OBJETIVOS 1.- Conocer las partes que componen un microscopio de Campo claro. 2.- Aprender la función de cada una de dichas partes. 3.- Ser capaz de realizar el enfoque de muestras biológicas en el microscopio con habilidad y rapidez. 4.- Observar y reconocer algunos tipos celulares a través del microscopio. INTRODUCCIÓN Debido a que las células son complejas y pequeñas, resulta difícil observar su estructura y descubrir su composición molecular, pero todavía resulta más difícil dilucidar cómo funcionan sus componentes. Lo que podemos aprender sobre las células depende de las herramientas que tengamos a nuestra disposición; de hecho, los mayores avances de la ciencia son frecuentemente fruto de la introducción de nuevas técnicas de estudio. Una célula animal mide entre 19 y 20 m de diámetro, es decir unas cinco veces menos que la partícula más pequeña visible a simple vista. Por ello, hasta que no se dispuso de buenos microscopios ópticos, a principios del siglo XIX, se descubrió que todos los tejidos vegetales y animales son agregados de células. Este descubrimiento, propuesto por Schleiden y Schwann en 1938 como la teoría celular, marca el nacimiento formal de la biología celular. ACTIVIDADES PRELABORATORIO Actividad 1. Investiga los descubrimientos realizados que permitieron desarrollar la microscopía óptica Aportación a la microscopía Año 1611 Científico Kepler 1655 Hooke 1674 Leeuwenhoek 1833 Brown 1838 Schleiden y Schann 1882 Koch 1886 Zeiss 1932 Zernicke 1 Actividad 2. Anota sobre el esquema al menos 10 partes del microscopio que se señalan. 2 Actividad 3. 1. ¿Qué parte del microscopio se muestra en la siguiente imagen? _____________________ 2. ¿Qué significan cada uno de los números señalados y porqué son importantes? Actividad 4. Investiga: 1. ¿Qué tipo de lentes son los objetivos y oculares del microscopio? 2. ¿Porqué al objetivo de 100X se le llama objetivo de inmersión? 3. ¿Cuál es el aumento de los oculares? 4. ¿Cómo se llama la pieza mecánica que permite cambiar el objetivo en el microscopio? 5. La luz blanca que se utiliza en los microscopios de luz ¿Qué longitud de onda tiene? MATERIALES Y MÉTODOS Microscopio de campo claro Laminillas permanentes Aceite de inmersión PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL 1. RECONOCIENDO LAS PARTES DEL MICROSCOPIO Y SU FUNCIÓN: a) El profesor remarcará la importancia que tiene el conocimiento y manejo del microscopio en el campo profesional del Químico Farmacobiólogo e Ingeniero en Bioprocesos. b) Con la supervisión del profesor, los alumnos realizarán un ejercicio sobre el microscopio señalando y discutiendo la función e importancia de las partes que componen un microscopio en base a Figura de la Actividad 2. PARTE DEL MICROSCOPIO 1. FUNCIÓN 2. 3. 4. 5. 6. 7. 3 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 2. APRENDIENDO A MANEJAR EL MICROSCOPIO Y EL ENFOQUE a) Selecciona una de las laminillas permanentes e intenta observar al microscopio siguiendo en orden cada uno de los pasos que se sugieren a continuación. No importa en este momento que centres tu atención en el contenido de la laminilla, lo más importante es que te vayas familiarizando con el manejo del microscopio y el enfoque adecuado de las muestras. PASOS PARA LOGRAR UN BUEN ENFOQUE 1. Coloca tu microscopio en un lugar adecuado y conéctalo. 2. Realiza la limpieza correcta de lentes oculares, lentes objetivos y platina utilizando un lienzo suave. 3. Con la platina completamente abajo, coloca la muestra a observar. 4. Enciende tu microscopio de tal manera que se observe la luz blanca. 5. Coloca el objetivo 10X 6. Sube la platina hasta el tope. 7. Observa a través de los oculares y simultáneamente ve bajando lentamente la platina usando el tornillo macrométrico hasta localizar la imagen. 8. Ajusta la distancia de los oculares a la de tus ojos 9. Utilizando el tornillo micrométrico trata de dar la mayor nitidez posible. 10. Regula la cantidad de luz utilizando el diafragma del condensador y la intensidad hasta percibir el máximo detalle y nitidez en la observación. 4 • Aunque mucho depende de la muestra, la agudeza y problemas visuales dependen de cada persona, debes seguir los pasos como un hábito que faciliten el enfoque mas preciso 11. Una vez que has enfocado en 10X, pasa al objetivo de 40X con ayuda del revolver. Vuelve a enfocar, pero SOLO ajustando con el anillo micrométrico y la luz. ¡NO ES NECESARIO QUE BAJES LA PLATINA! 12. Para pasar al objetivo de 100X debes mover el revolver y colocar una gota de aceite de inmersión NUNCA LO USES SIN ACEITE DE INMERSIÓN. Ahora posiciona el objetivo sobre la gota y enfoca ajustando con el anillo micrométrico y regulando la luz. 3. COMPETENCIA DE ENFOQUE Una vez que has logrado enfocar, tendrás la oportunidad de demostrar que tan eficiente eres en el manejo y enfoque. Todos los alumnos intentarán romper record de enfoque. Debes recordar que el récord actual es de 20 segundos para un primer intento. Bases de la competencia A) Tener un mismo tipo de laminilla B) La laminilla deberá estar al lado derecho del microscopio C) El microscopio deberá estar conectado, encendido con la luz a la mínima intensidad, la platina hasta la parte baja y el revólver en el lugar donde no hay lente objetivo. D) A la cuenta de 3 todos iniciaran colocando la muestra y se tomará como tiempo final cuando se haya logrado el enfoque con el máximo de nitidez y contraste. Cuando termines anota tu tiempo y levantando las manos da un paso atrás. Intento No. Tiempo de enfoque Minutos Segundos Observaciones del profesor 1 2 3 REPORTE A) Contestar: 1. ¿Cuál es el límite de resolución del ojo humano, es decir qué es lo más pequeño que alcanza a distinguir el ojo humano? 2. ¿Por qué se llama microscopio de Campo claro? 3. ¿De qué está compuesto el aceite de inmersión y por qué es necesario utilizarlo? 4. ¿Qué dificultades tendrías si al iniciar un trabajo lo hicieras con el objetivo de mayor aumento? 5. Investiga ¿cómo se realiza la limpieza del microscopio y qué cuidados se deben tener? 6. Investiga: Qué tipos de microscopios, además del de campo claro existen y da una breve explicación de su aplicación. B) Realiza un esquema del Microscopio señalando en el dibujo todas sus partes y muy brevemente la función de cada una de ellas. C) Escribe tus DISCUSIONES en base a los resultados, conclusiones y susténtalo con bases teóricas. D) Da tus CONCLUSIONES sin olvidar mencionar si se cumplieron los objetivos. Recuerda que deben ser ideas breves y ordenadas. E) Incluye las REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS en las que consultaste tus respuestas (se requiere que hayas revisado al menos un libro). 5
