CURSO PRÁCTICO DE DISEÑO Y EVALUACIÓN DE BIORREACTORES 2022 1 CURSO PRÁCTICO DE DISEÑO Y EVALUACIÓN DE BIORREACTORES Hidrodinámica en reactores no convencionales 37 HIDRODINÁMICA DE REACTORES AIRLIFT-LOOP Introducción Los biorreactores para la obtención de productos de fermentación se han empleado, clásicamente, desde el siglo pasado. Su desarrollo se vio impulsado por la necesidad de mantener condiciones asépticas controladas para la producción de antibióticos en la década de los cuarenta. Actualmente los biorreactores se emplean en un gran número de procesos que no sólo incluyen a productos obtenidos por cultivo de microorganismos, sino también de células animales y vegetales. Los biorreactores de tanque agitado son los más comúnmente empleados en procesos biotecnológicos industriales. Sin embargo, en las últimas décadas se han desarrollado nuevos tipos de fermentadores y algunos se han aplicado industrialmente con éxito. Un ejemplo sobresaliente es el reactor instalado por la ICI, en los años setenta, para la producción de proteína unicelular y más recientemente los reactores desarrollados por Bayer (columnas de burbujas) y Hoechst (ICI Deep shaft, generación de compresores internos) para el tratamiento biológico de aguas residuales. Torres de contacto gas-líquido (TCGL) Entre las ventajas que se atribuyen a esta clase de reactores biológicos está el menor consumo de energía, en comparación con un reactor convencional agitado mecánicamente, su bajo costo de instalación y la relativa sencillez en el diseño, construcción, operación y mantenimiento. Aunque se evita la generación de calor por agitación mecánica el grado de turbulencia en una TCGL es significativamente menor que en un reactor agitado, lo que redunda en un menor coeficiente global de transferencia de calor. La torre de contacto más simple es la columna de burbujas, que se puede definir como un recipiente cilíndrico, cuyo diámetro se ensancha en el extremo superior para facilitar el rompimiento de espuma y la liberación de burbujas. El aire que se distribuye en el fondo del reactor, asciende en forma de burbujas. Como éstas viajan más rápido que el líquido que las rodea, se 1 desplaza el líquido que está en su entorno estableciéndose un patrón de circulación que genera un mezclad0 aceptable. El aspecto más importante en el diseño de una columna de burbujeo es el difusor o aspersor de aire, ya que entre más pequeñas sean las burbujas que proporciona, mayor será el área para transferencia de masa. Las burbujas generadas en el difusor de la torre de contacto ascienden como enjambre de burbujas cuyo comportamiento está determinado por la velocidad superficial del gas. A una baja velocidad superficial de gas (Ug), el diámetro de la burbuja es relativamente homogéneo y la velocidad de ascenso de las burbujas es uniforme y prácticamente no hay coalescencia. A este régimen se le denomina pseudo-homogéneo. A velocidades mayores el régimen es heterogéneo perdiendo uniformidad tanto el diámetro de burbuja como su velocidad de ascenso. La formación de burbujas de gran tamaño provoca una mayor circulación en el interior de la columna, por lo que a este régimen también se le denomina recirculante. En estas condiciones, la mayor parte del gas es transportado por esas grandes burbujas, abatiéndose la velocidad de transferencia de masa. Una alta velocidad de recirculación del líquido sin aumentar la velocidad superficial del gas se logra colocando un tubo en el interior de la columna, o bien, en un brazo externo para recirculación del líquido, este tipo de reactores se conoce como airlift. Reactoresa Airlift En este tipo de reactor el suministro de aire necesario para la reacción biológica es suficiente para actuar como la única fuente de movimiento del líquido. En general, estos reactores consisten en un depósito de líquido dividido verticalmente en dos zonas conectadas en la parte superior e inferior. Una de estas zonas es aireada formándose una mezcla gas-líquido cuya densidad es menor a la del líquido solo. Al llegar a la parte superior las burbujas se separan y por diferencia de densidades el líquido desciende por el ducto no aireado (downcomer), provocando así un patrón de circulación dentro del biorreactor. Este patrón de circulación le confiere ventajas adiciones, por ejemplo una mejor transferencia de calor y un mejor mezclado en comparación con las columnas de burbujas. Adicionalmente, cuando se trabaja a velocidades superficiales de gas equivalentes se presenta una mayor 2 velocidad de recirculación del líquido en los reactores airlift en comparación con las columnas de burbujeo; por lo que el intervalo de operación (velocidad de aireación) en régimen homogéneo es mucho más amplio. Clasificación de los reactores airlift Una gran variedad de configuraciones se ha descrito en la literatura, y a pesar de que ocasionalmente se han encontrado términos confusos, básicamente se pueden clasificar como: a) Airlift con loop interno, que es parecido a una columna de burbujeo, sólo que está dividida por medio de un separador en dos zonas; una de ascenso de la mezcla gas-líquido (riser) y una de retorno (downcomer). b) Airlift con loop externo, donde las zonas de ascenso y retorno son dos tubos separados, que se conectan por secciones horizontales colocadas cerca de las partes superior e inferior de la torre. Los reactores airlift con loop interno pueden ser de tubo concéntrico (ALTC) ó bien la división puede hacerse mediante una mampara, denominándose entonces Split Cylinder Airlift (SCAL). Los reactores con loop externo tienen menos variedad que los anteriores; aunque muchos reactores se han diseñado variando las conexiones horizontales entre los ductos, particularmente la conexión en la parte superior de la columna. Hidrodinámica de los reactores airlift Los aspectos geométricos que mayor influencia tienen en el comportamiento hidrodinámico de los biorreactores airlift son: la relación altura-diámetro, la relación entre las áreas seccionales de ascenso y de descenso, las características del difusor y el diseño de la separación del gas en la parte superior del reactor. Otra característica que afecta marcadamente la caída de presión en un reactor airlift, es el espacio libre que existe entre el fondo del ducto de ascenso y el punto donde está colocado el difusor. La velocidad de circulación del líquido es una de las variables más importantes para el diseño y escalamiento de los reactores airlift, ya que ésta influye en la retención del 3 gas en el reactor, en el régimen de flujo prevaleciente, en los coeficientes de transferencia de calor y masa y en el grado de mezclado en el reactor. Otra variable importante en el diseño de este tipo de reactores es el coeficiente de retención del gas. La importancia de este coeficiente es múltiple, determina el tiempo de residencia del gas en el líquido y, en combinación con el tamaño de la burbuja permite calcular el área interfacial gas-líquido que se emplea para el cálculo del coeficiente de transferencia de oxígeno. Para el diseño de un reactor debe tomarse en cuenta la retención máxima de gas que puede lograrse en diferentes condiciones de operación. Objetivo de la práctica Caracterizar hidrodinámicamente un biorreactor airlift de tubo concéntrico, mediante la determinación de las ecuaciones que correlacionan a diferentes variables con la velocidad superficial del gas (Ug). Las variables que se determinarán son las siguientes: a) b) c) d) e) f) Tiempo de mezclado terminal (tm) Coeficiente de retención de gas (Eg) Diámetro Sauter medio de burbuja (dbsm) Área de contacto gas-líquido (a) Velocidad de circulación del líquido en el ducto de ascenso (vlcr) Velocidad de circulación del líquido en el ducto de descenso (vlcd) Desarrollo experimental Una vez conocidas las dimensiones del reactor se procederá a llenarlo con agua hasta el nivel superior a la altura del tubo central. a) Determinación del tiempo de mezclado terminal (tm): se considera como el tiempo necesario para que cualquier material soluble que entre en contacto con el fluido del rector sea completamente mezclado hasta niveles moleculares. 4 Procedimiento: Esta determinación se puede hacer en forma visual midiendo el tiempo que tarda en homogeneizarse el color impartido por un pulso de 250 μL de azul de metileno inyectado en la parte superior del airlift cuando a un determinado gasto de aire. Alternativamente se puede medir mediante la estabilización del pH; en este caso el líquido del reactor se ajusta a un pH ligeramente alcalino y una vez que el valor se mantiene constante se adiciona, al tiempo “cero”, un pulso de HCl y se evalúa el tiempo necesario para alcanzar el nuevo valor estable de pH. Esta operación se repetirá para diferentes velocidades de aireación. b) Determinación del coeficiente de retención de gas en el ducto de ascenso (Eg): es la fracción de gas retenido en la mezcla gas-líquido que se encuentra en el ducto de ascenso y se determina como la relación entre el incremento en el volumen del líquido cuando se airea y el volumen de la mezcla gas-líquido. Procedimiento: Para esta determinación se carga el biorreactor con agua hasta un nivel inferior al borde del tubo central y se mide la altura (Hl), que corresponde al volumen de referencia en la columna (Vl), en ausencia de aireación. Posteriormente se suministra aire a un determinado gasto y se mide el incremento de altura debida al gas retenido (Hg) o la altura de la mezcla gaslíquido (Hlg). Dado que el diámetro del tubo central es constante a todo lo largo, el coeficiente de retención de gas para cada aireación se calcula con la siguiente relación: Eg= (Hlg- Hl)/ Hlg o Eg=Hg/Hlg c) Determinación del diámetro Sauter medio de burbuja (dbsm): para establecer la correlación entre el diámetro medio de burbuja y la velocidad superficial del aire (Wsg), se determina el valor del diámetro estadístico de las burbujas en diversas condiciones de operación. El 5 diámetro estadístico que se determinará será el de Sauter que se expresa como: dbsm= ∑nidbi3/∑nidbi2 Donde: ni= número de veces que se presenta un diámetro determinado dbi= valor del diámetro de las burbujas Para facilitar la determinación se utiliza una hoja de cálculo, donde la primera columna corresponde a los valores de diámetro medidos, la segunda y tercera columna resultan de los diámetros al cuadrado y al cubo, respectivamente. Finalmente el dbsm se obtiene por el cociente de las sumatorias de las columnas, como se indicó anteriormente. Procedimiento: Se toman fotografías del reactor cuando se opera a diferentes velocidades de aireación. Estas se amplifican a tamaño natural y se mide el diámetro de 50 burbujas a lo largo del reactor. d) Determinación del área interfacial de contacto gas-líquido (a): ésta se calcula, empleando el coeficiente de retención de gas y el diámetro medio de Sauter, mediante la expresión de Calderbank: a= 6 Eg/dbsm Con esta información se construye la gráfica del área interfacial en función del valor de la velocidad superficial de gas (Ug). e) Determinación de la velocidad de circulación del líquido en el ducto de descenso o retorno (vlcd): se define como la velocidad que presentan los marcadores de circulación (fragmentos de papel de un diámetro de 5 mm) que son arrastrados por el líquido en el ducto de retorno del reactor. Se considera que la velocidad con que son arrastrados los fragmentos es igual a la del fluido circulante. Procedimiento: Se toma el tiempo que tardan los marcadores de circulación en recorrer una distancia establecida cuando se suministra un determinado flujo de aire. Con esta información se determina la velocidad de circulación en el downcomer. 6 f) Determinación de la velocidad de circulación del líquido en el ducto de ascenso (riser) (vlcr): La velocidad de circulación del líquido en el ducto de ascenso se estima de acuerdo a la siguiente expresión: vlcr= vlcd (Ad/Ar) Donde: vlcd= velocidad de circulación en el ducto de descenso Ad = Área seccional del ducto de descenso Ar = Área seccional del ducto de ascenso 7 Informe: 1) Construir la gráfica de tiempo de mezclado terminal (tm) en función de la velocidad superficial de aire (Ug). 2) Establecer la correlación entre el tiempo de mezclado terminal y Ug. 3) Construir la gráfica del coeficiente de retención de gas (Eg) en función de Ug. 4) Establecer la correlación entre el coeficiente de retención de gas y Ug, considerando un valor de cero cuando no hay aireación. 5) Construir la gráfica de diámetro medio de burbuja en función de Ug. 6) Establecer la correlación entre el diámetro medio de burbuja y Ug. 7) Construir la gráfica de área interfacial gas-líquido en función de Ug. 8) Establecer la correlación entre el área interfacial y Ug. 9) Construir la gráfica de la velocidad de ascenso y la velocidad de descenso del líquido en el reactor, en función de Ug. 10) Establecer la correlación entre la velocidad de circulación del líquido (ascenso y descenso) y Ug. 11) Determinar el valor del kLa teórico considerando un valor de kL de 4X10-4 m/s cuando el diámetro Sauter medio de la burbuja sea superior a 2 mm y de 1.5 x 10-4 m/s cuando este diámetro sea de aproximadamente 1 mm. 12) Discusión. 8 Bibliografía 1). Bailey, J.E. & Ollins, D.F. 1996. Biochemical Engineering Fundamentals. McGraw Hill. pp. 610-614. 2). Bell, R.A., Robinson, C.W. & Moo-Young, M. 1985. Gas holdup and overall volumetric oxygen transfer coefficient in airlift contactors. Biotechnol. Bioeng. 27: 369-381. 3). Chisti, M.Y., Halard, B. & Moo-Young, M. 1988. Liquid circulation in airlift reactors. Chem. Eng. Science. 43(3): 451-457. Galíndez-Mayer, J. & Ruiz-Ordaz, N. 1994. Bioingeniería. Informes Técnicos 21: 92-98. 4). McManamey, W. J. & Wase, J.D.A. 1986. Relationships between the volumetric mass transfer coefficient and gas holdup in airlift fermentors. Biotechnol. Bioeng. 28:1446-1448. 5). Merchuk, J.C., Ladwa, N, Cameron, A. Bulmer, M & Pickett, A. 1994. Concentric-tube airlift reactors: Effects of geometrical design on performance. AICHE Journal 40(7): 1105-1117. 6). Berovic M. 2009. Bioreactors, en : Biotecnology Vol IV: Bioprocess Engineering-Bioprocess Analysis. Doelle H.W., Rokem J.S. & Berovic M. (eds.). UNESCO EOLSS ( Encyclopedia of Life Support Systems). 9 DETERMINACIÓN EXPERIMENTAL DEL COEFICIENTE GLOBAL DE TRANSFERENCIA DE CALOR EN UN REACTOR AGITADO MECÁNICAMENTE (RAM) Introducción La realización de un bioproceso se encuentra afectado directamente por la temperatura, ya que para que se tenga un desarrollo adecuado del biocatalizador (microorganismo, célula animal o vegetal o enzima) se requiera mantener una temperatura constante en el biorreactor. Generalmente en bioprocesos aeróbicos, en donde ocurre la trasformación del carbono del sustrato por el microorganismo (oxidación biológica) se genera calor, el cual debe removerse para mantener la temperatura constante. Si la energía liberada por la conversión del sustrato es insuficiente para mantener la temperatura constante se requiere adicionar calor. Este es el caso de los digestores anaerobios en donde generalmente se requieren altas temperaturas para el proceso (55-60º C). El equipo de transferencia de calor necesario para mantener la temperatura de un bioproceso en el intervalo deseado, se denomina comúnmente intercambiador de calor. En los biorreactores el calor puede ser adicionado o removido a la fase líquida por medio de un intercambiador de calor, el cual puede ser: Tipo chaqueta Tipo serpentín (vertical o helicoidal) La ecuación fundamental de transferencia de calor en estado de equilibrio relaciona la velocidad total de generación de calor con la velocidad de eliminación de calor a través de una superficie de transferencia: (dQ/dt) gen = (dQ/dt) elim = U A ∆Tln 10 En donde : (dQ/dt)gen es la velocidad de generación de calor en Kcal/ h (dQ/dt)elim es la velocidad de eliminación de calor en Kcal/ h ∆Tln es la diferencia de temperatura media logarítmica entre líquido de proceso y el enfriamiento (ºC) A es el área de trasferencia de calor (m2) U es el coeficiente global de trasferencia de calor en Kcal/(h ºC m2) El inverso del coeficiente global de transferencia de calor puede considerarse como una resistencia global compuesta por tres resistencias en serie: 1 𝑈 = 1 ℎ𝑖 + 𝑥𝑤 𝑘𝑤 + 1 ℎ𝑜 El primer término de la ecuación hi representa el coeficiente de película del lado del líquido de proceso, el segundo término involucra la conducción a través de la pared de la chaqueta o tubo y ℎ𝑜 se refiere al coeficiente de película del lado del líquido de enfriamiento. Por medio de un análisis dimensional se observa que estos coeficientes de película dependen de las propiedades fisicoquímicas del líquido, la forma general de correlacionar dichos coeficientes en un tanque agitado con chaqueta como intercambiador es: Nu = K Rea Pr b (w/b)c Nu= Nusselt = hDt/k, Re = Reynold = NDi 2 /b, Pr= Prandtl = Cp b /k, 11 En donde K, a, b y c =constantes h= coeficiente de película característico (cal/ s cm2 ºC) k = conductividad térmica del fluido (cal/ s cm ºC) cp = capacidad calorífica específica del fluido (cal / g ºC) Dt = diámetro del tanque (cm) Di = diámetro del impulsor (cm) = densidad del fluido (g/cm3) N = velocidad de agitación (l/s) b= viscosidad del fluido en el seno del líquido (g/cm s) w = viscosidad del fluido en la pared (g/cm s) La correlación de Shinji Nagata para un reactor agitado con tubería estándar es: ℎ𝑖 𝐷 𝐷 2𝑁 0.67 𝑐 𝜇 0.33 𝜇 𝑡 𝑝 𝑏 𝑏 = 0.51 ( 𝑡 𝑝) ( )0.14 ( ) 𝑘 𝜇𝑏 𝑘 𝜇𝑤 Dependiendo de las temperaturas de entrada del líquido de enfriamiento (Tin), de la salida (Tout), de la de proceso (Top) y de la cantidad total de calor que se requiere eliminar, se estima el valor tentativo del gasto mínimo de agua (w) requerida para transportar el calor generado por el reactor y que deberá ser transferido por el sistema de enfriamiento ya que: 𝑑𝑄 𝑑𝑄 = 𝑈𝐴∆𝑇𝑙𝑛 = 𝑤𝑐𝑝(𝑇𝑜𝑢𝑡 − 𝑇𝑖𝑛) =( ) ( ) 𝑑𝑡 𝑒𝑙𝑖𝑚 𝑑𝑡 𝑔𝑒𝑛 Por lo que w = (dQ/dt)gen/ [cp(Tout- Tin)] Este valor inicial de (w) sirve para la estimación del coeficiente ho del lado del agua de enfriamiento, el cual conjuntado con el hi permite estimar un valor inicial de U. Por otro lado al reactor biológico se le suministra y elimina calor durante el proceso de esterilización del medio de cultivo. De acuerdo a Deindoerfer y Humphey cuando la trasferencia de calor es en forma indirecta a través de un 12 intercambio de calor el perfil temperatura tiempo se rige por las siguientes ecuaciones: a). Calentamiento indirecto: suministro de vapor en el intercambiador (chaqueta o serpentín) 𝑇 = 𝑇𝐻 (1 − 𝑏 𝑒𝑎𝑡) En donde: a = UA/MCp b = (To-TH) /TH U = coeficiente global de transferencia de calor A = área de transferencia de calor. M = masa de líquido de proceso dentro del reactor To = temperatura inicial del líquido de proceso TH = Temperatura del medio de calentamiento (vapor saturado) t = tiempo Cp = capacidad calorífica del líquido de proceso b). Enfriamiento indirecto: suministro de agua por el intercambiador (chaqueta o serpentín) 𝑇 = 𝑇𝑐𝑜 (1 − 𝑏 𝑒𝑎𝑡) En donde: a= (w cp’/Mcp)[1-e-(UA/wCp’)] b = (To-Tco)/Tco To= temperatura inicial del líquido de proceso (oC) Tco= temperatura del líquido de enfriamiento Cp’= capacidad calorífica específica del líquido de enfriamiento w = gasto de agua de enfriamiento Como puede observarse si se conoce el perfil temperatura tiempo durante el proceso de esterilización (calentamiento y enfriamiento) se puede determinar la ecuación empírica que describe esta función y de esta manera estimar el coeficiente global de transferencia de calor o también se puede calcular utilizando las correlaciones correspondientes, conociendo las propiedades fisicoquímicas del líquido y las dimensiones del reactor. 13 El área de transmisión de calor no permanece indefinidamente limpia durante el funcionamiento del fermentador, sino que en ambos lados de la chaqueta se forman incrustaciones y otros depósitos que proporcionan resistencia adicional al flujo de calor, reduciendo el coeficiente global de transferencia de calor. A esta reducción en el coeficiente se conoce como el factor de ensuciamiento. Objetivo Calcular el coeficiente global de transferencia de calor de un reactor agitado mecánicamente, nivel planta piloto, mediante un perfil de temperatura en función del tiempo y las ecuaciones empíricas correspondientes. Desarrollo experimental Se utilizará un reactor tanque agitado a nivel planta piloto New Brunswick de 50L de capacidad, del cual harán las siguientes anotaciones y mediciones: Tipo de impulsor Número de impulsores Diámetro del tanque (Dt) Diámetro del impulsor (Di) Altura del líquido (HL) Separación entre impulsores Colocar en el vaso del reactor 20 litros de agua y con ayuda del montacargas colocarlo en el fermentador, iniciar la etapa de calentamiento, se activa el interruptor general del equipo y el de la agitación, abrir las válvulas necesarias del fermentador para suministrar vapor a la chaqueta, llevando a cabo un registro de la temperatura cada minuto. Anotar la presión de vapor que marca el manómetro del reactor para poder conocer en tablas la temperatura del vapor (TH). Una vez que se alcanza la temperatura de 120º C, se suspende el suministro de vapor a la chaqueta y se inicia el enfriamiento inyectando agua a la chaqueta, también se sigue el registro de la temperatura cada minuto. Cada tres minutos medir el flujo de agua a la salida de la chaqueta. 14 Informe 1.- Reportar en una tabla las características y dimensiones del reactor utilizado. 2.- Reportar en una tabla el perfil temperatura tiempo para la etapa de calentamiento y para el enfriamiento. 3.- Graficar las curvas de temperatura en función del tiempo para el calentamiento y enfriamiento. 4.- Calcular el valor de las constantes a y b de las ecuaciones empíricas de calentamiento y enfriamiento. 5.- Calcular el coeficiente global de transferencia de calor para la etapa de calentamiento y enfriamiento. 6.- Calcular el coeficiente de película hi del lado del líquido de proceso utilizando la correlación correspondiente. 7.- Investigar en la bibliografía como se calcula el coeficiente de película externo (ho) cuando el intercambiador es una chaqueta 8.- Calcular el coeficiente global de transferencia de calor U 9.- Calcular el factor de ensuciamiento Rd = 1/Uc-1/Ud 10.- Discusión y conclusiones. Bibliografía 1. Bailey E. J., D. F. Ollis 1986. Biochemical engineering fundamentals, 2ª edición. Mc. Graw Hill. New York 2. Blanch W. H., D. S. Clark. 1997. Biochemical Engineering. Marcel Dekker Inc. New York 3. Bondy F., S. Lippa. 1993. Heat transfer in agitated vessels. Chem. Enginee. 4: 62-71 4. Galíndez M. J., Ruiz O. N. 1994. Bioingeniería. Fundamentos biocinéticos para el diseño de procesos fermentativos. Informe Técnico. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas del Instituto Politécnico Nacional. 5. Kern Q. D. 1984. Procesos de transferencia de calor. Continental. México 6. McCabe L. W., J. C. Smith. 1981. Unit Operations of Chemical Engineering. Mc Graw Hill 15 REOLOGÍA DE FLUIDOS Introducción El reómetro de extrusión es un aparato relativamente sencillo de construir, que permite medir la caída de presión friccional asociada al flujo laminar de un fluido a una velocidad determinada, a través de un tubo largo, liso y de dimensiones conocidas. El reómetro utilizado en esta práctica es el descrito por Bowen y consta de las siguientes partes: a) Un cuerpo cilíndrico donde se aloja el fluido problema, aislado térmicamente con fibra de vidrio, cubierto con lámina de aluminio y tensado con abrazaderas. b) Los extremos del cilindro se cierran con un juego de bridas unidas con tornillos y selladas por medio de una junta de asbesto. En la brida ciega de la parte superior, se localizan dos orificios, uno para introducir el gas y el otro que sirve para fijar un termómetro, la brida ciega inferior presenta en el centro un dispositivo para fijar termómetros. c) Capilares: la parte principal del aparato es el tubo “capilar” ya que de este dependen los resultados. Es importante que el tubo sea recto para que la medida de la longitud sea lo más exacta posible, inclusive debe tomarse con micrómetro. El diámetro del capilar es otra constante importante, debiendo ser determinado por el método de Bowen, que consiste esencialmente en medir la longitud del tubo, llenarlo con mercurio, pesar el mercurio y determinar el diámetro exacto utilizando la fórmula del volumen del cilindro. d) Partes auxiliares: termómetros, manómetros, regulador de presión, válvula de tres vías y líneas de presión con gas nitrógeno. De estas partes es importante señalar la acción de la válvula de tres vías, que consiste en presurizar el reómetro durante el tiempo necesario para fluir el material y eliminar rápidamente la presión, cuando deja de ser necesaria 16 TEORIA DEL MÉTODO PARA OBTENER CURVAS DE FLUJO Una sustancia que fluye en un tubo cilíndrico vertical de radio constante y longitud conocida, bajo la acción de una fuerza impulsora provocada por la diferencia de presión de sus extremos y en condiciones en equilibrio, desarrolla el siguiente balance de fuerzas: a). La fuerza total que impulsa el fluido hacia abajo está dada por el producto del área transversal del tubo capilar por la diferencia de presión en los extremos del tubo: 𝐹= 𝑡 𝜋 𝐷2 ∆𝑃 …… (1) 𝑡 4 b). La fuerza que se opone al flujo es producida por el esfuerzo cortante (𝑇𝑤) que actúa sobre la superficie del capilar, por lo tanto será 𝐹𝑜 = 𝜋 𝐷 𝐿 𝑇𝑤 ….. (2) c). En condiciones de régimen continuo y flujo laminar, la resultante de las fuerzas gravitacionales es insignificante y considerando que la velocidad con que fluye el líquido es constante, la suma de las fuerzas en el tubo capilar es igual a cero, de donde tenemos la siguiente expresión que nos permite encontrar el esfuerzo cortante en función del diámetro, la longitud del tubo y la caída de presión debido a la fricción: 𝜋 𝐷2 4 ∆𝑃𝑡 = 𝜋 𝐷 𝐿 𝑇 𝑤 ….. (3) De donde: 𝑇𝑤 = 𝐷 ∆𝑃𝑡 4𝐿 ..... (4) 17 d). El gradiente de velocidad a la pared del tubo puede ser calculado por la ecuación de Rabinowitch-Mooney bajo las siguientes condiciones: d.1) El fluido debe estar en estado de flujo laminar: d.2) Las propiedades del fluido deben ser independientes del tiempo. d.3) El fluido no debe presentar características de deslizamiento en la pared d.4) Se considera que la velocidad del fluido no tiene componentes radiales o tangenciales. d.5) Se considera que el fluido es incompresible d.6) La viscosidad no debe ser afectada por la presión Ecuación de Rabinowitch-Mooney 8𝑄 8𝑄 𝑑𝑢 ( )𝑤 = 𝑓 (𝑇𝑤 ) = 3 𝜋 𝐷3 + 𝑑𝑟 𝐷 ∆𝑃4 𝑑( 𝜋 𝐷)3 𝐷 ∆𝑃 𝐿 𝑑( ) ….. (5) 4𝐿 Esta ecuación contiene términos fácilmente calculables como son (8Q/πD3) y (D∆P/4L), no así la derivada del último término que representa la pendiente de una gráfica logarítmica. Sin embargo las modificaciones hechas a la ecuación por Severs y Austin, Metzner y Reed, la simplificaron considerablemente, al sustituir la velocidad masa V=4Q/πD2 para obtener la siguiente ecuación de gran utilidad práctica: 𝑑𝑢 ( ) =[ 𝑑𝑟 𝑤 3𝑛+1 4𝑛 8𝑉 ][ ] ….. (6) 𝐷 El gradiente de velocidad du/dr se puede obtener fácilmente con el reómetro de extrusión, sin embargo, para obtener datos reales es necesario hacer algunas correcciones para evitar la introducción de errores en el cálculo. 18 Las correcciones más importantes son las siguientes: a) Corrección por presión hidrostática b) Corrección por conversión de energía de presión en energía cinética c) Corrección por efectos de extremo en el tubo capilar d) Determinación del deslizamiento efectivo próximo a la pared del tubo La corrección por presión hidrostática se hace sumando a la presión del gas, la presión que corresponde a la altura del líquido que se encuentra arriba de la salida del capilar y está dada por la ecuación: Ph = (ρ g h ) …… (7) gc La conversión de la energía de presión a energía cinética está dada por la relación siguiente y para corregir se resta ésta Ec = (M ρ V2) …… (8) gc Efectos de extremo: En la entrada y salida del capilar el ensanchamiento y la contracción brusca del fluido puede causar pérdidas de energía, pero cuando se tiene una relación de longitud a diámetro mayor de cien el efecto puede despreciarse. Deslizamiento efectivo próximo a la pared del tubo. Algunos fluidos presentan ciertas características de comportamiento que inducen a orientar las partículas del material disperso, provocando que dichas partículas se muevan a cierta distancia de la pared del tubo formando una película de medio dispersante entre estas partículas y la pared. 19 Objetivo Manejo de un reómetro de extrusión y obtención de información para reogramas de fluidos newtonianos. Desarrollo de la práctica Datos que deben registrarse: a) Caída de presión, leída en el manómetro que registra la presión de la cámara b) Tiempo en el cual fluye el material c) Peso del material d) Altura del líquido e) Densidad del material a la temperatura del experimento Trabajo experimental: 1.- Determinar la densidad del fluido a la temperatura del experimento. 2.- Obtener datos de flujo de masa, tiempo de flujo a diferentes presiones de la siguiente forma: fijar en la brida ciega inferior el tubo capilar seleccionado para la prueba y montarlo en el aparato, aplicando en los tornillos la presión necesaria para que la junta selle perfectamente y no exista fuga del material al aplicarse presión. 3.- Llenar la cámara del aparato con el líquido problema a la temperatura seleccionada. Esperar a que se estabilice la temperatura, cuidando que todos los termómetros marquen la misma temperatura, debido a que el método es aplicable a flujo isotérmico. 4.- Cerrar el recipiente con la brida ciega superior, colocar un vaso a la salida del capilar. Los vasos deben pesarse antes de la prueba. Regular la presión para obtener la primera muestra. 20 5.- Abrir la válvula de tres vías, al mismo tiempo accionar el cronómetro y mantener el flujo cuando menos el tiempo necesario para leer en el manómetro la presión real. La estabilización de la presión en general no es mayor de dos segundos, después de este tiempo, el operador puede detener el flujo cuando lo desee. 6.- Detener el flujo cerrando la válvula de tres vías al mismo tiempo que se detiene el cronómetro. 7.- Anotar la presión que indica el manómetro el tiempo y el peso del material seleccionado. 8.- Obtener una serie de datos, seleccionando diferentes presiones, repitiendo los pasos de los puntos (5, 6 y 7). Informe a) Calcular 𝑇𝑤 en dinas/cm2, según la ecuación 4, haciendo las correcciones de la caída de presión por presión hidrostática y por conversión a energía cinética b) Trazar una gráfica de 𝑇𝑤 en función de (8V/D) para determinar qué tipo de ecuación rige al fluido utilizado. Obtener el valor del índice de comportamiento n y del índice de consistencia k. c) Calcular la viscosidad efectiva (ηef) a diferentes velocidades y trazar la gráfica correspondiente en función de 8V/D, con el fin de demostrar la dependencia de la viscosidad efectiva del du/dr. Comparar los resultados obtenidos de viscosidad efectiva, con el valor teórico de la sustancia utilizada a la temperatura de trabajo. 𝜂𝑒𝑓 = 𝜏𝑤𝑔𝑐 8𝑉 𝐷 d). Calcular el número de Reynolds del fluido en el tubo capilar a las diferentes presiones de trabajo empleadas para verificar si se tiene flujo laminar, ya que el experimento es válido únicamente si se cumple esta condición. 21 𝑁𝑅𝑒 = 𝐷𝑉𝜌 𝜇𝑒 e). Mencionar la clasificación de los fluidos en base a su viscosidad f). Explicar qué equipo se emplea para determinar la viscosidad de un fluido g). Explicar concretamente de qué manera se puede determinar si un fluido es o no tiempo dependiente NOMENCLATURA (du/dr)W = Gradiente de velocidad en la pared del tubo. D = Diámetro del tubo capilar. D’= Diámetro interior del recipiente. Ft = Fuerza total. F0 = fuerza de oposición. g = Constante gravitacional (cm/s2) h = Altura del fluido. K = Índice de consistencia L = Longitud del tubo capilar. M=Constante empírica para fluidos no-newtonianos= 1.12 adimensional n = Índice de comportamiento de flujo. Pf = Diferencia de presión en los extremos del tubo. Q = Gasto volumétrico t = Tiempo T = Temperatura. V = Velocidad del fluido w = Masa ρ = Densidad del fluido ηef = Viscosidad efectiva τw = Esfuerzo de corte k’ = antilogaritmo de la ordenada al origen 22 Registro de datos obtenidos en la práctica 1. 2. 3. 4. 5. D L D´ ρ h cm cm cm g/cm3 a T cm Presión de trabajo (g/cm2) t (seg) °C w (g) T (°C) Bibliografía 1. Ghose, T.K: y Fietcher, A. 1971. “Advances in Biochemical Engineering”. Springer-Verlag, N.Y. 2. Leberon, B.R. 1961. Chem. Eng Chem. 68: 243-247 3. Severs, E.T. y Austin J.M. 1954. Ind. Eng. Chem. 46 :2369-2371 4. Skelland, A.H.D. 1967. Non newtonian flow and heat transfer. John Wiley, N.Y. 23 DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE MEZCLADO TERMINAL EN UN REACTOR AGITADO MECÁNICAMENTE (RAM) Introducción La teoría del diseño de biorreactores (o de reactores simplemente) busca describir los fenómenos de transporte y de biorreacción de una manera más simple, considerando al reactor como una unidad y suponiendo que el material en el espacio del reactor se encuentra distribuido homogéneamente con respecto a su composición química o a sus características físicas como el potencial de hidrógeno, temperatura o cantidad de movimiento. En pocas palabras, se supone la homogeneidad. Con esa suposición se diseñan, operan y controlan los bioprocesos. La práctica, sin embargo, nos señala que esa condición ideal requiere de un esfuerzo, del gasto de energía en la operación de mezclado. El mezclado es un concepto empírico y muy ligado al aspecto experimental, idealmente implicaría que todas las moléculas de un material estuvieran distribuidas en cualquier espacio en la misma proporción y con exactamente la misma cantidad de movimiento o de energía interna. ¿Cómo medir eso? La calidad del mezclado depende entonces de nuestra capacidad analítica instrumental. La teoría del mezclado distingue dos calidades de mezclado: el mezclado a nivel molecular, o micromezclado, y el mezclado de volúmenes grandes del material con el que se trabaja, o macromezclado. Las herramientas disponibles para el mezclado a nivel práctico son demasiado gruesas para actuar en el mezclado molecular, el cual se logra mediante los procesos difusivos, que si bien son lentos considerando volúmenes grandes, son rápidos, del orden de segundos, cuando las distancias están en la escala de los micrómetros. Las velocidades de circulación de fluidos en los biorreactores (del orden de 10 cm/s) con respecto a las medidas de los equipos industriales (del orden de m) nos indican que cualquier material que se añada al equipo tardará un tiempo en llegar a las partes más alejadas del reactor. En la práctica de la ingeniería entonces se concibe el tiempo de mezcla. 24 El tiempo de mezcla se define como el lapso transcurrido en el que se añade un material a un equipo agitado (completa heterogeneidad) y el momento en que esta heterogeneidad se diferencia una proporción convencional de la homogeneidad absoluta teórica. Esta proporción convencional puede ser entre el 5 ó 10% comúnmente. Para explicarse mejor se muestra la siguiente expresión, considerando la adición de una especie química fácilmente analizable (trazador) y un grado de homogeneidad del 90 %: 100*(C∞ -CL)/C∞ = 10% En la expresión, CL es la concentración medida en el líquido y C la concentración teórica, estequiométrica. El material añadido es típicamente una especie química fácilmente observable, o un material con un pH distinto al de la mezcla en el reactor, o un material con una temperatura diferente. Como se observará en la práctica, el tiempo de mezcla es una medición de fácil realización, una vez establecidos los materiales de trabajo, el equipo y sus dimensiones, las condiciones de operación y equipo de agitación. Sin embargo, para poder hacer generalizaciones que permitan predecir el tiempo de mezcla en condiciones diferentes a las establecidas para la medición, y como una práctica común en la ingeniería, se han establecidos diversas correlaciones. Empíricamente se define que el tiempo de mezcla es una función del tiempo de circulación del material en el recipiente. Así, para un reactor de tanque agitado con una sola fase líquida, con bafles e impulsor, se tiene la siguiente correlación: 𝑡𝑚 = 4 ∗ 𝑡𝑐 Donde tm, es el tiempo de mezcla y tc es el tiempo de circulación, definido como el tiempo transcurrido para que el fluido en el recipiente realice un circuito completo de flujo en su interior. Este último concepto, si bien es fácil de entender, es difícil de medir. El tiempo de mezclado en tanque agitados depende de variables como son el tamaño y tipo de impulsor, de propiedades del fluido como la viscosidad y de 25 la velocidad del impulsor. La relación entre tm y varias de estas variables ha sido determinada experimentalmente para diferentes impulsores. El producto N*tm se puede graficar como una función del número de Reynolds Re. El tm es el tiempo de mezclado calculado considerando una desviación del 10% con respecto a las condiciones finales. El producto de N*tm representa el número de rotaciones del impulsor requeridas para homogeneizar el líquido. A número de Re bajos, N*tm incrementa significativamente con la disminución del Re. Sin embargo cuando el Re se incrementa hasta aproximadamente 500o, N*tm se aproxima a un valor constante que se mantiene a valores de Re altos. Para turbinas Rushton, este valor constante de puede ser estimado usando la siguiente correlación: N*tm = 1.54 V /Di3 En la ecuación anterior, V es el volumen de operación y Di es el diámetro del agitador mecánico. Finalmente se debe anotar que las mediciones de tiempo de mezcla para líquidos agitados, difieren de las hechas para el mismo líquido agitado y aireado. Objetivos Evaluar el tiempo de mezcla en un reactor piloto en función de la velocidad de agitación Materiales y reactivos Reactor piloto de 30 L de volumen de operación Solución de NaCl 5 M NaOH 3 N H2SO4 3 N Solución de verde de bromocresol Ligas 26 Desarrollo experimental a). Determinación del tiempo de mezclado con verde de bromocresol. En el fermentador nivel planta piloto con vaso de acrílico se colocarán 30 L de agua adicionando 15 mL del trazador (verde de bromocresol), activar el interruptor general del fermentador y el de la agitación, ajustando la velocidad del impulsor a 50 rpm. Se adicionan 30 mL de una solución de ácido sulfúrico 3N hasta el vire del indicador de azul a amarillo (pH inicial = 6). Posteriormente se adicionan de manera rápida y continua 10 mL de una solución de hidróxido de sodio 3N midiendo con un cronómetro el tiempo en que tarda en cambiar el indicador de amarillo a azul. El tiempo que transcurre para lograr un color homogéneo en el reactor será el tiempo de mezcla. Repetir el proceso para las velocidades de agitación del impulsor de 100, 150,200, 250, 300 y 350 rpm. 27 HOJA DE RESULTADOS Equipo Grupo VELOCIDAD VELOCIDAD n (rpm) n (rps) 50 100 150 200 250 300 350 Fecha TIEMPO tm (s) VIRE ÁCIDO VIRE BÁSICO DATOS DEL FERMENTADOR Tipo de biorreactor Tipo de impulsor Diámetro del tanque (DT) Diámetro del impulsor (Di) Altura del líquido (HL) Ancho de los deflectores (Wb) Ancho del impulsor (Wi) Altura de la paleta del impulsor (Hi) Número de paletas del impulsor (Np) Longitud del impulsor (Li) Número de impulsores (Ni) Separación de los impulsores (L) 28 INFORME 1. Determine y tabule las proporciones geométricas del reactor usado [(DT/ Di), (HL/DT), (Wb/DT) y (Hi/Di)] Elabore la gráfica de velocidad (n) en función del tiempo de mezcla (tm). 2. 3. Con los datos de la tabla de tiempo, determine: Factor de tiempo de mezcla () Número de Reynolds Elabore la gráfica de en función del número de Reynolds 𝜃= 𝑡𝑚 (𝑛 𝐷2)2/3 𝑔1/16 𝐷1/2 𝑖 𝑖 𝐻𝐿1/2 𝐷3/2 𝑇 𝑅𝑒 = 𝑛 𝐷𝑖2 𝜌 𝜇 4. Utilizando la gráfica de Rushton, calcule el número de potencia para cada velocidad de agitación. También, para cada velocidad de agitación determine la potencia teórica y la potencia corregida (corrección por geometría y por número de impulsores). Corrección por geometría P*= fc * PT P* - potencia corregida por geometría PT - potencia teórica fc – factor de corrección 𝑓𝑐 = √ (𝐻𝐿/𝐷𝑖)(𝐷𝑇/𝐷𝑖) (𝐻𝐿/𝐷𝑖)𝑠(𝐷𝑇/𝐷𝑖)𝑠 Corrección por número de impulsores: P**= Ni * P* P**- potencia corregida por número de impulsores 29 Construya la gráfica tm y P** en función de n, diga cual tiempo y 5. velocidad considera como mejores, tomando en cuenta la densidad y viscosidad del líquido que emplea. Determine la velocidad lineal del líquido (vi) en agitación en las 6. condiciones de rps que considere como óptimas. 𝑣 𝑖 = 𝜋 𝐷𝑖 𝑛 7. Haga un escalamiento del proceso tomando como base los parámetros obtenidos en la prueba de laboratorio, considerando una similitud geométrica entre ambos reactores. El proceso se transfiere a un reactor con agitación y operando con 30 m3 de líquido, de igual densidad y viscosidad del líquido de prueba. Calcule: Tiempo de mezcla en el reactor de 30 m3 ¿En qué proporción aumenta la velocidad lineal con respecto a la obtenida en la prueba de laboratorio que se consideró como óptima? Potencia consumida por el impulsor 8. Discusión y conclusiones. Bibliografía 1. Doran, P. (1995) Bioprocess Engineering Principles. Academic Press 2. Ollis, D. F., Bailey, J. E. (1986) “Biochemical Engineering Fundamentals”. Mc Graw-Hill. 3. Hadjiev, D.; Sabiri, N. E.; Zanati, A. (2006) “Mixing time in bioreactors under aerated conditions” Biochemical Engineering Journal 27: 323330. 30 DETERMINACIÓN DEL COEFICIENTE DE TRANSFERENCIA DE OXÍGENO EN UNA COLUMNA DE BURBUJEO Introducción En muchas fermentaciones la presencia de oxígeno permite la necesaria obtención de energía para la biosíntesis de material celular, o de algún metabolito de interés humano. La ausencia de oxígeno o su deficiencia parcial obliga al microorganismo a buscar otras vías, generalmente menos eficientes para obtener la energía necesaria para su crecimiento. De ahí la importancia del suministro de oxígeno al microorganismo en una fermentación sumergida, por lo que es importante establecer las condiciones de operación del biorreactor para transferir el oxígeno necesario que demande el cultivo. El flujo masa de oxígeno se denota como Na y se encuentra regido por el área de transferencia (a), la fuerza impulsora (c) y la resistencia específica o su inversa, la conductividad específica (kL), lo anterior se expresa por la siguiente ecuación: Na = klac = kLa (c* - cL) Donde: Na = velocidad de absorción de oxígeno. kLa = coeficiente de transferencia de oxígeno. c* = concentración de oxígeno en el equilibrio. cL = concentración de oxígeno en el seno del líquido. Para que los procesos de transferencia de masa y energía se lleven a cabo de manera efectiva es necesario que en el reactor se tenga una agitación eficiente con objeto de favorecer la formación de corrientes de líquido que transfieran su cantidad de movimiento a elementos de fluido estáticos, provocando el mezclado y creando condiciones de homogeneidad en el reactor. Para mantener la homogeneidad en un reactor biológico es necesario crear una alta velocidad de recirculación de fluido y una elevada transferencia de masa. 31 La economía del proceso mejora en tanto menor es el consumo de energía para mantener la homogeneidad del cultivo. Una alternativa más económica que los reactores agitados mecánicamente la constituyen las torres de contacto gas-líquido. Dentro de ellas se incluye a la columna de burbujeo simple. Los difusores con los que operan las torres de contacto pueden ser estáticos (tubo simple o perforado y placa perforada o porosa) o dinámicos (eyector o inyector). A una baja velocidad superficial del gas el diámetro de la burbuja es relativamente homogéneo y la velocidad de ascenso de las burbujas es uniforme y prácticamente no hay coalescencia, a éste se le denomina régimen pseudohomogéneo. La velocidad superficial del gas se define como: Ug = Qg/As En donde: Ug= velocidad superficial del gas. Qg= gasto de aire. As= área seccional del fermentador (o del área aireada). Existe un buen número de correlaciones para la estimación de kLa en columnas de burbujeo, que ocupan diversas variables de diseño y operación, una de las más conocidas es la de Akita y Yoshida: kLa = [0.6 (D/Dr2) (Sc)0.5 (Bo)0.62 (Ga)0.31][Eg]1.1 , donde: D= difusividad Dr = diámetro del reactor Sc= número de Schmidt Bo= número de Bond Ga= número de Galilei Eg= coeficiente de retención del gas 32 Para el consumo de potencia en columnas de burbujeo Bello y col. propusieron la siguiente ecuación: P/V = g Hl Qg/V donde: P= potencia V= volumen del reactor g= constante gravitacional Hl= altura del líquido = densidad del líquido Conociendo el valor de la potencia se puede obtener el valor de la economía de aireación aplicando la ecuación: Ea = kLa c* V/P Para medir la velocidad de transferencia de oxígeno existen varias técnicas: polarográficas, con electrodos sensibles al oxígeno (técnicas dinámicas: abiótica y biótica) y la técnica química ideada por Cooper y col. Determinación del kla por el método dinámico (abiótico). Consiste en que el oxígeno es desplazado del medio empleando nitrógeno gaseoso, luego el suministro de gas se reemplaza por aire y se mide el oxígeno disuelto en la fase líquida en función del tiempo. La velocidad de solubilización del oxígeno está dada por la ecuación: dcL/dt = kLa (c* - cL) Separando variables: dcL/(c*-cL) = kLa (dt) 33 Integrando la ecuación cuando kLa es constante: -dcL/(c* - cL) = kLa * dt Los límites de la integración son: Concentración de oxígeno disuelto: de cLo a cL Tiempo: de 0 a t. La ecuación resultante es: ln [(c*-cL0)/(c*-cL)] = kLa (t) Cuando se traza la gráfica de ln [(c*-cL0)/(c*-cL)] en función del tiempo la pendiente de la región lineal es el valor de kLa 34 Objetivo Determinar el coeficiente volumétrico de transferencia de oxígeno de una columna de burbujeo. Desarrollo experimental Método dinámico (abiótico). Se lee directamente la concentración del oxígeno disuelto en el medio, utilizando un medidor de oxígeno disuelto, con un electrodo sensible al oxígeno, que registra la señal en la pantalla. Se inicia inyectando nitrógeno gaseoso para desplazar el oxígeno y cuando llega a un valor mínimo de oxígeno disuelto se cierra la línea del nitrógeno y se sustituye por el suministro de aire (oxígeno) a una velocidad de aireación constante, en forma simultánea se inicia el registro de lecturas del medidor de oxígeno disuelto en función del tiempo. Se repite la misma operación utilizando diferentes gastos de aire. 35 Informe 1. Tabular las concentraciones de oxígeno disuelto (cL) tomadas a diferentes tiempos, a las diferentes velocidades superficiales de aireación (Ug), correspondientes a los diferentes gastos (Qg) 2. Graficar el ln[(c*-cL0)/(c*-cL)] en función del tiempo para los diferentes gastos de aire. 3. A partir de la ecuación: ln[(c*-cL0)/(c*-cL)] = kLa ·t obtener los valores de kLa para los diferentes gastos de aire. 4. Obtener la ecuación empírica de kLa en función de la velocidad superficial del gas (Ug) kLa = b Ugn 5. Discusión y Conclusiones. Bibliografía 1. Doran, P. M. 1999. Bioprocess Engineering Principles. Academic Press. N.Y. USA. 2. Bailey, J.E., Ollis, D.F. 1989. Biochemical engineering fundamentals. McGraw Hill Book Co. USA. 3. Galíndez M.J., Ruiz O.N. 1994. Bioingeniería. Fundamentos biocinéticos para el diseño de procesos fermentativos. Informes Técnicos 21. Serie: Investigación y Desarrollo Tecnológico. IPN. México. 4. Chavarría H.N. 1991. Diseño, construcción y evaluación de una columna burbujeadora. Tesis de licenciatura. ENCB. IPN. 36 Hidrodinámica en reactores no convencionales Introducción El biorreactor es un equipo en el que se pueden realizar reacciones bioquímicas para convertir cualquier sustrato en un producto de utilidad por la acción de biocatalizadores (enzimas, células o estructuras subcelulares). Los biorreactores se emplean en la manufactura de productos comerciales como metabolitos primarios (ácido acético, acetona, alcohol, ácidos orgánicos, aminoácidos, vitaminas y polisacáridos); metabolitos secundarios (antibióticos); enzimas industriales; cultivo de células (biomasa) y tratamiento de aguas residuales (López Gómez y col., 2007). Los biorreactores convencionales y no convencionales suelen diseñarse en función de las necesidades de cada bioproceso, todos los requerimientos tienen como objetivo mantener toda una serie de condiciones críticas en el ambiente del reactor que permitan una biotransformación eficiente de la materia; particularmente, los no convencionales están adaptados para incrementar la eficiencia de los procesos de fermentación y deben ser propuestos de acuerdo al tipo de producto que se desee obtener (Rosales López, 2019). Los biorreactores horizontales son adecuados para diversos bioprocesos, como el tratamiento de aguas residuales, la producción de etanol o ácidos orgánicos (Ivancic y col., 2004). Un reactor horizontal es un tipo de reactor continuo heterogéneo donde las reacciones tienen lugar a lo largo de la distancia y el tiempo. En consecuencia, la composición de reactivos y productos varía espacialmente (Mann, 2009). El proceso aeróbico, en un reactor horizontal de biopelícula de lecho empacado que funciona en régimen de flujo pistón, podría lograrse si el oxígeno disuelto (OD) se suministra de manera eficiente al consorcio microbiano, mediante el flujo continuo de líquido que contenga una concentración suficiente de oxígeno (transporte convectivo de O2). Evidentemente, el OD se consume a lo largo de la distancia del reactor por la biomasa adherida. Si el consumo de oxígeno es excesivo, el líquido que fluye podría recargarse mediante el transporte difusivo de O2 en compartimentos aireados ubicados entre las secciones del reactor de flujo pistón. La aplicación actual del reactor horizontal de biopelícula, como el prototipo que se utilizará en esta práctica de laboratorio, es en el tratamiento de aguas residuales generadas por actividades e industrias agrícolas (Alvarado Gutiérrez y col., 2017) El flujo difusivo de oxígeno está definido por: jO2 = (DOL/ axle) (C*-CL) = kL (C*-CL) [mg cm-2 s-1] Donde: xL = espesor de la película líquida en la interfase gas-líquido. DOL = difusividad de oxígeno en la película líquida 37 En el caso del transporte convectivo a lo largo de un canal, el flujo de O2 puede definirse en su forma más simple como: jO2 = (F/A) (CL) = UL (CL) [mg cm-2 s-1]. F = flujo del agua A = área seccional hidráulica del canal CL = concentración de oxígeno disuelto UL = velocidad lineal del líquido Para evaluar las potencialidades de estos reactores para degradar contaminantes es necesario conocer el balance de los parámetros convencionales del proceso de tratamiento y establecer las características hidrodinámicas de estas instalaciones (Juárez y col.,2015). Estas condiciones garantizan un adecuado flujo de la fase líquida en el reactor, necesario para) garantizar la degradación de los contaminantes por un proceso avanzado de oxidación en el tiempo de retención determinado (Abreu-Zamora y col., 2019). Por otra parte, conocer y entender los principios básicos de la mecánica de fluidos es esencial en el análisis y diseño de cualquier sistema en el cual el fluido es el elemento de trabajo, como pueden ser: reactores, sistemas de tuberías para la conducción de reactivos y productos, canales de aguas residuales, redes de servicios auxiliares para calentamiento o enfriamiento, selección de la bomba para mover un líquido, etc. Para ello es importante conocer algunos conceptos y cálculos que nos ayuden a determinar la naturaleza del flujo en un canal, las características que lo condicionan y su relación con otros conceptos y clasificación de flujos como lo es el Número de Reynolds el Número de Froude y el Número de Mach (Jarquín, 2010). Objetivos • • • • Que el alumno evalúe la hidrodinámica de un reactor no convencional tubular segmentado que puede operar en flujo pistón. Que el alumno evalúe la concentración de oxígeno disuelto (OD) en las diferentes secciones del reactor no convencional tubular segmentado que puede operar en flujo pistón. Que el alumno calcule el radio hidráulico y el número de Reynold para canales abiertos y clasifique el flujo en función del valor obtenido. Que el alumno calcule el número de Froude y clasificar el flujo en función del valor obtenido. 38 Diseño experimental I. Hidrodinámica en estado bifásico de un reactor horizontal no convencional Montar el reactor horizontal de biopelícula y llenar con agua Fijar el flujo de alimentación del líquido y el flujo de suministro de aire. Comenzar a suministrar líquido al reactor en regimen continuo y depositar 1mL de azul de metileno en el primer compartimiento Determinar el porcentaje de azul de metileno en cada una de las secciones del reactor a los diferentes tiempos. Medir las absorbancias en cada uno de los compartimentos del reactor. Repertir este paso cada 20 minutos o hasta que el reactor se lave. Para montar el reactor horizontal de biopelícula se colocará sobre una superficie fija y se conectarán las mangueras que suministrarán aire a las tres zonas correspondientes a una bomba de aire con ayuda de un conector T o con una válvula de control de flujo de aire multicanal (Colocar pinzas en las mangueras de las zonas que no estarán aireadas y en la manguera de alimentación conectada en la entrada del reactor). Posteriormente el reactor se llenará con agua potable y se fijará el flujo de suministro de aire a 1 L/min únicamente en el primer compartimiento. (Se probará un segundo método de aireación con las tres zonas aireadas activas a un flujo de aire de 1 L/min). Se conectará la manguera del tanque de alimentación (agua) a una bomba peristáltica y se fijará la velocidad de alimentación. Una vez realizado lo anterior se conectará la manguera de suministro de medio al reactor y se comenzará a suministrar el líquido en régimen continuo. Se depositará 1mL del trazador azul de metileno en el primer compartimento aireado del reactor e inmediatamente se tomarán 5ml de muestra de todas las zonas del reactor. Se leerán las absorbancias a una longitud de onda de 580nm y se repetirá esta operación cada 20 min o hasta que haya migrado todo el azul de metileno fuera del reactor. Con las absorbancias obtenidas se elaborará un perfil del trazador representado por la respuesta superficial de la absorbancia del azul de metileno en diferentes momentos a lo largo de la distancia del reactor después de un pulso del colorante. Los datos obtenidos se ajustarán a la función que tenga el coeficiente de regresión más alto (generalmente polinómica). 39 II. Transferencia de oxígeno por convección Se conectará al reactor un recipiente que suministre agua saturada con oxígeno, mediante el burbujeo de aire en éste. Al agua del reactor horizontal se le debe eliminar el oxígeno disuelto por inyección de nitrógeno, previo al inicio de la alimentación continua del agua saturada. Inmediatamente después de iniciar la alimentación se tomarán los valores de oxígeno disuelto a lo largo del reactor. Para cada distancia se repetirá el experimento en las mismas condiciones y respetando el mismo tiempo para la toma de lecturas. En el caso del transporte convectivo a lo largo de un canal, el flujo de O2 puede definirse en su forma más simple como: jO2 = (F/A) (CL) = UL (CL) [mg cm-2 s-1]. F = flujo del agua A = área seccional hidráulica del canal CL = concentración de oxígeno disuelto UL = velocidad lineal del líquido III. Cálculo del radio hidráulico y del número de Reynold para canales abiertos Para el cálculo del radio hidráulico y del número de Reynold para canales abiertos rectangulares, se tomarán las medidas del reactor de b y y (como se muestran en la imagen) y se realizarán los cálculos correspondientes a las siguientes ecuaciones. A) Para el cálculo del radio hidráulico se utilizará la siguiente ecuación: Imagen tomada de: https://hidraulica65.webnode.com.co/paseos/ 40 B) Para calcular el número de Reynold se utilizará la siguiente ecuación Donde: V: velocidad del líquido. Dada por V= Q/A, donde Q es el flujo volumétrico del líquido y A el área seccional transversal o área hidráulica. Rh: Radio hidráulico ρ: densidad del líquido μ: viscosidad absoluta del fluido ν = ρ/μ viscosidad cinemática del fluido. Para este caso utilizaremos la del agua a 25⁰C que es de 1x10-6 m2/s IV. Número de Froude para canales Donde: V: Velocidad del líquido en el canal g aceleración gravitacional y: profundidad del flujo en el canal INFORME DE RESULTADOS Se entregará un informe por cada equipo de trabajo en donde se reportará lo siguiente: • • • • • • • Gráfica de la respuesta superficial de la absorbancia del azul de metileno en diferentes momentos a lo largo de la distancia del reactor Trazar la curva de concentración de oxígeno disuelto en función de la distancia Trazar los valores de flujo en función de la distancia y obtener una expresión empírica del comportamiento. Radio hidráulico para las diferentes secciones del reactor empleado Número de Reynold para canales abiertos (canales abiertos seccionados) y en función del número, clasificar el flujo en laminar o turbulento y su significado. Número de Froude para canales abiertos y en función del valor obtenido clasificar el flujo en crítico, subcrítico y supercrítico y su significado. Discusión de resultados con respecto a lo encontrado en referencias bibliográficas Referencias 41 Abreu-Zamora M A, Eloy González-López D E, Domínguez-Catasús J, Borroto-Portela J I, Jáuregui-Haza U J. 2019. Caracterización hidrodinámica de un reactor plano de canal abierto con un radiotrazador. Afinidad LXXVI. 587: 189-194 Alvarado Gutiérrez M L, Ruiz Ordaz N, Galíndez Mayer C, Santoyo Tepole F, Curiel Quesada E. 2017. Kinetics of carbendazim degradation in a horizontal tubular biofilm reactor. Bioprocess Biosyst Eng 40:519-528 doi: 10.1007/s00449-016-1717-3 Ivancic M, Santek B, Novak S, Horvat P, Maric V. 2004. Bioprocess kinetics in a horizontal rotating tubular bioreactor. Bioprocess Biosyst Eng 26:169–175 doi:10.1007/s00449-0030346-9 Jarquín H. 2010. Flujo de Fluidos. Paginas Web educativas de la Universidad Autónoma Metropolitana. Recuperado el 15/enero de /2022 de: http://sgpwe.izt.uam.mx/Curso/208.Flujo-deFluidos.html#:~:text=El%20flujo%20de%20fluidos%20o,el%20contorno%20que%20lo%2 0limita. Juárez A, Alvarado A, Vallejo N, Alvarado A. 2015. Estudio hidrodinámico de un reactor de lecho fluidizado en paralelo con diferentes configuraciones. Revista de energía química y física 2(2): 288-294. Mann U. 2009. Principles of chemical reactor analysis and design: new tools for industrial chemical reactor operations, 2nd edn. Wiley, USA, pp 239–285. doi:10.1002/9780470385821 Rosales López C. 2019. Los bioprocesos en la biotecnología: uso de biorreactores para la producción y el escalamiento de productos de interés comercial. Revista Tecnología en Marcha 32(9): 41-46 doi: https://doi.org/10.18845/tm.v32i9.4626 42