiene diferente solubilidad en los solventes utilizados Tubo 1 : _________________________________________________________ Tubo 2 : _________________________________________________________ Tubo 3 : _________________________________________________________ Tubo 4 : _________________________________________________________ Tubo 5 : _________________________________________________________ Tubo 6 : _________________________________________________________ Se observa que el aceite siendo un lípido es insoluble en agua, debido a la polaridad de esta. Cuando se agitan fuertemente agua y aceite se observa una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua. Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Segundo: Para la determinación de la solubilidad en Sudan III: a) En un tubo de ensayo colocar 2 mL de aceite comestible. b) Mezclar con 3 gotas de Sudan III y agitar. c) Observar sus resultados Resultados: El aceite se colorea tomando el color del sudan lo que indica que el sudan es soluble en el aceite. El lípido disuelve al sudan. El sudan sirve para identificar lípidos. CONCLUSIONES _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ CUESTIONARIO 1. ¿Porque los aceites son líquidos, las mantecas semisólidas y los sebos sólidos? ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 2. ¿Qué relación tienen los terpenos y las ceras en la adaptación de los seres vivos, Ejemplifique? ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ 3. Explique la formación y función de la cutícula en las plantas ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ 4. ¿Los lípidos en el ambiente, pueden Biodegradarse, explique? ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ ___________________________________________________________________ Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Práctica N° 05 IDENTIFICACIÓN DE PROTEINAS Y ENZIMAS Son las moléculas fundamentales en la organización celular, no solo por su abundancia, pues constituyen casi la mitad del peso seco de la célula, sino también por la enorme variedad de funciones que desempeñan. En cuanto a su composición química, las proteínas son biopolímeros, es decir, macromoléculas de elevado peso molecular formadas por veinte unidades moleculares o monómeros diferentes, llamados aminoácidos, cada de los cuales presenta características particulares. Las proteínas determinan la forma y la estructura de las células y dirigen casi todos los procesos vitales. Las funciones de las proteínas son específicas de cada una de ellas y permiten a las células mantener su integridad, defenderse de agentes externos, reparar daños, controlar y regular funciones, etc. OBJETIVOS Identificar cualitativamente proteínas en muestras biológicas Determinar la presencia y actividad enzimática en una muestra biológica MATERIALES De laboratorio Tubos de ensayo Beaker Pipetas Embudo Gradillas Mechero Trípode Mortero Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 Malla de asbesto Encendedor o Fósforos Soluciones y Reactivos Agua Destilada Biuret Biológico Huevo Leche fresca Trozos de zanahoria fresca PROCEDIMIENTO Primero: Para la identificación de proteínas: prueba control (clara de huevo) a) En un tubo de ensayo colocar 5 mL de clara de huevo. b) Mezclar con 2mL de agua destilada y agitar. c) Agregar 2mL de Na (OH) al 30 % con 1mL de Biuret agitar fuertemente. d) Observar Resultados: Se observa la aparición de un color violeta, lo que indica la presencia de proteínas en la clara de huevo. La prueba de Biuret reconoce las uniones peptídicas presentes en polipéptidos y proteínas, si la reacción es positivase manifiesta por la aparición de una coloración violeta, esto se debe a la formación de un complejo de coordinación entre los cationes cúpricos presentes en el reactivo de Biuret en un medio alcalino con las uniones peptídicas de las proteínas. Segundo: Para la identificación de proteínas: muestra biológica (leche): a) Colocar en un tubo de ensayo 10 mL de leche b) Agregar 2 mL de Na (OH) al 30 % con 1 mL de solución de Biuret y agitar. Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 c) Observar los resultados. Resultados: Se observa la aparición de una coloración_________________ , lo que indica la presencia de proteínas en la leche. Tercero: Influencia de la cantidad de enzima en el aumento y velocidad dedegradación. a) Rotula cinco tubos de ensayo del 1 al 5. b) Coloca cinco gotas de detergente líquido en cada uno de ellos. c) Coloca, en cada tubo, 10 mL de peróxido de hidrógeno. d) Corta 10 cubitos de zanahoria de 1 cm de lado. e) Coloca un cubito de zanahoria en el tubo 2, dos cubitos en el tubo 3, tres cubitos en el tubo 4y cuatro cubitos en el tubo 5. En el tubo 1 no coloques cubitos de zanahoria. f) Durante diez minutos y en intervalos de dos minutos, observa y mide con una regla el volumen de gas producido (1 cm equivaldrá a 1 mL). g) Discutir la intervención de las estructuras intracelulares y la actividad enzimática CONCLUSIONES _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación – UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2023 CUESTIONARIO 1. ¿Por qué las proteínas adoptan espontáneamente la configuración mas estable? ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ 2. ¿Qué fuerzas intervienen en la estabilización de los distintos niveles de complejidad de las proteínas? ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ __________________________________________________________ 3. ¿Por qué los aminoácidos que poseen restos apolares se localizan en la superficie de las proteínas de membrana? ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ 4. ¿Cómo se puede modificar la funcionalidad biológica de una proteína? ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ __________________________________________________________ 5. ¿Qué relación tienen las proteínas y los microorganismos en el suelo? ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. Práctica N° 06 PARTES Y MANEJO DEL MICROSCOPIO INTRODUCCIÓN El conocimiento de las estructuras del ser vivo está basado casi totalmente en el estudio con el microscopio. El microscopio óptico es un instrumento que permite la observación de objetos y detalles de estructuras tan pequeñas que no podrían ser observadas a simple vista. Con él, nuestro grado de visibilidad se amplía en cientos o miles de veces, gracias a un conjunto de lentes, dispuestos convenientemente. Las principales dificultades en la observación y estudio de estructuras biológicas son su reducido tamaño y su transparencia a la luz visible. Dado que el microscopio permite superar estas dos dificultades, el uso del mismo y conocimiento de los principios y técnicas en microscopía, resultan fundamentales para el desarrollo de la investigación en ciencias biológicas. El Microscopio Óptico es el instrumento más importante en laboratorios, hospitales, centros de educación e investigación, es una de las herramientas más útiles para el estudio de las células y de los microorganismos. Actualmente contamos básicamente con dos tipos de microscopios: microscopio óptico y el microscopio electrónico. Todo microscopio óptico compuesto consta de tres sistemas que son el mecánico, óptico y de iluminación. OBJETIVOS 1. Identificar cada uno de los Sistemas del Microscopio Óptico Compuesto, así como sus respectivas partes para un manejo adecuado del mismo. 2023 Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. SISTEMA MECÁNICO Está constituido por la parte mecánica, soporte o cuerpo del microscopio, consiste en esencia en un armazón metálico que sostiene al sistema óptico y en ocasiones al de iluminación, está compuesto por: El pie: constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene forma variable (forma de Y, rectangular, redonda, herradura), el pie debe de ser suficientemente grande y tener suficiente base para mantener la estabilidad del microscopio, incluso cuando esté inclinado. La columna: llamada también asa o brazo, es una pieza colocada en la parte posterior del aparato, sostiene el tubo, platina y otros accesorios en su porción superior y por el extremo inferior se adapta al pie. El tubo: tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para evitar las molestias que ocasionan los reflejos de la luz, en la parte superior lleva el ocular o los oculares, y en la parte inferior los objetivos. El cabezal: contiene el tubo ocular o los tubos oculares varía según el modelo; puede ser estático o giratorio 360º. 2023 Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. El revólver: formado por dos discos, uno fijo al tubo y la otra gira sobre su propio eje, es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se enroscan los objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posición de trabajo, la cual se nota por el ruido que lo fija. La platina: es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u objeto que se va a observar, presenta un orificio en el eje óptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a la preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmóvil; en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares. Carro: es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar la preparación con movimiento ortogonal de adelante hacia atrás y de derecha a izquierda. Permite ubicar con rapidez un punto de la preparación es decir buscar el campo de la observación. 2023 Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. Tornillo macrométrico: girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del microscopio o la platina, deslizándose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rápido de la preparación. Tornillo micrométrico: mediante el movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nítido de la preparación Tornillo de movimiento del condensador: es también denominado “piñón”, este sube y baja el condensador sobre una cremallera regulando la cantidad de luz en la preparación. Ajuste de Dioptría: ajuste usado para compensar la diferencia de visión que existe entre los dos ojos; ubicado en los tubos oculares. Ajuste de distancia interpupilar: usado para regular la distancia entre los ojos del observador. 2023 Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. Regulador de la iluminación: se usa para controlar la intensidad de luz que se dirige hacia el condensador. Interruptor de encendido: dispositivo que permite encender y apagar la lámpara del microscopio, puede estar ubicado en la base o a un lado de la columna. Tornillos de desplazamiento de la platina y carro: de mandos coaxiales en eje vertical; desplaza la platina del microscopio con movimiento ortogonal de adelante hacia atrás y el carro de derecha a izquierda. SISTEMA ÓPTICO Es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes mediante el conjunto de lentes que lo componen, también es conocido como sistema de magnificación. El ocular: examina y amplifica la imagen producida por el objetivo, están constituidos generalmente por dos lentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los oculares generalmente más utilizados son los de: 8x, 1Ox, 12.5x, 15x y 16 x. La x se utiliza para expresar en forma abreviada los aumentos. La imagen formada por el ocular es virtual derecha y de mayor tamaño. 2023 Los objetivos: los objetivos producen aumento de las imágenes de los objetos y organismos y, por lo tanto, se hallan cerca de la preparación que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de inmersión. Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparación. En la cara externa llevan una serie de índices que indican el aumento que producen, la abertura numérica y otros datos. Así, por ejemplo: 160: donde 160 es la longitud del tubo (160mm) 0.17: (0.17mm) el grosor del cubreobjetos. 45 (ó 45x): donde 45 es el aumento o le valor del objetivo y la x indica que se debe multiplicar ese valor por el ocular para obtener el aumento total. 0.65 (ó NA 0.65): donde 0.65 es la apertura numérica, que es la capacidad del objetivo para utilizar la mayor cantidad de luz que procede del espejo o foco, durante la formación de la imagen. El número de objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos más frecuentemente utilizados son: 6x, 10x, 20x, 40x, 43x 45x y 60x. El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de lentes. Para observar a través de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro (de inmersión) entre el objetivo y la preparación, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 95x, 97x y 100x. Los objetivos se disponen en una pieza giratoria denominada revólver. Apertura numérica (NA): Es una medida que indica la capacidad del objetivo de poder captar los rayos refractados por las estructuras finas de las cuales está constituido el objeto que se observa. Esta capacidad se traduce en el poder del microscopio de formar imágenes que muestren al observador una serie de detalles del objeto que se está examinando. Cuanto mayor sea la apertura numérica de un objetivo, éste tendrá una mayor capacidad de mostrar detalles finos en la imagen que forma. Aumento de un objetivo. Es la capacidad que posee un objetivo de ampliar la imagen del objeto observado. Se define como la relación entre el tamaño de la imagen y el objeto, en valores lineales (largo y ancho). Condensador y Diafragma: el condensador está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparación. El condensador se halla debajo de la platina. El condensador puede deslizarse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que determina su movimiento ascendente o descendente. Generalmente, el condensador está provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura y controla la calidad de luz que debe pasar a través del condensador. Precondensador: evita la dispersión masiva de la luz. Se ubica sobre la base y puede ser removible, de tal forma que se pueda intercambiar de forma rápida y sencilla con un espejo y utilizarse en lugares donde no se pueda acceder a energía eléctrica SISTEMA DE ILUMINACIÓN Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparación u objeto que se va a observar en el microscopio. Fuente de Iluminación: podemos obtener la fuente de luz a través de un espejo que tiene dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cóncava se emplea de preferencia con iluminación artificial, y la plana, para iluminación natural (luz solar). Modernamente se prescinde del espejo en la fabricación de microscopios, ya que éstos traen incorporada una lámpara de bajo voltaje (generalmente de 6 voltios) se trata de una lámpara halógena (o lámparas LED) de intensidad graduable que, mediante un reóstato regula la emisión y la intensidad de luz colocada en la base o columna del microscopio esta lámpara se enciende y se apaga con un interruptor. PROPIEDADES DEL MICROSCOPIO 1. Poder de resolución: se define como la distancia mínima entre dos puntos próximos que pueden verse separados. El ojo humano normal puede separar puntos distantes en 0.25mm, en el microscopio óptico. El máximo poder de resolución que se puede obtener es de 0.2µm aproximadamente, para lo cual se requiere que el microscopio proporcione una imagen de un aumento total de 1000x a 1400x. 2. Poder de definición: se refiere a la nitidez de las imágenes obtenidas, sobre todo respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la corrección de las aberraciones de las lentes utilizadas. 3. Aumento del microscopio: en términos generales se define como la relación entre el diámetro aparente de la imagen y el diámetro o longitud del objeto. Esto quiere decir que si el microscopio aumenta 100 diámetros un objeto, la imagen que estamos viendo es 100 veces mayor que el tamaño real del objeto. Para calcular el aumento de un microscopio, basta multiplicar el aumento del ocular por el aumento del objetivo. Por ejemplo, si estamos utilizando un ocular de 10x y un objetivo de 45x, el aumento a que estamos viendo la preparación será: 10 x 45 = 450x, lo cual quiere decir que la imagen del objeto está ampliada 450 veces. CAMPO DEL MICROSCOPIO Se denomina "campo del microscopio" al círculo visible que se observa a través del microscopio. También podemos definirlo como la porción del plano visible observado a través del microscopio. Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es inversamente proporcional al aumento del microscopio. Para medir el diámetro del campo del microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el micrómetro. MANEJO DEL MICROSCOPIO 1. Iluminación del Campo del Microscopio: Consiste en que la luz que proporciona la lámpara eléctrica o el espejo ilumina el círculo o campo del microscopio, de tal manera que presente un color blanco y de brillantez máxima. Esto se logra moviendo el revólver para colocar el objetivo de menor aumento en posición óptica luego prender la lámpara o mover el espejo mirando por el ocular de tal manera que se pueda observar un campo blanco muy iluminado. La iluminación se regula moviendo el condensador y el diafragma, si la muestra es muy transparente se cierra el diafragma, pero para objetivos de 40 o más aumentos debe estar totalmente abierto. 2. Enfoque: Consiste en buscar la imagen de la muestra, esto se hace mirando por el ocular y moviendo el tornillo macrométrico hasta lograr ver la imagen, para luego afinar el enfoque con el tornillo micrométrico. Este método requiere usar primero el tornillo macrométrico para ascender la platina con la muestra hacia el objetivo o descender el objetivo hasta que esté tan cerca del portaobjetos como sea posible, el ascenso de la platina o el descenso del objetivo debe observarse lateralmente con cuidado para asegurarse de que el lente no toque el portaobjetos (sólo en el caso del objetivo de inmersión se permitirá el contacto previa aplicación de una gota de aceite). Cuando el lente esté a punto de tocar el portaobjetos, entonces ya puede ver por el ocular y empezar a enfocar moviendo el objetivo hacia arriba o bajando la platina según sea el caso del microscopio, hasta alcanzar el mejor foco posible, ayudándose para un enfoque más detallado del tornillo micrométrico. 3. Observación: Consiste en determinar las características más importantes de la muestra en observación, se inicia con el objetivo de menor aumento, ya que da una visión panorámica de la muestra, permitiendo seleccionar los mejores campos de la muestra. Para pasar a los otros objetivos se hace girar el revólver y se coloca en el objetivo que se va a usar en posición óptica correcta. El microscopio óptico puede ser monocular y consta de un solo tubo, la observación en estos casos se hace con un solo ojo. Es binocular cuando posee dos tubos entonces la observación se hace con los dos ojos. Esto presenta ventajas tales como mejor percepción de la imagen, más cómoda la observación y se perciben con mayor nitidez los detalles. CUIDADO DEL MICROSCOPIO Debe tenerse en cuenta las siguientes recomendaciones: 1) Para trasladar el microscopio de un lugar a otro, hágalo siempre sujetándolo del brazo con una mano y apoyando el pie con la otra mano. No lo intente por otra parte ya que podría dañarlo. Muchos de los desperfectos que puede sufrir son debidos a golpes durante la manipulación 2) Lo más conveniente sería dejar fijo el microscopio en la mesa de trabajo. La mesa que se vaya a utilizar debe ser estable para evitar molestas vibraciones de la muestra durante el examen. La posición ante el microscopio debe ser cómoda a una altura correcta. 3) El aceite de inmersión impregnado en el objetivo referente deberá limpiarse inmediatamente después de utilizarlo. Para ello utilice paño suave (campo) impregnado con alcohol isopropílico. 4) Si el aceite se ha secado en el lente frontal del objetivo, límpielo cuidadosamente un poco de alcohol isopropílico impregnado en un pedazo de tela (campo), si emplea otros solventes cuide que no disuelvan el pegamento de la lente. 5) Deberá de limpiarse de inmediato cualquier suciedad o líquido que se derrame sobre el microscopio. 6) En caso de que los oculares estén sucios, deben limpiarse de la misma forma que para los objetivos. 7) En cualquier desperfecto del microscopio deberá llamar a su profesor. 8) Cuando termine de hacer sus observaciones, deberán colocar el microscopio en posición de descanso (bajar la platina hasta el tope y colocar en posición óptica el objetivo de menor aumento). 9) Por último, deberás limpiarlo completamente (objetivos y oculares) y guardarlo en el estante y/o cubrirlo con una funda de plástico para protegerlo del polvo. MATERIALES 1. De laboratorio Microscopio Óptico Compuesto Laminas Preparadas con la letra ¨e¨ 2. Soluciones y Reactivos Alcohol Isopropílico Aceite de Inmersión PROCEDIMIENTO A. Identificación de las partes del Microscopio Óptico Compuesto 1. Sobre la mesa de trabajo colocar un microscopio óptico compuesto e identificar las partes del Sistema Mecánico, Óptico y de iluminación MICROSCOPIO BINOCULAR 1. Colocar en la siguiente tabla el aumento del ocular y de los objetivos del Microscopio que está utilizando OBJETIVOS Ocular AUMENTO Objetivo Panorámico Objetivo de Menor Aumento Objetivo de Mediano Aumento Objetivo de Mayor Aumento o Inmersión 2. Rotular las partes del siguiente Microscopio Óptico Compuesto Binocular MICROSCOPIO TRINOCULAR CON CAMARA A. Para observar una muestra en el microscopio se deben de seguir los siguientes pasos: 1. Acomode el objetivo de menor aumento (10 x) en el revólver, de manera tal que sea éste el que apunte a la muestra a observar 2. Busque con el espejo la máxima iluminación. Si fuese un microscopio de luz incorporada encender la lámpara. Fijarse si el diafragma está abierto (muchos casos de falla en la iluminación se deben a un diafragma cerrado). 3. Coloque la muestra a observar en este caso la letra ¨e¨ sobre la platina, acomode la muestra de tal manera que el preparado quede a la altura del objetivo. Para ello se valdrán de los tornillos del carro presentes en la platina, que le permitirán mover al preparado en dos planos: vertical y horizontal, con el cubreobjetos mirando hacia arriba. En este momento se torna fundamental ubicar el cubreobjetos mirando hacia el objetivo, pues el primer gran error se comete en este punto, cuando fácilmente se puede enfocar con el objetivo de menor aumento, pero se torna imposible su enfoque con el objetivo de mediano y mayor aumento cuando el cubreobjetos queda mirando hacia abajo. 4. Mirando desde un costado del microscopio, descienda el objetivo o acerque la platina con el tornillo macrométrico hasta su tope inferior, o hasta apoyarlo levemente sobre la muestra, normalmente los microscopios convencionales poseen un tope que impide su descenso por debajo de cierta marca. Sin embargo, puede darse el caso que tal tope no exista, por eso se vuelve fundamental observar el descenso o ascenso según sea el caso desde un costado, a fin de evitar la rotura de la muestra. 5. Una vez puesto el preparado en el eje del objetivo, con el tornillo macrométrico comience a alejar el objetivo de menor aumento o la platina del preparado, buscando ver una imagen cada vez más nítida, hasta pasarse del punto de enfoque. Vuelvan hacia el máximo punto de enfoque con el tornillo macrométrico. Utilice el tornillo micrométrico para dar el enfoque fino 6. Una vez conseguido el enfoque correcto, se procede a la observación para lo cual se debe de esquematizar lo que se está observando, además es de mucha importancia colocar el aumento del ocular por el aumento del objetivo para así tener el aumento final de la imagen. Descripción: Con objetivo de menor aumento se observa la letra ¨ e ¨ invertida, ocupa la mayor parte del campo del microscopio, y esta aumentada 100 veces. 7. Mueva el revólver a fin de acomodar el objetivo de mediano aumento, solamente se podrá utilizar para enfoque el tornillo micrométrico. El uso del tornillo macrométrico podrá llevar a la ruptura de la muestra en observación. Esquematizar su observación. Descripción: La muestra está aumentada 8. Mueva el revólver a fin de acomodar el objetivo de mayor aumento (inmersión). En este caso deberá utilizar una gota aceite de inmersión sobre la muestra antes de colocar el objetivo en posición óptica. Esquematizar su observación. Descripción: La muestra está aumentada 9. Una vez terminada la observación de la muestra, limpiar los objetivos y dejar el objetivo de menor aumento en posición óptica. CONCLUSIÓN _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ CUESTIONARIO 1. Describa el funcionamiento y uso de diversos tipos de Microscopios Electrónicos Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita. 2. ¿Cuál es la importancia de los prismas en los microscopios mono y binoculares? 3. Enumere 5 ventajas de la microscopía electrónica con focal de barrido laser frente a la microscopía óptica tradicional: a) b) c) d) e) 4. 2023 ¿Qué son los objetivos planapocromáticos? 5. El índice de refracción (IR) de un objeto o una sustancia transparente se expresa mediante la siguiente fórmula: