Universidad de Guadalajara Centro Universitario de Ciencias Exactas e Ingenierías Identificación de microorganismos en sangre periférica Profesor: Dr. José de Jesús Guerrero García Alumno: Jorge Armando Domínguez Mejía Universidad de Guadalajara Centro Universitario de Ciencias Exactas e Ingenierías BACTERIAS Profesor: Dr. José de Jesús Guerrero García Alumno: Jorge Armando Domínguez Mejía Anaplasma • Ehrlichia y Anaplasma son dos géneros de bacterias transmitidas por garrapatas. Son intracelulares e infectan mamíferos domésticos y otros de la vida salvaje, así como a los humanos. • Anaplasma phagocytophilum es una bacteria intracelular gramnegativa obligada que causa una enfermedad febril aguda conocida como anaplasmosis o anaplasmosis granulocítica humana (HGA). Es transmitido por Ixodes scapularis en el noreste de los Estados Unidos y por Ixodes pacificus en California. • Síntomas inespecíficos: Fiebre, escalofríos, malestar general, dolor de cabeza y mialgias. • Un bajo número de pacientes manifiestan complicaciones potencialmente mortales. Los pacientes inmunodeprimidos tienen más probabilidades de ser hospitalizados y tienen mayor riesgo de sufrir complicaciones graves Anaplasma McNaughton. (2013). Pozdnyakova. (2012). Ehrlichia • La ehrlichiosis es una enfermedad transmitida por la picadura de garrapatas que afecta a perros y humanos causada por las especies Ehrlichia canis y E. chaffeensis, respectivamente. • Estas bacterias son gram negativas intracelulares obligadas, de aspecto cocoide a pleomorfo y pueden infectar monocitos. • Síntomas como fiebre alta, anorexia, trombocitopenia, hemorragias, anemia y algunos problemas graves como esplenomegalia, hepatomegalia y meningitis. Anaplasma Lazarchick. (2008). Universidad de Guadalajara Centro Universitario de Ciencias Exactas e Ingenierías PARÁSITOS Profesor: Dr. José de Jesús Guerrero García Alumno: Jorge Armando Domínguez Mejía Plasmodium • Hay aproximadamente 156 especies, pero sólo 4 infectan humanos; P. falciparum, P. vivax, P. ovale y P. malariae. Se piensa que P. knowlesi también podría, pero no está confirmado. • Es el responsable de la malaria. • Se transmite por la picadura del moquito Anopheles hembra infectado con el parásito. • Es un problema de salud pública importante, con 200 a 300 millones de personas afectadas anualmente. En Estados Unidos hay aproximadamente 1700 casos por año. • Los pacientes con malaria típicamente tienen una historia de viaje a África, Asia, Centro y Sudamérica. Malaria • Episodios periódicos de fiebre, precedidos a veces por un cuadro tipo influenza. • La anemia hemolítica es frecuente. Aproximadamente el 20% de los pacientes con infección por P. falciparum demuestra anemia de severidad moderada. • Se puede producir secuestro eritrocitario: la unión de eritrocitos parasitados al endotelio de órganos. • Es común la esplenomegalia. Ciclo de Plasmodium CDC. (2020). Invasión del eritrocito Cowman A, et al. (2016). Respuesta inmune • Derivados de ácidos nucleicos generan citocinas pro-inflamatorias por el macrófago, otros actúan directamente. • En malaria severa, la activación endotelial pude ocurrir por coagulopatías, secuestro de eritrocitos y moléculas del complemento. • Los neutrófilos aumentan, lo que también aumenta la activación endotelial. • Th1 secretan IL-10 que regula la activación de los neutrófilos, junto con las Treg. Moxon, et al. (2020). Microscopía • Es el método más adecuado para diagnosticar la parasitosis. Tinción: Giemsa. • Se puede usar un frotis delgado o uno grueso. • Un frotis grueso nos permite encontrar al parásito más fácil, pero la morfología se puede alterar. • Se coloca una gota de sangre sobre un portaobjetos. • Se extiende la gota con la orilla de otro portaobjetos, formando un círculo de 1-2 cm. • El círculo no debe ser tan grueso. Debemos poder leer a través de él. P. falciparum Trofozoítos en anillo. Miden aproximadamente 1/5 del diámetro del eritrocito, usualmente en la periferia del mismo. Pueden tener un punto de cromatina o dos, así como puntos de Maurer. Pueden haber varios por RBC. CDC. (2020). P. falciparum Trofozoítos maduros. Suelen seguir en anillo, pero se tornan más gruesos y compactos. El pigmento y la cromatina también incrementan. Cuando hay un retraso en el procesamiento, podemos ver formas ameboides. CDC. (2020). P. falciparum Gametocitos. En forma de salchicha. Los macrogametocitos (femeninos) suelen ser azules oscuros y con cromatina condensada, mientras que los microgametocitos (masculinos) son más pálidos. Suelen encontrarse restos del eritrocito (babero de Laveran). CDC. (2020). P. falciparum Esquizontes. Son raros, salvo en infecciones graves. Contienen de 8-24 merozoítos. Un esquizonte maduro usualmente ocupa 2/3 del eritrocito. CDC. (2020). P. knowlesi Trofozoítos en anillo. Muy similares a los de P. falciparum. Sólo que estos no tienen los puntos de Maurer y pueden ser rectangulares. CDC. (2020). P. knowlesi Trofozoítos maduros. Pueden aparecer bandas parecidas a las de P. malariae. El núcleo rojo se hace más grande y el pigmento como gránulos oscuros. Puede haber punteado de Sinton y Mulligan. CDC. (2020). P. knowlesi Gametocitos. Los macrogametocitos suelen ser más grandes, se tiñen de azul, con pigmento negro irregular y un núcleo rojo excéntrico. Los microgametocitos pueden ser rosas y con un núcleo más oscuro. CDC. (2020). P. knowlesi Esquizontes. Pueden tener hasta 16 (regularmente 10) merozoítos segmentados, el pigmento se concentra en una o varias masas conforme madura el esquizonte. CDC. (2020). P. malariae Trofozoítos en anillo. Suelen tener un único punto de cromatina (formando un “ojo de pájaro”), raramente 2. Son más delgados que los de P. falciparum. CDC. (2020). P. malariae Trofozoítos maduros. El citoplasma suele elongarse formando una banda, o puede ser oval con una vacuola central. La cromatina en una única masa y menos definida. Pigmento con disposición periférica. CDC. (2020). P. malariae Gametocitos. Regularmente compactos y ocupan todo el eritrocito, incluso lo pueden comprimir. Citoplasma azul, cromatina rosa-roja y abundante pigmento negro. CDC. (2020). P. malariae Esquizontes. Son comunes. Tienen de 6-12 (casi siempre 8-10) merozoítos en forma de roseta. Suelen llenar el eritrocito. CDC. (2020). P. ovale Trofozoítos en anillo. Usualmente con un solo punto de cromatina, a veces dos. Puede ser frecuente observar múltiples trofozoítos en un eritrocito. CDC. (2020). P. ovale Trofozoítos maduros. Compactos y con pequeñas vacuolas. El eritrocito puede verse ligeramente alargado y con fimbriación. Hay punteado de Schüffner. Pigmento difuso. CDC. (2020). P. ovale Gametocitos. Difíciles de distinguir respecto a P. vivax, pero son menos alargados. Macrogametocito es más grande y suele llenar todo el eritrocito, los microgametocitos son más chicos. Punteado de Schüffner. Fimbrias. CDC. (2020). P. ovale Esquizontes. Similares a P. vivax, pero son más pequeños y con menos merozoítos (4-16, promedio 8). Eritrocitos elongados, ovales y fimbriados con punteado de Schüffner. Pigmento más claro. CDC. (2020). P. vivax Trofozoítos en anillo. Con un solo punto de cromatina largo, citoplasma delgado. Los eritrocitos infectados suelen ser más largos. CDC. (2020). P. vivax Trofozoítos maduros. Ameboides, con vacuolas largas y pseudópodos. El pigmento suele ser café y fino. Puede haber punteado de Schüffner. A veces similar a P. malariae pero el pigmento es más claro y no es periférico. CDC. (2020). P. vivax Gametocitos. Los macrogametocitos llenan todo el eritrocito y lo alargan, citoplasma azul oscuro. En el microgametocito el citoplasma es azul pálido, gris o rosa. Punteado de Schüffner y pigmento café claro. CDC. (2020). P. vivax Occineto. Son cigotos móviles, producto de la unión de dos gametocitos en el intestino de Anopheles. No se observan en SP humana, a menos que haya un gran retraso en el procesamiento de la muestra. CDC. (2020). P. vivax Esquizontes. Tienen 12-24 merozoítos, cada uno tiene un punto de cromatina. Pigmento forma uno o dos conglomerados. CDC. (2020). Babesia • Hay más de 100 especies, pero sólo algunas infectan humanos; B. microti, B. divergens, B. duncani y una especie sin nombrar conocida como MO-1. • Es el responsable de la babesiosis. • Se transmite por la picadura de la garrapata Peromyscus leucopus y se requiere del ratón como huésped. O por transfusiones de sangre. • En 2013, en USA, se reportaron 1762 casos. Babesiosis • Se asocia con un síndrome tipo malaria con fiebre, escalofríos, sudoración y cefalea, aunque la fiebre no suele ser de periocidad regular (como sí es en la malaria). • Cuando está presente, la anemia suele ser leve, pero hay algunos casos de anemias hemolíticas severas, con frecuencia en pacientes con una esplenectomía previa. • Una forma europea más severa de la babesiosis se debe a la B. divergens. • En Estados Unidos, la babesiosis es comúnmente causada por B. microti; un trastorno autolimitado leve que se observa casi siempre en el noreste del país. Ciclo de Babesia CDC. (2017). Microscopía • La forma predominante observada en sangre es una forma de anillo pequeño, que se asemeja bastante al P. falciparum, sin embargo, los trofozoítos de Babesia spp. pueden mostrar una amplia variedad morfológica, que oscila desde formas muy pequeñas compuestas por un cuerpo citoplasmático diminuto con un punto nuclear apenas visible, hasta formas ameboides más grandes, en forma de pera o alargadas. • En un solo eritrocito pueden observarse hasta 12 trofozoítos de Babesia spp. • Las tétradas de anillos de Babesia spp. son raras, aunque diagnósticas. Babesia spp. CDC. (2017). Trypanosoma cruzi • Es un protozoo que se ha clasificado en 6 linajes distintos. • Es el responsable de la enfermedad de Chagas (tripanosomiasis americana). • Se transmite por la mordedura y defecación de los triatominos. Otros mamíferos también pueden ser huéspedes. • Se han informado casos de enfermedad de Chagas en países de América Central y del Sur, particularmente en áreas rurales empobrecidas. • Ha habido un pequeño número de casos autóctonos de la enfermedad de Chagas en los Estados Unidos. Enfermedad de Chagas • En la fase aguda: • Usualmente asintomática o con síntomas somáticos inespecíficos. • Puede haber signos y síntomas cardíacos o neurológicos, pero son raros en esta fase. • Hay chagomas; inflamación localizada en el sitio de inoculación del parásito. • Signo de Romaña: inflamación en el párpado. • En la fase crónica: • Puede ocurrir hasta dentro de años después de la inoculación. • Sintomatología cardíaca o gastrointestinal (usualmente ambas). • Complicaciones que pueden ser fatales. Ciclo de T. cruzi CDC. (2021). Microscopía de T. cruzi CDC. (2021). Trypanosoma b. gambiense/rhodesiense • Hay dos subespecies de T. brucei que son patógenas para el ser humanao; T. b. gambiense y T. b. rhodesiense. • Son los responsables de la tripanosomiasis africana. • T. b. gambiense causa la tripanosomiasis africana crónica ("enfermedad del sueño de África occidental") • T. b. rhodesiense causa la tripanosomiasis africana aguda ("enfermedad del sueño de África oriental"). • La mosca tsetsé es el vector para ambas especies. • El humano es el principal reservorio para T. b. gambiense. • El reservorio más importante para T. b. rhodesiense es el ganado. • Todavía no hay diagnóstico molecular validado. Tripanosomiasis africana • Enfermedad de primera etapa (hemolinfática): • Fiebre intermitente. • Prurito. • Linfadenopatía. • Enfermedad de segunda etapa (meningoencefálica): • Trastornos de sueño. • Anomalías en el ECG compatibles con perimiocarditis. • T. b. rhodesiense es más rápida y grave. • Ambas subespecies pueden ser mortales si no se tratan. CDC. (2019). Microscopía de T. b. gambiense/rhodesiense CDC. (2019). Universidad de Guadalajara Centro Universitario de Ciencias Exactas e Ingenierías HONGOS Profesor: Dr. José de Jesús Guerrero García Alumno: Jorge Armando Domínguez Mejía Histoplasma capsulatum • La histoplasmosis, causada por el hongo ambiental dimórfico Histoplasma capsulatum, es una micosis importante en el escenario mundial. • La adquisición del hongo por parte de huéspedes mamíferos puede ser clínicamente silenciosa o puede conducir a una enfermedad sistémica potencialmente mortal, que puede ocurrir en huéspedes inmunológicamente intactos o deficientes, aunque la enfermedad grave es más probable en el contexto de inmunidad celular comprometida. Histoplasma capsulatum Goldberg. (2019). Vicari. (2021). Universidad de Guadalajara Centro Universitario de Ciencias Exactas e Ingenierías CASO CLÍNICO Profesor: Dr. José de Jesús Guerrero García Alumno: Jorge Armando Domínguez Mejía Choi IH, et al. (2016). Choi IH, et al. (2016). DÍA 10 DÍA 19 Choi IH, et al. (2016). Referencias • • • • • • • • • • • • • • • • CDC. (2017). Babesiosis. https://www.cdc.gov/dpdx/babesiosis/index.html. CDC. (2019). African Trypanosomiasis. https://www.cdc.gov/dpdx/trypanosomiasisafrican/index.html CDC. (2020). Malaria. https://www.cdc.gov/dpdx/malaria/index.html. CDC. (2021). American Trypanosomiasis. https://www.cdc.gov/dpdx/trypanosomiasisamerican/index.html. Choi, I. H., Hwang, P. H., Im Choi, S., Lee, D. Y., & Kim, M. S. (2016). Delayed diagnosis of falciparum malaria with acute kidney injury. Journal of Korean Medical Science, 31(9), 1499-1502. Cowman, A. F., Healer, J., Marapana, D., & Marsh, K. (2016). Malaria: biology and disease. Cell, 167(3), 610-624. Dumic, I., Jevtic, D., Veselinovic, M., Nordstrom, C. W., Jovanovic, M., Mogulla, V., ... & Ramanan, P. (2022). Human granulocytic anaplasmosis—a systematic review of published cases. Microorganisms, 10(7), 1433. Franco-Zetina, M., Adame-Gallegos, J., & Dzul-Rosado, K. (2019). Effectivity of diagnostic methods for the detection of human and canine monocytic ehrlichiosis. Revista Chilena de Infectologia: Organo Oficial de la Sociedad Chilena de Infectologia, 36(5), 650-655. Goldberg. (2019). Histoplasmosis in Neutrophils 1. American Society of Hematology. Guzman, N., Yarrarapu, S. N. S., & Beidas, S. O. (2018). Anaplasma phagocytophilum. Lazarchick. (2008). Ehrlichiosis – 3. American Society of Hematology. McNaughton. (2013). Anaplasma morulae detected on peripheral smear. American Society of Hematology. Mittal, J., Ponce, M. G., Gendlina, I., & Nosanchuk, J. D. (2018). Histoplasma capsulatum: mechanisms for pathogenesis. Fungal Physiology and Immunopathogenesis, 157-191. Moxon, C. A., Gibbins, M. P., McGuinness, D., Milner Jr, D. A., & Marti, M. (2020). New insights into malaria pathogenesis. Annual Review of Pathology: Mechanisms of Disease, 15, 315-343. Pozdnyakova. (2012). Human granulocytic anaplasmosis. American Society of Hematology. Vicari. (2021). Histoplasma capsulatum in bone marrow. American Society of Hematology.