Subido por FABIO YAIR CARI COILA

Biología General Prácticas

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Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA
Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita.
2023
Practica N° 01
NORMAS DE SEGURIDAD, TRABAJO Y
MATERIAL DE LABORATORIO
Dentro de las competencias establecidas en el
desarrollo de la asignatura, se tiene las del tipo
procedimental o sicomotriz, en donde el
estudiante debe aplicar y dominar técnicas y
procedimientos, así como comprobar diversos
fenómenos biológicos que se desprenden de
los conocimientos que se imparten en las
clases teóricas.
El laboratorio constituye un ambiente adecuado para el desarrollo de las prácticas e
investigación a través de la aplicación de técnicas basadas en la observación en primera
instancia y luego la experimentación, dichos procedimientos importantes del método
científico se realizan en el laboratorio, el que conduce a la utilización de materiales,
equipos y aparatos específicos. Para el desarrollo de las prácticas se debe considerar
algunas normas de seguridad que deben ser tomadas en cuenta con mucha seriedad y
responsabilidad.
Dentro de las competencias establecidas en el desarrollo de la asignatura, se tiene las del
tipo procedimental o psicomotriz, en donde el estudiante debe aplicar y dominar técnicas
y procedimientos, así como comprobar diversos fenómenos biológicos que se desprenden
de los conocimientos que se imparten en las clases teóricas. El laboratorio constituye un
ambiente adecuado para el desarrollo de las prácticas e investigación a través de la
aplicación de técnicas basadas en la observación en primera instancia y luego la
experimentación, dichos procedimientos importantes del método científico se realizan en
el laboratorio, el que conduce a la utilización de materiales, equipos y aparatos
específicos. Para el desarrollo de las prácticas se debe considerar algunas normas de
seguridad que deben ser tomadas en cuenta con mucha seriedad y responsabilidad.
NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
 Utilizar un mandil para evitar posibles salpicaduras de productos químicos así mismo
es aconsejable no vestir prendas cortas.
 No manipular productos inflamables (éter, benceno, etc.) cerca de mecheros encendidos.
 Al calentar una solución en un tubo de ensayo, debe hacerse bajo el nivel del líquido y
constantemente agitando. No debe apuntarse con el tubo al compañero o a sí mismo, pues
puede proyectarse.
 Manipular con mucho cuidado los productos químicos ya que pueden ser peligrosos
por sus propiedades tóxicas, corrosivas, inflamables o explosivas. Algunas de estas
sustancias se reflejan en el etiquetado de los productos químicos mediante un símbolo o
pictograma, de manera que capte la atención de la persona que va a utilizar la sustancia.
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 Para recoger recipientes calientes como vasos ó tubos de ensayo, utilizar pinzas, en
caso contrario podemos utilizar un paño del laboratorio.
 Despojarse de todos los accesorios personales que puedan iniciar accidentes
mecánicos, químicos o por fuego, como son: anillos, pulseras, collares y gorros.
COM PORTAM IENTO EN EL LABORATORIO
 Se ingresa sin producir ruido, sin distraer a las personas que se encuentran trabajando
en el laboratorio.
 Colocar en los cajones de su mesa o mesón de trabajo: las mochilas, carteras, bolsos u
otro objeto innecesario. En la mesa de trabajo solo de haber su guía de prácticas, el
material requerido y equipo de trabajo.
 No se permite la ingesta de alimentos o bebidas en el laboratorio, los alimentos y las
bebidas se pueden contaminar en el laboratorio con productos químicos.
 Mantener limpia y ordenada el área de trabajo, limpiar inmediatamente todos los
productos químicos derramados, así como el material biológico que no sea utilizado. El
desorden en la zona de trabajo equivale a riesgo.
 En el laboratorio no se debe propiciar el desorden o inconductas como: correr, jugar o
gritar.
 No se harán procedimientos que no hayan sido autorizados por el profesor.
 No utilizar equipos o aparatos sin conocer su funcionamiento. En caso de duda,
consultar con el profesor.
 El material y los aparatos utilizados se deben dejar siempre limpios y en perfecto
estado de uso.
TRABAJO EN EL LABORATORIO
 Cada equipo de trabajo es responsable del material que se le asigne, además del equipo
especial (por ejemplo, microscopios, material de laboratorio) en caso de pérdida o
daño, deberá responder de ello. Antes de empezar con el procedimiento experimental o
utilizar algún aparato revisar todo el material.
 Antes de empezar con el procedimiento experimental o utilizar algún aparato revisar
todo el material que se encuentre en perfecto estado, de no ser así, comunicárselo al
profesor.
 Al finalizar cada práctica el material utilizado debe dejarse perfectamente limpio y
ordenado, así como la mesa de trabajo.
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 El lavado del material deberá ser lo más simple y fácil posible, a veces solo con agua.
Usar un cepillo y detergente cuando sea necesario. El material lavado se deja escurrir
en un lugar adecuado.
 Aclarar con el profesor las dudas que se tenga en referencia a un procedimiento.
Mantenerlo informado de cualquier hecho anormal que suceda.
MATERIAL DE LABORATORIO
Antes de utilizar el material de laboratorio es necesario conocer sus características y uso,
permitiendo así resultados confiables y evitar el daño o gasto innecesario del mismo. En
la mayoría de procedimientos se indica el tamaño y el tipo de material para trabajar. El
material tiene un uso correcto, con ello se obtiene reacciones químicas, preparan
soluciones, hacen análisis, mediciones, etc. Algunos de los instrumentos más utilizados
en los laboratorios, son elaborados de vidrio resistente a altas temperaturas, por su alto
contenido de dióxido de silicio, bajo álcali, óxido bórico y vestigios de otros óxidos, lo
que condiciona su escaso coeficiente de dilatación, teniendo una gran aplicación en la
fabricación de materiales de laboratorio, uno de los más conocidos es el vidrio PIREX, así
como los elaborados de distintos metales pesados como platino, mercurio, aluminio, cobre
que les otorgan características como buenos conductores del calor o porque al ambiente
son muy manejables sin alterar su composición.
OBJETIVOS
o Comentar y discutir sobre la seguridad en el laboratorio.
o Comentar y discutir sobre el comportamiento y trabajo en el laboratorio
o Identificar con destreza el material de laboratorio
MATERIALES
o
o
Guía de prácticas
Material de laboratorio
PROCEDIMIENTO
Primero: Los alumnos se distribuirán en equipos de trabajo a fin de realizar el
comentario y discutir sobre la seguridad, comportamiento y trabajo en el laboratorio
Segundo: Una vez concluido el comentario cada equipo de trabajo nombrará a un
representante, encargado de exponer las conclusiones referidas a la seguridad,
comportamiento y trabajo en el laboratorio
Tercero: Con ayuda de la guía de prácticas cada equipo de trabajo procederá a la
identificación de los materiales de laboratorio de uso más frecuente en el Laboratorio de
Biología
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Tubos de ensayo: Es un cilindro con fondo
cerrado y un extremo abierto y de borde romo,
de longitud y diámetros variables. Puede ser de
vidrio corriente ó de plástico. El tubo de ensayo
sirve para calentar líquidos, realizar mezclas
(reactivos)
preparar
cultivos
de
microorganismos.
Probeta: Es un cilindro graduado y aforado, su
volumen varia, su base es plana y ancha
(proporcionando el apoyo y la estabilidad
requerida). La probeta se utiliza para medir
líquidos mayores a 1 mL. Durante la medición se
considera el menisco del líquido que se mide
(menisco cóncavo ó convexo).
Beaker: Llamado también vaso de precipitado,
es uno de los utensilios de mayor uso, es un vaso
de borde romo y con una escotadura; puede ser
graduado (mL). Generalmente es de vidrio
especial (resistente al calor: lleva una marca). Se
utiliza para transvasar líquidos, preparar
soluciones, calentar y hervir líquidos.
Placas Petri: Llamadas también Cajas Petri, este
utensilio consta de dos cajas o tapas en forma de
discos, de diferentes diámetros (mm), y se usa
para el cultivo de microorganismos, para
seleccionar especímenes.
Mechero: Es un frasco que puede ser de vidrio y
lleva en el cuello un tapón atravesado por una
mecha de algodón, además tiene una tapa para
apagar el fuego. El combustible del mechero
puede ser alcohol o ron de quemar.
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Mortero: Pueden ser de porcelana o de madera.
Es un recipiente con su superficie interna
esmerilada sobre la que se desplaza un mango
con la superficie de frote esmerilado. Se emplea
para triturar muestras como por ejemplo órganos
y vegetales.
Embudo: Es un cuerpo cónico que se prolonga
en un tubo de vidrio delgado llamado vástago
que termina en una punta cortada en diagonal
(bisel) se emplea para filtrar utilizando papel
filtro o algodón que se coloca en el interior del
cono.
Gotero: Es un tubo delgado de vidrio o de
plástico con un extremo agudo abierto y en el
otro extremo se puede colocar una goma hueca
para succionar el líquido al interior del gotero. El
gotero se utiliza para trasvasar líquidos en
pequeñas cantidades (gotas).
Luna de Reloj: Es un disco cóncavo
transparente similar a la luna de reloj cuyo
tamaño variado se expresa en mm. En ella se
separarán trozos de organismos, se colocan
muestras y fragmentos pequeños de organismos
y se llevan a la observación con el estereoscopio,
también se le emplea para tapar los vasos.
Matraz Erlenmeyer: es un recipiente cónico
graduado, se utiliza para medir, calentar o
guardar líquidos.
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Pipeta: Es un cuerpo cilíndrico delgado y hueco
con un extremo agudo y el otro abierto a través
del cual se succiona el líquido a medir. Su cara
externa lleva una escala graduada en mL o cc. Se
utiliza para medir pequeñas cantidades de
líquidos. La precisión de la pipeta está
determinada por el menor volumen que mide.
Lámina portaobjetos: Es una lámina delgada de
vidrio especial con bordes pulidos, se usa para
realizar preparaciones de muestras de órganos,
frotis de líquidos (por ejemplo, sangre), que
después se observa al microscopio, también hay
portaobjetos excavados.
Laminillas cubreobjetos: Con estas laminillas
muy delgadas se cubren las preparaciones que se
depositan sobre la lámina portaobjetos para luego
ser observadas en el microscopio. Su forma
generalmente es cuadrada, en algunos casos son
circulares.
Malla de Asbesto: Es una malla metálica con
centro de asbesto, en ella se colocan los
recipientes de vidrio que se van a calentar.
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Pizeta ó Frasco lavador: Es una botella con un
tubo delgado curvado que sale del cuello de ella,
sirve para lavar con agua destilada las
preparaciones y el material de vidrio.
Gradillas: Son soportes de madera o de alambre
galvanizado de diferentes tamaños, en ellas se
colocan los tubos de ensayo durante el trabajo.
Trípode: Es un aro sostenido por tres ejes
verticales, sobre el trípode se coloca el recipiente
en observación (matraces, vasos) o para ponerlos
al fuego.
Escobillas para limpieza: Son cepillos para el
lavado de los tubos de ensayo y frascos, tiene
diferentes tamaños.
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Cuarto: Tomar una pipeta por la parte superior con los dedos pulgares y anular, al tiempo
que el dedo índice debe situarse sobre el orificio superior de la pipeta, absorber agua hasta
enrasar a cero, el dedo índice permitirá cerrar la caída de líquido. Tener en cuenta el
menisco durante la medición.
CONCLUSIONES

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_________________________________________________________________
_________________________________________________________________

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CUESTIONARIO
1. Defina: Bioseguridad
2. ¿Cuáles son las recomendaciones en caso de un accidente por salpicadura de
un ácido en la piel?
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3. ¿Cuáles son las recomendaciones en caso de un accidente por ingestión
deuna sustancia tóxica?
4. En la medición de líquidos en recipientes cilíndricos ¿Qué es el menisco?
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Práctica N° 02 y 03
IDENTIFICACIÓN DE SALES
MINERALES Y CARBOHIDRATOS
Además del agua y los gases atmosféricos, existen otros compuestos minerales,
como las sales inorgánicas. En función de su solubilidad en agua se distinguen dos
tipos de sustancias salinas solubles e insolubles en agua. Cuando se observa un
organismo vivo, surge inevitablemente una serie de interrogantes acerca del modo
en que se ha podido estructurar este organismo para realizar todas sus funciones
vitales. Desde el punto de vista químico los seres vivos están constituidos por una
variedad de moléculas que proceden del medio ambiente de donde son tomados,
luego mediante el metabolismo son transformados e incorporados al ser vivo. La
diversidad de los seres vivos se debe a la variabilidad de su composición química,
la cantidad de cada clase de estas moléculas varía de un órgano a otro y de un
individuo a otro, y cada uno de estos cuerpos cumple una función específica.
Estos cuerpos se agrupan en: Inorgánicos como las sales inorgánicas (fosfatos,
carbonatos de Na+, K+, Ca++ y Mg++) y Orgánicos como los carbohidratos. Todos
los componentes químicos de la materia viva se pueden identificar a través de
pruebas químicas específicas que usan reactivos específicos y luego se explican
mediante ecuaciones químicas.
OBJETIVOS

Identificar la presencia de sales minerales en diferentes muestras biológicas

Identificar la presencia de carbohidratos en diferentes muestras biológicas
MATERIALES

De laboratorio (PRESENCIAL)

Tubos de ensayo

Beaker

Pipetas

Embudos

Pinzas
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
Gradillas

Mortero

Mechero

Papel filtro

Encendedor o Fósforos

Soluciones y Reactivos

Agua de Cal

Agua Destilada

Nitrato de Plata

Solución de NaCl

Reactivo de Benedict

Solución de Glucosa

Solución de Almidón

Biológico

Hojas de vegetales, fruto (manzana o pera), Semillas de trigo cocido, papa
I. PROCEDIMIENTO (PRESENCIAL)
Primero: Para la identificación de cuerpos inorgánicos utilizando agua de
cal (Ca(OH)2):
a)
En un tubo de ensayo colocar 10 mL de agua de cal.
b)
Con una pipeta burbujear durante 1 minuto con el aire de los pulmones.
c)
Observar sus resultados.
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Resultados: El agua de cal reacciona con el anhídrido carbónico exhalado de los pulmones,
formándose un precipitado de color blanco lechoso que corresponde al carbonato de calcio. La
reacción química obtenida es: Ca (OH)2 + CO2→ CaCO3 + H2O
Segundo: Para la identificación de cloruros realizando la prueba control:
a)
En un tubo de ensayo colocar 2 mL de NaCl
b)
c)
Mezclar con una ó dos gotas de solución AgNO3.
Observar sus resultados
Resultados: Se forma un precipitado blanco lechoso (AgCl) que después se torna negro o gris y se
le encuentra en el fondo del tubo de ensayo, lo que demuestra la presencia de cloro en la solución.
La reacción química obtenida es: NaCl+AgNO3→ AgCl + NaNO3
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Tercero: Para la identificación de cloruros en una muestra biológica vegetal
a) Con la ayuda de un mechero carbonizar una hoja pequeña de una planta
b) Las cenizas se trituran en un mortero con 5mL de agua destilada
c) Filtrar la muestra
d) Al filtrado recogido en un tubo de ensayo (que sea transparente)
agregar 1 o 2gotas de solución de AgNO3
e) Observar y anotar los resultados.
Resultados: Resultados: Se observa un precipitado
presencia de cloro en el filtrado de la hoja vegetal
lo que demuestra la
Cuarto: Para la identificación de glucosa realizando la prueba control:
a) En un tubo de ensayo colocar 4 mL de solución de glucosa al 30%
b) Mezclar con 5 gotas de reactivo de Benedict
c) Con la ayuda del mechero calentar el tubo de ensayo durante 1 ó 2
minutos. Observar sus resultados
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Resultados: Se observa la aparición de una coloración verde, amarilla que cambia a naranja o de
ésta a rojo ladrillo, esto indica la presencia de glucosa en la solución. El fundamento de esta
reacción radica en que en un medio alcalino, el ión cúprico otorgado por el sulfato de cobre
presente en el reactivo de Benedict, es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehido (CHO)
presente en los azucares reductores como la glucosa a ion cuproso, este nuevo ion se observa como
un precipitado verde, amarillo, naranja ó rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).
Quinto: Para la identificación de glucosa utilizando una muestra biológica (fruto)
a) Con la ayuda de un mortero triturar un pedazo de fruta agregando unos 10
mL de agua destilada
b) Mezclar bien y filtrar en un tubo de ensayo
c) Colectar 4 mL de filtrado de la fruta en un tubo de ensayo y mezclar con 5
gotas de reactivo de Benedict.
d) Con la ayuda del mechero calentar el tubo de ensayo durante 1 ó 2 minutos.
e) Observar y anotar los resultados
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Resultados: Se observa la aparición de una coloración
presencia de azúcares reductores como la glucosa en el filtrado de la
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lo que indica la
.
Sexto: Para la identificación de almidón realizando la prueba control:
a)
En un tubo de ensayo colocar 2 mL de solución de almidón
b)
Mezclar la solución con 2 gotas de Lugol.
c)
Observar sus resultados
Resultados: Se observa la aparición de una coloración azul violeta, lo que indica la
presencia de almidón en la solución. La coloración producida por el Lugol se debe a que
el yodo se introduce entre las espiras de la amilosa del almidón. No es por tanto, una
verdadera reacción química, sino que se forma un compuesto de inclusión, apareciendo la
coloración azul violeta.
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Séptimo: Para la identificación de almidón utilizando una muestra biológica
vegetal
a) Con la ayuda de un mortero triturar unos 10 gramos de trigo cocido y/o papa
con 5 mL de agua destilada.
b) Dejar macerar, luego decantar en un tubo de ensayo 2 mL del macerado.
c) Mezclar con 2 gotas de solución de Lugol.
d) Observar y anotar los resultados.
Resultados: Se observa una coloración
lo que indica la presencia de
almidón en la parte líquida del triturado de trigo.
II.
PROCEDIMIENTO (NO PRESENCIAL)
1. Realizar búsquedas en la red de pruebas similares o complementarias, discutir su
utilidad rápida en el laboratorio o en el campo
2. Discutir la disponibilidad de reactivos y equipos para la realización de las pruebas
de identificación.
CONCLUSIONES
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
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CUESTIONARIO
1.
¿Cuáles son los síntomas de deficiencia en fosforo y magnesio en las plantas?
2.
¿Qué funciones biológicas cumple las sales de carbonato y oxalato de
calcio en los organismos y su relación con la adaptación a ambientes
xerófilos?
3.
¿Cuál es el fundamento químico y como interviene la estructura química
de la glucosa y los componentes del reactivo de Benedict en la identificación
de azucares reductores?
4.
¿Cuál es el fundamento químico y como interviene la estructura
química del almidón y los componentes de la solución de Lugol en la
identificación de polisacáridos?
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5.
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¿Qué papel desempeña el Sodio y el Potasio en las membranas celulares?
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Práctica N° 04
IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS
Constituyen una variedad de moléculas orgánicas bastante heterogénea, tanto desde el
punto de vista estructural como por la diversidad de funciones que desempeñan. Los
lípidos son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por C, H, O, siendo este
último en menor porcentaje. Además pueden contener también fósforo, nitrógeno y
azufre. Son insolubles en agua y son solubles en solventes orgánicos, como éter,
cloroformo, benceno, etc. Son moléculas altamente energéticas, se presentan al estado
sólido (sebos); semisólidos (mantecas) y líquido (aceites) a la temperatura ambiente. En
las plantas los lípidos son almacenados generalmente como glóbulos de aceite , son muy
abundantes en las semillas que en los otros órganos de las plantas, en los animales se les
encuentra depositados mayormente en el tejido adiposo y se transportan como formas
solubles (fosfolípidos) ó como emulsiones (colesterol).
OBJETIVOS
 Determinar la solubilidad e importancia de los lípidos en los procesos
biológicos
MATERIALES
 De laboratorio
 Tubos de ensayo
 Beaker
 Pipetas
 Soluciones y Reactivos
 Agua Destilada
 Solución de Sudan III
 Gasolina
 Xilol, Alcohol, Benceno y Acetona
 Biológico
 Aceite comestible
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PROCEDIMIENTO
Primero: Para la determinación de la solubilidad de los lípidos:
a) Agregar a 3 tubos de ensayo 2 mL de aceite
b) Rotular cada tubo con los números 1, 2, 3, 4, 5 y 6.
c) Al tubo 1 añadir 2 mL de xilol y agitar.
d) Al tubo 2 añadir 2 mL de gasolina y agitar.
e) Al tubo 3 añadir 2 mL de benceno y agitar
f) Al tubo 4 añadir 2 mL de acetona y agitar
g) Al tubo 5 añadir 2 mL de alcohol 70% y agitar
h) Al tubo 6 añadir 2 mL de agua corriente y agitar
i) Observar y anotar los resultados.
Resultados: El aceite tiene diferente solubilidad en los solventes utilizados
Tubo 1
: _________________________________________________________
Tubo 2
: _________________________________________________________
Tubo 3
: _________________________________________________________
Tubo 4
: _________________________________________________________
Tubo 5
: _________________________________________________________
Tubo 6
: _________________________________________________________
Se observa que el aceite siendo un lípido es insoluble en agua, debido a la polaridad de esta. Cuando se agitan
fuertemente agua y aceite se observa una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en
reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el
agua.
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Segundo: Para la determinación de la solubilidad en Sudan III:
a) En un tubo de ensayo colocar 2 mL de aceite comestible.
b) Mezclar con 3 gotas de Sudan III y agitar.
c) Observar sus resultados
Resultados: El aceite se colorea tomando el color del sudan lo que indica que el sudan es soluble en el
aceite. El lípido disuelve al sudan. El sudan sirve para identificar lípidos.
CONCLUSIONES
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_________________________________________________________________
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
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CUESTIONARIO
1. ¿Porque los aceites son líquidos, las mantecas semisólidas y los sebos sólidos?
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2. ¿Qué relación tienen los terpenos y las ceras en la adaptación de los seres vivos,
Ejemplifique?
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3. Explique la formación y función de la cutícula en las plantas
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4. ¿Los lípidos en el ambiente, pueden Biodegradarse, explique?
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Práctica N° 05
IDENTIFICACIÓN DE
PROTEINAS Y ENZIMAS
Son las moléculas fundamentales en la organización celular, no solo por su abundancia,
pues constituyen casi la mitad del peso seco de la célula, sino también por la enorme
variedad de funciones que desempeñan. En cuanto a su composición química, las
proteínas son biopolímeros, es decir, macromoléculas de elevado peso molecular
formadas por veinte unidades moleculares o monómeros diferentes, llamados
aminoácidos, cada de los cuales presenta características particulares. Las proteínas
determinan la forma y la estructura de las células y dirigen casi todos los procesos
vitales. Las funciones de las proteínas son específicas de cada una de ellas y permiten a
las células mantener su integridad, defenderse de agentes externos, reparar daños,
controlar y regular funciones, etc.
OBJETIVOS
 Identificar cualitativamente proteínas en muestras biológicas
 Determinar la presencia y actividad enzimática en una muestra
biológica
MATERIALES
 De laboratorio
 Tubos de ensayo
 Beaker
 Pipetas
 Embudo
 Gradillas
 Mechero
 Trípode
 Mortero
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 Malla de asbesto
 Encendedor o Fósforos
 Soluciones y Reactivos
 Agua Destilada
 Biuret
 Biológico
 Huevo
 Leche fresca
 Trozos de zanahoria fresca
PROCEDIMIENTO
Primero: Para la identificación de proteínas: prueba control (clara de huevo)
a) En un tubo de ensayo colocar 5 mL de clara de huevo.
b) Mezclar con 2mL de agua destilada y agitar.
c) Agregar 2mL de Na (OH) al 30 % con 1mL de Biuret agitar fuertemente.
d) Observar
Resultados: Se observa la aparición de un color violeta, lo que indica la presencia de proteínas en la clara
de huevo. La prueba de Biuret reconoce las uniones peptídicas presentes en polipéptidos y proteínas, si la
reacción es positivase manifiesta por la aparición de una coloración violeta, esto se debe a la formación de
un complejo de coordinación entre los cationes cúpricos presentes en el reactivo de Biuret en un medio
alcalino con las uniones peptídicas de las proteínas.
Segundo: Para la identificación de proteínas: muestra biológica (leche):
a) Colocar en un tubo de ensayo 10 mL de leche
b) Agregar 2 mL de Na (OH) al 30 % con 1 mL de solución de Biuret y agitar.
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c) Observar los resultados.
Resultados: Se observa la aparición de una coloración_________________ , lo que indica la presencia de
proteínas en la leche.
Tercero: Influencia de la cantidad de enzima en el aumento y velocidad dedegradación.
a) Rotula cinco tubos de ensayo del 1 al 5.
b) Coloca cinco gotas de detergente líquido en cada uno de ellos.
c) Coloca, en cada tubo, 10 mL de peróxido de hidrógeno.
d) Corta 10 cubitos de zanahoria de 1 cm de lado.
e) Coloca un cubito de zanahoria en el tubo 2, dos cubitos en el tubo 3, tres cubitos
en el tubo 4y cuatro cubitos en el tubo 5. En el tubo 1 no coloques cubitos de
zanahoria.
f) Durante diez minutos y en intervalos de dos minutos, observa y mide con una regla
el volumen de gas producido (1 cm equivaldrá a 1 mL).
g) Discutir la intervención de las estructuras intracelulares y la actividad enzimática
CONCLUSIONES
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Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita.
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CUESTIONARIO
1. ¿Por qué las proteínas adoptan espontáneamente la configuración mas estable?
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2. ¿Qué fuerzas intervienen en la estabilización de los distintos niveles de
complejidad de las proteínas?
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3. ¿Por qué los aminoácidos que poseen restos apolares se localizan en la superficie
de las proteínas de membrana?
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4. ¿Cómo se puede modificar la funcionalidad biológica de una proteína?
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5. ¿Qué relación tienen las proteínas y los microorganismos en el suelo?
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Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita.
Práctica N° 06
PARTES Y MANEJO DEL
MICROSCOPIO
INTRODUCCIÓN
El conocimiento de las estructuras del ser vivo está
basado casi totalmente en el estudio con el
microscopio. El microscopio óptico es un instrumento
que permite la observación de objetos y detalles de
estructuras tan pequeñas que no podrían ser
observadas a simple vista. Con él, nuestro grado de
visibilidad se amplía en cientos o miles de veces,
gracias a un conjunto de lentes, dispuestos
convenientemente. Las principales dificultades en la
observación y estudio de estructuras biológicas son su
reducido tamaño y su transparencia a la luz visible.
Dado que el microscopio permite superar estas dos
dificultades, el uso del mismo y conocimiento de los
principios y técnicas en microscopía, resultan
fundamentales para el desarrollo de la investigación
en ciencias biológicas. El Microscopio Óptico es el
instrumento más importante en laboratorios,
hospitales, centros de educación e investigación, es
una de las herramientas más útiles para el estudio de
las células y de los microorganismos. Actualmente
contamos básicamente con dos tipos de microscopios:
microscopio óptico y el microscopio electrónico.
Todo microscopio óptico compuesto consta de tres sistemas que son el mecánico,
óptico y de iluminación.
OBJETIVOS
1. Identificar cada uno de los Sistemas del Microscopio Óptico Compuesto, así
como sus respectivas partes para un manejo adecuado del mismo.
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SISTEMA MECÁNICO
Está constituido por la parte mecánica, soporte o cuerpo del microscopio, consiste
en esencia en un armazón metálico que sostiene al sistema óptico y en ocasiones al
de iluminación, está compuesto por:
El pie: constituye la base sobre la que se
apoya el microscopio y tiene forma variable
(forma de Y, rectangular, redonda,
herradura), el pie debe de ser
suficientemente grande y tener suficiente
base para mantener la estabilidad del
microscopio, incluso cuando esté inclinado.
La columna: llamada también asa o brazo,
es una pieza colocada en la parte posterior
del aparato, sostiene el tubo, platina y otros
accesorios en su porción superior y por el
extremo inferior se adapta al pie.
El tubo: tiene forma cilíndrica y está
ennegrecido internamente para evitar las
molestias que ocasionan los reflejos de
la luz, en la parte superior lleva el ocular
o los oculares, y en la parte inferior los
objetivos.
El cabezal: contiene el tubo ocular o los
tubos oculares varía según el modelo;
puede ser estático o giratorio 360º.
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El revólver: formado por dos discos, uno
fijo al tubo y la otra gira sobre su propio
eje, es una pieza giratoria provista de
orificios en los cuales se enroscan los
objetivos. Al girar el revólver, los
objetivos pasan por el eje del tubo y se
colocan en posición de trabajo, la cual se
nota por el ruido que lo fija.
La platina: es una pieza metálica plana
en la que se coloca la preparación u
objeto que se va a observar, presenta un
orificio en el eje óptico del tubo que
permite el paso de los rayos luminosos a
la preparación. La platina puede ser fija,
en cuyo caso permanece inmóvil; en
otros casos puede ser giratoria, es decir,
mediante tornillos laterales puede
centrarse o producir movimientos
circulares.
Carro: es un dispositivo colocado
sobre la platina que permite deslizar la
preparación con movimiento ortogonal
de adelante hacia atrás y de derecha a
izquierda. Permite ubicar con rapidez
un punto de la preparación es decir
buscar el campo de la observación.
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Tornillo macrométrico: girando este
tornillo, asciende o desciende el tubo del
microscopio o la platina, deslizándose en
sentido vertical gracias a una cremallera.
Estos movimientos largos permiten el
enfoque rápido de la preparación.
Tornillo micrométrico: mediante el
movimiento casi imperceptible que produce
al deslizar el tubo o la platina, se logra el
enfoque exacto y nítido de la
preparación
Tornillo de movimiento del condensador:
es también denominado “piñón”, este sube
y baja el condensador sobre una cremallera
regulando la cantidad de luz en la
preparación.
Ajuste de Dioptría: ajuste usado para
compensar la diferencia de visión que
existe entre los dos ojos; ubicado en los
tubos oculares.
Ajuste de distancia interpupilar: usado
para regular la distancia entre los ojos del
observador.
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Regulador de la iluminación: se usa para
controlar la intensidad de luz que se dirige
hacia el condensador.
Interruptor de encendido: dispositivo
que permite encender y apagar la lámpara
del microscopio, puede estar ubicado en la
base o a un lado de la columna.
Tornillos de desplazamiento de la
platina y carro: de mandos coaxiales en
eje vertical; desplaza la platina del
microscopio con movimiento ortogonal
de adelante hacia atrás y el carro de
derecha a izquierda.
SISTEMA ÓPTICO
Es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes mediante el conjunto de
lentes que lo componen, también es conocido como sistema de magnificación.
El ocular: examina y amplifica la
imagen producida por el objetivo,
están constituidos generalmente por
dos lentes, dispuestas sobre un tubo
corto. Los oculares generalmente
más utilizados son los de: 8x, 1Ox,
12.5x, 15x y 16 x. La x se utiliza
para expresar en forma abreviada los
aumentos. La imagen formada por el
ocular es virtual derecha y de mayor
tamaño.
2023
Los objetivos: los objetivos producen
aumento de las imágenes de los objetos y
organismos y, por lo tanto, se hallan cerca
de la preparación que se examina. Los
objetivos utilizados corrientemente son de
dos tipos: objetivos secos y objetivos de
inmersión. Los objetivos secos se utilizan
sin necesidad de colocar sustancia alguna
entre ellos y la preparación.
En la cara externa llevan una serie de índices que indican el aumento que producen, la abertura
numérica y otros datos. Así, por ejemplo:
160: donde 160 es la longitud del tubo (160mm)
0.17: (0.17mm) el grosor del cubreobjetos.
45 (ó 45x): donde 45 es el aumento o le valor del objetivo y la x indica que se debe
multiplicar ese valor por el ocular para obtener el aumento total.
0.65 (ó NA 0.65): donde 0.65 es la apertura numérica, que es la capacidad del
objetivo para utilizar la mayor cantidad de luz que procede del espejo o foco,
durante la formación de la imagen.
El número de objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se destina.
Los aumentos de los objetivos secos más frecuentemente utilizados son: 6x, 10x,
20x, 40x, 43x 45x y 60x. El objetivo de inmersión está compuesto por un
complicado sistema de lentes. Para observar a través de este objetivo es necesario
colocar una gota de aceite de cedro (de inmersión) entre el objetivo y la
preparación, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de
cedro. Generalmente, estos objetivos son de 95x, 97x y 100x. Los objetivos se
disponen en una pieza giratoria denominada revólver.
Apertura numérica (NA): Es una medida que indica la capacidad del objetivo de
poder captar los rayos refractados por las estructuras finas de las cuales está
constituido el objeto que se observa. Esta capacidad se traduce en el poder del
microscopio de formar imágenes que muestren al observador una serie de detalles
del objeto que se está examinando. Cuanto mayor sea la apertura numérica de un
objetivo, éste tendrá una mayor capacidad de mostrar detalles finos en la imagen
que forma.
Aumento de un objetivo. Es la capacidad que posee un objetivo de ampliar la
imagen del objeto observado. Se define como la relación entre el tamaño de la
imagen y el objeto, en valores lineales (largo y ancho).
Condensador
y
Diafragma:
el
condensador está formado por un sistema
de lentes, cuya finalidad es concentrar los
rayos luminosos sobre el plano de la
preparación. El condensador se halla
debajo de la platina. El condensador
puede deslizarse sobre un sistema de
cremallera mediante un tornillo que
determina su movimiento ascendente o
descendente.
Generalmente, el condensador está
provisto de un diafragma-iris, que regula
su abertura y controla la calidad de luz
que debe pasar
a través
del
condensador.
Precondensador: evita la dispersión
masiva de la luz. Se ubica sobre la base y
puede ser removible, de tal forma que se
pueda intercambiar de forma rápida y
sencilla con un espejo y utilizarse en
lugares donde no se pueda acceder a
energía eléctrica
SISTEMA DE ILUMINACIÓN
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que
ilumine la preparación u objeto que se va a observar en el microscopio.

Fuente de Iluminación: podemos obtener la fuente de luz a través de un
espejo que tiene dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de movimientos en
todas las direcciones. La cara cóncava se emplea de preferencia con iluminación
artificial, y la plana, para iluminación natural (luz solar). Modernamente se
prescinde del espejo en la fabricación de microscopios, ya que éstos traen
incorporada una lámpara de bajo voltaje (generalmente de 6 voltios) se trata de una
lámpara halógena (o lámparas LED) de intensidad graduable que, mediante un
reóstato regula la emisión y la intensidad de luz colocada en la base o columna del
microscopio esta lámpara se enciende y se apaga con un interruptor.
PROPIEDADES DEL MICROSCOPIO
1.
Poder de resolución: se define como la distancia mínima entre dos puntos
próximos que pueden verse separados. El ojo humano normal puede separar puntos
distantes en 0.25mm, en el microscopio óptico. El máximo poder de resolución que
se puede obtener es de 0.2µm aproximadamente, para lo cual se requiere que el
microscopio proporcione una imagen de un aumento total de 1000x a 1400x.
2.
Poder de definición: se refiere a la nitidez de las imágenes obtenidas, sobre
todo respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la
corrección de las aberraciones de las lentes utilizadas.
3.
Aumento del microscopio: en términos generales se define como la relación
entre el diámetro aparente de la imagen y el diámetro o longitud del objeto. Esto
quiere decir que si el microscopio aumenta 100 diámetros un objeto, la imagen que
estamos viendo es 100 veces mayor que el tamaño real del objeto. Para calcular el
aumento de un microscopio, basta multiplicar el aumento del ocular por el aumento
del objetivo. Por ejemplo, si estamos utilizando un ocular de 10x y un objetivo de
45x, el aumento a que estamos viendo la preparación será: 10 x 45 = 450x, lo cual
quiere decir que la imagen del objeto está ampliada 450 veces.
CAMPO DEL MICROSCOPIO
Se denomina "campo del microscopio" al círculo visible que se observa a través
del microscopio. También podemos definirlo como la porción del plano visible
observado a través del microscopio. Si el aumento es mayor, el campo disminuye,
lo cual quiere decir que el campo es inversamente proporcional al aumento del
microscopio. Para medir el diámetro del campo del microscopio con cualquiera de
los objetivos se utiliza el micrómetro.
MANEJO DEL MICROSCOPIO
1. Iluminación del Campo del Microscopio: Consiste en que la luz que
proporciona la lámpara eléctrica o el espejo ilumina el círculo o campo del
microscopio, de tal manera que presente un color blanco y de brillantez máxima.
Esto se logra moviendo el revólver para colocar el objetivo de menor aumento en
posición óptica luego prender la lámpara o mover el espejo mirando por el ocular
de tal manera que se pueda observar un campo blanco muy iluminado. La
iluminación se regula moviendo el condensador y el diafragma, si la muestra es
muy transparente se cierra el diafragma, pero para objetivos de 40 o más aumentos
debe estar totalmente abierto.
2. Enfoque: Consiste en buscar la imagen de la muestra, esto se hace mirando
por el ocular y moviendo el tornillo macrométrico hasta lograr ver la imagen, para
luego afinar el enfoque con el tornillo micrométrico. Este método requiere usar
primero el tornillo macrométrico para ascender la platina con la muestra hacia el
objetivo o descender el objetivo hasta que esté tan cerca del portaobjetos como sea
posible, el ascenso de la platina o el descenso del objetivo debe observarse
lateralmente con cuidado para asegurarse de que el lente no toque el portaobjetos
(sólo en el caso del objetivo de inmersión se permitirá el contacto previa aplicación
de una gota de aceite). Cuando el lente esté a punto de tocar el portaobjetos,
entonces ya puede ver por el ocular y empezar a enfocar moviendo el objetivo hacia
arriba o bajando la platina según sea el caso del microscopio, hasta alcanzar el
mejor foco posible, ayudándose para un enfoque más detallado del tornillo
micrométrico.
3. Observación: Consiste en determinar las características más importantes de la
muestra en observación, se inicia con el objetivo de menor aumento, ya que da una
visión panorámica de la muestra, permitiendo seleccionar los mejores campos de la
muestra. Para pasar a los otros objetivos se hace girar el revólver y se coloca en el
objetivo que se va a usar en posición óptica correcta. El microscopio óptico puede
ser monocular y consta de un solo tubo, la observación en estos casos se hace con
un solo ojo. Es binocular cuando posee dos tubos entonces la observación se hace
con los dos ojos. Esto presenta ventajas tales como mejor percepción de la imagen,
más cómoda la observación y se perciben con mayor nitidez los detalles.
CUIDADO DEL MICROSCOPIO
Debe tenerse en cuenta las siguientes recomendaciones:
1)
Para trasladar el microscopio de un lugar a otro, hágalo siempre sujetándolo del
brazo con una mano y apoyando el pie con la otra mano. No lo intente por otra parte ya
que podría dañarlo. Muchos de los desperfectos que puede sufrir son debidos a golpes
durante la manipulación
2) Lo más conveniente sería dejar fijo el microscopio
en
la
mesa de
trabajo. La mesa que se vaya a utilizar debe ser estable para evitar molestas
vibraciones de la muestra durante el examen. La posición ante el microscopio debe
ser cómoda a una altura correcta.
3) El aceite de inmersión impregnado en el objetivo referente deberá limpiarse
inmediatamente después de utilizarlo. Para ello utilice paño suave (campo)
impregnado con alcohol isopropílico.
4) Si el aceite se ha secado en el lente frontal del objetivo,
límpielo
cuidadosamente un poco de alcohol isopropílico impregnado en un pedazo de tela
(campo), si emplea otros solventes cuide que no disuelvan el pegamento de la
lente.
5) Deberá de limpiarse de inmediato cualquier suciedad o líquido que se derrame
sobre el microscopio.
6) En caso de que los oculares estén sucios, deben limpiarse de la misma
forma que para los objetivos.
7) En cualquier desperfecto del microscopio deberá llamar a su profesor.
8) Cuando termine de hacer sus observaciones, deberán colocar el microscopio en
posición de descanso (bajar la platina hasta el tope y colocar en posición óptica el
objetivo de menor aumento).
9) Por último, deberás limpiarlo completamente (objetivos y oculares) y guardarlo
en el estante y/o cubrirlo con una funda de plástico para protegerlo del polvo.
MATERIALES
1.
De laboratorio

Microscopio Óptico Compuesto

Laminas Preparadas con la letra ¨e¨
2.
Soluciones y Reactivos

Alcohol Isopropílico

Aceite de Inmersión
PROCEDIMIENTO
A. Identificación de las partes del Microscopio Óptico Compuesto
1. Sobre la mesa de trabajo colocar un microscopio óptico compuesto e identificar las partes del Sistema
Mecánico, Óptico y de iluminación
MICROSCOPIO BINOCULAR
1. Colocar en la siguiente tabla el aumento del ocular y de los objetivos del
Microscopio que está utilizando
OBJETIVOS
Ocular
AUMENTO
Objetivo Panorámico
Objetivo de Menor Aumento
Objetivo de Mediano Aumento
Objetivo de Mayor Aumento o Inmersión
2.
Rotular las partes del siguiente Microscopio Óptico Compuesto Binocular
MICROSCOPIO TRINOCULAR CON CAMARA
A.
Para observar una muestra en el microscopio se deben de seguir los
siguientes pasos:
1. Acomode el objetivo de menor aumento (10 x) en el revólver, de manera tal que
sea éste el que apunte a la muestra a observar
2. Busque con el espejo la máxima iluminación. Si fuese un microscopio de luz
incorporada encender la lámpara. Fijarse si el diafragma está abierto (muchos casos
de falla en la iluminación se deben a un diafragma cerrado).
3. Coloque la muestra a observar en este caso la letra ¨e¨ sobre la platina, acomode
la muestra de tal manera que el preparado quede a la altura del objetivo. Para ello se
valdrán de los tornillos del carro presentes en la platina, que le permitirán mover al
preparado en dos planos: vertical y horizontal, con el cubreobjetos mirando hacia
arriba. En este momento se torna fundamental ubicar el cubreobjetos mirando
hacia el objetivo, pues el primer gran error se comete en este punto, cuando
fácilmente se puede enfocar con el objetivo de menor aumento, pero se torna
imposible su enfoque con el objetivo de mediano y mayor aumento cuando el
cubreobjetos queda mirando hacia abajo.
4. Mirando desde un costado del microscopio, descienda el objetivo o acerque la
platina con el tornillo macrométrico hasta su tope inferior, o hasta apoyarlo
levemente sobre la muestra, normalmente los microscopios convencionales poseen
un tope que impide su descenso por debajo de cierta marca. Sin embargo, puede
darse el caso que tal tope no exista, por eso se vuelve fundamental observar el descenso
o ascenso según sea el caso desde un costado, a fin de evitar la rotura de la muestra.
5. Una vez puesto el preparado en el eje del objetivo, con el tornillo macrométrico
comience a alejar el objetivo de menor aumento o la platina del preparado,
buscando ver una imagen cada vez más nítida, hasta pasarse del punto de enfoque.
Vuelvan hacia el máximo punto de enfoque con el tornillo macrométrico. Utilice el
tornillo micrométrico para dar el enfoque fino
6. Una vez conseguido el enfoque correcto, se procede a la observación para lo
cual se debe de esquematizar lo que se está observando, además es de mucha
importancia colocar el aumento del ocular por el aumento del objetivo para así
tener el aumento final de la imagen.
Descripción: Con objetivo de menor aumento se observa la letra ¨ e ¨ invertida,
ocupa la mayor parte del campo del microscopio, y esta aumentada 100 veces.
7. Mueva el revólver a fin de acomodar el objetivo de mediano aumento,
solamente se podrá utilizar para enfoque el tornillo micrométrico. El uso del
tornillo macrométrico podrá llevar a la ruptura de la muestra en observación.
Esquematizar su observación.
Descripción: La muestra está aumentada
8. Mueva el revólver a fin de acomodar el objetivo de mayor aumento (inmersión).
En este caso deberá utilizar una gota aceite de inmersión sobre la muestra antes de
colocar el objetivo en posición óptica. Esquematizar su observación.
Descripción: La muestra está aumentada
9. Una vez terminada la observación de la muestra, limpiar los objetivos y
dejar el objetivo de menor aumento en posición óptica.
CONCLUSIÓN

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CUESTIONARIO
1.
Describa el funcionamiento y uso de diversos tipos de Microscopios Electrónicos
Guía de Practicas de Biología General para alumnos de La Facultad de Educación - UNSA
Dr. Armando Arenazas Rodríguez; Dr. E. Walter Colque Rondón; Dr. Daniel Luque Zurita.
2.
¿Cuál es la importancia de los prismas en los microscopios mono y binoculares?
3.
Enumere 5 ventajas de la microscopía electrónica con focal de
barrido laser frente a la microscopía óptica tradicional:
a)
b)
c)
d)
e)
4.
2023
¿Qué son los objetivos planapocromáticos?
5.
El índice de refracción (IR) de un objeto o una sustancia
transparente se expresa mediante la siguiente fórmula:
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