GUÍA PRÁCTICA Modelo y replicación del ADN. Ingeniería genética. Nº ía g lo io B Ejercicios PSU 1. ¿Qué proteína es la encargada de romper los puentes de hidrógeno que unen las dos hebras del ADN? A) B) C) 2. Topoisomerasa Primasa ADN polimerasa D) E) ARN polimerasa Helicasa La replicación del ADN se dene como semiconservativa, semiconservat iva, lo que signica que A) B) C) D) E) 3. s a ic s á B s ia c n ie C o v it c le E a m a r g o r P cuando se duplica el ADN, las hebras contienen solo ADN nuevo. cuando el ADN se replica, el resultado es una mezcla desigual de ADN nuevo y original. luego de la replicación, cada doble hebra de ADN contiene la mitad del ADN nuevo y la otra mitad original. cada cadena de ADN conserva completamente la información de la cadena original. cada cadena resultante sufre una dispersión con respecto a la cadena original. En el modelo de ADN de Watson y Crick, las hebras se caracterizan caracteriz an porque I) II) III) tienen una disposición antiparalela. se unen por puentes de hidrógeno entre las bases nitrogenadas. se unen en forma exacta y complementaria. A) B) C) Solo I Solo II Solo III D) E) Solo I y II I, II y III 1 V 9 0 A 1 1 L B 1 0 0 L E C I U G Cpech 1 Ciencias Básicas Electivo Biología 4. 5. 6. ¿Qué cambio(s) debe(n) ocurrir para que el ADN se pueda replicar? I) II) III) La doble hebra se debe desenrollar. Se deben romper los puentes de hidrógeno. El ADN se debe encontrar en el estado de cromatina. A) B) C) Solo I Solo II Solo III I) II) III) Nucleótidos Nucleótidos libres. Cebadores sobre los moldes de ADN. Presencia de horquilla de replicación. A) B) C) Solo I Solo II Solo I y II D) E) Solo I y III I, II y III En el marco de la ingeniería genética las enzimas de restricción restricci ón tienen como objetivo generar copias de los fragmentos de ADN a recombinar. cortar un segmento de ADN para recombinar. unir segmentos de ADN a recombinar con ADN del vector. degradar copias defectuosas de ADN recombinante. limitar el número de copias que se hacen del ADN a recombinar. ¿En cuál de las siguientes situaciones se debe aplicar una mayor cantidad de energía para separar las hebras del ADN? A) B) C) D) E) 2 Solo I y II I, II y III ¿Qué condición(es) se debe(n) cumplir para que ocurra replicación del ADN? A) B) C) D) E) 7. D) E) Cpech 75% pares de bases AT y 25% pares de bases GC. 50% pares de bases AT y 50% pares de bases GC. 25% pares de bases AT y 75% pares de bases GC. 80% pares de bases AT y 20% pares de bases GC. 60% pares de bases AT y 40% pares de bases GC. GUIA PRÁCTICA 8. De las(s) siguiente(s) pareja(s) de conceptos I) II) III) Pares de bases complementarias complementari as = adenina y citosina. Bases = adenina, timina, citosina y guanina. Cromosoma eucariótico = ADN y proteínas. Es (son) INCORRECTA(S) A) B) C) 9. solo I. solo II. solo III. D) E) solo I y II. solo II y III. El uso de la terapia génica en el futuro apuntará a I) II) III) la ubicación de genes defectuosos para reemplazarlos reemplazarl os por los normales. la identicación identicaci ón de enfermedades genéticas en personas que aún no las hayan desarrollado. la prevención del desarrollo de enfermedades genéticas. Es (son) correcta(s) A) B) C) 10. solo I. solo II. solo I y II. D) E) solo II y III. I, II y III. A partir de la siguiente secuencia de ADN 5’GTGCATTCCA3’ ¿Cuál es el orden correcto en que se replica la secuencia complementaria? complementaria ? A) B) C) D) E) 3’TGGAATGCAC5’ 5’CACGTAAGGT3’ 3’ACCTTACGTG5’ 5’TGGAATGCAC3’ 3’CACGTAAGGT3’ Cpech 3 Ciencias Básicas Electivo Biología Tabla de corrección Ítem 4 Cpech Alternativa H Haabilidad 1 Reconocimiento 2 Comprensión 3 Reconocimiento 4 Comprensión 5 Comprensión 6 Reconocimiento 7 Aplicación 8 Comprensión 9 Comprensión 10 ASE GUIA PRÁCTICA Resumen de contenidos Modelo y características del ADN La información genética de los seres vivos está codicada en una estructura química: el ácido desoxirribonucleico, propuesta en el año 1953 por los cientícos Watson y Crick. Este modelo presenta las siguientes características: Característica de la molécula Doble hebra. Antiparalelas. Hebras complementarias. de ADN Bases nitrogenadas de ADN Pirimidinas Pirimidina s ( 1 anillo ): Timina, Timina, Citosina. Purinas ( 2 anillos ): Adenina, Guanina. Complementariedad entre las bases nitrogenadas Pentosa de ADN Sitios de unión entre la pentosa, la base nitrogenada y el fosfato Uniones dentro de la hebra Adenina- dos puentes Adeninapuentes de hidrógeno hidrógeno con Timina. Timina. Citosina – tres puentes de hidrógeno con Guanina. Uniones entre hebras Dirección de las hebras Puentes de Hidrógeno (enlaces débiles). Desoxirribosa Desoxirrib osa ( en el carbono 2 solo hidrógeno) Base nitrogenada con pentosa: carbono 1. Pentosa con fosfato: carbono 5. Un nucleótido con otro: el fosfato se une entre carbono 3 de la pentosa de un nucleótido, con el carbono 5 de la pentosa del otro nucleótido. Este es el enlace fosfodiéster, de tipo covalente. De 5’ a 3’ y la hebra contraria de 3’ a 5’. Los bloques del ADN Fosfato Cadena de ADN Azúcar 5’ G + G Base 3’ G C T A Nucleótido Cadena doble de ADN Doble hélice de ADN 5’ 3’ 3’ 5’ G G C T A A T A T C G G C C 5’ T G C A T A T A A Cadena de fosfato y azúcar G C C G C G A C G A C A G T 5’ 3’ 3’ Enlaces de hidrógeno entre pares de bases Cpech 5 Ciencias Básicas Electivo Biología Replicación del ADN Cada vez que las células se reproducen, ya sea en organismos procariontes o eucariontes, este ADN debe duplicarse previamente, esta copia es fundamental para mantener las características de los organismos de la misma especie. En general, la duplicación duplicac ión o replicación es bastante el, considerando consideran do la cantidad de veces que se copia. a) Móleculas paternas ADN pesado (15N) b) Móleculas hijas ADN híbrido (15N/14N) c) La replicación del ADN hoy, se conoce gracias a los trabajos de Messelson y Stahl (1957), en que demostraron que la copia es semiconservativa, esto signica que de cada hebra original, se copia una nueva, de esta manera se cometen menos errores por las enzimas de síntesis (ADN- polimerasas) Móleculas nietas ADN liviano (14N) ADN híbrido (15N/14N) Proceso de replicación: 1. Conjunto de enzimas capaces de desenrollar, abrir y mantener a las hebras de ADN para dar inicio a la replicación, en el lugar que corresponde que es la horquilla de replicación. 2. ADN La acción de lassARN polimerasas, para lamadre de do un que primer o cebador, y de esa forma las polimerasas polimerasa puedan pueda n copiar copiar la hebra mgeneración adre (recordan (recordando lo realizan realiza n en la dirección dire cción de de 5’ a 3’. 3. La presencia de dos moldes de copia, la hebra adelantada o continua ( que corresponde a la copia de 5’ a 3’) y la retardada o discontinua (que corresponde a la copia de 3’ a 5’). 4. En la hebra adelantada la acción de la ADN polimerasa, aparte de incluir nucleótidos de ADN, también puede corregir errores en el mismo lugar. 5. En la hebra retrasada, la copia es más compleja, dado por la dirección de la hebra. Pues la ADN polimerasa copia de trozos, donde cada uno debe iniciarse con un primer o cebador. Estos trozos se denominan fragmentos de Okazaki. 6 Cpech GUIA PRÁCTICA 6. Para nalizar el proceso, actúa una enzima ligasa, que es capaz de unir los espacios generados entre los fragmentos ( en las zonas donde se encontraban los cebadores, los cuales deben ser eliminados posteriormente). Ingeniería genética Es la técnica de uso de enzimas de restricción, que cortan trozos de ADN (gen) para ser combinados con otros y entregar las características en el ADN híbrido que se desean. Algunos ejemplos se dan en la agricultura donde utilizan plásmidos de bacterias con ADN recombinante. El ADN contiene genes que se requiere replicar en otras plantas, así se corta cor ta el gen preciso y se combina con el plásmido. Este a su vez es transferido a cultivos celulares que replican numerosas veces al gen de interés y posteriormente son transferidos a las células de las plantas normales. En conclusión, se obtienen plantas transgénicas con la característica deseada. En la producción de insulina se utiliza el material extracromosomal de una bacteria, que corresponde a su plásmido, para transportar el gen de la insulina humana. Una vez que está inserto, se introduce a E. coli para que ella multiplique el ADN recombinante recombinante que se encuentra encuentra en el plásmido, plásmido, generándose generándose insulina insulina en grandes grandes cantidades. cantidades. El proceso termina con su posterior extracción y puricación de la hormona, que es la insulina humana que se vende en laboratorios farmacéuticos. un gen de interés ADN de otro organismo o rganismo (a) Plásmido de una bacteria Ambos se tratan con enzima de restricción (b) Se mezcla, se permite que los extremos complementarios se apareen, y los extremos cortados se unen con ligasa de ADN (c) Cpech 7 Registro de propiedad intelectual de Cpech. Prohibida su reproducción total o parcial.