ESTUDIO DE VERIFICACIÓN SECUNDARIA DEL MÉTODO ANALÍTICO ELISA PARA LA PRUEBA CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM Ref. T1023 DE LA CASA COMERCIAL VIRCELL EN EL DISPOSITIVO MEDICO DS2 DE LA CASA COMERCIAL DYNEX DISPOSITIVO MÉDICO DE REFERENCIA: Dynex DSX METODOLOGIA DE REFERENCIA: EIA- Bioschile DISPOSITIVO MÉDICO A VALIDAR: DS2 Número de Serie: 4247 PRUEBA A VERIFICAR: CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM referencia. T1023 VIRCELL Fecha inicio del Estudio: 12-01-2022 Fecha Finalización el Estudio: 14-02-2022 1. INTRODUCCIÓN La enfermedad de Chagas es causada por el parásito Trypanosoma cruzi, el cual es trasmitido a animales y personas por insectos vectores triatominos, que se encuentran solamente en América (principalmente, en áreas rurales de Latinoamérica). Las personas también pueden infectarse por ingestión de alimentos crudos contaminados con heces de insectos infectados, trasmisión congénita, trasmisión sanguínea, trasplante de órganos o exposición accidental en el laboratorio. Se estima que aproximadamente de 8 a 11 millones de personas en México, América Central y Suramérica tienen la enfermedad de Chagas, la mayoría de los cuales no saben que están infectados. Si no se trata, la infección puede durar toda la vida y hasta ser mortal. Hay dos fases en la enfermedad de Chagas: la fase aguda y la fase crónica. Ambas fases pueden ser asintomáticas o ser potencialmente mortales. La fase aguda termina a las pocas semanas o meses de la infección. Usualmente es asintomática o presenta síntomas leves (fiebre, fatiga, dolor de cuerpo, dolores de cabeza, sarpullido, pérdida de apetito, diarrea y vómitos). La señal más característica de la fase aguda de la enfermedad de Chagas es el signo de Romaña, el cual se caracteriza por una hinchazón del párpado en el lado de la cara más cercano a la picadura. Los síntomas generalmente desaparecen en pocas semanas, pero la infección, si no es tratada, persiste. Raramente, niños jóvenes (<5%) o pacientes inmunocomprometidos mueren de infección/inflamación del músculo cardiaco (miocarditis) o el cerebro (meningoencefalitis). Durante la fase crónica la infección puede permanecer latente durante décadas o incluso toda la vida. En este estadio, algunas personas desarrollan complicaciones cardiacas (cardiomiopatía, insuficiencia cardiaca, paro cardiaco) arritmias e intestinales (megaesófago o megacolon). La detección de anticuerpos es el principal método para el diagnóstico del Chagas. Los ensayos más empleados han sido la hemaglutinación indirecta, inmunofluorescencia indirecta y ELISA con antígenos totales o semi-purificados de epimastigotes de T. cruzi. Las reacciones cruzadas, especialmente con sueros de pacientes de leishmaniosis, han sido el principal inconveniente de estos tests. Esto ha llevado a la búsqueda de antígenos individualizados (bien antígenos recombinantes o péptidos sintéticos) para mejorar las prestaciones de los ensayos de ELISA. En consecuencia, la Organización Panamericana de la Salud ha recomendado el uso de dos ensayos diferentes para un diagnóstico confirmatorio de Chagas. El uso de diferentes tipos de antígenos (nativos, recombinantes, sintéticos) puede ayudar a esta estrategia. Se ha recomendado el uso de un antígeno nativo, TESA (antígenos excretores-secretores de tripomastigotes), ya sea en formato ELISA o inmunoelectrotransferencia, para confirmar la enfermedad de Chagas, con buenos resultados de sensibilidad y especificidad. 2.0 FUNDAMENTO DE LA PRUEBA Método de ELISA basado en la reacción de los anticuerpos de la muestra con el antígeno unido a la superficie de poliestireno. Las inmunoglobulinas no unidas por reacción con el antígeno son eliminadas en el proceso de lavado. En un paso posterior la globulina anti-humana reacciona con el complejo antígeno-anticuerpo, y la que no se une es eliminada por los lavados; la unida reacciona con el sustrato (TMB), para dar una reacción coloreada azul, que cambia a amarillo tras la adición de la solución de parada. 3.0 USO PREVISTO Prueba inmunoenzimática indirecta para determinar anticuerpos IgG+IgM frente a antígenos excretores-secretores de Trypanosoma cruzi (TESA) en suero/plasma humano. Este producto es un análisis cualitativo y manual o automatizado, destinado para ser usado como ayuda al diagnóstico. 4.0 CARACTERÍSTICAS DEL KIT Todos los reactivos a excepción de la solución de lavado vienen listos para su uso. Las soluciones de dilución de muestras y de conjugado están coloreadas como ayuda a la realización de la técnica. No se precisa dilución previa de la muestra. Los pocillos son individuales, por lo que solo se consumen tantos pocillos como pruebas se van a realizar. 4.1. CONTENIDO DEL KIT 1. VIRCELL CHAGAS PLATE: 1 placa con 96 pocillos recubiertos con antígenos excretores-secretores de Trypanosoma cruzi (TESA). Contiene antígeno inactivado. Contiene material de origen animal. 2. VIRCELL SERUM DILUENT: 25 ml de diluyente para sueros: tampón fosfatos con estabilizante de proteínas, con Neolone y Bronidox y coloreado de azul. Listo para su uso. . Contiene material de origen animal. 3. VIRCELL IgG+IgM POSITIVE CONTROL: 500 µl de suero control positivo con Neolone y Bronidox. . Contiene material de origen animal. 4. VIRCELL IgG+IgM CUT OFF CONTROL: 500 µl de suero cut off con Neolone y Bronidox. . Contiene material de origen animal. 5. VIRCELL IgG+IgM NEGATIVE CONTROL: 500 µl de suero control negativo con Neolone y Bronidox. . Contiene material de origen animal. 6. VIRCELL IgG+IgM CONJUGATE: 15 ml de una dilución de globulina antiinmunoglobulina IgG+IgM humana conjugada con peroxidasa, con Neolone y Bronidox y coloreada de naranja. Lista para su uso. Contiene material de origen animal. 7. VIRCELL TMB SUBSTRATE SOLUTION: 15 ml de solución de sustrato: tetrametilbenzidina (TMB). Listo para su uso. 8. VIRCELL STOP REAGENT: 15 ml de solución de parada: ácido sulfúrico 0,5 M. 9. VIRCELL WASH BUFFER: 50 ml de solución de lavado (concentrado 20x): tampón fosfatos con TweenR -20 y con Proclin 300. Conservar entre 2 y 8ºC y comprobar la fecha de caducidad. • ESPECIFICIDAD La especificidad del ensayo se define como la probabilidad que tiene el ensayo de dar un resultado negativo en ausencia de la sustancia a analizar específicamente, para el ensayo de CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM referencia. T1023 VIRCELL, la especificidad es del 99 %. • SENSIBILIDAD La sensibilidad del ensayo se define como la probabilidad que tiene el ensayo de dar un resultado positivo en presencia del analítico específico, para el ensayo de CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM referencia. T1023 VIRCELL, la sensibilidad es del 98 %. 5.0 OBJETIVOS 5.1 OBJETIVO GENERAL Realizar la verificación del método ELISA para la determinación de anticuerpos IgG+IgM frente a antígenos excretores-secretores de Trypanosoma cruzi (TESA) en suero/plasma humano de la casa comercial VIRCELL, procesadas en el dispositivo Médico DS2 serie 4247 de Annar Health Technologies, con el fin de garantizar la ausencia de diferencias significativas en los resultados frente a las metodologías tomadas como referencia. 5.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS ▪ Verificar que el desempeño del método ELISA para la determinación de anticuerpos IgG+IgM frente a antígenos excretores-secretores de Trypanosoma cruzi (TESA) en suero/plasma humano de la casa comercial VIRCELL, procesadas en el dispositivo Médico DS2 serie 4247 de Annar Health Technologies, cumple con los requisitos de seguridad y calidad establecidos por los estándares definidos como meta. ▪ Determinar el grado de concordancia que hay entre la metodología toma como referencia y la metodología a validar. ▪ Verificar que no existen errores clínicamente significativos en términos de precisión y veracidad que afecten los límites de decisión clínicos. 6.0 ALCANCE Este estudio aplica para la determinación de anticuerpos IgG+IgM frente a antígenos excretores-secretores de Trypanosoma cruzi (TESA) en suero/plasma humano de la casa comercial VIRCELL, procesadas en el dispositivo Médico DS2 serie 4247 de Annar Health Technologies. 7.0 • • 8.0 DOCUMENTOS RELACIONADOS: Inserto de la prueba REF T1023 Chagas TESA ELISA IgG+IgM Vircell. Certificado de análisis REF T1023 Chagas TESA ELISA IgG+IgM lote 21ETESAT101 Vircell. MATERIALES Y MÉTODOS 8.1. Tipo de Muestra: En el estudio se emplearon 40 muestras de suero humano previamente valoradas por los dispositivos médicos o metodologías tomadas como referencia. Se verificaron las condiciones de almacenamiento, temperatura, tiempo, transporte y embalaje, garantizando la integridad y estabilidad de los especímenes muestreados. 8.2 Reactivos, Controles y Calibradores: KIT REF.T1023 Chagas TESA ELISA IgG+IgM LOTE 21ETESAT101 VENCE 10/22 8.3 CALCULO DE RESULTADOS Para realizar el cálculo de los resultados se debe establecer la media de las DO del suero cut off. La fórmula que se emplea para calcular el índice de anticuerpos es: Índice de anticuerpos= (DO de la muestra/media de DO del suero cut off) x 10 La interpretación de los resultados de las muestras es la siguiente: Las muestras con resultados dudosos deben ser vueltas a analizar y/o solicitar una nueva muestra para confirmación de los resultados. Las muestras con índices inferiores a 9 se considera que no tienen anticuerpos de la especificidad y clase determinados mediante este kit. Las muestras con índices superiores a 11 se considera que tienen anticuerpos de la especificidad y clase determinados mediante este kit. 9.0 METODOS Para realizar la validación del método inmunoenzimático EIA, se efectuaron las siguientes estimaciones: EVALUACIÓN DE LA PRECISIÓN 9.1.1. Test de Repetibilidad Se efectúan los análisis en las mismas condiciones analíticas de medición, mismo reactivo, mismo evento de calibración, mismo analizador y de medio ambiente por el mismo operador en un periodo corto de tiempo. Se realizaron 10 réplicas de una muestra positiva y negativa valoradas previamente por la metodología de referencia, el mismo día, para la determinación de anticuerpos IgG+IgM frente a antígenos excretoressecretores de Trypanosoma cruzi (TESA) en suero humano, manteniendo las condiciones de conservación y estabilidad del material de control especificadas por el fabricante. 9.1.2 Test de precisión intermedia Se efectúan los análisis en diferentes condiciones analíticas de medición, diferentes eventos de calibración, mismo analizador y de medio ambiente, se procesa durante 5 días el control de calidad interno de la prueba Chagas TESA ELISA IgG+IgM de la casa comercial Vircell. 9.1.3 Comparación de métodos Se realizó la comparación de métodos usando 40 muestras de suero humano para la prueba Chagas TESA ELISA IgG+IgM de Vircell, que fueron procesados por la metodología ensayo Inmunoabsorbente Ligado a Enzima (EIA) en el dispositivo médico de referencia frente a la misma metodología en el equipo a validar DS2 serie 4247 de Annar Health Technologies, durante varios días, con el fin de evidenciar la concordancia obtenida en el proceso de medición. 10.0 HERRAMIENTAS ESTADÍSTICAS COMPARACION DE METODOS 10.1 EVALUACION DE LA EXACTITUD Concordancia: La concordancia tiene como objetivo estimar hasta qué punto dos observadores coinciden en su medición. Su importancia en el Área de la Salud reside en que existen diferentes maneras de valorar los fenómenos Biológicos por medio de Dispositivos médicos, la concordancia adquiere importancia cuando se desea conocer si un método o dispositivo nuevo diferente al habitual, obtiene resultados equivalentes. La concordancia no evalúa la validez o la certeza sobre una u otra observación, sino cuan acordes están entre sí, acá se evalúa la consistencia entre los dos métodos o instrumentos, si se evalúa frente a un Gold Estándar se estima la conformidad del método respecto al patrón de referencia que también se denomina Validez o desempeño operativo de una prueba diagnóstica. Índice Kappa: El coeficiente kappa fue propuesto originalmente por Cohen (1960) para el caso de dos evaluadores o dos métodos, por lo que a menudo se le conoce como kappa de Cohen, Landis y Koch propusieron unos márgenes para valorar el grado de acuerdo en función del índice kappa: Se calcula la diferencia entre la proporción de acuerdo observado y la proporción de acuerdo esperado por azar; si ésta es igual a cero, entonces el grado de acuerdo que se ha observado puede atribuirse enteramente al azar; si la diferencia es positiva, ello indica que el grado de acuerdo es mayor que el que cabría esperar si solo estuviera operando el azar y viceversa: en el caso (ciertamente improbable) en que la diferencia fuera negativa entonces los datos estarían exhibiendo menos acuerdo que el que se espera solo por concepto de azar. Kappa es el cociente entre esa cantidad y el acuerdo máximo que se puede esperar sin intervención del azar. Este índice cumple las características definen que debe tener una medida de concordancia. 11.0 RESULTADOS Y ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS Esta comparación se realiza utilizando como plataforma analítica de comparación el dispositivo medico DS2 de la casa comercial Dynex Technologies, del cual se confía plenamente en sus resultados al ser una plataforma previamente verificada y actualmente presenta adecuado desempeño en sus controles de calidad internos y externos garantizando la veracidad de los resultados. 11.1 EVALUACION DE LA IMPRECISION 11.1.1 Test de repetibilidad. intra-ensayo Verificación de la precisión RESULTADOS OBTENIDOS Chagas TESA ELISA IgG+IgM Ref. T1023 Datos del LaboratoriO CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM VIRCELL lote 21ETESAT101 muestra positiva 12-ene.-22 19,668 20,486 19,917 19,895 19,907 19,660 19,789 19,599 19,721 20,230 Media DS %CV RESULTADOS OBTENIDOS n CV% ACEPTABLE Manufactura CUMPLIMIENTO Datos del Laboratorio 19,89 0,278 1,40 10 5,3 CUMPLE CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM VIRCELL lote muestra negativa 21ETESAT101 12-ene.-22 Media DS %CV n CV% ACEPTABLE manufactura CUMPLIMIENTO 1,723 1,649 1,59 1,649 1,677 1,672 1,697 1,662 1,681 1,649 1,66 0,035 2,12 10 3,5 CUMPLE Los coeficientes de variación obtenidos bajo condiciones de repetibilidad para la determinación del Inmunoensayo T1023 Chagas TESA ELISA IgG+IgM en muestras positivas y negativas de suero, procesados en el dispositivo Médico DS2 serie 4247 en Annar Health Technologies, cumplen con los criterios de aceptabilidad definidos por la meta de calidad de Manufactura, garantizando la confiabilidad de los resultados en términos de precisión. RESULTADOS OBTENIDOS 11.1.1 11.1.2 Test de precisión intermedia: Verificación de la precisión inter-ensayo CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM VIRCELL lote 21ETESAT101 Vircell IgG+IgM Positive control LOTE 21ETESAT001 OD>0,90 14-ene.-22 17-ene.-22 17-ene.-22 17-ene.-22 18-ene.-22 18-ene.-22 18-ene.-22 19-ene.-22 19-ene.-22 2,394 2,195 2,546 2,671 2,673 2,409 2,409 2,364 2,360 2,676 Annar Health Technologies DS2 4247 19-ene.-22 Media DS %CV n Manufactura 9,8CV% ERROR TOTAL CV% ACEPTABLE CUMPLIMIENTO 2,470 0,164 6,640 10 10 9,8 CUMPLE Los coeficientes variación obtenidos para el control positivo, procesados en el dispositivo Médico DS2 serie 4247 en Annar Health Technologies, bajo condiciones de precisión intermedia para la prueba T1023 Chagas TESA ELISA IgG+IgM cumplen con los criterios de aceptabilidad definidos por la especificación de calidad de Manufactura, garantizando la confiabilidad de los resultados en términos de precisión. RESULTADOS OBTENIDOS CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM VIRCELL lote 21ETESAT101 14-ene.-22 17-ene.-22 17-ene.-22 17-ene.-22 18-ene.-22 18-ene.-22 18-ene.-22 19-ene.-22 19-ene.-22 Annar Health Technologies DS2 4247 19-ene.-22 Media DS %CV n Vircell IgG+IgM negative control LOTE 21ETESAT051 OD<0,50 0,068 0,061 0,077 0,063 0,066 0,058 0,066 0,074 0,079 0,077 0,069 0,007 10,741 10 CLSI <15CV% ERROR TOTAL CV% ACEPTABLE 10 15,0 CUMPLIMIENTO CUMPLE Dadas las concentraciones tan bajas del control negativo, que están en el orden de 0,0 la variación de los datos es mayor, aun así los coeficientes variación obtenidos para el control negativo, procesados en el dispositivo Médico DS2 serie 4247 en Annar Health Technologies, bajo condiciones de precisión intermedia para la prueba T1023 Chagas TESA ELISA IgG+IgM cumplen con los criterios de aceptabilidad definidos por la guía CLSI EP12-A2 User protocol for evaluation of qualitative test performance, garantizando la confiabilidad de los resultados en términos de precisión. 12.0 EVALUACION DE LA VERACIDAD 12.1 Comparación de Métodos Se realizó la comparación con 40 muestras de suero humano para la verificación del método ELISA para la determinación de anticuerpos IgG+IgM frente a antígenos excretores-secretores de Trypanosoma cruzi (TESA) en el dispositivo DS2 de Annar Health Technologies frente a la metodología tomada como referencia : ELISA CHAGAS III Bioschile procesadas en el dispositivo DSX, con el fin de evidenciar la presencia de errores sistemáticos y la veracidad en el proceso de medición. COMPARACIÓN DE MÉTODOS PRUEBA CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM DISPOSITIVO MÉDICO DSX DISPOSITIVO MÉDICO : A VERIFICAR DS2 Número de Muestra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Referencia ELISA CHAGAS III BIOSCHILE CAFAM Identificación de la Muestra A Verificar CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM VIRCELL Concordante 1121410056 1121602074 1121402413 1121515035 1121405054 1112940023 1121508039 1121414084 1121405068 1121508064 1121415077 1121502221 1121508147 1121508077 1121414078 1121409070 1121408083 2128 1121402057 1121508220 Valor Cuantitativo 2.98 2,409 2,148 2,229 1,331 23,810 2,679 2,427 2,497 1,613 1,731 1,186 2,450 2,020 3,965 1,903 2,391 21,280 1,899 2,683 Interpretación Valor Cuantitativo Interpretación NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO 1,785 2,443 1,612 6,446 1,427 25,834 2,230 2,643 3,450 1,914 2,065 1,514 2,293 2,065 2,108 2,318 1,998 26,040 1,497 3,689 NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI VALORES DE REFERENCIA O PUNTO DE CORTE DE LAS PRUEBAS: ELISA CHAGAS III BIOSCHILE Positivo Indice >11.0 Indeterminado de 9.0 -11.0 y Negativo < 9.0. CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM VIRCELL Indice Positivo Indice >11.0 Indeterminado de 9.0 -11.0 y Negativo < 9.0. Porcentaje de Concordancia Número de Muestras Analizadas Número de Muestras Concordantes Número de Muestra Inconcordantes Porcentaje de Concordancia (%) Criterio de Aceptabilidad Criterio de Cumplimiento 20 20 0 100 80% - 100% CUMPLE ANÁLISIS DE CONCORDANCIA ENTRE LOS MÉTODOS / ELISA CHAGAS III BIOSCHILE vs CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM VIRCELL DS2 SERIE 4247 Positivo Negativo TOTAL Positivo DSX Negativo TOTAL 2 0 2 0 18 18 2 18 20 ÍNDICE KAPPA Probabilidad Observada Po 1,00 Probabilidad Esperada Pe 0,82 Índice Kappa Grado de Concordancia K 1,000 MUY BUENO Índice Kappa < 0,0 Grado de Concordancia Sin Acuerdo 0,0 - 0,20 Insignificante 0,21 - 0,40 0,41 - 0,60 0,61 - 0,80 0,81 – 1,0 Bajo Moderado Bueno Muy Bueno COMPARACIÓN DE MÉTODOS PRUEBA CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM DISPOSITIVO MÉDICO DSX DISPOSITIVO MÉDICO : A VERIFICAR DS2 Referencia ELISA CHAGAS III BIOSCHILE COLCAN Número de Identificación de la Muestra Muestra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 A Verificar CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM Concordante Valor Cuantitativo Interpretación Valor Cuantitativo Interpretación 3,000 0,100 0,200 0,100 3,600 0,340 0,312 0,454 0,236 0,190 2,000 0,218 0,15 3,100 0,20 0,20 0,20 2,200 0,50 2,40 POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO POSITIVO 22,641 2,152 5,587 1,396 27,631 2,716 4,379 1,720 1,692 1,935 14,376 2,011 2,108 28,920 1,923 1,546 2,909 20,735 2,508 23,592 POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO POSITIVO 123100717 123100583 123100573 123100280 10800898 1120803 10900627 10900588 10900571 10800981 10500902 10800178 10500926 123100718 10100184 10200331 10300085 122900768 123100668 122800603 SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI SI VALORES DE REFERENCIA O PUNTO DE CORTE DE LAS PRUEBAS: ELISA CHAGAS III BIOSCHILE Positivo Indice >1,1 Indeterminado de 0,9 -1,1 y Negativo <0,9 CHAGAS TESA ELISA IgG+IgM VIRCELL Indice Positivo Indice >11.0 Indeterminado de 9.0 -11.0 y Negativo < 9.0. Porcentaje de Concordancia Número de Muestras Analizadas 20 Número de Muestras Concordantes 20 Número de Muestra Inconcordantes 0 Porcentaje de Concordancia (%) 100 Criterio de Aceptabilidad 80% - 100% Criterio de Cumplimiento ANÁLISIS DE CONCORDANCIA ENTRE LOS MÉTODOS / CHAGAS ELISA BIOSCHILE COLCAN vs CHAGAS TESA VIRCELL DS2 Positivo Negativo Positivo 6 0 DSX Negativo 0 14 TOTAL 6 14 Índice Kappa < 0,0 Grado de Concordancia Sin Acuerdo 20 0,0 - 0,20 Insignificante 1,00 0,21 - 0,40 0,41 - 0,60 0,61 - 0,80 0,81 – 1,0 Bajo Moderado Bueno Muy Bueno TOTAL 6 14 ÍNDICE KAPPA Probabilidad Observada Po Probabilidad Esperada Pe 0,58 Índice Kappa Grado de Concordancia K 1,000 MUY BUENO CUMPLE En los resultados obtenidos se observa un 100% de concordancia y un índice Kappa de 1,0 muy bueno, por la metodología EIA para la determinación de anticuerpos IgG+IgM frente a antígenos excretores-secretores de Trypanosoma cruzi (TESA) de Vircell en suero, procesadas en el dispositivo DS2 serie 4247 de Annar Health Technologies, frente a la metodología tomada como referencia; garantizando la alta asociación y correlación entre los resultados, sin que se afecte la decisión clínica de los pacientes. Se analizaron 4o muestras para el ejercicio de comparación, de las cuales 8 muestras fueron valoradas como positivas lo que equivale al 20% y 32 muestras valoradas como negativas lo que equivale al 80% del total de muestras analizadas. Se realizaron 2 tablas de comparación debido a que se emplearon muestras de 2 laboratorios y los valores de interpretación de los resultados para cada laboratorio son diferentes. 13. CONCLUSIONES • En el presente estudio se evidenció que no existen errores clínicos ni estadísticamente significativos en términos de precisión y exactitud en los resultados emitidos para la metodología ELISA para la determinación de anticuerpos IgG+IgM frente a antígenos excretores-secretores de Trypanosoma cruzi (TESA) de Vircell Ref. T1023 en suero, procesadas en el dispositivo DS2 serie 4247 de Annar Health Technologies frente a los resultados emitidos por la metodología tomada como referencia. • Por medio de esta verificación secundaria, se infiere que el nuevo método Inmunoenzimático EIA para la determinación de anticuerpos IgG+IgM frente a antígenos excretores-secretores de Trypanosoma cruzi (TESA) de Vircell Ref. T1023 en suero, procesadas en el dispositivo DS2 serie 4247 de Annar Health Technologies cumplen con las especificaciones de desempeño establecidas, para el reporte de resultados de las muestras sin que se afecte la decisión clínica de los pacientes. • La prueba Chagas TESA ELISA IgG+IgM de Vircell tiene un excelente rendimiento en las plataformas Automatizadas, permitiendo optimizar el gasto de reactivo y organización de la mesa de trabajo, además de presentar una gran estabilidad de cada uno de los componentes del kit. • Con el presente estudio se demuestra que la prueba Chagas TESA ELISA IgG+IgM de Vircell, tiene un excelente desempeño como prueba de Antígenos nativos, la cual está incluida dentro del algoritmo de diagnóstico de la enfermedad de Chagas establecido por la OMS y la OPS. 14. BIBLIOGRAFÍA • Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline—Second Edition. CLSI document EP9-A2 (ISBN 1-56238-472-4). 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