Orchidaceae Epidendrum radicans Protocolo de Desinfección Medio Resultados Fuentes Se lava la cápsula cepillándola con jabón y enjuagándola al chorro de agua corriente, posteriormente se colocó dentro de un vaso de precipitados con una solución de hipoclorito de sodio al 0.5% de cloro disponible y adicionado con una gota de jabón líquido, colocándolo dentro la campana de flujo laminar. Se mantuvo en agitación constante durante 10 minutos, posteriormente se decantó la solución de cloro y se realizaron tres enjuagues con agua destilada estéril para eliminar los restos de la solución; a continuación se sumergió en etanol al 70% y con ayuda de una pinza se retiró y se incendió hasta que se consumió el alcohol, posteriormente, se colocó sobre una caja Petri estéril para realizar un corte longitudinal con ayuda de un bisturí previamente esterilizado, quedando dos secciones de la cápsula con las semillas expuestas. Medio Ms (en el experimento se usan otros medios). Se adiciono Carbonactivado y Peptona como sustituyentes orgánicos. Ca y P fueron adicionados con 2 gL-1. Todos los medios de cultivo fueron semisólidos, se utilizó agar gel como agente gelificante (5gL-1). El pH se ajustó a 5.7 y fueron esterilizados en autoclave. El mayor porcentaje de geminación se https://www.zaragoza.una m.mx/wpcontent/Portal2015/Licenci aturas/biologia/tesis/tesis_ rodriguez_farfan.pdf Para la desinfección de semillas de cápsulas Medio Ms E. secundum y E.ibaguense. maduras, las semillas se depositaron en tubo de centrífugo estéril de 50 ml, luego se agregaron 20 ml de alcohol antiséptico al 70%, se agitó suavemente durante 5 segundos, posteriormente se lavaron con agua destilada estéril, a continuación se colocó hipoclorito 20 ml y una gota de Tween 20, se agitó suavemente por 5 minutos. Para finalizar se realizó tres lavados con agua destilada estéril y con una microespátula se colocaron en los medios de cultivo. obtuvo en el tratamiento T6 con el medio de cultivo Mitra, adicionado con carbón activado y peptona, donde las semillas alcanzaron el 87% de germinación; mientras que, el menor porcentaje obtenido fue en el tratamiento T10 que corresponde al medio nutritivo con el fertilizante orgánico comercial con Humus, donde alcanzaron 38% de germinación. A los 15 días después de la siembra (DDS) se observó que los embriones de E. secundum solo un promedio del 9% de semillas comenzaban a hidratarse, mientras que para E. ibaguense el 100% de las semillas habían tomado un color verde. Para los 30 días las semillas mostraron el siguiente paso del desarrollo en el cual aumenta el embrión, pero en el día 51 de observación en esta especie se logró un 99% de semillas germinadas, para E. secundum la germinación fue más, con un promedio de 55% de éxito en la germinación. https://repository.unimilita r.edu.co/bitstream/handle /10654/35949/DelgadoCas troDianaPaola2019.pdf?isA llowed=y&sequence=1 Se empleó el medio de cultivo MS En las fases de crecimiento de hojas y de https://www.redalyc.org/pdf No especifica Prosthechea citrina (Murashige y Skoog, 1962) suplementado con 30 g l-1 de sacarosa, 2 g l-1 de Phytagel, el pH se ajustó a 5.70 ± 0.01. Se utilizaron los reguladores de crecimiento vegetal 6-bencil-aminopurina (BAP) y ácido naftalenacético (ANA), resultando la combinación BAP/ANA en concentraciones de 1.0–0.1 a 3.0-0.3 mg l-1 para organogénesis y para enraizamiento la combinación ANA/BAP, en concentraciones de 1.0–0.1 a 3.0- 0.3 mg l-1. Se utilizaron frascos tipo Gerber® de 100 (ml) a los cuales se agregaron 20 ml del medio de cultivo. Estos se esterilizaron a 120 °C, 15 psi por 20 min. enraizamiento la combinación ANA3.0/BAP 0.3 mg l-1 fue la que mostró el mayor desarrollo de hojas y raíces nuevas, ya que hubo incrementos en los parámetros de evaluación en el tamaño de hojas con una longitud máxima de 20.6 mm y raíces de 38.37 mm. Las plantas aclimatadas con el sustrato S3 (corteza de encino + tezontle + carbón en relación 1:1:1) fueron las que mostraron mayor supervivencia con 85% durante 30 días. /674/67446178003.pdf Para realizar la siembra en medios de cultivos, El medio de cultivo basal fue el MS Se consiguió el cultivo in vitro por semillas de https://www.researchgate.n se desarrolló la asepsia superficial de las cápsulas bajo un procedimiento ya establecido (Ávila y Salgado-Garciglia, 2000), que consistió en colocarlas en una solución de detergente neutro (Hyclin® 15%, 15 min), enjuague con agua corriente, ponerlas en etanol 70% por 2 min, posteriormente en agua oxigenada 3% por 1 min y por último en hipoclorito de sodio comercial 1.2% por 20 min. En área estéril se enjuagaron tres veces con agua destilada estéril y fueron seccionadas con un corte transversal y otro longitudinal, separando las semillas con una espátula y cultivándolas sobre el medio nutritivo. (Murashige y Skoog, 1962) con 30 g litro1 de sacarosa, 7 g litro-1 de agar, con un pH 5.75. Para optimizar la germinación, regeneración, desarrollo de plántulas y lograr la conservación de plántulas, se adicionaron reguladores de crecimiento (ácido naftalenacético, ANA; benciladenina, BA; ácido giberélico, GA3; y ácido abscísico, ABA) en diferentes dosis según la planta y el tipo de respuesta in vitro. Los cultivos fueron mantenidos en cuarto de incubación con condiciones controladas de luz (16 h fotoperíodo, 2000 lux) y temperatura (25°C). todas las orquídeas en estudio. En general se ha obtenido un 100% de germinación utilizando el medio completo MS, con o sin reguladores de crecimiento, al cultivarlas en condiciones de luz. Se ha observado que al adicionar BA en una dosis relativamente baja (0.05 mg litro1 ), el proceso de germinación en general se acelera y es homogénea, no importando si se incuban en la oscuridad o en la luz. et/publication/233799527_P ropagacion_y_mantenimient o_in_vitro_de_orquideas_m exicanas_para_colaborar_en _su_conservacion