CROMATOGRAFÍA MATERIA: TÉCNICAS ANALÍTICAS DOCTOR: OSCAR GONZÁLEZ RÍOS ALUMNA: PAULINA ISABEL CORDOBA GRAJALES CROMATOGRAFÍA La cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas cuyo objetivo es separar los distintos componentes, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia; en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. La cromatografía cumple dos funciones básicas que se complementan • Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros y usarlos posteriormente. • Medir la proporción de los componentes de la mezclas. FASES DE LA CROMATOGRAFÍA Fase estática o estacionaria Fase móvil Secuencia Orden de Elución de Compuestos Hidrocarburos Saturados Hidrocarburos Aromáticos Derivados Halogenados Éteres Actividad de Adsorbentes Celulosa Fuerza de Elución de Disolventes Eter de petróleo Ciclohexano Benceno Tetracloruro de Carbono Cetonas Aldehídos Esteres Alcoholes Aminas Ácidos Sulfato Cálcico (Yeso) Sílice Florisil Oxido de magnesio Alúmina Carbón Activo Diclorometano Cloroformo Acetato de etilo Acetona Etanol Agua Acido acético CROMATOGRAFO • Es el equipo que permite una separación sofisticada en la cromatografía, puede haber de gases o líquidos. ANALISIS EN EL CROMATOGRAFO Identificación Cuantitativa Identificación Cualitativa PARTES DEL CROMATOGRAFO 1. Gas de arrastre o acarreador 2. Puerto de inyección 3. Una columna 4. Un detector 5. Un registrador 6. Cromatograma Cumple básicamente 2 propósitos 1. GAS PORTADOR • Transportar los componentes de la muestra. • Crear una matriz adecuada para el detector. Debe reunir las siguientes condiciones: • Debe ser inerte para evitar interacciones. • Debe ser capaz de minimizar la difusión gaseosa. • Debe ser fácilmente disponible y puro. • Debe ser económico. • Debe ser adecuado al detector que se esta por utilizar en un cromatrografo. La inyección de la muestra es un apartado critico, ya que se debe inyectar una cantidad adecuada, y debe introducirse de tal forma como un tapón de vapor que sea rápida para evitar el ensanchamiento de la sobandas de salida. El método mas empleado es una micro jeringa (con capacidad de varios micro litros) para introducir el analito en una cámara de vaporización instantánea . Es la parte en la cual el analito es arrastrado por el gas portador para poder así ser separado. Se emplean 2 tipos de columnas: las empaquetadas o de relleno y las tubulares abiertas o capilares. La longitud de estas columnas es variable, de 2 hasta 60 metros, y están constituidas por acero inoxidable, vidrio, sílice fundida o teflón. 4. DETECTORES Es la parte del cromatografo que se encarga de determinar cuando ha salido el analito por el final de la columna. Existen diversos tipos de detectores, los cuales son : • • • • Detector de ionización de llama Detector termoiónico Detector de captura de electrones Detector de emisión atómica 5. REGISTRADOR Y CRONOGRAMA • Esta es la parte final de un cromatografo y es el resultado grafico de la cromatografía. • En el caso de la separación optima de la mezcla, los diferentes picos o manchas en el cromatograma se corresponden a los diversos componentes de la mezcla que a sido separada. Técnicas cromatográficas Se pueden dividir según como este dispuesta la fase estacionaria Columna cromatográfica Con relleno poroso Entrada de fase móvil • Cromatografía Plana • Cromatografía en columna Señal Detector Cromatografía en Papel Cromatografía de Capa Fina TIPOS DE CROMATOGRAFÍA Cromatografía de Exclusión Cromatografía de Gases Cromatografía en Columna Cromatografía Liquida Cromatografía de Fluidos Supercríticos CROMATOGRAFÍA DE PAPEL Es muy utilizado para análisis cualitativos en el laboratorio ya que no requiere ningún tipo de equipamiento, su fase estacionaria es constituida por una tira de papel filtro. Factores que influyen para una cromatografía eficaz: • Elección del disolvente • Elección del papel filtro CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA • Está basada, en la preparación de una capa uniforme de un absorbente contenido sobre una placa la cual puede ser de aluminio, vidrio, u otro soporte. CROMATOGRAFÍA LIQUIDA Su fase estacionaria puede ser alúmina, sílice, o resina de intercambio iónico. No debe confundirse con la técnica cualitativa y cuantitativa de análisis. Permite separar físicamente los distintos componentes de una solución por absorción selectiva de los constituyentes de una muestra. CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA la cromatografía en columna es un método cromatográfico usado para aislar un único compuesto químico de una mezcla. CROMATOGRAFÍA DE GASES • • Cromatografía gas-sólido (GSC) Cromatografía gas-líquido (GLC), Técnica cromatográfica en la que la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de un mechero de una columna cromatográfica. La elución se produce por el flujo de una fase móvil de gas inerte. su única función es la de transportar el analito a través de la columna. CROMATOGRAFÍA DE EXCLUSIÓN procesos de separación de biomoléculas de acuerdo a su tamaño cuando una solución fluye a través de una cama empacada con un medio poroso CROMATOGRAFÍA DE FLUIDOS SUPER CRITICOS Emplea fluidos supercríticos como fase móvil. Un fluido supercrítico se forma cuando una sustancia se encuentra por encima de su presión y temperatura críticas (punto crítico). CONCLUSIÓN En la actualidad la cromatografía es una técnica ampliamente utilizada en la resolución de macromoléculas de interés en la industria, biotecnológica, biológica y bioquímica. Bibliografía https://cienciadelux.com/2015/08/17/cromatografia-de-fluidos-supercriticos/ https://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_de_gases https://www.cromtek.cl/cromatografia-gaseosagc/#:~:text=La%20cromatograf%C3%ADa%20de%20gases%20es,fase%20m%C3%B3vil%20de% 20gas%20inerte. https://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_en_columna#:~:text=El%20objetivo%20f inal%20de%20la,que%20nos%20proporciona%20la%20columna. https://dequimica.com/teoria/cromatografia#:~:text=Cromatograf%C3%ADa%20es%20el%20 m%C3%A9todo%20f%C3%ADsico,m%C3%B3vil%20que%20atraviesa%20la%20columna. https://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia/capafina#:~:text=La%20cromatograf%C3%ADa%20en%20capa%20fina,de%20vidrio%20u%20otro% 20soporte.
